不同剂量定痫丸治疗癫痫的动物实验研究

<正>中医称癫痫为痫症,病位在脑窍,涉及心、肝、肾、脾四脏,病机特点是邪实证虚,治疗的关键在痰,治疗的原则是熄风定痫。从中医的角度讲,癫痫是由痰所致,应从痰论治。中药治疗有逐瘀、补虚法、涤痰息风、标本同治等方法。定痫丸源于《医学心语》,被认为是治疗痫病发作的主方之一。近年来,临床上采用定痫丸治疗癫痫,并取得了较好的     

戊四氮慢性致痫大鼠海马区NF-kB、I-kBα动态表达及地塞米松的影响

目的:研究戊四氮慢性点燃大鼠即癫痫形成过程中海马区NF-Kb及其抑制蛋白I-kBα的动态变化及作用,并同时探讨地塞米松的抗痫作用机制.方法:将81只Wistar大鼠随机分为对照组(C),非用药组(P),用药组(D)即地塞米松干预组,除对照组外,均给予戊四氮(PIZ)35mg/kg·d腹腔注射.用免疫组织化学法检测不同时间点(4,7,11,15d)海马区NF-Kb、I-kBα的蛋白表达,同时行为学观察和脑电图确定痫性发作.结果:注射PIZ的各组大鼠海马区NF-Kb的表达随着注射时间逐渐增加,并于第15天达到高峰,且用药组相同时间点NF-Kb表达较非用药组减少(P<0.05); I-kBα蛋白量随着PTZ的注射逐渐减少(P<0.05),并于第15天降到最低,用药组相同时间I-kBα蛋白的减少较非用药组少(P<0.05);且地塞米松明显改善了大鼠点燃时的痫性发作程度,延长了发作潜伏期.结论:慢性癫痫的形成过程中海马区神经细胞中存在NF-Kb 的激活及其I-kBα的减少;NF-Kb介导了癫痫形成过程中的炎症反应过程,同时,地塞米松可能通过抑制NF-Kb活性发挥抗痫作用.     

卡马西平对青霉素点燃癫痫大鼠脑内GABA_B受体蛋白表达的影响

目的研究两种剂量卡马西平(CBZ)对青霉素慢性点燃大鼠的抗癫痫作用及对癫痫大鼠脑内GABAB受体蛋白表达的影响,从蛋白水平探讨CBZ抗癫痫作用的新机制。方法采用腹腔注射青霉素(PNC,3×106U·kg-1·d-1×13d)慢性点燃大鼠癫痫模型,两种剂量CBZ(50和100mg/kg体质量)灌胃给药,以痫性发作潜伏期和Racine癫痫行为分级标准为判定指标,观察CBZ的抗癫痫作用。用免疫组织化学SABC法测定大鼠脑内GABAB受体蛋白表达,分析CBZ对GABAB受体蛋白表达的影响。结果两种剂量CBZ灌胃给药后,均可使青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期延长,与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),同时使癫痫大鼠的发作程度均较模型对照组减轻。青霉素慢性点燃大鼠脑内GABAB受体蛋白表达量较正常组降低,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。CBZ1组、CBZ2组脑内GABAB受体蛋白表达量分别与正常对照组和模型对照组比较,均显示增高,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论两种剂量CBZ可延长青霉素慢性点燃大鼠痫性发作的潜伏期,减轻发作程度,具有明显的抗癫痫作用。青霉素慢性点燃大鼠癫痫发作与降低脑内GABAB受体蛋白表达有关,而CBZ抗癫痫作用机制与增加大鼠脑内GABAB受体蛋白表达有关。     

抗痫灵抗惊厥作用的实验研究

目的探讨抗痫灵抗癫痫作用。方法采用大鼠戊四氮(PTZ)惊厥法,观察大鼠惊厥发生率,惊厥发作潜伏期及惊厥发作持续时间。结果抗痫灵能明显抑制大鼠戊四氮惊厥发生率,缩短惊厥发作持续时间,潜伏期延长,并能降低阈剂量小鼠戊四氮半数惊厥剂量(CD50)。结论本品有一定的抗惊厥作用。     

戊四氮诱导癫痫大鼠脑N-cadherins和NT-4的变化及灵芝酸的干预作用

目的:观察戊四氮(PTZ)诱导大鼠癫痫后脑神经型钙粘附素(N-cadherins)和神经营养因子-4(NT-4)变化及应用灵芝酸进行干预与治疗,主要研究灵芝酸预防和治疗癫痫的痫性发作的机理.方法:采用健康的雄性Wistar实验大白鼠33只,按随机分配原则分成正常对照组、癫痫模型组和灵芝酸治疗组每组11只.癫痫模型组与灵芝酸治疗组均采用诱导癫痫亚惊厥发作剂量腹腔注射戊四氮制备Wistar大白鼠慢性点燃痫性模型.在实验室冰盒低温条件下迅速提取大鼠脑组织,采用Western-Blotting方法检测大鼠脑N-cadherins和NT-4的变化.结果:实验性诱导癫痫大鼠痫性模型制备成功,灵芝酸治疗组和癫痫模型组实验动物都达到癫痫点燃的实验标准,与癫痫模型组动物相比,灵芝酸组大鼠潜伏期明显延长,但持续时间之间的差别没有显著性.实验检测Western-Blotting结果发现:PTZ诱导癫痫发作后N-cadherins蛋白表达水平明显高于正常对照组,差异有显著性(P＜0.01);用灵芝酸干预后,N-cadherins的表达有明显下降,差异有显著性(P＜0.01),癫痫模型组大鼠脑NT-4蛋白含量比正常对照组蛋白含量升高,差异具显著性(P＜0.05);灵芝酸组大鼠脑NT-4蛋白含量较癫痫模型组蛋白含量升高,差异具显著性(P＜0.05).结论:灵芝酸作用癫痫大鼠后N-cadherins蛋白表达降低,调整机体病变神经元的兴奋性,灵芝酸还能够增强NT-4的表达从而减轻癫痫发作给神经系统造成的损伤,从而起到抗癫痫作用.     

定痫丸对青霉素致痫大鼠脑组织环核苷酸(cAMP、cGMP)影响

目的观察探讨定痫丸治疗癫痫的作用及作用机制。方法各组大鼠按不同剂量灌胃给药7 d后,采用腹腔注射青霉素制备癫痫急性模型,青霉素注射剂量为600万U.kg-1,分别测定各组大鼠脑组织中环核苷酸(cAMP、cGMP)的含量,并进行各组大鼠脑电波观察。结果定痫丸能明显减轻青霉素的致痫作用,减少模型大鼠癫痫发作的频率,显著升高模型大鼠脑组织中SOD活性、降低MDA含量,显著升高脑组织中cAMP含量、降低cGMP含量。结论定痫丸抗癫痫作用机制与其抑制自由基引起的脂质过氧化反应、增加自由基的清除,调节脑内cAMP、cGMP含量变化有关。     

尼莫地平对癫痫大鼠海马突触后致密物95表达的影响

目的探讨尼莫地平(nimodipin,NIM)对戊四氮(Pen-tylenetetrazol,PTZ)点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力及海马突触后致密物95(postsynaptic density95,PSD-95)表达的影响。方法动物分为正常对照组、PTZ组和NIM组,采用PTZ慢性点燃癫痫模型,应用Morris水迷宫观察各组大鼠空间学习记忆能力,Western blot及反转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测各组大鼠海马PSD-95蛋白和PSD-95 mRNA的表达。结果PTZ致痫组大鼠空间学习记忆能力受损,其海马PSD-95蛋白水平及PSD-95 mRNA表达较对照组明显减少(P<0·05);与PTZ组比较,NIM组大鼠空间学习记忆能力好转,其海马PSD-95蛋白水平及PSD-95 mRNA表达均升高(P<0·05)。结论PTZ点燃癫痫大鼠存在空间学习记忆受损,可能与PSD-95表达减少有关;NIM可以提高PSD-95的表达,改善癫痫大鼠的学习记忆能力。     

戊四氮致痫大鼠脑GFAP的变化及甜菜碱的干预作用

目的:观察戊四氮致痫大鼠脑神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)变化及甜菜碱的干预治疗,研究癫痫的发病机理及甜菜碱的作用机制.方法:健康雄性的Wistar实验大鼠共24只,按体重随机分为正常对照组、癫痫模型组、甜菜碱干预组,每组8只.模型组和甜菜碱干预组均以致痫亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)腹腔注射点燃Wistar大鼠模型.在低温条件下迅速取脑,通过免疫组化检测大鼠脑GFAP的变化.结果:实验性癫痫大鼠模型复制成功,甜菜碱组和癫痫模型组的实验大鼠均已达到点燃标准,与癫痫组动物相比,甜菜碱组大鼠潜伏期明显延长,但持续时间之间的差别没有显著性.免疫组化检测实验结果表明:癫痫模型组脑GFAP含量比正常对照组增加,差异具有显著性(P＜0.05);甜菜碱组脑GFAP含量与癫痫模型组比较,差异有显著性(P＜0.05).结论:甜菜碱能够降低GFAP的表达从而减轻癫痫发作,维持神经元存活起到抗癫痫作用.     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织BDNF表达的影响

目的:观察使用灵芝孢子粉后,癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区脑源性神经营养因子(BDNF)的含量及神经元形态学的改变,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉组,点燃后断头取脑,免疫组化染色观察BDNF含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内BDNF含量明显升高,同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够增强脑源性神经营养因子的表达,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

咪唑啉I2受体激动剂BU224对小鼠致痫作用研究

目的:本文主要探讨咪唑啉I2受体的高选择性激动剂BU224 对戊四氮(PTZ)诱导小鼠癫痫发作的协同作用研究.方法:成年C57B6L 小鼠40 只分为四组,第一组10 只,对照组10 只,第二组10 只,对照组10 只,两组分别腹腔注射BU224(18mg/Kg),对照组注射等量生理盐水.将小鼠分别置入树脂玻璃箱观察30Min 后,第一组和对照组腹腔注射PTZ(25mg/Kg);第二组和对照组注射PTZ(30mg/Kg)诱导其癫痫发作,观察其行为学改变.结果:咪唑啉I2受体激动剂BU224 注射组小鼠呈明显的阵发性肌痉挛,而对照小鼠无明显反应.再分别经过高低两浓度PTZ诱导癫痫,发现药物处理组用较低浓度PTZ 即可诱发癫痫发作,对照组却没有诱发癫痫发作;药物处理组和对照组用较高浓度PTZ 诱发癫痫后,给药组发作等级明显高于对照组,潜伏期较对照组缩短且发作持续时间明显延长(P＜0.05).结论:I2受体激动剂BU224 有一定的至痫作用,或与戊四氮具有协同诱导癫痫的作用,其确切作用机制有待进一步研究.     

人参皂苷Rb_1对癫痫大鼠海马神经元的影响

目的：探讨人参皂苷Rb1对青霉素所致癫痫大鼠作用。方法：将大鼠随机分为正常（A）组、模型（B）组及人参皂苷Rb1（C）组。采用青霉素制作癫痫模型制作方法,观察B组及C组大鼠癫痫发作潜伏期及发作持续时间,并测定各组大鼠海马组织（SOD）、（MDA）含量。结果：C组大鼠发作潜伏期较B组明显延长（P〈0.01）,发作时间显著缩短（P〈0.05）。C组大鼠SOD活性与B组相比显著升高（P〈0.01）,与A组比较明显降低（P〈0.05）。C组MDA含量与B组比较显著降低（P〈0.01）,与A组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：人参皂苷Rb1可通过抗氧化机制发挥抗癫痫作用。     

丙戊酸钠预防自发性蛛网膜下腔出血后癫痫发作

目的:观察丙戊酸钠预防自发性蛛网膜下腔出血后癫痫发作的效果。方法:自发性蛛网膜下腔出血入院时未发生癫痫的患者共计287例,随机分为预防组143例、对照组144例。预防组入院后即给予丙戊酸钠治疗;对照组未出现癫痫发作前不使用抗癫痫药物,出现癫痫发作的患者给予丙戊酸钠抗癫痫治疗。结果:预防组癫痫总发生率9·79%,对照组癫痫总发生率20·83%,组间有显著性差异(P<0·05)。结论:丙戊酸钠对自发性蛛网膜下腔出血后癫痫发作的预防效果良好。     

丹莪妇康煎膏对大鼠肝毒性的实验研究

目的:观察丹莪妇康煎膏对大鼠的肝脏毒性作用。方法:大鼠连续灌胃丹莪妇康煎膏(5.6g/kg、2.8g/kg)30d,同时设对照组。每5d称体重一次,末次给药后禁食12h,麻醉后取血,测定血清AST、ALT和ALP值,取肝脏称重并计算肝脏指数,HE染色观察病理改变。结果:丹莪妇康煎膏各剂量组大鼠体重增长均显著低于对照组(P<0.01);丹莪妇康煎膏高剂量组大鼠肝脏湿重与对照组相比无显著性差异(P>0.05),但肝脏指数却显著增加(P<0.05),低剂量组肝脏湿重及肝脏指数与对照组相比均无显著性差异(P>0.05);丹莪妇康煎膏各剂量组大鼠血清AST、ALT和ALP值与对照组相比均无显著性差异(P>0.05),大鼠肝脏组织无明显病变。结论:丹莪妇康煎膏连续灌胃30d,对大鼠肝脏无明显毒性。     

舒肝顺气丸对胃溃疡、反流性食管炎模型鼠的保护作用

目的:研究舒肝顺气丸对胃溃疡、反流性食管炎模型鼠的保护作用。方法:通过对利血平、无水乙醇、幽门结扎、水应激复制鼠胃溃疡模型;对贲门切开联合半结扎幽门复制大鼠反流性食管炎模型。5个实验均分为正常对照组、模型组、舒肝健胃丸组、化学药对照(西咪替丁/西沙比利)组与舒肝顺气丸高、中、低剂量组。检查胃溃疡模型鼠胃溃疡病变程度,计算溃疡指数或溃疡发生率;测定反流性食管炎模型大鼠血管活性肠肽、血浆胃动素和血清胃泌素含量。结果:与胃溃疡模型组(利血平/无水乙醇导致/水应激)比较,舒肝顺气丸高、中剂量组鼠溃疡指数降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与胃溃疡模型组(幽门结扎)比较,舒肝顺气丸高、中剂量组大鼠溃疡发生率降低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与反流性食管炎模型组比较,舒肝顺气丸高、中剂量组大鼠血管活性肠肽含量减少,血浆胃动素和血清胃泌素含量增加,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:舒肝顺气丸具有较强的改善功能性消化不良症状、治疗胃溃疡的作用。该研究为舒肝顺气丸的再评价及临床应用提供了药理学依据。     

p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路特异性阻滞药对癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用研究

目的:研究p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路特异性阻滞药SB203580对癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用。方法:取大鼠随机分为正常对照组、模型组和SB203580低、中、高剂量(5、10、20mg.kg-1)组,每组10只,后4组腹腔注射戊四唑建立癫痫模型,SB203580各剂量组建模前10min腹腔注射相应药物。建模给药后按Racine分级标准对各组大鼠进行行为学评价,建模给药后2h检测各组脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)释放率,采用免疫组化法和免疫印迹法检测海马组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达。结果:正常对照组无癫痫发作;与正常对照组比较,模型组癫痫发作程度明显增强,LDH释放率明显升高,Caspase-3阳性细胞数及其表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,SB203580各剂量组癫痫发作程度明显减轻,LDH释放率明显降低,Caspase-3阳性细胞数及其表达明显减少(P<0.05或P<0.01),且与剂量成正相关。结论:SB203580可能通过间接抑制Cas-pase-3表达实现对癫痫模型大鼠神经细胞的保护作用。     

石菖蒲挥发油对锂-匹罗卡品诱发癫痫大鼠c-fos表达的影响

目的探讨石菖蒲挥发油对锂-匹罗卡品（毛果芸香碱）致痫大鼠癫痫发作时间及其脑内c-fos表达的影响。方法选择Wistar大鼠96只,随机分为六组,正常对照组（6只）,模型组（18只）,丙戊酸钠预处理组（18只）,石菖蒲预处理低、中、高剂量组（各18只）。观察石菖蒲挥发油对锂-匹罗卡品致痫大鼠发作时间的影响。以锂-匹罗卡品诱导制作癫痫动物模型,应用免疫组化方法观察石菖蒲挥发油对其脑内c-fos表达的影响。结果石菖蒲低、中、高剂量组大鼠首次抽搐发作时间（SB）和第1次达到Ⅴ级发作时间（RFSⅤS）较模型组明显延长,差异均有统计学意义（P〈0.05）,锂-匹罗卡品致痫大鼠脑内c-fos表达水平明显增强,丙戊酸钠预处理组、石菖蒲预处理高剂量组大鼠海马部位c-fos阳性细胞较模型组及石菖蒲预处理低、中剂量组明显减少,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论该研究方法快速、简便、准确、重现性好,石菖蒲挥发油能缓解锂-匹罗卡品所致的癫痫发作,其作用机制可能与降低脑内c-fos基因表达水平有关。     

孟鲁司特治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床研究

目的 观察孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者的治疗作用。方法根据诱导痰嗜酸性粒细胞百分比（EOS％）将AECOPD患者分组,A、B组患者EOS％≥3％,C、D组患者EOS％〈3％,每组20例。四组均使用抗生素等基础治疗,A组及c组加用孟鲁司特口服,10mg,QN,疗程均为14天。四组患者分别在人院第1天及第14天进行CAT评分,记录肺功能中FEV1、FEV1％pre的变化,动脉血气分析中的Pa02、PaC02、PaO2/FiO2,检测诱导痰中EOS％及半胱氨酰白三烯（CysLTs）的水平。结果与B、C组比较,A组治疗后CAT评分、PaO2、PaCO2、PaOJFi02各项指标均显著好转（P〈0．05）;FEVl、FEVl％pre也有好转,但差异无统计学意义（P〉0．05）。A组治疗后诱导痰EOS％及CysLTs水平较B组显著下降（P〈0．01）。诱导痰EOS％、CysLTs水平与CAT评分呈正相关,与FEV1、FEV1％pre、PaO2、PaO2/FiO2呈负相关（P〈0．05）。诱导痰EOS％与CysLTs水平呈正相关（P〈0．05）。结论孟鲁司特可改善气道内嗜酸性粒细胞计数升高的AECOPD患者的临床症状和生活质量,改善患者血气,减轻气道炎症;半胱氨酰白三烯可能在其中发挥重要作用。     

左乙拉西坦和奥卡西平单药治疗新诊断儿童部分性癫痫的疗效及安全性分析

目的：观察左乙拉西坦（Levetiracetam,LEV）与奥卡西平（Oxcarbazepine,OXC）单药治疗新诊断部分性发作癫痫患儿的疗效和安全性。方法将68例新诊断部分性发作癫痫患儿随机分为两组,OXC组和LEV组各34例。观察两组的临床疗效、脑电图改变及不良反应。结果OXC组完成治疗32例,LEV组完成治疗34例。临床疗效比较OXC组总有效率为87．5％,LEV组总有效率为85．3％。两组总有效率比较差异无统计学意义（ P＞0．05）。脑电图改善情况比较OXC组有效率为50．0％,LEV组有效率为76．5％,LEV组有效率高于 OXC组,差异有统计学意义（P＜0．05）。 LEV组不良反应发生率低于OXC组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论奥卡西平与左乙拉西坦治疗儿童部分性发作癫痫临床疗效相当,但左乙拉西坦对脑电图改善优于奥卡西平,且不良反应少,安全性更高。     

疏肝利胆汤佐治老年胆囊炎胆石症的效果

目的评价疏肝利胆汤辅助治疗老年胆囊炎胆石症的临床效果。方法选取2009年4月~2013年3月本院收治的胆囊炎胆石症患者77例,随机分为观察组和对照组,其中对照组38例,采用急诊手术治疗,观察组39例,采用疏肝利胆汤口服联合静脉滴注头孢哌酮,7 d后手术,观察并比较两组的临床疗效、治疗前后症状积分及血脂变化情况。结果观察组的总有效率为94.9%,对照组的总有效率为84.2%,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组治疗后的症状积分较治疗前均显著降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组治疗后的症状积分低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组治疗前TG及TC水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;两组治疗后TG水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;两组治疗后TC水平比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论疏肝利胆汤联合西药治疗老年胆囊炎胆石症的效果好,安全性高,值得临床推广应用。     

左乙拉西坦对海人酸致痫大鼠血清NSE和MBP变化的影响

目的:建立海人酸(KA)致痫大鼠模型并观察癫痫大鼠血清神经元特异性烯醇酶(NSE)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的变化及左乙拉西坦(LEV)对其水平的影响,以探讨左乙拉西坦在癫痫脑损伤中是否具有保护的作用。方法:清结级Wistar雄性4~5周龄幼鼠72只,随机分为对照组24只,立体定向右侧海马注射生理盐水,KA组24只,注射海人酸,LEV治疗组24只,注射KA造模成功前12h胃管内注入LEV200mg/kg,以后未处死大鼠均每日给药一次。分别于致痫后6h、24h、72h处死,采用ELISA法检测各组大鼠血清NSE和MBP含量。结果:(1)大鼠癫痫行为;对照组无大鼠癫痫发作,其余组均有行为学改变。LEV组幼鼠癫痫发作程度与KA组类似,但潜伏期较KA组延长。(2)血清NSE变化:KA组和LEV组血清NSE于在致痫后6h升高,24h达高峰,与对照组相比有差异(P<0.05),LEV组与KA组的NSE比较无显著差异(P>0.05)。(3)MBP变化:KA组和LEV组血清MBP于致痫后6h升高,72h达高峰,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),LEV组与KA组的MBP比较无显著差异(P>0.05)。结论:KA致痫大鼠血清NSE、MBP水平显著增高,提示癫痫发作可造成一过性脑损伤,血清NSE、MBP可能作为判断癫痫脑损伤程度的敏感指标,LEV对KA致痫大鼠血清NSE、MBP水平无影响,提示LEV不能减轻亦不加重癫痫发作引起的脑损伤。