琥珀酸曲格列汀的合成及初步HPLC质量控制研究

目的对琥珀酸曲格列汀的合成工艺进行系统研究,为其工艺放大奠定基础。方法以6-氯-3-甲基尿嘧啶为起始原料,通过2次亲核取代、氯化氢-甲醇溶液脱Boc,再与琥珀酸成盐制得琥珀酸曲格列汀。针对采用的特定路线,制备了5种主要有关物质的标准品。结果与结论选用(R)-3-Boc-氨基哌啶引入氨基侧链,可位置选择性地合成曲格列汀,4步反应的总收率达43.1%(以6-氯-3-甲基尿嘧啶计),终产物的纯度达到99.5%以上,单个杂质量均控制在0.1%以下。建立了琥珀酸曲格列汀合成所涉及的各步中间体、目标物及其有关物质的HPLC检测方法,并运用此方法进行合成过程控制及产品质量评价。     

利拉利汀中4种杂质的合成

目的：为了加强对抗糖尿病药物利拉利汀的质量控制,合成了与利拉利汀相关的5个化合物：A、B、C、D和E。方法：利拉利汀1经取代反应分别得到化合物A和B;利拉利汀1经加成反应得到化合物C;利拉利汀1经三步取代反应得到化合物D;利拉利汀1经多步取代反应得到化合物E。结果与结论：合成了5个化合物,经HPLC确证,其中化合物A、B、D、E分别对应杂质A、B、D、E,其中化合物C的结构有待进一步研究。     

HPLC法测定利格列汀原料药的有关物质

目的：采用HPLC法测定利格列汀原料药的有关物质。方法采用C18（150mm ×4．6mm,5μm）色谱柱,流动相A为0．1％磷酸;流动相B为乙腈,梯度洗脱;流速为1mL? min －1,检测波长为225nm。结果利格列汀及其已知杂质（杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E）的线性范围分别为0．05～1．2μg? mL －1;平均回收率分别为97．5％、100．2％、103．6％、97．6％和99．0％。结论本法简便、准确、可靠、适合于利格列汀原料药有关物质测定。     

沙库巴曲有关物质的合成

目的为加强对沙库巴曲缬沙坦钠原料药及其中间体的质量控制,合成沙库巴曲的3种杂质A～C。方法以(2R,4S)-5-(联苯-4-基)-4-氨基-2-甲基戊酸乙酯盐酸盐为起始物,经过环合、酰化反应得到杂质A;该起始物经过水解、酯化、酰化和成盐得到杂质B;该起始物经过水解、酯化、酰化和再酯化得到杂质C。结果与结论合成的3种有关物质的结构经~1H-NMR、~(13)C-NMR和HRMS谱确证,HPLC测定纯度均在99%以上,3种杂质可用于沙库巴曲缬沙坦钠原料药的质量研究和质量控制。     

利伐沙班降解杂质的合成

目的 为了加强对Xa因子抑制剂类抗凝药利伐沙班原料药的质量控制,合成了利伐沙班的3个降解杂质。方法 利伐沙班(1)经开环反应得到杂质A;杂质A经水解反应得到杂质B;杂质A经取代反应得到杂质C。结果 合成的3种降解杂质的结构经1H-NMR、13C-NMR和MS确证,纯度经HPLC检测均达到97.1%以上。结论 3个杂质可作为利伐沙班原料药质量控制的杂质对照品。     

普拉曲沙有关物质的合成

目的 加强普拉曲沙的质量控制，合成4个普拉曲沙有关物质，为其质量研究提供对照品。方法 以4-{2-[(2,4-二氨基蝶啶-6-基)甲基]-1-甲氧基-1-氧代-4-戊炔-2-基}苯甲酸甲酯为起始原料，经水解、脱羧、酰化反应，再经水解反应，得到杂质A;以4-{1-[(2,4-二氨基蝶啶-6-基)基]-4-戊炔-2-基}苯甲酸为起始原料，分别与D-谷氨酸二甲酯盐酸盐、L-谷氨酸-1-甲酯盐酸盐、L-谷氨酸-5-甲酯盐酸盐进行酰化缩合，再分别水解或经柱色谱分离，得到杂质B、C及D。结果与结论合成的4种普拉曲沙有关物质的结构均经HR-MS、¹H-NMR、¹³C-NMR谱确证，杂质总收率为8.5%～60.9%,纯度为94.37%～98.33%。4种杂质可用于普拉曲沙原料药的质量控制和质量研究。     

苯甲酸阿格列汀原料药的有关物质及含量测定

目的建立RP-HPLC法测定苯甲酸阿格列汀原料药的含量及有关物质。方法采用Thermo ODS-2 HYPERSIL色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-体积分数为0.1%甲酸水溶液(用三乙胺调p H值为3.0)为流动相,流速为1.0 m L·min-1,检测波长为278 nm,柱温为30℃。结果在含量测定色谱条件下,阿格列汀在质量浓度8~80 mg·L-1内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 8,n=5),平均回收率为99.9%(n=9);在有关物质测定色谱条件下,有关物质A、B、C、D和E在质量浓度0.1~2.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r在0.999 6~0.999 8内,n=6);有关物质A、B、D和E含量均小于0.25‰,有关物质C含量小于0.4‰。结论该方法准确、专属性强,为苯甲酸阿格列汀原料药的质量控制提供了依据。     

琥珀酸曲格列汀对2型糖尿病小鼠肠道菌群的改变

目的:研究琥珀酸曲格列汀对2型糖尿病小鼠肠道菌群的影响。方法:16S rRNA高通量测序法对健康组、T2DM组、琥珀酸曲格列汀组、磷酸西格列汀组小鼠肠道菌群进行测序,利用QIME对数据进行过滤,对物种进行分类和注释。对样品的Alpha多样性指数和Beta多样性指数进行了分析,比较4组的样本菌群丰富度和多样性。结果:结果表明健康组、T2DM组、琥珀酸曲格列汀组、磷酸西格列汀组小鼠肠道菌群结构差异具有统计学意义。与健康组相比,T2DM组的厚壁菌门与拟杆菌门的比值降低,与琥珀酸曲格列汀组比较,T2DM组的Cyanobacteria、Verrucomicrobia、Tenericutes差异具有统计学意义(P<0.05);T2DM组候选生物标志物可能是:Bacilli、Lactobacillales、Lactococcus、Streptococcaceae;琥珀酸曲格列汀组候选生物标志物可能是:Bacteroidia、Bacteroidetes、Bacteroidales、Prevotella、Paraprevotellaceae、Parabacteroides、Porphyromonadaceae;磷酸西格列汀组候选生物标志物可能是:Lactobacillus、Lactobacillaceae、Helicobacter。结论:使用琥珀酸曲格列汀改善小鼠肠道菌落,可能通过改善肠道菌群而达到降糖效果。     

氟比洛芬有关物质的合成

目的为了加强非甾体消炎镇痛药氟比洛芬原料药的质量控制,合成氟比洛芬的相关物质。方法以4-溴代联苯类化合物为起始原料,经Grignard反应,再分别与2-溴丙酸乙酯、乙酸酐和二氧化碳反应得到目标化合物。结果合成了氟比洛芬的3个有关物质,其结构经1H-NMR、MS确证。结论合成的产品可作为氟比洛芬原料药质量控制的有关物质对照品。该方法原料易得、反应条件温和、操作简单。     

盐酸依格列汀合成工艺研究

目的 研究盐酸依格列汀(1)的合成工艺。方法 以 2,4,5-三氟苯乙酸为原料,经缩合、氨化、NaBH4还原三步反应得到消旋依格列汀,再经酒石酸拆分、盐酸成盐得到目标产物盐酸依格列汀。其中,拆分后所得的另一对映异构体S-依格列汀通过N-氯代、消除后顺利回收烯胺中间体。结果 制备工艺总收率26.9%,化学纯度为99.9%,光学纯度 ee 值为99.8%;烯胺中间体回收率为92.3%(以拆分所得依格列汀剩余的对映异构体量计算)。结论 该工艺收率高,步骤短,成本低廉、操作简便,适应工业化生产。此外,本文也为手性胺类药物的高效制备提供了一种极具吸引力的策略。