不同离心速率对波尔山羊精液低温保存效果的影响

本试验研究了离心速率对波尔山羊精子的活率、顶体完整率、存活时间、生存指数的影响 ,以期为波尔山羊的推广、利用提供科学依据和有效方法。对波尔山羊精液进行 10 0 0、2 0 0 0、30 0 0、4 0 0 0rpm离心处理 ,用含葡萄糖、柠檬酸钠、EDTA和卵黄的稀释液代替精清 ,在 4℃下保存 ,每隔 12h检测一次精子活率和精子顶体完整率。结果表明 :在这四种离心处理中以 10 0 0rpm处理效果最好 ,生存指数和保存 4 8h后的精子活率显著优于其它离心处理 (P <0 .0 1) ,精子顶体完整率显著高于其它三种离心处理 (P <0 .0 1) ,精子的存活时间达到 90h ,精子顶体完整率、精子活率和生存指数随着离心转数的增加而下降。离心冲洗处理为精子的冻前保存提供了新的试验方法 ,为进一步深入研究精清和稀释液在精液中的作用提供了新的思路。     

麦洼牦牛冷冻精液效果试验

精液冷冻是保存优秀种质资源的一种较为长久、高效的方式,冷冻精液的质量影响到人工授精成功率的重要因素之一.为推广麦洼牦牛良种优秀遗传资源,四川省龙日种畜场在经过多年的摸索和改进,形成一套成熟的冻精制作技术,为确保麦洼牦牛细管冻精精液品质,提高冷冻精液配种成功率,本试验随机抽取15支四川省龙日种畜场所制备麦洼牦牛细管冻精,按照中华人民共和国牛冷冻精液国家标准(GB4143-2008)对麦洼牦牛细管冻精进行精子活力、前进运动精子数、精子畸形率以及细菌数检测.结果表明,随机抽取的15支麦洼牦牛细管冻精,精子活力均≥35％(即0.35)、前进运动精子数均≥800万个、精子畸形率均≤18％,细菌数均≤18％,4项检测指标均达到国家标准中的各项要求.结论:四川省龙日种畜场所制备麦洼牦牛细管冻精可应用于麦洼牦牛优秀种质资源的推广工作中.     

马精液保存稀释液筛选及保存效果观察

为了提高优秀种公马的利用率,快速扩大优秀马群,在马的非繁殖季节进行常温、低温和超低温马精液保存稀释液的筛选及保存效果观察,精液采自新疆伊犁昭苏马场的4匹种公马。实验结果表明:(1)常温保存时,2.5%甘油液和7%葡萄糖液精子活率显著高于5%甘油液和0.9%NaCl液(P<0.05),存活时间极显著高于5%甘油液和0.9%NaCl液(P<0.01);(2)低温保存时,10%奶粉液和5%卵黄液精子活率显著高于0.8%卵黄液(P<0.05),极显著高于7%葡萄糖液(P<0.01),存活时间较0.8%卵黄液和7%葡萄糖液差异极显著(P<0.01);(3)冷冻保存时,11%乳糖液、10%蔗糖液和4%果糖液颗粒冻精活率均极显著高于0.1?TA液、3%葡萄糖液和1.25%Tris液(P<0.01);细管冻精活率显著高于3%葡萄糖液和1.25%Tris液(P<0.05),极显著高于0.1?TA液(P<0.01),且同一种稀释液的颗粒冻精和细管冻精的冻后活率和复苏率差异显著(P<0.05)。10%蔗糖液和4%果糖液冻后精子顶体完整率极显著高于11%乳糖液(P<0.01),畸形率显著高于11%乳糖液(P<0.05),颗粒和细管冻精差异不显著(P>0.05)。     

公羊细管精液的冷冻保存

从商业上讲,公羊细管精液的保存有几个优于颗粒精液保存的优点。这些优点有:易于鉴别、输精剂量标准化、保存效率高和解冻速度快。Hunton等(1987)已经证明,用细管冻精和颗粒冻精解冻后经子宫内输精后的妊娠率是相近的,但细管精液解冻后的活力低于颗粒精液的。本试验用不同的冷冻速度和稀释液检测了颗粒和细管冻精解冻后的     

驴细管精液冷冻效果研究

采用假阴道法采集成年种公驴精液,经品质评定后,用5种不同冷冻保存液稀释、平衡,冷冻保存制作细管冷冻精液,以筛选适宜的驴精液冷冻保存液和冷冻保护剂.结果表明:乳糖-葡糖-甘油-卵黄液为最佳种冷冻保存液(P<0.05);甘油为最佳冷冻保护剂,其适宜浓度为5%,精子冻后活率平均为0.36.畸形率≤27.4%,顶体完整率82.2%,解冻后常温下精子存活时间为8.2h.     

两种奶牛性别控制技术应用效果

为了评价性控胶囊、性控冻精两种奶牛性别控制技术的应用效果．对135头奶牛分为性控胶囊组（30头）和性控冻精组（105头）,对其分别进行常规冷冻精液和X冷冻精液人工授精。结果表明,性控冻精组奶牛情期受胎率和母犊率分别为65．7％（69：105）和94．2％（65：69）,均高于性控胶囊组46．7％（14：30）的情期受胎率和71．4％（10：14）的母犊率（P〈0．05）,X型冻精与常规冻精产后代出生重差异不显著（P〉0．05）。     

密度梯度离心法与直接上游法在宫腔内人工授精中的应用效果分析

目的探讨密度梯度离心法与直接上游法两种方法优化处理精液行官腔内人工授精对精子动态参数和受孕率的影响。方法对116例患者共254个IUI治疗周期作回顾分析,将254个周期随机分为A、B两组,两组精子的动态参数无显著性差异,A组采用直接上游法,B组采用密度梯度离心法优化处理精液后行宫腔内人工授精,比较两种方法的精子检测结果与妊娠结局。结果两种方法处理前后精予密度、活率、活力（a＋b）、畸形率的差异均有显著性（P〈0．05）;两种方法处理后精子密度的差异有显著性（P〈0．05）;密度梯度离心法高于直接上游法,但活率、活力、畸形率的差异无显著性（P〉0．05）,两组间的临床妊娠率及流产率的差异也无显著性（P〉0．05）。结论两种方法处理精液均可改善精子动态参数,但行宫腔内人工授精得到的临床妊娠率差异无显著性（P〉0．05）。     

水牛附睾精子品质初步观察

试验采取屠宰水牛附睾头体尾三段精液作为实验材料,与冷冻精液的解冻材料对照,对精子活力、密度、顶体完整率、原生质滴带有率等指标进行品质鉴定。试验组中附睾头体尾的精子活力分别为0.1、0.3和0.8,附睾尾与冻精0.7相比无显著性差异(P>0.05);精子密度与冻精相比差异不显著(P>0.05);顶体完整率分别为88.64%、87.78%和86.43%,与冻精的92.5%没有显著的差异(P>0.05);原生质滴带有率分别是42.49%、40.93%、30.37%,而冻精是3.13%,两者差异极显著(P<0.01)。结果表明采自附睾尾的精液精子密度大、活力好、顶体完整率接近正常,但是1/3的精子带有原生质滴,极显著的高于冻精组。     

抗精子抗体与精子数质量之间的关系

目的：观察男性不育症抗精子抗体阳性与精子数质量之间的关系。方法：抗精子抗体采用金标免疫斑点法，精子数质量采用常规方法。结果：男性不育症抗精子抗体阳性者的精子数质量明显下降，尤其是两种抗体同时存在时，精子数质量显著下降（P〈0．05），精子总数均显著减少。结论：抗精子抗体可抑制精子产生，降低精子活动力及存活率。     

波尔公羊精液的品质,保存稀释液和冷冻技术的研究

本试验对３只～２岁德国波尔公羊的精液品质、精液保存稀释液和制作冻精技术进行了研究。结果表明：①引进的波尔公羊的射精量、精液ｐＨ值、密度、颜色、活率和畸形率均属正常范围，精子密度高达５５亿／ｍｌ左右，但个体间差异较大。②比较３种精液保存稀释液「三羟甲基氨基甲烷－卵黄－柠檬酸（１号）、葡萄糖－卵黄－柠檬酸三钠（２号）、葡萄糖－卵黄－柠檬酸（３号）」对保存精子活力的影响，３号稀释液的保存效果极显著优于１     

巨细胞病毒体外感染对人精子存活率及其运动参数与超微结构的影响

 目的 探讨人巨细胞病毒(HCMV)感染对人精子存活率、精子各运动参数及其超微结构的影响.方法 将HCMV与10例经过上游法优化的正常人精子体外共同孵育,于0、1、2、3、4 h分 别取样,检测精子存活率,并应用计算机辅助精子分析系统(CASA)测定精子直线运动速度(VSL)、曲线运动速度(VCL)、平均路径速度(VAP)、头部侧摆幅度(ALH)和前向运动百分率(a+b 级精子百分率);同时,电镜观察HCMV感染不同时间人精子超微病理结构的改变.结果 与空白、阴性对照组比较,人精子存活率在高浓度HCMV感染后1、3 h时明显降低,差异显著(P＜0.05),4 h时差异非常显著(P＜0.001).a+b级精子百分率仅在高浓度HCMV感染4 h时明显降低,差异显著(P＜0.05).精子VSL在各时间点各组比较差异均无统计学意义(P＞0.05).精子VCL在高浓度HCMV感染3 h时明显下降,差异显著(P ＜0.05),4 h时显著下降,差异非常显著(P＜0.001).而中浓度HCMV感染4 h时,精子VCL才下降,差异显著(P＜0.05).精子VAP在高、中浓度HCMV感染2、3、4 h时明显降低,差异显著(P＜0.05).精子ALH在高浓度HCMV感染3、4 h时明显下降,差异显著(P＜0. 05).电镜结果显示:人精子超微结构的异常改变在高浓度HCMV感染时常见,4 h时严重;主要表现有精子核解聚、空泡增多、顶体破裂、质膜破损、线粒体肿胀及其排列紊乱.结论 HCMV体外感染3～4 h可造成人精子存活率与运动参数及精子超微结构的异常,且这种改变与HCMV浓度存有一定的量效关系,高浓度HCMV感染的影响结果显著.     

男性不育患者精浆中弹性蛋白酶水平和白细胞定量及其与精液质量的关系研究

目的针对男性不育患者精浆中弹性蛋白酶水平和白细胞定量及其与精液质量的关系研究。方法对140例男性不育患者采用酶联免疫吸附试验（ELISA）以及过氧化物酶染色法分别检测精浆弹性蛋白酶水平和精液的白细胞的定量测定，并采用计算机作为辅助精液分析仪对精液的质量进行评估与分析。结果140例男性不育患者中有69例精浆蛋白酶水平有异常并且精液的pH、精子活力、精子的A级率，精子的密度与71例弹性蛋白酶正常水平对照组相比，其差异具有统计学意义（P〈0．05）；精浆性蛋白酶水平异常的生殖道具有隐匿性炎症组46例，与确证炎症组23例患者的精液pH、精子的B级率，精子的活力差异比较具有统计学意义（P〈0．05）；且精浆蛋白水平与白细胞定量呈正比例关系（r=0．561，P=0）；140例不育患者精液白细胞含量正常有99例，含量异常的为41例，这两组患者的精液的pH、精子活力、精子的A级率的差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论通过实验以及统计学方法验证，精浆性蛋白酶及白细胞含量与精液质量相关密切，精浆弹性蛋白酶水平以及白细胞含量检测可为以后的进一步的生殖道炎症所导致的不育研究提供重要的病因学诊断依据。     

腹腔注射环磷酰胺对小鼠精子凋亡的影响

目的观察腹腔注射环磷酰胺对小鼠精液常规和精子凋亡的影响。方法将20只雄性昆明小鼠随机分为对照组和实验组,按60 mg/kg体重给对照组小鼠腹腔注射NS,60 mg/kg体重给实验组小鼠腹腔注射环磷酰胺,每天1次,连续5 d,常规饲养观察34 d,然后对小鼠睾丸进行病理切片观察病理形态变化,对小鼠精子进行精液常规分析,对精子行FITC-AV/PI染色后用流式细胞仪检测精子凋亡率。结果实验组小鼠睾丸生精细胞、间质细胞和部分支持细胞明显变性,对照组与实验组精子密度分别为（5.20±1.34）×106/ml、（1.73±0.03）×106/ml,精子活力分别为（14.49±0.30）%、（6.64±1.88）%,精子成活率分别为（68.39±15.13）%、（39.96±4.89）%,精子凋亡率分别为8.38±0.45、14.84±1.22,两组比较有显著差异（P〈0.05）。结论腹腔注射环磷酰胺可使小鼠睾丸生精功能降低,精子凋亡增加,造成小鼠少弱精症。     

吐鲁番驴细管精液冷冻试验

为高效保护新疆特有家驴地方品种资源,我们在鄯善县开展了驴精液冷冻试验。试验选用6头4～10岁的吐鲁番种公驴,在采精后采用进口马精液冷冻保存液冷冻驴精液,解冻后80％以上公驴精液的活力〉10．3以上,效果良好。     

芳香化酶在人精子中的表达与精子功能状态的关系

目的研究芳香化酶表达与精子功能状态和受精力的关系。方法采用流式细胞术检测精子中的芳香化酶水平,以SPA试验检测精子的受精力、三色法染色观察硕体反应率。结果精子芳香化酶水平与受精率、顶体反应率都有一定的相关性,其相关系数分别为0．5319和0．5114。正常男性与不明原因不育症患者精子芳香化酶阳性率分别为41．32±18．99％和27．72±11．69％,差异有显著性（P〈0．01）。结论芳香化酶对于正常的精子功能有重要意义,芳香化酶表达异常可能与某些不明原因不育有关。     

Sperm characteristics of endurance trained cyclists

The purpose of this study was to investigate the influence of cycling on sperm characteristics. Twenty subjects volunteered for the study, comprising 10 long distance competitive cyclists (median 25.5 y) and 10 sedentary controls (median 24.5 y). A questionnaire was used to obtain a history of training, health, nutrition and life style. Semen analysis consisted of a detailed evaluation of sperm characteristics that included semen volume, sperm count, viability, motility and morphology. Compared to controls, the cyclists had a significantly lower proportion of spermatozoa with normal morphology (medians: 41.5 % versus 19.5 %; p < 0.01) and a significantly higher proportion of morphologically abnormal tapered forms (medians: 4.5 % versus 22.5 %; p < 0.01). No significant difference in semen volume and sperm motility, viability and count was observed between the two groups. We concluded that endurance cycling appears to be associated with a significant alteration in sperm morphology.     

血细胞处理仪的改进研究

目的：对血细胞处理仪（ BBS926型全自动医用低速离心机）处理冰冻红细胞技术进行改进研究,确定冰冻红细胞洗涤程序和效果。方法取源于400 ml （2 U）全血的健康献血者悬浮红细胞,-80℃冰冻保存,采用血细胞处理仪对解冻红细胞进行处理,在初始程序（程序1）洗涤冰冻红细胞的基础上,通过对洗液量和洗涤步骤等进行改进,形成新的优化程序（程序2）洗涤冰冻红细胞;对两组程序洗涤后的冰冻红细胞质量进行评价。结果两组洗涤程序（程序1和程序2）处理后的冰冻红细胞质量各项指标检测：血红蛋白（Hb）含量（g）分别为37．55±3．58和42．18±3．35（P＜0．05）,游离血红蛋白（FHb）含量（g/L）分别为0．51±0．08和0．53±0．07（P＞0．05）,白细胞残留量（×10^7个）分别为1．90±0．99和1．92±1．04（P＞0．05）,晶体渗透压（mOsm）分别为334±8．03和327±9．06（P＞0．05）,无菌实验普通细菌和真菌检测均为阴性。红细胞体外溶血率（％）分别为12．44±8．24和12．02±5．78（P＞0．05）,红细胞变形性（EI）分别为21．40±1．41和21．42±1．45（P＞0．05）,红细胞回收率（％）分别为72．02±3．70和77．18±5．58（P＜0．05）,红细胞凋亡（％）分别为1．12±0．54和1．10±0．61（P＞0．05）,洗涤时间（min）分别为79．00±0．71和79．60±0．55（P＞0．05）。结论两组洗涤程序洗涤冰冻红细胞质量均达到国家冰冻解冻去甘油红细胞质量控制要求,改进后洗涤程序2处理的冰冻红细胞Hb含量和红细胞回收率有一定提高;程序2洗涤效果优于程序1。     

亚硝基铁氰化钠对正常人精子结构的影响

目的：观察一氧化氮（N0）供体亚硝基铁氰化钠（SNP）作用正常精子后超微结构的变化。方法：采用percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子，与不同浓度的SNP孵育作用后，在透射电镜下观察精子的超微结构。结果：正常精子与300nmol／LSNP作用后，精子膜、顶体及精子线粒体出现不同程度的损伤和结构上的异常。结论：高浓度NO供体SNP可致精子膜、顶体及精子线粒体等超微结构的改变，进一步阐明了精子运动功能障碍的机制。