23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠糖脂代谢紊乱的改善作用

目的:研究23-乙酰泽泻醇B对肥胖模型小鼠糖脂代谢紊乱的改善作用及机制。方法:小鼠给予高脂饲料10周以复制肥胖模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、奥利司他组(阳性对照,15.6 mg/kg)和23-乙酰泽泻醇B低、中、高剂量组(7.5、15、30 mg/kg),每组10只;另设置喂养普通饲料的小鼠10只为正常组。正常组和模型组小鼠灌胃水,给药组小鼠灌胃相应药物,灌胃体积均为20 mL/kg,每天1次,连续4周。末次给药后,测定小鼠的体质量、腰围和全身脂肪、肌肉和体液质量;测定小鼠血清中血脂指标[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)]和血糖水平;采用酶联免疫吸附法测定肝组织中过氧化物酶体增殖剂激活受体γ(PPAR-γ)、核因子κB(NF-κB)、白细胞介素6(IL-6)水平和血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;采用苏木精-伊红染色法观察小鼠脂肪和肝组织的病理变化。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量、腰围、全身脂肪和体液质量均显著增加(P<0.01);血清中TC、TG、HDL-C、血糖、TNF-α水平和肝组织中PPAR-γ、NF-κB、IL-6水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);脂肪细胞结构破裂、体积增大,伴有炎性细胞浸润;大量肝细胞水肿,细胞浆疏松淡染,伴有脂肪变性。与模型组比较,23-乙酰泽泻醇B各剂量组小鼠体质量、全身脂肪和体液质量以及血清中TG、TNF-α水平均显著降低(P<0.01);23-乙酰泽泻醇B中、高剂量组小鼠血清中TC、血糖和肝组织中IL-6均显著降低(P<0.05或P<0.01),肝组织中PPAR-γ水平均显著升高(P<0.05或P<0.01);23-乙酰泽泻醇B高剂量组小鼠腰围和肝组织中NF-κB显著减少或降低(P<0.01);23-乙酰泽泻醇B中剂量组小鼠血清中HDL-C水平显著降低(P<0.01);脂肪细胞排列紧密、体积较小;肝细胞轻中度肿胀,少量细胞浆疏松淡染或呈空泡状,少量肝细胞伴脂肪变性和炎性细胞小灶性浸润。结论:23-乙酰泽泻醇B可改善肥胖模型小鼠的糖脂代谢紊乱,其作用机制可能与调节肝组织中PPAR-γ、NF-κB、IL-6水平和血清中TNF-α水平有关。     

泽泻汤对高脂血症大鼠肝脏线粒体蛋白质组的影响

目的 研究泽泻汤对高脂血症大鼠肝脏线粒体蛋白质组的影响.方法 将40只健康雄性SD大鼠随机分为正常组、高脂模型组、辛伐他汀组、泽泻汤组,每组10只,造模4周后辛伐他汀组和泽泻汤组分别灌胃给予相应的药物,正常组和模型组灌胃给予等量的生理盐水.连续给药4周后检测血清TC、TG、LDL-C及HDL-C水平.运用同位素标记的相对与绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)检测大鼠肝脏蛋白质组的变化.结果 高脂模型组大鼠TC、TG、LDL-C水平明显高于正常组(P＜0.05),辛伐他汀组和泽泻汤组给药4周后,TC、TG、LDL-C水平均降低(P＜0.05);iTRAQ分析结果显示,在各组大鼠肝脏组织样本中共检测出4 213种差异蛋白,其中模型组蛋白的变化有统计学意义的共有195种,经泽泻汤治疗后,与肝脏线粒体相关的蛋白表达变化有统计学意义的有18种,其中△3-△2-烯酰-辅酶A异构酶(3,2 trans-enoyl-Coenzyme A isomerase,ECI)表达差异最为显著.结论 泽泻汤对高脂血症大鼠肝脏线粒体能量代谢相关蛋白有影响,泽泻汤降血脂作用可能与线粒体ECI等蛋白差异表达有关.     

泽泻汤对肾性高血压复合高脂血症大鼠的影响

目的观察泽泻汤对肾性高血压复合高脂血症大鼠的影响。方法通过两肾一夹手术及高脂饲料喂养,建立肾性高血压复合高脂血症大鼠模型。分为模型组、泽泻汤组、对照组(卡托普利18.75 g.kg-1+血脂康0.12 g.kg-1)及假手术组。每天灌胃给药1次,共8周。观察药物对实验动物收缩压(SBP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)及高密度脂蛋白(HDL-C)的影响,并对肝脏、肾脏及胸主动脉组织切片做病理学观察。结果泽泻汤能显著性降低模型大鼠SBP、TC、TG、LDL-C(P<0.05),升高HDL-C(P<0.05),并能减轻其脂肪肝、肾小球动脉硬化及胸主动脉中膜增厚症状。结论泽泻汤有很好的降压调脂作用,并对肝、肾及胸主动脉有较好的保护作用。     

泽泻有效成分在模拟人体胃肠道环境中的转化研究

目的:利用高效液相色谱法研究了在模拟人体胃肠道环境中泽泻调酯活性成分泽泻醇类化合物23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A的稳定性。方法:采用色谱柱:Lichrospher C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(80∶20),流速:0.8 mL.min-1,检测波长:210 nm,柱温:30℃。结果:23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A在模拟胃酸性条件下不稳定,易发生转化。23-乙酰泽泻醇B的主要转化产物为泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和一未知物。24-乙酰泽泻醇A的主要转化产物为泽泻醇A和一未知物。23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A在模拟体内肠道环境中稳定,不发生明显转化。结论:胃蛋白酶可能并非引起分解的主要因素。该结果可为中药泽泻剂型研究、泽泻醇类化合物的入血成分及调脂机制提供参考,并提示泽泻醇A可能也应作为中药泽泻的另一质量控制指标。     

多廿醇对高脂血症大鼠血清胆固醇水平的影响

目的观察多廿醇对高脂血症大鼠的降胆固醇作用并探讨其作用机制。方法大鼠分为正常对照组、多廿醇4mg.kg-1预防组、高脂模型组、多廿醇4,6和8mg.kg-1治疗组和洛伐他汀阳性对照组;后5组大鼠在实验前4周给予高脂饲料制备高脂大鼠模型,从第5周开始,除正常对照和高脂模型组外,各给药组ig给予不同浓度的多廿醇或洛伐他汀,每天1次,连续6周。多廿醇预防组喂饲高脂饲料的同时ig多廿醇,每天1次,连续10周。用全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并测定粪便总胆汁酸(FBA)排出量,紫外分光速率法测定肝脏微粒体3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶活性,荧光配体标记法测定外周血淋巴细胞低密度脂蛋白受体(LDL-R)活性。结果与高脂模型组比较,多廿醇预防组、多廿醇治疗组和洛伐他汀阳性对照组大鼠血清TC含量明显下降(39.1%～46.4%),LDL-C含量明显下降(66.6%～80.7%),粪便FBA明显升高(9.7%～19.0%),肝脏微粒体HMG-CoA还原酶活性明显下降(13.8%～23.6%),外周血淋巴细胞LDL-R活性升高(27.5%～129.6%);多廿醇预防组、多廿醇8mg.kg-1组和洛伐他汀组HDL-C水平明显升高(12.2%～16.7%);洛伐他汀组TG水平明显下降。结论多廿醇具有明显降低胆固醇的作用,其机制包括增加胆汁酸的排泄、抑制胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶活性和促进低密度脂蛋白受体活性的表达。     

多廿醇降胆固醇及抗氧化作用的实验研究

目的 观察多廿醇对高脂血症大鼠的降胆固醇和抗氧化作用.方法 将大鼠随机分为正常对照组、多廿醇预防组和高脂造模组.多廿醇预防组喂饲高脂饲料的同时给予多廿醇灌胃10周;高脂造模组先给予高脂饲料4周制备大鼠高脂血症模型,再按照总胆固醇水平分为多廿醇低、中、高剂量组和阳性药物洛伐他汀对照组,灌胃给予相应药物6周后采血,测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并计算LDL-C/HDL-C、TG/HDL-C比值和动脉硬化指数(AI);测定血清中丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 与高脂模型组比较,多廿醇预防组、多廿醇低、中、高剂量组和阳性对照组大鼠的血清中TC、LDL-C含量显著性下降(P＜0.01);阳性对照组大鼠的血清中TG水平显著性降低(P＜0.05);多廿醇预防组、多廿醇高剂量组和阳性对照组大鼠血清中HDL-C水平显著性升高(P＜0.05);多廿醇预防组,多廿醇低、中、高剂量组和阳性对照组LDL-C/HDL-C比值显著性下降(P＜0.01);AI显著性下降(P＜0.01);血清中MDA含量显著性下降(P＜0.05或P＜0.01);多廿醇中、高剂最组和阳性对照组的血清中SOD活性显著性升高(P＜0.05或P＜0.01);多廿醇中和高剂量组的血清中GSH-Px活性显著性升高(P＜0.01).结论 多廿醇对高脂血症模型大鼠具有明显降胆固醇的作用,且可增强机体的抗氧化作用.     

脱氢洛伐他汀的调脂和抗炎作用的关系

目的:观察洛伐他汀的衍生物脱氢洛伐他汀(dehydrolovastatin)调脂和抗炎作用的关系。方法:以洛伐他汀作为阳性对照药,用高脂饲料喂养建立高脂血症大鼠模型,灌胃给予不同剂量的脱氢洛伐他汀,第12周末全自动生化分析仪测定血脂水平,获取肝脏组织进行病理切片以观察肝脏脂肪变性情况。采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型和采用棉球植入小鼠背部致肉芽肿模型,观察洛伐他汀和脱氢洛伐他汀的抗炎作用。结果:脱氢洛伐他汀能明显降低高血脂大鼠血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,并能阻止脂肪肝样变性,其作用似弱于等剂量的洛伐他汀。脱氢洛伐他汀对二甲苯所致耳急性炎症反应和棉球植入致肉芽肿形成的慢性炎症均有显著抑制作用,其作用与洛伐他汀相当。结论:脱氢洛伐他汀的良性调脂作用似弱于洛伐他汀,但其抑制急性和慢性炎症反应的作用与洛伐他汀相当,提示他汀类的调脂和抗炎作用并不平行。     

反相高效液相色谱法测定泽泻提取物中23-乙酰泽泻醇B含量

目的 利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定泽泻提取物中23-乙酰泽泻醇B含量.方法 利用RP-HPLC检测,选用Kromasil 100-5C18(250 mm×4.6 mm)色谱柱,以乙腈-水为流动相等梯度洗脱,流速1ml·min-1;检测波长208 nm.结果 23-乙酰泽泻醇B在进样量范围内与峰面积线性关系良好,仪器精密度和稳定性RSD均小于2％,平均回收率在99％～101％(n=3).测定了5批提取物中23-乙酰泽泻酐B,平均的含量为2.550 mg/g.结论 该方法快速、准确、重复性好,可对泽泻指标性成分23-乙酰泽泻醇B进行定量,从而控制提取物质量.     

HPLC法同时测定泽泻中2种有效成分的含量

目的:建立泽泻药材中24-乙酰泽泻醇 A 和23-乙酰泽泻醇 B 含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法;色谱柱:大连依利特 Hypersil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);检测器:蒸发光散射检测器(ELSD);柱温:室温;流动相:乙腈-水(75:25);流速:0.8 mL·min~(-1);ELSD 气体流速:2.00 L·min~(-1);漂移管温度:82℃。结果:被测定峰与其他组分峰可达到基线分离,泽泻中24-乙酰泽泻醇 A 和23-乙酰泽泻醇 B 的线性范围分别是0.33～1.98 μg(r=0.9992)及0.31～3.12 μg(r=0.9999);平均回收率(n=6)分别为100.8%及98.7%,RSD 分别为1.2%及3.3%。结论:该方法准确、简便、重复性好,可作为泽泻中24-乙酰泽泻醇 A 和23-乙酰泽泻醇 B 的含量测定方法。     

泽泻提取物三萜类成分含量测定研究

目的:建立紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法测定泽泻提取物中三萜类成分含量。方法:采用紫外-可见分光光度法,以5%香草醛(用冰醋酸配制)-高氯酸显色,在555 nm波长处测定吸光度,计算泽泻提取物总三萜含量;应用高效液相色谱法同时测定泽泻提取物中12个三萜类成分,采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-5%甲醇水为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长208 nm。结果:紫外-可见分光光度法测定总三萜含量,以23-乙酰泽泻醇B计,质量浓度在5.9~15.6μg·m L-1范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.999 1),平均加样回收率99.05%,RSD为2.3%;高效液相色谱法测定12个泽泻三萜类成分含量,在考察的浓度范围内,线性关系良好(r>0.999 0),回收率均在95.89%~99.33%范围内,RSD为2.0%~3.4%。泽泻提取物中12个三萜类成分的含量:泽泻醇A 5.71%~5.95%、泽泻醇B 3.47%~3.99%、泽泻醇C 2.53%~2.97%、泽泻醇G 3.07%~3.93%、泽泻醇L 3.65%~3.99%、23-乙酰泽泻醇A 2.39%~3.02%、23-乙酰泽泻醇B 10.56%~11.32%、23-乙酰泽泻醇C 9.44%~9.86%、16-羰基-23-乙酰泽泻醇A 0.63%~3.14%、16-羰基-24-乙酰泽泻醇A 1.08%~1.21%、11-去氧泽泻醇B 2.29%~2.85%、24-乙酰泽泻醇A 4.04%~5.02%。结论:经方法学验证,本文建立的紫外-可见分光光度法可以用于检测泽泻提取物中总三萜含量,高效液相色谱法可用于检测泽泻提取物中12个泽泻三萜类成分含量。