内质网应激信号通路在棕榈酸诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用

目的探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)信号通路在棕榈酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡中的作用。方法不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8 mmol·L~(-1))棕榈酸刺激HUVECs(0、12、24、48 h),CCK-8法检测血管内皮细胞增殖能力;免疫印迹法检测血管内皮细胞GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6等ERS信号通路蛋白的表达水平;免疫荧光法检测细胞内凋亡水平。结果 0.4 mmol·L~(-1)棕榈酸刺激血管内皮细胞24 h,细胞增殖率明显降低;GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6等ERS信号通路蛋白的表达明显升高(P<0.05),细胞凋亡水平明显增高(P<0.05);ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA,10 mmol·L~(-1))预处理组血管内皮细胞凋亡水平明显下调(P<0.05)。结论 ERS信号通路在棕榈酸所致血管内皮细胞凋亡的防治中有重要意义。     

内质网应激在黄芪甲苷诱导的心肌线粒体保护中的作用

目的研究黄芪甲苷的心肌保护作用是否与内质网应激相关,并探讨其可能的线粒体信号转导机制。方法大鼠H9c2细胞常规培养;实验分为对照组、内质网应激诱导剂(2-DG)组、黄芪甲苷+2-DG组、黄芪甲苷组;共聚焦显微镜观察荧光强度变化以确定内质网应激对线粒体膜电位的影响,进而推测线粒体通透性转化孔(mPTP)开放情况;Western blot检测内质网应激相关GRP 78、GRP 94、IRE1的表达;电镜观察细胞超微结构。结果不同浓度2-DG能够模仿mPTP开放剂atractyloside使mPTP开放,以100μmol·L~(-1)2-DG作用最明显;黄芪甲苷明显抑制2-DG引起的mPTP开放;黄芪甲苷明显抑制2-DG引起的GPR 78、GRP 94、IRE1的表达;黄芪甲苷减轻2-DG引起的内质网和线粒体损伤。结论 2-DG可以诱发内质网应激反应,黄芪甲苷可能通过GRP 78、GRP 94、IRE1抑制内质网应激进而阻止mPTP开放,发挥心肌细胞线粒体保护作用。     

杨桃根DMDD对高糖诱导的肾小管上皮细胞HK-2内质网应激IRE1α通路及炎症反应的抑制作用北大核心CSCD

目的研究杨桃根活性成分2-十二烷基-6-甲氧基-2,5-二烯-1,4-环己二酮(DMDD)对高糖诱导肾小管上皮细胞HK-2内质网应激及炎症反应的抑制作用。方法体外培养HK-2细胞,并分为正常组、高糖组、内质网应激抑制剂4-PBA组(5 mmoL·L^(-1))和DMDD高、中、低浓度组(8、4、2μmol·L^(-1))。各组细胞培养结束后,采用CCK-8法检测细胞存活率;ELISA检测细胞上清液中TNF-α、IL-6的水平;AO/EB染色法检测细胞凋亡;Western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达水平、内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP的表达水平以及IRE1α通路相关蛋白(IRE1α、JNK)的磷酸化水平。结果与高糖组比较,DMDD各浓度组细胞存活率明显升高;TNF-α、IL-6水平,Bax/Bcl-2、GRP78、CHOP蛋白表达水平和IRE1α、JNK蛋白磷酸化水平均明显降低,细胞中橙红色荧光明显减少。结论DMDD可能部分通过抑制内质网应激及IRE1α通路相关蛋白的表达,减少炎症反应,达到HK-2细胞的保护作用。     

紫草素通过内质网应激蛋白抑制人骨肉瘤U-2 OS细胞增殖的研究

目的研究紫草素对人骨肉瘤U-2 OS细胞存活的抑制和对内质网应激蛋白的调控机制。方法采用CCK-8法检测0.156 25～4μmol/L紫草素对人骨肉瘤U-2 OS细胞抑制率;取对数生长期U-2 OS细胞,分别给予0～4μmol/L紫草素诱导U-2 OS细胞凋亡,24 h后用流式细胞术检测细胞凋亡率;通过Western blotting检测紫草素对内质网应激蛋白ATF6、IRE1α、ATF4、GRP78的表达调控作用;将混有质粒或小干扰RNA的Lipofectamine 2000试剂处理U-2 OS细胞6 h换液,加入紫草素处理,检测ATF4或GRP78对紫草素处理的细胞活力的影响;将ATF4或空白质粒(3μg)、GRP78报告质粒(3μg)和海肾内参质粒(4μg)均匀混合,用Lipofectamine 2000试剂对人骨肉瘤U-2 OS细胞进行转染,6 h换液,加入0.8μmol/L紫草素继续孵育24h,实验结果用各孔海肾荧光做参比进行校正,检测紫草素对ATF4介导的GRP78转录的调控作用。结果紫草素显著抑制人骨肉瘤细胞的活力并能浓度相关性促进细胞凋亡;Westernblotting结果显示,紫草素能特异性增加ATF4和GRP78蛋白的表达;过表达ATF4能显著抑制U-2 OS细胞活力(P0.01);敲低ATF4能部分逆转紫草素对细胞活力的抑制(P0.01);过表达GRP78并不影响紫草素对细胞存活的抑制效果,但敲低GRP78可以显著增加紫草素对U-2 OS细胞活力的抑制(P0.01);报告基因结果显示紫草素能增加ATF4对GRP78基因的转录调控。结论紫草素能显著抑制人骨肉瘤U-2 OS细胞活力,诱导内质网应激蛋白的表达,敲低GRP78能进一步增加紫草素的细胞毒性。     

砷及MPST过表达对SH-SY5Y细胞GRP78/CHOP通路的影响

目的探讨内质网应激是否参与亚砷酸钠(NaAsO2)神经毒性损伤,明确3-巯基丙酮酸硫转移酶(3-mercaptopyruvate sulfurtransferase,MPST)过表达是否调节砷诱导的内质网应激。方法通过构建MPST基因慢病毒表达载体来获得稳定表达外源MPST基因的SH-SY5Y细胞株作为SH-MPST过表达组,另设空载体转染细胞为SH-PEB组,染砷组(NaAsO2组),内质网应激阻断剂TUDCA组,TUDCA预处理染砷组。Western blot法分别检测过表达MPST、染砷及TUDCA预处理后细胞内GRP78和CHOP蛋白表达的变化。结果单纯MPST过表达不影响SH-SY5Y细胞内GRP78、CHOP蛋白的表达水平;经NaAsO2处理后,SH-PEB细胞内GRP78、CHOP蛋白明显上调(P<0.01),而被内质网应激阻断剂TUDCA所拮抗;MPST过表达则抑制砷对GRP78、CHOP蛋白的上调(P<0.01);然而,TUDCA预处理则明显逆转MPST过表达对GRP78、CHOP蛋白的影响(P<0.01)。结论GRP78/CHOP内质网应激通路参与了砷诱导的神经毒性损伤;MPST过表达可降低砷诱导的内质网应激水平。     

利拉鲁肽对肥胖大鼠脂肪组织内质网应激的影响

目的:研究利拉鲁肽对肥胖大鼠脂肪组织内质网应激的影响。方法:取大鼠分别用基础饲料和高脂饲料喂养8周后,分为正常对照组、肥胖组、肥胖-利拉鲁肽组,前2组大鼠腹腔注射0.9%氯化钠注射液,肥胖-利拉鲁肽组大鼠腹腔注射利拉鲁肽100μg/kg,每日2次,连续8周。末次给药后隔夜禁食处死大鼠,称体质量,取肾周及睾周脂肪组织,计算脂体比,检测脂肪组织中类蛋白质激酶激活的双链RNA的内质网激酶(PERK)、肌醇需求激酶1-α(IRE1-α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)mRNA的表达和葡萄糖转运蛋白78(GRP78)的表达。结果:与正常对照组比较,肥胖组大鼠体质量、脂体比和脂肪组织中PERK、IRE1-α、CHOP mRNA及GRP78蛋白表达均明显升高(P<0.01);与肥胖组比较,肥胖-利拉鲁肽组大鼠上述指标均明显降低(P<0.01)。结论:利拉鲁肽可显著减轻肥胖大鼠体质量及内脏脂肪组织过度累积,并可缓解脂肪组织内质网应激。     

褪黑素减轻博来霉素诱发小鼠肺纤维化早期的内质网应激反应

目的探讨褪黑素(MT)是否能减轻由博来霉素(BLM)诱发小鼠肺纤维化早期的内质网应激反应。方法将成年健康♂ICR小鼠随机分为对照组、MT组、BLM组和MT+BLM组。MT组小鼠给予生理盐水前30 min经腹腔注射MT(10 mg·kg-1),并在给予生理盐水后按每24 h一次经腹腔注射MT(10 mg·kg-1),BLM组小鼠经气管插管单次给予BLM(5 mg·kg-1),MT+BLM组小鼠在给予BLM(5mg·kg-1)前30min经腹腔注射给予MT(10 mg·kg-1),并在给予BLM后按每24 h一次经腹腔注射给予MT(10 mg·kg-1),对照组小鼠经气管插管给予等容积的生理盐水。各组分别在BLM处理后不同时间点(24、72 h)剖杀小鼠并取材,肺组织进行病理切片,HE染色法观察肺部炎性细胞浸润情况,Western blot检测内质网(ER)应激相关蛋白(GRP78、p-e IF2α和p-IRE1α)的表达水平,免疫组化检测ER应激相关蛋白(GRP78、p-IRE1α、ATF6α和p-PERK)的分布。结果成功构建了小鼠肺纤维化急性炎症模型;在BLM处理后,肺重、肺重比和肺炎性细胞浸润明显增加,并呈明显时间-效应关系;MT可明显降低BLM引起的肺重和肺重比增加,减轻肺部炎性细胞浸润;Western blot显示,MT处理后明显对抗BLM引起的ER应激敏感蛋白GRP78蛋白的上调,抑制BLM引起的UPR通路相关蛋白e IF2α和IRE1α磷酸化;免疫组化结果显示,MT可降低BLM诱导的ER应激相关蛋白GRP78、p-IRE1α、ATF6α和p-PERK的表达。结论 MT可减轻BLM诱发的小鼠肺纤维化早期ER应激反应。     

淫羊藿次苷Ⅱ通过改善内质网应激和caspase-12信号改善SHR大鼠左心室功能

目的基于内质网应激与caspase-12信号,探索淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ, ICSⅡ)改善自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats, SHRs)左心室功能的机制。方法 30只14周龄♂SHRs分为模型组、ICSⅡ低、中、高剂量(4、8、16 mg·kg~(-1))组及阳性药氯沙坦(20 mg·kg~(-1))组(n=6);同时,WKY作为空白对照组(n=6)。在第26周给药结束后,麻醉大鼠,用小动物超声检测大鼠左心室功能;RT-PCR检测左心室GRP78 mRNA水平;Western blot检测左心室GRP78、cleaved-caspase-12/9/3蛋白水平。结果与WKY组相比,SHR组大鼠左心室舒张末期的内径和后壁厚度增加,射血分数和短轴缩短率降低;GRP78 mRNA和蛋白水平上调,cleaved-caspase-12/9/3蛋白水平增加(P <0. 05)。与SHR组相比,ICSⅡ中、高剂量组及阳性药组左心室舒张末期的内径和后壁厚度降低(P <0. 05),射血分数和短轴缩短率增加(P <0. 05); GRP78 mRNA和蛋白水平下调,cleaved-caspase-12/9/3蛋白水平降低(P <0. 05)。结论ICSⅡ可改善SHRs左心室功能,其作用机制可能与改善内质网应激、下调升高的caspase-12信号有关。     

Effects of overexpression of IncRNA AC079466.1 on apoptosis of NSCLC cells through endoplasmic reticulum stress signaling pathway北大核心CSCD

目的初步探讨lncRNA AC079466.1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织和细胞中的表达,及其过表达对A549和H1299细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法收集20例NSCLC患者癌组织及相应的癌旁组织,qRT-PCR检测lncRNA AC079466.1在组织和细胞中的表达。转染过表达质粒为AC079466.1组,转染空质粒为NC组,无转染为Blank组。MTT、流式细胞术、Transwell检测过表达lncRNA AC079466.1对A549和H1299细胞活力、凋亡、迁移和侵袭的影响;Western blot检测过表达lncRNA AC079466.1对内质网应激相关因子GRP78、PERK、eIF2α、ATF4、CHOP,以及Bax、caspase-3表达的影响。结果与癌旁组织相比,癌组织中lncRNA AC079466.1的表达水平明显降低;与HBE细胞相比,lncRNA AC079466.1在A549和H1299细胞的表达量明显降低。与Blank组和NC组相比,AC079466.1组A549和H1299细胞的活力、迁移、侵袭能力均明显下降,凋亡率明显升高,内质网应激相关因子GRP78、p-PERK、eIF2α、ATF4、CHOP,以及Bax、caspase-3表达均明显上调。结论过表达lncRNA AC079466.1可明显抑制A549和H1299细胞的活力、迁移和侵袭能力,并促进细胞的凋亡,其机制可能与促进内质网应激介导的细胞凋亡有关。     

内质网应激调控NADPH氧化酶表达在克罗恩病中的作用

目的研究衣霉素(Tm)诱导肠上皮细胞发生内质网应激(ERS)的过程中,ERS的不同通路调控还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶中调节蛋白P47 PHOX的表达,以评估不同通路对氧化应激(OS)的影响,探讨ERS调控NADPH氧化酶的表达在克罗恩病的作用及可能机制。方法选取克罗恩病患者手术标本10份作为实验组,再选取结肠癌患者癌旁正常肠黏膜手术标本10份作为对照组,采用免疫组织化学方法检测肠道标本中GRP78蛋白和P47 PHOX蛋白的表达情况。随后取离体培养的肠上皮细胞,观察Tm刺激细胞后,GRP78和P47 PHOX蛋白表达的情况,并考察不同浓度的4-苯基丁酸钠盐(4PBA)是否可以抑制Tm诱导的GRP78和P47 PHOX蛋白表达。再分别抑制ERS不同通路IRE1α-XBP1S、IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α,检测P47 PHOX蛋白表达的情况。结果与结肠癌癌旁正常肠黏膜标本比较,克罗恩病肠黏膜标本GRP78和P47 PHOX表达明显升高。在离体的细胞中Tm诱导ERS发生,GRP78蛋白、P47 PHOX蛋白表达增加,而4PBA可以抑制上述蛋白的表达。抑制IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α途径均可以使P47 PHOX蛋白下调,而抑制IRE1α-XBP1S使P47 PHOX蛋白表达上调。结论 ERS可能通过调控NADPH氧化酶细胞溶质中的调节蛋白P47 PHOX,从而影响OS,最终参与克罗恩病的发病过程。其中IRE1α-TRAF2-JNK、PERK-eIF2α途径可能诱导P47 PHOX蛋白表达从而促进OS的发生。而IRE1α-XBP1S可以降低P47 PHOX蛋白活性,对OS有保护作用,可增强细胞对应激的适应性。     

纳米硒对硫酸镍致大鼠睾丸损伤的保护作用

目的探讨纳米硒(nano-selenium, Nano-Se)对硫酸镍(NiSO_4)诱导大鼠睾丸损伤的保护作用,为镍生殖毒性的防治提供新思路。方法采用液相激光加工与制备技术获得Nano-Se胶体溶液。将40只健康成年雄性SD大鼠随机分为5组:对照组(生理盐水)、NiSO_4组(5 mg/kg·bw NiSO_4)、低(5 mg/kg·bw NiSO_4+0.5 mg/kg·bw Nano-Se)、中(5 mg/kg·bw NiSO_4+1 mg/kg·bw Nano-Se)和高剂量Nano-Se干预组(5 mg/kg NiSO_4+2 mg/kg Nano-Se)。以腹腔注射NiSO_4、Nano-Se灌胃的方式连续处理大鼠14 d。苏木素-伊红(HE)染色观察各组睾丸组织病理学改变,并测定睾丸组织中丙二醛(MDA)含量及内质网应激相关基因GRP78、GADD153的mRNA表达水平。结果与对照组比较,NiSO_4组睾丸生精小管破坏,各级生精细胞排列紊乱,细胞数量减少;MDA含量升高(P0.05),GRP78和GADD153 mRNA表达水平上调(P0.05)。与NiSO_4组比较,各剂量Nano-Se干预组明显减轻了睾丸的病理损伤,并明显降低MDA含量(P0.05)和GRP78、GADD153 mRNA表达水平(P0.05)。结论 Nano-Se可以拮抗硫酸镍所致的大鼠睾丸损伤,其机制可能与减少氧化损伤和抑制内质网应激相关基因GRP78和GADD153表达有关。     

新藤黄酸通过内质网应激诱导人鼻咽癌 CNE-2Z细胞凋亡的研究

目的 探讨新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对人鼻咽癌CNE-2Z细胞的影响和相关分子机制.方法 采用倒置显微镜观察药物处理组和对照组的CNE-2Z细胞形态的变化;MTT法检测药物处理组的CNE-2Z细胞增殖的抑制作用;DAPI染色和AV/PI 双染实验观察细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测GRP78、CHOP和ATF4蛋白的表达.结果 倒置显微镜和荧光显微镜观察,发现与对照组相比,GNA作用CNE-2Z细胞后,体积缩小变圆,细胞核发生典型核染色质固缩等细胞凋亡形态学的变化.GNA可以抑制人鼻咽CNE-2Z细胞的增殖,并有时间和浓度依赖性.AV/PI染色后早凋细胞膜呈苹果绿色,晚凋或坏死细胞质呈不同程度的黄-红色.蛋白质印迹法检测表明GRP78蛋白表达总体呈现浓度依赖性下调,上调了CHOP蛋白和ATF4蛋白.结论 GNA可以影响人鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖,引发细胞凋亡,这可能与内质网应激相关蛋白(GRP78、CHOP和ATF4蛋白)有关.     

柴胡皂苷-b2抑制内质网应激信号通路减轻四氯化碳致小鼠急性肝损伤

目的探讨柴胡皂苷-b2(SS-b2)对四氯化碳(CCl_4)诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用及其对内质网应激通路的影响。方法 60只雄性BALB/c小鼠分为正常对照组、模型组、SS-b2(5,10和20 mg·kg~(-1))组和阳性药(水飞蓟宾10 mg·kg~(-1))组。各组小鼠连续7 d每天ig给予不同剂量的SS-b2、水飞蓟宾或生理盐水;末次给药后2 h,除正常对照组外,各组分别一次性ip给予5%CCl_4建立小鼠急性肝损伤模型。比色法检测血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;HE染色检测肝组织病理变化,免疫组织化学和Western蛋白印迹法检测小鼠肝组织中内质网应激通路蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核起始因子2α(p-eIF2α)、转录激活因子4(ATF4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中GPT和GOT的活性及MDA的含量明显升高(P<0.05,P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.01),同时,肝组织内质网应激通路相关蛋白PERK,p-eIF2α,ATF4,GRP78和CHOP表达水平显著增高(P<0.01)。与模型组相比,不同浓度SS-b2组小鼠血清中GPT和GOT的活性及MDA的含量明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD的活性明显升高(P<0.01);肝组织上述内质网应激通路相关蛋白的表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。HE染色结果显示,不同浓度的SS-b2明显改善CCl_4引起的小鼠肝细胞肿胀、肝小叶周围胞核溶解和肝索排列紊乱,使细胞形态明显好转。结论 SS-b2对CCl_4诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用,其机制可能与改善氧化应激损伤,抑制内质网应激通路的激活有关。     

内质网应激在三氧化二砷抑制HL-60增殖过程中的效应机制

目的探究三氧化二砷(ATO)引起内质网应激的效应机制,为掌控急性早幼粒白血病治疗药物监测提供间接药理学指标。方法通过ATO的毒理学数据库关联基因数据整理建立蛋白-蛋白互作网络,使用MCODE算法对网络拓扑关系聚类分析寻找关联基因群;采用HL-60细胞模型进行实验研究。MTT法评价ATO对HL-60的细胞毒活性;Realtime PCR法检测细胞内质网应激相关基因表达变化;Western blot检测内质网应激相关蛋白表达水平;用ER-Tracker Red对内质网进行特异性荧光染色;流式细胞技术检测细胞分化及凋亡指标变化。结果 ATO相关的206个基因PPI网络中有3 794对关系,排名前4的基因群中内质网应激模块凸显;ATO能抑制HL-60细胞增殖,并呈浓度依赖性;ATO在给药4 h即可引起细胞内质网应激,GRP78和GRP94表达较明显,随着时间延长基因表达水平变化明显,1~4μmol·L~(-1)引起GRP78、GRP94和Nrf2表达,8μmol·L~(-1)引起CHOP大量表达。ATO在1、2μmol·L~(-1)时引起e IF2α蛋白磷酸化水平增加,在8μmol·L~(-1)时诱导CHOP蛋白大量表达;内质网染色结果显示,4、8μmol·L~(-1)的ATO诱导内质网的肿胀;流式结果表明ATO在1μmol·L~(-1)时引起细胞分化,在2μmol·L~(-1)时出现明显分化群,4、8μmol·L~(-1)时细胞分化同样明显,但在8μmol·L~(-1)时细胞同时出现凋亡群。结论 ATO抑制HL-60细胞增殖过程中出现内质网应激,并呈浓度依赖性阶段性切换效应。     

辛伐他汀通过内质网应激途径诱导K562细胞凋亡

探讨内质网应激在辛伐他汀诱导K562细胞凋亡中的作用。采用荧光显微镜观察凋亡细胞的形态变化，AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率，激光扫描共聚焦显微镜检测细胞内Ｃa²⁺浓度，RT-PCR检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78，GRP78)、钙蛋白酶(calpain)基因mRNA表达水平，Western blotting检测GRP78、 calpain、 caspase-3， -6， -7， -9， -12蛋白水平。结果显示，10、 20、 30 μmol·L^-1辛伐他汀(simvastatin，Sim)作用K562细胞72 h后，细胞出现典型的凋亡形态，凋亡率分别为12.41%、 19.08%和23.41%；细胞内Ca²⁺浓度增加，荧光强度分别为43、54和64；GRP78、calpain基因mRNA表达上调；calpain、 caspase-3， -6， -7， -9， -12蛋白剪切活化、GRP78蛋白表达增强。以上结果表明，内质网作为细胞凋亡的重要途径参与了辛伐他汀诱导K562细胞的凋亡。辛伐他汀将可能被用于临床治疗白血病。     

二氟甲基鸟氨酸对2型糖尿病大鼠心肌肥厚及内质网应激的影响

目的研究二氟甲基鸟氨酸(difluoromethylornithine,DFMO)对2型糖尿病(T2DM)大鼠心肌肥厚的作用,以及对内质网应激蛋白GRP78和CHOP的影响。方法采用高糖高脂膳食负荷链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)单次腹腔注射,建立T2DM大鼠模型。实验大鼠分为正常对照组、T2DM模型组和DFMO治疗组,上述条件继续饲养12周。检测各组大鼠空腹血糖、心脏参数、心肌纤维化程度;测定MDA含量、SOD和T-AOC活性;检测GRP78和CHOP蛋白表达。结果 DFMO治疗后,降低T2DM大鼠空腹血糖和心脏参数(P<0.05),心肌间质纤维化程度下降(P<0.05),MDA含量降低,SOD和T-AOC活性增加。同时,DFMO治疗可以下调GRP78和CHOP蛋白表达水平(P<0.05)。结论 DFMO抑制T2DM大鼠心肌肥厚,机制与下调GRP78和CHOP蛋白表达,抑制内质网应激有关。     

GRP78在二型糖尿病(T2DM)及其并发症中表达研究进展

糖尿病是一种常见的慢性疾病,有许多并发症,涉及多个器官和组织。葡萄糖调节蛋白78(GRP78)是内质网应激最敏感的伴侣蛋白。糖尿病及其并发症与内质网应激有着密切联系。研究GRP78表达特征及机制,对糖尿病及其并发症的发病机制及治疗有重要意义。文章就GRP78在二型糖尿病(T2DM)及其并发症中的表达和作用进行了综述。     

内质网应激对小鼠卵巢卵泡发育的影响

摘要：目的 探索小鼠卵巢内质网应激对卵泡发育的影响。方法 对照组小鼠4只,实验组小鼠6只,应用经典 内质网应激诱导物衣霉素经腹腔注射诱导小鼠卵巢内质网应激激活,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT qPCR）检测未折叠蛋白质应答（UPR）标志分子HSPA5、CHOP、ATF4 mRNA表达情况,明确小鼠卵巢内质网应激激活 状态,苏木精伊红染色（HE染色）检测小鼠卵巢卵泡发育状态,明确内质网应激对小鼠卵巢卵泡发育的影响。结果 衣霉素的处理明显上调了小鼠卵巢内质网应激标志分子的表达,与对照组相比,衣霉素处理组小鼠卵巢卵泡发育明 显受限。结论 内质网应激的激活明显抑制了小鼠卵巢卵泡的发育     

棕榈酸诱导小鼠精原细胞株GC-1细胞凋亡的作用机制

目的 从内质网应激(endoplasmic reticulum stress, ERS)角度探讨棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导小鼠精原细胞株GC-1细胞凋亡的机制。方法 将GC-1细胞分为正常组(Control)、溶剂对照组(Vehicle)和不同浓度PA处理组(100、150、200、250μmol·L^-1)。MTT法检测细胞增殖活力，流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况；Caspaes-3活性检测试剂盒检测凋亡蛋白caspase-3的活性；Western blot检测凋亡相关蛋白和ERS相关蛋白表达水平。结果 PA处理GC-1细胞48 h后，细胞增殖活力显著下降，细胞凋亡率上升，凋亡蛋白caspase-3活性增高，结果均具有浓度依赖性；PA可明显增加GC-1细胞促凋亡蛋白cleaved-caspase-3的表达水平，明显降低抑凋亡蛋白BCL2的表达水平，同时上调ERS相关蛋白GRP78、CHOP、p-IRE1、XBP1的表达水平，但对p-PERK、PERK、p-eIF2α、eIF2α、ATF4以及ATF6的表达无...