贵州省新型甲型HIN1(2009)流感病毒HA-1基因分析

目的 建立并完善贵州省新型甲型H1N1流感病毒基因分析检测技术平台,了解贵州省新型甲型H1N1(2009)流感病毒HA1片断与WHO公布的流行株有否发生变异.方法 收集16株新型甲型H1N1流感病毒毒株,提取病毒核酸RNA,通过RT-PCR扩增HA1片断,用电泳观察PCR产物目的条带大小,经过纯化、测序,用Biodeit、MEGA4相关软件进行序列比对,同源性及差异性分析,构建系统发育树.结果 贵州省(2009)代表株与中俄代表株A/Habarovak/01/2009 (H1N1)和墨西哥第一株甲型H1N1流感A/Mexio City/001/2009(H1N1)同属一个谱系,亲缘关系较近,同源性在93.2％～95.8％之间.结论 贵州省(2009)代表株与WHO公布的流行株在核苷酸水平上有一定程度的变异.     

我国分离出首株甲型流感病毒并完成基因组序列测定

5月18日，中国疾控中心透露，根据中国内地确诊的首例输入性甲型H1N1流感病例标本，国家流感中心日前成功分离出中国内地第一株甲型H1N1流感病毒并完成了全基因组序列测定。     

重症甲型H1N1流感1例临床分析

甲型H1N1流感为一种新型呼吸道传染病,其病原菌为新甲型H1N1流感病毒株,病毒基因中包含有猪流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片段。2009年12月我院收治了重症甲型H1N1流感患儿1例,现将该病的救治与药学监护报道如下。     

2010-2011年北半球流感流行季节使用流感疫苗病毒的建议

2009年9月-2010年1月,全球分离到甲型H1N1、甲型H3N2、甲型H5N1、甲型H9N2和乙型流感病毒.全球流感疫情比上年同期严重得多,由2009大流行甲型H1N1流感病毒传播所致.北半球有2009大流行甲型H1N1流感的广泛疫情,这比通常季节性流感出现得早.南半球大多数国家到9月,大流行流感疫情已减至散发病例状态.对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明,2009大流行甲型H1N1流感病毒呈抗原同质性,并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关.2009大流行甲型H1N1流感病毒的序列分析表明,病毒呈遗传同质性.大多数季节性甲型H1N1流感病毒的抗原性和遗传性与A/Brisbane/59/2007密切相关.许多新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性与南半球现行疫苗病毒A/Pert]h/16/2009密切相关.大多数B/Victoria/2/87谱系病毒的抗原性与疫苗病毒B/Brisbane/60/2008密切相关.     

2010-2011年北半球流感流行季节使用流感疫苗病毒的建议

2009年9月-2010年1月,全球分离到甲型H1N1、甲型H3N2、甲型H5N1、甲型H9N2和乙型流感病毒.全球流感疫情比上年同期严重得多,由2009大流行甲型H1N1流感病毒传播所致.北半球有2009大流行甲型H1N1流感的广泛疫情,这比通常季节性流感出现得早.南半球大多数国家到9月,大流行流感疫情已减至散发病例状态.对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明,2009大流行甲型H1N1流感病毒呈抗原同质性,并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关.2009大流行甲型H1N1流感病毒的序列分析表明,病毒呈遗传同质性.大多数季节性甲型H1N1流感病毒的抗原性和遗传性与A/Brisbane/59/2007密切相关.许多新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性与南半球现行疫苗病毒A/Pert]h/16/2009密切相关.大多数B/Victoria/2/87谱系病毒的抗原性与疫苗病毒B/Brisbane/60/2008密切相关.     

2010-2011年北半球流感流行季节使用流感疫苗病毒的建议

2009年9月-2010年1月,全球分离到甲型H1N1、甲型H3N2、甲型H5N1、甲型H9N2和乙型流感病毒.全球流感疫情比上年同期严重得多,由2009大流行甲型H1N1流感病毒传播所致.北半球有2009大流行甲型H1N1流感的广泛疫情,这比通常季节性流感出现得早.南半球大多数国家到9月,大流行流感疫情已减至散发病例状态.对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明,2009大流行甲型H1N1流感病毒呈抗原同质性,并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关.2009大流行甲型H1N1流感病毒的序列分析表明,病毒呈遗传同质性.大多数季节性甲型H1N1流感病毒的抗原性和遗传性与A/Brisbane/59/2007密切相关.许多新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性与南半球现行疫苗病毒A/Pert]h/16/2009密切相关.大多数B/Victoria/2/87谱系病毒的抗原性与疫苗病毒B/Brisbane/60/2008密切相关.     

安徽省淮南市2012-2013年流感病毒细胞分离及其流行特征分析

目的：观察安徽省淮南市2012-2013年流感病毒细胞培养分离结果,研究淮南市流感流行特征,为该市流感防控提供科学依据。方法实时荧光定量PCR法对哨点医院送检咽拭子标本进行核酸快速分型后采用狗肾（ MDCK）传代细胞培养法分离病毒,红细胞凝集试验（ HA）鉴定病毒滴度,红细胞凝集抑制试验（ HI）进行型和亚型的鉴定。结果从148份流感网络实验室实时定量PCR阳性标本中,分离出流感毒株68株,总分离率45．9％,其中 A1（H1N1）型26株,分离成功率56．5％,A3（H3N2）型25株,分离成功率33.3％;BY型4株,BV型13株,B型毒株分离成功率为63．0％;各型毒株的分离成功率差异有统计学意义（P＜0．05）。2012年淮南市流行株为BV型流感病毒,于3月份达到流行高峰;2013年流行株为A（H1N1）型流感病毒,流行高峰期则是12月份。结论淮南市2012-2013年甲型流感病毒抗原的变异性强;细胞培养分离病毒对流感流行的病原鉴定起决定性作用;流感病毒B型毒株和新A（H1N1）型毒株分离成功率较高。     

2015—2016年北半球流感流行季节使用流感疫苗成分的建议

 2014年9月—2015年1月,全球分离到2009年大流行甲型H1N1（甲型H1N1pdm09）、甲型H3N2和乙型流感病毒。对流感病毒分离株的抗原性和遗传学分析表明,甲型H1N1pdm09流感病毒呈抗原同质性,并与疫苗病毒A/California/7/2009密切相关。甲型H1N1pdm09流感病毒血凝素基因的序列分析表明,最近流行的大多数病毒属于进化枝6B。大多数新近分离的甲型H3N2流感病毒的抗原性和遗传性与细胞培养病毒A/Switzerland/9715293/2013相似。大多数新近分离的乙型流感病毒B/Yamagata/16/88谱系病毒的抗原性与鸡胚培养病毒B/Phuket/3073/2013更密切相关。     

大学校园内甲型H1N1流感的护理及预防

甲型H1N1流感是一种由新的甲型H1N1流感病毒引起的急性呼吸道传染病,其病原体是一种新型的甲型H1N1流感病毒,在人群中传播。与以往或目前的季节性流感病毒不同,该病毒毒株包含有猪流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片段。人群对甲型H1N1流感病毒普遍易感,并可以人传染人,人感染甲型H1N1流感后的早期症状与普通流感相似,包括发热、咳嗽、喉痛、身体疼痛、头痛、发冷和疲劳等,有些还会出现腹泻或呕吐、肌肉痛或疲倦、眼睛发红等^[1]。     

上海地区人群甲型H1N1流感抗体水平监测分析

目的 了解上海地区不同年龄组人群甲型H1N1流感血清抗体水平,对人群中甲型H1N1与2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)的血清抗体水平进行分析比较.方法 应用常规微量血凝抑制试验(micro-hemagglutination inhibition test,HI)对上海地区不同年龄组(0～5月龄、6月龄～4岁、5～24岁、25～59岁和≥60岁)人群进行甲型H1N1流感抗体检测.各年龄组抗体阳性率的比较采用Pearson X2检验和Fisher确切概率法进行分析.结果 上海地区人群甲型H1N1流感血清抗体总阳性率为9.2%(37/404).不同年龄组中以老年人组(≥60岁)的血清抗体阳性率最高,为25.0%(21/84);其次是成年人组(25～59岁),血清抗体阳性率为10.0%(8/80);其他年龄组血清抗体阳性率较低.Pearson X2检验结果显示不同年龄组之间抗体阳性率差异有统计学意义.在2008-2009年季节性流感疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)抗体阳性的329份血清中有31份甲型H1N1流感抗体阳性,季节性疫苗株抗体阴性的75份血清中有6份甲型H1N1流感抗体阳性.经Pearson X2检验分析,这两层人群甲型H1N1流感抗体阳性率差异没有统计学意义.结论 上海地区人群血清中甲犁H1N1流感抗体水平普遍偏低,其中老年人组抗体水平最高,人群对甲型H1N1流感病毒普遍高度易感;季节性疫苗株A/Brisbane/59/2007(H1N1)HI抗体阳性人群血清不能对甲型H1N1流感病毒产生交叉保护抑制.     

2005～2008年河北省儿童流感病毒检测分析

目的了解2005～2008年河北省儿童流感病毒感染的流行情况。方法狗肾传代细胞（MDCK）进行流感病毒分离,用血凝试验、血凝抑制试验进行型和亚型的鉴定。结果2005年10月至2008年3月共采集流感样患儿咽试子标本2 071份,分离出205株流感病毒,检出率为9.90%。2005～2006年流行期流感病毒分离阳性率为10.05%,H1N1优势株;2006～2007年流行期分离阳性率为11.85%,以H3N2占优势;2007～2008年流行期分离阳性率为8.08%,B型流感病毒替代了A型流感病毒占据优势地位,B型yamagata系成了优势株。按月统计流感病毒分离阳性率高峰在每个流行期的1月或3月;3岁以上儿童流感病毒分离阳性率高于3岁以下儿童。结论近年来河北省儿童中同时流行着H1N1、H3N2亚型和B型流感病毒,然而,不同年份优势株不一样。儿童流感病毒阳性率3岁以上是高峰年龄段,冬春季是发病高峰季节。     

甲型H1N1流感合并肺炎支原体感染的病原学分析

目的研究新型甲型H1N1流感患者合并肺炎支原体感染情况。方法收集医院发热门诊及学校集中发热人群的咽拭子标本,荧光PCR法检测其甲型H1N1流感病毒RNA,同时接种肺炎支原体培养液。结果 627份样本中有318例为甲型H1N1流感病毒RNA阳性,占50.7%,在这318例甲型H1N1流感病毒RNA阳性标本中,有61例合并肺炎支原体感染,占甲流患者的19.2%。结论在许昌地区2009年的甲流疫情中,甲流患者合并肺炎支原体感染的情况值得关注,治疗中要注意检测并加用治疗肺炎支原体感染的药物。     

贵州省2010年H3N2亚型流感病毒HA1基因序列分析

目的 了解2010年贵州省H3N2亚型流感病毒HA1基因变异特征.方法 用MDCK细胞分离流感病毒,采用血凝抑制试验分型鉴定,随机选取8株H3N2亚型流感毒株进行RNA提取,逆转录扩增获得HA1基因产物,将其进行基因产物测序,测定的序列用相关的生物信息软件进行分析.结果 贵州省各代表株在同一分支.该分支与2008-2009年疫苗推荐株A/Brisbane/10/2007(H3N2)接近,与WHO 2010年疫苗推荐株A/Perth/16/2009 (H3N2)相距较远.结论 2010年根据WHO疫苗推荐株生产的疫苗对该年我市H3N2亚型流感预防效果不好,以至于H3亚型在我省成为优势株,引起广泛流行.     

宁都县某中心小学甲型H1N1流感疫情的调查分析

目的分析此次学校甲型H1N1流感疫情的流行病学特征和控制措施,为制订学校甲型H1N1流感的预防控制措施提供依据。方法采用现场流行病学调查方法分析甲型HINl流感疫情的流行病学特征。运用RT—PCR方法检测流感病毒核酸。结果本起疫情历时11d,全校累计发生流感样病例67例,罹患率为5．58％,实验室检查确诊5例,男生、女生性别比为1．31：1,主要临床症状为发热、咳嗽、咽痛、头痛;采集鼻咽拭子5份,均为甲型H1N1流感病毒核酸阳性。结论此为一起由甲型H1N1流感病毒引起的学校流感暴发疫情：流行季节前应开展流感疫苗应急接种,建立完善的联防联控机制。加强宣传培训,落实预防控制措施．是做好学校传染病暴发疫情控制的关键。     

贵州省A(H1N1)亚型流感病毒HA基因系列分析

目的:了解贵州省A(H1N1)流感病毒血凝素抗原的基因变异情况.方法:对贵州省分离的部分A(H1N1)流感病毒株利用聚合酶链反应进行扩增,将扩增产物进行序列测定,然后进行基因系列分析.结果:2001-2005年贵州省分离的A(H1N1)流感病毒株有以下位点发生变异:202G>R、203D>N、225R>K、268M>R...     

CL-385319 inhibits H5N1 avian influenza A virus infection by blocking viral entry

CL-385319, an N-substituted piperidine, is effective in inhibiting infection of H1-, H2-, and to a lesser extent, H3-typed influenza A viruses by interfering with the fusogenic function of the viral hemagglutinin. Here we show that CL-385319 is effective in inhibiting infection of highly pathogenic H5N1 influenza A virus in Madin-Darby Canine Kidney (MDCK) cells with an IC50 of 27.03±2.54 μM. This compound with low cytotoxicity (CC50=1.48±0.01 mM) could also inhibit entry of pseudoviruses carrying hemagglutinins from H5N1 strains that were isolated from different places at different times, while it had no inhibitory activity on the entry of VSV-G pseudotyped particles. CL385319 could not inhibit N1-typed neuraminidase activity and the adsorption of H5-typed HA to chicken erythrocytes at the concentration as high as 1 mg/ml (2.8 mM). Computer-aid molecular docking analysis suggested that CL-385319 might bind to the cavity of HA2 stem region which was known to undergo significant rearrangement during membrane fusion. Pseudoviruses with M24A mutation in HA1 or F110S mutation in HA2 were resistant to CL-385319, indicating that these two residues in the cavity region may be critical for CL-385319 bindings. These findings suggest that CL-385319 can serve as a lead for development of novel virus entry inhibitors for preventing and treating H5N1 influenza A virus infection.     

上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后抗体水平监测分析

 目的  了解上海地区在校中学生接种甲型H1N1流感疫苗前后的抗体水平;观察甲型H1N1流感疫苗对该人群的免疫保护作用。 方法    应用常规微量血凝抑制试验（micro-hemagglutination inhibition test, HIT）对上海地区在校中学生分3个时间段进行甲型H1N1流感病毒抗体的血清学监测,3个时间段的抗体阳性率比较采用Pearson χ2 检验进行分析。 结果  2009年甲型H1N1流感流行前上海地区在校中学生的血清抗体阳性率仅为1.3%。经过一段时间流行后,血清抗体阳性率升至8.5%。接种甲型H1N1流感疫苗后,血清抗体阳性率升至87.3%。经Pearson χ² 检验分析,3个时间段在校中学生的血清甲型H1N1流感抗体阳性率差异有统计学意义（χ²=243.7,P<0.05）。 结论  在甲型H1N1流感流行前,上海地区在校中学生对其几乎没有免疫力,接种甲型H1N1流感疫苗能为该人群提供较好的免疫保护作用。     

The 2008-2009 H1N1 influenza virus exhibits reduced susceptibility to antibody inhibition: Implications for the prevalence of oseltamivir resistant variant viruses

A naturally-occurring H275Y oseltamivir resistant variant of influenza A (H1N1) virus emerged in 2007, subsequently becoming prevalent worldwide, via an undetermined mechanism. To understand the antigenic properties of the H275Y variant, oseltamivir resistant and susceptible strains of H1N1 viruses were analyzed by hemagglutination inhibition (HI) and microneutralization assays. HI analysis with H1-positive sera obtained from seasonal flu vaccine immunized and non-immunized individuals, and H1-specific monoclonal antibodies, revealed that resistant strains exhibited a reduced reactivity to these antisera and antibodies in the HI assay, as compared to susceptible strains. Neutralization assay testing demonstrated that oseltamivir resistant H1N1 strains are also less susceptible to antibody inhibition during infection. Mice inoculated with a resistant clinical isolate exhibit 4-fold lower virus-specific antibody titers than mice infected with a susceptible strain under the same conditions. Resistant and sensitive variants of 2009 pandemic H1N1 virus did not exhibit such differences. While HA1 and NA phylogenetic trees show that both oseltamivir resistant and susceptible strains belong to clade 2B, NA D354G and HA A189T substitutions were found exclusively, and universally, in oseltamivir resistant variants. Our results suggest that the reduced susceptibility to antibody inhibition and lesser in vivo immunogenicity of the oseltamivir resistant 2008-2009 H1N1 influenza A virus is conferred by coupled NA and HA mutations, and may contribute to the prevalence of this H1N1 variant.