反相高效液相色谱法测定伏立诺他含量和有关物质

目的:建立伏立诺他含量及有关物质的反相高效液相色谱测定方法。方法:采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);含量测定以0.1%磷酸溶液(三乙胺调节pH值至3.0)-乙腈(70∶30)为流动相,有关物质采用梯度洗脱;流速为1 mL.min-1;检测波长为241 nm。结果:伏立诺他与各杂质之间均达到良好分离,伏立诺他在5.3～266μg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=1),其最低检测限为0.3 ng(S/N=3)。结论:该方法简便、准确、可靠,适用于伏立诺他的质量控制。     

伏立诺他含量测定及其稳定性考察

目的：建立测定伏立诺他含量及有关物质的高效液相色谱法,考察光照、温度和湿度对伏立诺他质量的影响。方法采用Inertsil ODS-SP色谱柱,含量测定以0.1％磷酸溶液(三乙胺调节pH至3.0)-乙腈(70：30)为流动相,有关物质以0.1％磷酸溶液(三乙胺调节pH至3.0)-乙腈(60：40)为流动相;流速1.0 mL·min-1;检测波长242 nm;进样量20μL;柱温30℃;样品超声时间20 min。依据2010年版《中华人民共和国药典》二部附录“原料药与药物制剂稳定性实验指导原则”的有关技术要求进行影响因素实验。结果伏立诺他与各杂质之间均达到良好分离,伏立诺他在20.16~302.4μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9997)。经影响因素实验后伏立诺他含量及有关物质均无明显变化。结论伏立诺他对光照、高温、高湿稳定。     

高效液相色谱法测定伏立诺他的含量及有关物质

目的建立测定伏立诺他含量及有关物质的高效液相色谱法。方法采用Luna-C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）;流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液（27：73及40：60）;流速为1．0ml／min;检测波长为24nm;进样量为20μl;柱温为30℃;样品提取超声时间为20min。结果伏立诺他浓度在24．66-295．92／μg／ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=O．9999,检测限为10．07ng／ml,其它方法学验证各项指标均良好。伏立诺他对高温与光照较稳定,其酸降解、碱降解、氧化降解产物和苯胺等有关物质与伏立诺他均有良好的分离。结论该方法灵敏度与准确度高,专属性强,可应用于伏立诺他的质量控制。     

高效液相色谱法测定氟他胺中有关物质

目的:建立氟他胺中有关物质的测定方法.方法:采用Superspher 100 RP-18e (4.0 mm×25 cm,5 μm)不锈钢柱;流动相为乙腈-水(5:5);检测波长:240 nm;流速:0.5 mL·min-1.结果:氟他胺与6个主要杂质能得到有效分离,各杂质在0.2～3.4 μg·mL-1范围内呈良好线性关系.结论:本测定方法灵敏度高,准确可靠,可以控制氟他胺中有关物质的含量.     

头孢丙烯中有关物质检查的HPLC法

目的：建立头孢丙烯中有关物质的检测方法。方法：采用高效液相色谱法,固定相为C18柱,流动相为乙腈-磷酸二氢铵溶液（10：90）,检测波长为280nm。结果：头孢丙烯与各有关物质达到了较好的分离,顺式异构体和反式异构体峰的相对保留时间分别为0．7和1．0,分离度大于2．5。3批样品的中间体杂质含量分别为0．14％、0．15％和0．15％,其它最大单个杂质含量分别为0．38％、0．39％和0．36％,杂质总量分别为1．20％、1．15％和1．18％。结论：本法简便、专属性强、准确度高、重复性好,可用于测定头孢丙烯中的有关物质。     

阿替洛尔片的有关物质研究和质量评价

目的 优化阿替洛尔片的有关物质检查方法,对国内13家企业生产的171批次阿替洛尔片进行有关物质研究和质量评价.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为X-bridge C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为磷酸盐缓冲液-甲醇(60:40),检测波长为226 nm,流速为0.6 mL·min-1,柱温为30℃,进样量为20μL.结果 阿替洛尔及其有关物质分离良好;171批样品共检出4个杂质(杂质1~4),其中杂质2~4为原料引入,杂质1为片剂特有;阿替洛尔与乳糖、氯乙酸均未反应生成杂质.结论 本文优化后的方法可以有效地分离分析阿替洛尔及其有关物质,对完善质量标准,加强药品质量控制具有重要意义.     

气相色谱法测定伏立诺他原料药中的有机溶剂残留量

目的建立伏立诺他原料药中残留溶剂乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙酸乙酯、乙醇的测定方法。方法采用气相色谱法,色谱柱:ZB-Wax毛细管柱(30m×0.25mm×0.5μm),载气为氮气,检测器为氢火焰离子化检测器,以程序升温方式使乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙酸乙酯和乙醇达到了完全分离。结果 5种溶剂的线性关系、精密度、准确度、灵敏度均达到了预定的分析要求,在伏立诺他原料药中仅检测出乙醇。结论建立的方法灵敏、准确,适用于伏立诺他原料药质量控制中的有机残留溶剂检查。     

高效液相色谱法测定双氯芬酸二乙胺乳胶剂有关物质

目的 建立HPLC法测定双氯芬酸二乙胺乳胶的有关物质.方法 采用Ultimate C18色谱柱,以0.2％乙酸溶液(pH=3.0)-甲醇(34∶66)为流动相,检测波长为254 nm.结果 辅料不干扰各杂质的检出,双氯芬酸二乙胺能与各杂质完全分离,检测限为0.02 μg·mL-1,在杂质的吸收系数等于或大于双氯芬酸二乙胺的情况下,最低杂质检出量为0.002％.结论 建立的双氯芬酸二乙胺有关物质测定方法简单,灵敏度高,能用于该制剂的质量控制.     

氯霉素有关物质测定方法的建立

目的:建立氯霉素有关物质的检测方法.方法:采用薄层色谱法,以在冰箱中放置过夜的氯仿-甲醇-水(80:20:5)下层液为展开剂.结果:在专属性试验中,氯霉素主斑点与其他杂质斑点有较好的分离;检测限为0.25μg.结论:该方法操作简便、结果满意,可用于氯霉素有关物质的检测.     

雌三醇有关物质的可能结构

采用LC-MSn和GC-MSn技术对雌三醇中有关物质的结构进行了初步鉴定.结果表明,存在2个主要杂质,可能为雌三醇的立体异构体.     

A New Stability Indicating HPLC Method for Related Substances in Zolmitriptan

A sensitive, precise, specific, linear and stability indicating isocratic HPLC method was developed for the analysis of related substances in zolmitriptan. The potential known related substances are (S)-4-(4-aminobenzyl)-1,3-oxazolidin-2-one (impurity I) and (S)-4-(4-hydrazinobenzyl)-1,3-oxazolidin-2-one (impurity II). The method can be used for the detection and quantification of known and unknown impurities and degradants in the drug substance zolmitriptan during routine analysis and also for stability studies in view of its capability to separate degradation products.     

HPLC法测定曲安奈德益康唑乳膏中的有关物质

目的:建立HPLC法测定曲安奈德益康唑乳膏中有关物质的方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件为:色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Kromasil100-5C18,4.6mm×250mm,5μm),柱温为45℃;以0.077%醋酸铵缓冲液(用磷酸调节pH值至3.0)-甲醇(80∶20)为流动相A;甲醇-乙腈(40∶60)为流动相B;流速为1.0mL/min;梯度洗脱;检测波长为240nm和225nm。结果:在225nm检测波长下,阴性样品色谱峰、曲安奈德峰及其杂质峰对硝酸益康唑及其杂质检测无干扰,加已知杂质的供试品溶液中益康唑、益康唑杂质A、杂质B、杂质C、咪康唑及未知杂质峰和相邻色谱峰分离度均符合要求;在240nm检测波长下,阴性样品色谱峰、硝酸益康唑及其杂质色谱峰对曲安奈德及其杂质检测无干扰,加已知杂质的供试品溶液中,曲安奈德、曲安奈德杂质A(曲安西龙)、杂质B、杂质C及未知杂质与相邻色谱峰分离度均符合要求。结论:经过对拟定的有关物质方法的方法学验证,表明本方法具有重现性和科学性,可用于曲安奈德益康唑乳膏有关物质检查。     

罗红霉素原研制剂与自研制剂有关物质及降解机制研究

目的 对比研究自研制剂与原研制剂的杂质谱和杂质水平,初步探索罗红霉素的降解机理。方法 采用HPLC考察原研和自研制剂的有关物质,通过LC-MS定位EP系统适用性对照品的11种杂质,进而利用LC-MS对2种制剂的有关物质进行辅助结构确证。进行原研和自研制剂的强制降解实验,通过HPLC对比研究两者的主要降解途径,并利用LC-MS初步鉴定降解杂质的结构。结果 原研制剂检出的主要杂质为杂质F、杂质G、杂质H、杂质I,其中最大单杂为杂质G,含量为0.439%,自研制剂检测到杂质C、杂质D、杂质H、杂质I、杂质J,其中最大单杂为杂质C,含量为0.196%。原研制剂在碱、高温、光照条件下较稳定,强酸条件下主要产生杂质B、杂质D,强氧化条件下生成的杂质未能归属到EP系统适用性对照品的11种杂质中,已通过质谱确定分子量,推测可能为罗红霉素N氧化物。自研制剂主要降解途径及产生的杂质与原研制剂一致。2种制剂加速实验有关物质均无明显变化。结论 由于国产原料药和进口原料药的差异,自研制剂与原研制剂杂质谱不完全一致,自研制剂的杂质水平低于原研制剂。罗红霉素主要降解途径为水解、异构化和N的氧化,分别产生杂质B、D以及N氧化杂质（m/z=853.531 8）。     

Determination of albuterol sulfate and its related substances in albuterol sulfate inhalation solution, 0.5% by RP-HPLC

An isocratic reversed-phase high performance liquid chromatographic (RP-HPLC) method has been developed and validated for the determination of albuterol sulfate and six of its related substances in albuterol sulfate inhalation solution, 0.5% (w/v). The separation was achieved using a YMC phenyl column (250 mm x 4.6 mm ID, 5 microm fitted with a direct connect YMC phenyl guard column (20 mm x 4 mm ID) maintained at ambient conditions, and a mobile phase of 25 mM monobasic potassium phosphate (pH 3.0) and methanol (95:5, v/v). The mobile phase flow rate was 1.5 mL/min and the detection wavelength was 225 nm. Albuterol is quantitated versus an external standard. The method was capable of resolving six of the seven known albuterol-related substances. Bis-ether albuterol, a drug substance process related impurity, is retained on the column due to its different hydrophilic character. The related substances are determined by area percent. However, a correction factor of 1.6 is applied for the determination of albuterol aldehyde, a potential impurity and a degradation product, since its molar absorptivity is about 1.6 times that of albuterol. The limits of detection and quantitation for albuterol and six of its related substances ranged between 0.01 and 0.21% of the assay concentration of 0.3 mg/mL as albuterol base. The method was found to be linear for albuterol over the range of 50-150% of the active label claim. The method was also found to be linear for the six related substances over the range 0.05-0.5%. No interferences from the blank, placebo (formulation matrix), related substances or force-degraded placebo samples were observed for the determination of the active or the individual related substances. The method was found to be accurate, precise, linear, specific, sensitive, rugged, robust, and stability-indicating.     

高效液相色谱法测定盐酸氨溴索注射液中2种杂质的含量

目的采用高效液相色谱法测定盐酸氨溴索注射液中2种有关物质的含量。方法采用辛烷基硅烷键合硅胶Kromasil 100-5C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以磷酸二氢铵缓冲液(取磷酸氢二铵2 g,溶于800m L水中,用磷酸调p H值至4.0,再加水稀释成1 000 m L)-甲醇(45:55)为流动相,流速为1.0 m L·min-1,检测波长分别为238、250 nm,柱温:30℃。结果杂质B反-4-(6,8-二溴-1,2,3,4-四氢喹唑啉-3-基)环己醇和杂质E 2-氨基-3,5-二溴苯甲醛的检出限分别为9.39 ng、3.70 ng,定量限分别为18.78 ng、11.10ng;线性范围分别为0.376¹8.8μg·m L-1(r=0.999 9)、0.38618.8μg·m L-1(r=0.999 9)、0.386⁷.72μg·m L-1(r=0.999 8),平均加样回收率均在99.8%7.72μg·m L-1(r=0.999 8),平均加样回收率均在99.8%¹00.1%,RSD均<0.5%。结论该方法测定盐酸氨溴索注射液中的有关物质方法简便、准确、专属性强,可用于盐酸氨溴索注射液中有关物质的质量控制。     

加校正因子的主成分自身对照法测定盐酸普拉克索的有关物质

目的 建立盐酸普拉克索原料药中有关物质的含量测定方法。方法 采用HPLC建立盐酸普拉克索及其杂质A、B、C、E的线性方程,以斜率计算杂质相对于主成分的校正因子,并用该校正因子测定有关物质的含量。通过方法学考察证明此方法的可行性。结果 盐酸普拉克索杂质A、B、C、E的校正因子分别为0.642,0.999,0.796,0.999;相对保留时间为0.703,1.512,1.733,0.522;方法学考察验证该方法符合要求;3批样品中杂质A、B、E均未检出,杂质C的含量分别为0.013%,0.013%,0.012%。结论 加校正因子的主成分自身对照法能够准确测定盐酸普拉克索原料药中有关物质的含量。     

离子色谱法测定硫酸阿米卡星原料及其制剂的有关物质

目的:建立测定硫酸阿米卡星原料及其制剂有关物质的离子色谱方法。方法:采用Carbopac MA1(250 mm×4 mm)色谱柱,以去离子水为淋洗液A,400 mmol·L-1氢氧化钠溶液为淋洗液B,梯度洗脱,流速:0.4 mL·min-1,柱温为35℃,安培检测器,工作电极为金电极(1 mm)。结果:阿米卡星在0.9～4.8μg·mL-1(r=0.9994)内线性关系良好,阿米卡星杂质A在1.0～8.1μg·mL-1(r=0.9994)内线性关系良好;阿米卡星与阿米卡星杂质A精密度(RSD)分别为1.8%及1.9%;检测限分别为3.6 ng及3.2 ng;供试品溶液在10 h内稳定性良好。结论:该方法简便、准确、灵敏,可用于硫酸阿米卡星原料及其制剂的有关物质测定。     

液相色谱结合液质联用法测定酮康唑原料药及复方酮康唑软膏中的有关物质

摘要：目的 建立一种复方酮康唑软膏中有关物质的液相色谱及液相色谱质谱测定方法。方法 采用Agilent HPLC,选择 ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(250mm×4.6mm,5mm),以10mmol/L四丁基硫酸氢铵溶液-乙腈(85:15)为流动相A,10mmol/L 四丁基硫酸氢铵溶液-乙腈(20:80)为流动相B,流速为1mL/min,检测波长为220nm。经优化流动相比例确定了线性梯度洗脱, 开展了专属性、线性、准确度、精密度、重复性、稳定性和耐用性等方法学研究。并将该方法应用于酮康唑原料药及复方酮康 唑软膏中有关物质的检测。在液相色谱-四级杆飞行时间质谱方法中,选择0.1%甲酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B,梯度 洗脱,通过二级质谱数据推导了酮康唑的裂解规律。结果 通过检测酮康唑原料药、复方酮康唑软膏并结合降解实验结果发 现,酮康唑与相邻杂质均可实现基线分离。根据确定的HPLC方法对比了不同来源复方酮康唑软膏有关物质的差异。建立了基 于高分辨质谱的酮康唑及其杂质的结构解析方法,修正了酮康唑及杂质E的特征子离子的产生过程及结构,并确认了酮康唑的 主要降解杂质为杂质D。结论 本方法灵敏度较高、重复性较好,为复方酮康唑软膏的质量控制提供了一种可行的分析方法, 适用于该产品的质量控制。基于高分辨质谱的结构解析方法也为酮康唑中其他杂质的结构推断提供了研究基础。     

HPLC测定穿琥宁注射液中的有关物质

目的 采用HPLC法测定穿琥宁注射液中的有关物质.方法 采用Inertsil ODS -3色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2％甲酸(7∶3),检测波长251 nm,柱温35℃.结果 主成分与有关物质可完全分离,杂质1、杂质2的相对校正因子和相对保留时间分别为0.92、0.90和0.8、0.9 min,检测限为0.2 μg· mL-1.结论 所用方法灵敏、专属、准确.     

高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用美洛西林钠-舒巴坦钠中有关物质

目的建立HPLC梯度洗脱法测定注射用美洛西林钠-舒巴坦钠有关物质的方法。方法使用ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5.0μm）,以磷酸盐缓冲液（5.44 g L-1磷酸二氢钾溶液,用磷酸调节pH至3.8,即得）和乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL min-1,柱温为31℃,检测波长为215 nm。结果样品中有关物质完全洗出,美洛西林和舒巴坦主峰与有关物质峰均达到基线分离,舒巴坦杂质A、B分离度符合要求;舒巴坦杂质A、舒巴坦杂质B、舒巴坦和美洛西林与峰面积线性关系良好,相关系数（r）均〉0.997 2;舒巴坦杂质A相对舒巴坦校正因子为0.6,舒巴坦杂质B相对舒巴坦校正因子为0.5;舒巴坦杂质A、B检测限分别为3.11 ng和5.98 ng,定量限分别为10.36 ng和17.93 ng,舒巴坦检测限和定量限分别为8.46 ng和31.01 ng;美洛西林的检测限和定量限分别为12.20和40.25 ng;舒巴坦杂质A、B平均回收率（n=9）分别为100.9%和102.0%。结论该方法对注射用美洛西林钠舒巴坦钠有关物质的测定灵敏、准确、专属性强,适用于产品质量控制。