5个蒽醌三三配伍治疗脑缺血大鼠的药代动力学研究

目的:建立LC-MS方法测定大鼠血浆中蒽醌成分含量,探讨5个大黄蒽醌成分(芦荟大黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚)三三配伍时在脑缺血大鼠模型中的药代动力学特征。方法:MCAO法制备大鼠局灶性脑缺血模型。模型大鼠随机分成11组,空白组1组,给药组10组。给药组将5个大黄蒽醌三三结合,给药剂量:芦荟大黄素(A)13.05 mg·kg^-1,大黄素(B)34.65 mg·kg^-1,大黄酸(C)17.25mg·kg^-1,大黄酚(D)39.45 mg·kg^-1,大黄素甲醚(E)26.4 mg·kg^-1。血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,XBridge^TMC₁₈色谱柱分析,高分辨质谱检测。流动相为甲醇-3 mmol·L^-1乙酸铵,梯度洗脱。采用内标法测血药浓度,Kinetica 5.0药动学软件以非房室模型计算药代动力学参数。结果:当与不同的2个大黄蒽醌联用时,芦荟大黄素、大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚的药代动力学参数均存在差异。结论:本研究为这5个大黄蒽醌的作用机制研究提供理论基础,为其临床用药提供了实验参考。     

高效液相色谱法测定六味安消胶囊中5种活性成分的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定六味安消胶囊中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚5个成分含量.方法:采用Agela Venusil XBP-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈(A)-0.1％磷酸(B),进行梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1;检测波长为226 nm.结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚进样量分别在0.040～0.800、0.040～0.800、0.040～0.800、0.040～0.800、0.020～0.400 μg范围内线性关系良好.平均回收率(n=6)分别为97.69％、98.65％、99.82％、97.29％、96.38％,RSD分别为2.08％、1.64％、1.07％、1.78％、2.26％.结论:该方法简便、准确,可同时测定六味安消胶囊中5种活性成分的含量.     

HPLC法测定导赤丸中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的含量

目的制定测定导赤丸中芦荟大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素和大黄素甲醚5种活性成分含量的方法。方法利用高效液相色谱法进行测定,采用流动相A:100%乙腈-0.1%磷酸,B:10%乙腈-0.1%磷酸以梯度浓度洗脱;流速控制在1mL/min;波长设定为254nm;柱温30℃。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚质量浓度与峰面积均呈良好的线性关系,平均回收率分别为99.7%(RSD为1.28%n=5),99.1%(RSD为1.68%n=5),99.6%(RSD为0.90%n=5),98.8%(RSD为0.89%n=5),99.7%(RSD为1.04%n=5)。结论本法结果准确,操作简便,可靠,重复性好,可用于导赤丸的质量控制。     

塔黄的化学成分研究

目的对塔黄的化学成分进行研究。方法通过各种柱色谱对其成分进行分离纯化,通过波谱解析进行结构鉴定。结果从中分离得到8个化合物,分别鉴定为:大黄素(1),大黄酚(2),大黄素甲醚(3),1,8-二羟基-2,3-甲氧基-6-甲基蒽醌(4),大黄酚葡萄糖苷(5),大黄素葡萄糖苷(6),β-谷甾醇(7),胡萝卜素(8)。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

HPLC法同时测定大黄-黄连药材中5种蒽醌类成分的含量及最优配伍研究

目的:建立同时测定大黄-黄连药材中5种蒽醌类成分含量的方法,并优选大黄-黄连药材质量比。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Zorbax SB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾(48:52,V/V,每100 mL中加十二烷基硫酸钠0.4 g,磷酸调节p H至4.0),流速为1 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。考察大黄-黄连药材质量比为1:1、1:2、2:1、2:3、3:2时配伍药材中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚进样量分别在0.652~3.081、0.704~3.422、1.280~6.197、0.633~0.324、1.326~5.954μg范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r≥0.999 7),精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6),平均加样回收率为98.92%~100.37%(RSD≤2.26%,n=6)。大黄-黄连药材质量比为2:1时,5种蒽醌类成分总量最高。结论:本方法精密度、稳定性、重复性良好,可用于不同配伍比大黄-黄连药材的质量检定;大黄-黄连药材的最佳质量比为2:1。     

决明子发酵前后5种蒽醌类成分变化研究

目的:探讨固态发酵对决明子中5种蒽醌类成分含量的影响。方法:采用高效液相色谱法测定决明子发酵前后芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量并进行对比研究。色谱柱为C18-ODS反相柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1mL.min-1,检测波长为280nm。结果:决明子经过发酵后,游离型蒽醌含量呈上升趋势。以未发酵成分含量为100%计算,5种成分变化分别为104.6%、102.2%、93.4%、215.6%、134.8%,其中芦荟大黄素、大黄酸和大黄素变化不明显,大黄酚与大黄素甲醚分别增加至2.15倍和1.34倍,可见发酵增加了蒽醌苷元的含量。结论:决明子通过发酵,有利于增加活性成分蒽醌苷元的含量。     

茵陈蒿汤HPLC指纹图谱初步研究

目的:优选茵陈蒿汤HPLC指纹图谱色谱条件。方法:采用welch-materials XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%磷酸(B)梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,检测波长254 nm,以标准品对照法初步鉴定茵陈蒿汤主要有效成分。结果和结论:该色谱条件下,茵陈蒿汤指纹图谱中8个成分得到鉴定,其中没食子酸、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及大黄素甲醚来源于大黄,绿原酸和栀子苷来源于茵陈、栀子。     

栽培河套大黄根、茎、叶中游离蒽醌类成分的含量分析

目的:利用 HPLC 法测定栽培河套大黄根、茎、叶中游离蒽醌的含量。方法:采用 Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸(85:15)为流动相,流速:1.0mL·min~(-1),检测波长为254nm,理论板数按大黄素峰计算不低于3000。结果:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚5种成分的线性范围分别为0.046～0.232μg(r=0.9998)、0.069～0.343μg(r=0.9999)、0.063～0.314μg(r=0.9995)、0.060～0.298μg(r=0.9994)、0.032～0.161μg(r=0.9997)。河套大黄样品1(根)中上述5种成分的回收率(n=6)分别为97.31%(RSD 为1.3%),96.73%(RSD 为2.2%),98.85%(RSD 为1.9%),98.96%(RSD 为1.0%),98.11%(RSD 为2.3%)。河套大黄根中上述5种成分的含量依次为0.42%～0.48%,0.06%～0.08%,0.40%～0.47%,1.90%～2.40%,0.44%～0.62%;茎中的含量依次为0,0,0.08%～0.1%,0.01%,0.03%～0.06%;叶中的含量依次为:0.01%,0,0.62%～0.90%,0.01%,0.05%～0.07%。结论:栽培河套大黄根、茎、叶中均含有游离蒽醌,其中根的含量最高,叶次之,茎最少;根中游离蒽醌最高为大黄酚,其次为大黄素甲醚,芦荟大黄素与大黄素的含量基本相同,大黄酸的含量最低。可针对河套大黄中含量较高的游离蒽醌进行开发。     

HPLC法测定金花消痤胶囊中大黄素和大黄酚的含量

目的建立金花消痤胶囊中大黄素和大黄酚含量的HPLC测定方法。方法色谱柱:C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-1g.L-1磷酸溶液(80∶20);流速:1.0mL·min-1;检测波长:254nm。结果大黄素和大黄酚得到完全分离。两种成分线性良好,平均加样回收率(n=5)分别为大黄素100.0%,RSD为2.3%;大黄酚95.4%,RSD为2.0%。结论该法简便,快速,结果准确。     

一测多评法测定肾康栓中的大黄蒽醌类成分

目的建立一测多评法测定肾康栓中大黄蒽醌类成分含量的HPLC法,并进行方法学考察。方法以大黄素为内标,建立芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚和大黄素甲醚的相对校正因子。分别采用外标法和一测多评法测定肾康栓中5种大黄蒽醌类成分的含量。结果肾康栓中蒽醌类成分间的相对校正因子分别为f_(芦荟大黄素/大黄素)=0.750,f_(大黄酸/大黄素)=0.860,f_(大黄酚/大黄素)=0.690,f_(大黄素甲醚/大黄素)=0.930。采用一测多评法计算的含量与外标法实测值比较差异无统计学意义。结论一测多评法可用于测定肾康栓中5种大黄蒽醌类成分的含量。     

高速逆流色谱法分离纯化楤木总皂苷中的楤木皂苷A及活性研究

目的： 采用高速逆流色谱法（HSCCC）对楤木大孔树脂纯化所得总皂苷中的楤木皂苷A进行分离纯化并做体外抗血小板研究。方法： 采用75%乙醇渗滤提取楤木原药材，渗滤液经过大孔树脂纯化，所得总皂苷粉末作为高速逆流色谱分离的样品。采用TBE-300B型高速逆流色谱仪，以氯仿：甲醇：正丁醇：水（4：4：1：3.5）为溶剂体系进行分离纯化，采用两种逆流色谱操作模式（0~130 min为正接正转，体系下相流动；130~180 min为正接反转，体系上相流动，流动相流速为5.0 mL·min^-1，仪器转速为850 r· min^-1，温度为25℃）进行分离。采用二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）诱导小鼠体外血小板聚集，分别采用不同浓度HSCCC分离后的四号馏分处理，检测空白对照管与不同浓度的4号馏分给药管富血小板血浆在5 min内的最大聚集率，计算血小板聚集的抑制率。结果： 楤木大孔树脂提取物经过HSCCC一步纯化，得到的楤木皂苷A纯度为95.81%；分离所得楤木皂苷A呈浓度依赖的抑制ADP诱导的血小板聚集，最大抑制率达80%。结论： 利用大孔树脂富集总皂苷，HSCCC分离纯化总皂苷中的楤木皂苷A，为楤木皂苷A的分离纯化提供了一种新的简便、高效的途径。抗血小板活性研究表明HSCCC法分离得到的楤木皂苷A具有初步的抗血小板凝聚作用。     

高速逆流色谱法从多花蒿中分离制备阿格拉宾

目的 采用高速逆流色谱法分离制备多花蒿中阿格拉宾.方法 多花蒿乙醇提取物经硅胶柱色谱分离,所得组份Fr.1用高速逆流色谱进一步分离,采用正己烷-醋酸乙酯-甲醇-水(1.2∶0.8∶1.5∶0.5)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,主机转速850 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长为254 nm.采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,HPLC法测定产品的纯度.结果 从500 mg组分Fr.1中得到260 mg质量分数为99.5％的阿格拉宾.结论 该方法操作简单,可用于阿格拉宾化学对照品的分离制备.     

高速逆流色谱法从棉花花提取物中分离制备异槲皮素

目的 应用高速逆流色谱法分离制备异槲皮素.方法 对棉花花提取物用高速逆流色谱法一步分离纯化,以醋酸乙酯-水(1∶1)为两相溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,主机转速为800 r/min,体积流量2.0 mL/min,检测波长254 nm,采用波谱法对所得化合物进行结构鉴定,薄层色谱、高效液相色谱法测定产品的纯度.结果 在该条件下经一步分离可得到质量分数为99％的异槲皮素对照品.结论 该方法操作简便,适合于从棉花花提取物中分离制备异槲皮素对照品.     

On-line purity monitoring in high-speed counter-current chromatography: application of HSCCC-HPLC-DAD for the preparation of 5-HMF, neomangiferin and mangiferin from Anemarrhena asphodeloides Bunge

An efficient on-line purity monitoring strategy based on on-line coupling of high-speed counter-current chromatography (HSCCC) with high-performance liquid chromatography-diode array detection (HPLC-DAD) was successfully applied for the first time to the isolation and purification of 5-hydroxymethyl-furancarboxaldehyde (5-HMF), mangiferin and neomangiferin from the Chinese medicinal plant Anemarrhena asphodeloides Bunge, a plant used in the traditional Chinese medicine. The introduction of on-line purity monitoring in HSCCC has greatly improved the efficiency of this technique by overcoming the drawbacks of post-purification sample handling in HSCCC isolation. The effluent from the outlet of HSCCC was split into two parts, and one was collected, while the other was introduced directly through a switch valve into a HPLC-DAD system for purity monitoring. Using this method the desired fractions with high purities could be collected. From 600 mg partially purified extract, 165.6 mg neomangiferin and 292.8 mg mangiferin with purities of 98.9 and 99.5%, respectively, were obtained with a two-phase solvent system composed of n-butanol-water (1:1, v/v) by increasing the flow-rate of the mobile phase stepwise from 1.0 to 2.2 ml min(-1) after 210 min. A 17.1mg 5-HMF with purity of 96.6% was also isolated for the first time.     

高速逆流色谱法分离纯化长春花中长春新碱

目的采用高速逆流色谱(HSCCC)分离纯化长春花中长春新碱,建立相关工艺条件,为工业生产提供参考数据。方法采用高速逆流色谱仪,氯仿-甲醇-0.3mol.L-1 HCl(4∶3∶2)溶剂体系,上相为固定相,下相为流动相,流动相流速为2.0mL.min-1,紫外检测波长为280nm,主机转速为800r.min-1,恒温循环温度为28℃。结果 HPLC检测HSCCC纯化后长春新碱质量分数为79.7%。结论高速逆流色谱纯化长春花中长春新碱容量大、分离纯度和效率高,避免了有机溶剂的大量使用,适用于工业生产高纯度产品。     

高效逆流色谱研究进展——在天然产物有效成分分离方面的应用

本文简述了HSCCC近年来在天然产物有效成分分离方面的应用,介绍了双向逆流色谱、正交轴逆流色谱、pH-区带精制逆流色谱和HSCCC与MS联用技术。     

高速逆流色谱法分离黄芩中总黄酮的研究

目的:建立一种快速分离黄芩中总黄酮的方法。方法:运用高速逆流色谱(HSCCC)法进行分离,提取溶剂为二氯甲烷-乙醇-水(7:3:1,V/V/V),上相(二氯甲烷)作固定相,下相(乙醇-水)作流动相,流速为10mL·min-1,转速为855r·min-1,进样量为10mL;采用高效液相色谱法测定总黄酮含量。结果:分离得到的总黄酮含量可达到98.8%,1g黄芩能分离得到178mg黄芩苷。结论:该方法简便、易行,可作为黄芩中总黄酮的分离方法。     

天然产物分离中高速逆流色谱溶剂体系的研究进展

根据溶剂体系的极性与分离的天然产物的关系,本文对高速逆流色谱中使用的溶剂系统进行了归纳总结,不仅对快速选择溶剂体系分离天然产物起到了一定的指导作用,而且为今后高速逆流色谱溶剂体系的研究提供了方便。     

HSCCC的分离原理、特点及应用的研究进展

对高速逆流色谱技术（High—speedcountereurrentchromatography,HSCCC）的分离原理及特点,溶剂体系的选择,影响分离效果的因素及其在中药、抗生素、蛋白质等方面的应用作了综述。     

高速逆流色谱法用于甜味剂阿司帕坦的提纯和杂质鉴别

应用高效逆流色谱法,以氯仿-甲醇-水(4∶3∶2)为溶剂系统,下层作固定相,上层作流动相,254nm作检测波长,检测杂质并作分离纯化阿司帕坦(1)。所得1纯品在TLC和HPLC中为单色点、单峰,与对照品IR谱完全一致,HPLC表明1粗品含两种主要杂质,即苯丙氨酸和5-苄基-3,6-二氧代-2-哌嗪乙酸(2)及两种尚待鉴别的成分。