HPLC法同时检查华蟾素片中蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基限量和测定蟾蜍噻咛的含量

目的 采用HPLC法对华蟾素片中有毒成分蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基进行限量检查;并利用HPLC法测定其有效成分蟾蜍噻咛的含量.方法 限量检查:色谱柱为Agela C18柱,流动相为乙腈-0.5％磷酸二氢钾溶液(50∶50)(用磷酸调节pH为3.2),检测波长为296nm.含量测定:色谱柱为Kromasil C18柱,流动相为乙腈-水(10∶90),检测波长为226nm.结果 在与蟾毒灵、华蟾酥毒基及酯蟾毒配基对照品色谱峰相同的保留时间处,5批样品出现的色谱峰面积之和小于对照品峰面积之和.蟾蜍噻咛在0.1045～1.0448μg范围内呈良好的线性关系,r=0.9998;平均回收率为98.9％,RSD=1.6％;每片含量不得少于0.15mg.结论 方法快速、准确、重复性好,可用于华蟾素片质量标准的控制.     

HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定蟾酥中11个蟾毒配基成分(伪异沙蟾毒精、日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、远华蟾蜍精、蟾毒它灵、脂蟾毒精、南美蟾毒精、蟾毒灵、脂蟾毒配基和华蟾酥毒基)的含量。方法:采用Agilent InfinityLab Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱(150 mm×3.0 mm 2.7μm),以0.3%乙酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为296 nm。结果:11个蟾毒配基成分的线性范围分别为2.024～20.24μg·mL^-1(r=0.999 8)、18.44～184.4μg·mL^-1(r=0.999 9)、12.40～124.0μg·mL^-1(r=0.999 5)、3.720～37.20μg·mL^-1(r=0.999 5)、10.28～102.8μg·mL^-1(r=0.999 8)、22.16～221.6μg·mL^-1(r=...     

HPLC法同时测定FT-CS胶囊中4种有效成分的含量

目的建立同时测定Tegafur-Venenum Bufonis(FT-CS)胶囊中4种有效成分含量的方法,提高制剂的质量控制标准。方法采用HPLC法。色谱柱:Luna Phenyl-Hexyl柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(体积比60∶40);流速:1.0 mL.min-1;柱温:40℃;检测波长:296 nm;进样量:10μL。结果蟾毒灵、脂蟾毒配基、华蟾毒精、替加氟能够达到基线分离;蟾毒灵质量浓度在1.1~21.0 mg.L-1内、脂蟾毒配基质量浓度在2.2~44.0 mg.L-1内、华蟾毒精质量浓度在2.0~40.0mg.L-1内、替加氟质量浓度在10.0~40.0 mg.L-1内与峰面积呈良好的线性关系;蟾毒灵、脂蟾毒配基、华蟾毒精、替加氟的回收率分别为98.05%、99.92%、100.02%、101.56%,RSD分别为2.52%、1.19%、0.43%、1.74%。结论该方法可作为FT-CS胶囊的质量控制方法之一。     

毒性中药蟾酥质量检测方法研究

目的:建立蟾蜍中多种药效及毒性成分蟾蜍毒素的定性定量检测方法。方法:采用液相色谱-质谱/质谱联用方法检测蟾酥中多种蟾蜍毒素成分。结果:建立了华蟾毒它灵、蟾蜍灵、华蟾毒配基及脂蟾毒配基的LC-MS/MS检测方法。比较了蟾酥样本的液相色谱-质谱/质谱联用分析数据。对4个不同来源中华大蟾蜍及黑眶蟾蜍的蟾酥样本进行检测,检出华蟾毒它灵、蟾蜍灵、华蟾毒配基及脂蟾毒配基的含量范围为0.05%~5.12%(w/w)。结论:液相色谱-质谱/质谱联用方法可用于蟾酥定性定量检测,并为质量评价提供参考。     

干蟾皮及其炮制品的指纹图谱建立与化学模式识别

目的:建立干蟾皮生品及炮制品UPLC指纹图谱,并同时测定干蟾皮中指标性成分日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾蜍它里定、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、沙蟾毒精-3-辛二醇辛酯的含量,通过化学模式识别控制干蟾皮质量。方法:干蟾皮的甲醇提取液的分析采用Waters Acquity UPLC BEH色谱柱(100 mm×2.1 mm, 1.7μm),以乙腈-0.5%乙酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^-1,柱温为30℃,检测波长为296 nm。结果:12批生品和12批炮制品的总含量分别为3.18～4.69 mg·g^-1和0.91～2.77 mg·g^-1,指纹图谱中均有9个共有峰,相似度分别为0.963～0.991和0.692～0.988,主成分分析和聚类分析能很好地识别干蟾皮的生品和炮制品。结论:该方法稳定、可靠,可为干蟾皮的质量控制、炮制工艺,进一步开发研究提供科学依据。     

一测多评法测定心可宁胶囊中6种蟾蜍二烯内酯类化合物

目的 建立一测多评法同时测定心可宁胶囊中6种蟾蜍二烯内酯类化合物的含量,并验证此方法在心可宁胶囊中应用的可行性和准确性。方法 以华蟾酥毒基为内参物,建立日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵和脂蟾毒配基与华蟾酥毒基的相对校正因子。分别采用外标法和一测多评法测定心可宁胶囊中6种蟾蜍二烯内酯类化合物的含量,比较2种方法的结果差异,验证一测多评法的可行性和准确性。结果 日蟾毒它灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、蟾毒灵和脂蟾毒配基与华蟾酥毒基的相对校正因子分别为1.06,0.862,0.897,1.09,0.915;2种方法结果无显著差异。结论 以华蟾酥毒基为内参物建立的相对校正因子重现性好,一测多评法可用于心可宁胶囊中多个蟾蜍二烯内酯类成分的质量评价。     

HPLC法同时测定六神丸中9种蟾蜍二烯内酯类成分的含量

目的:建立同时测定六神丸中和蟾蜍他灵、沙蟾毒精、远华蟾毒精、去乙酰华蟾毒它灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为ODS-2 C_(18),流动相为乙腈-0.15%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为296 nm,柱温为40℃,进样量为10μL。结果:和蟾蜍他灵、沙蟾毒精、远华蟾毒精、去乙酰华蟾毒它灵、蟾毒它灵、华蟾毒它灵、蟾毒灵、华蟾酥毒基、酯蟾毒配基检测质量浓度线性范围分别为1.10~70.39μg/mL(r=0.999 6)、4.03~257.78μg/mL(r=0.999 9)、4.09~261.89μg/mL(r=0.999 9)、0.67~42.96μg/mL(r=0.999 9)、3.36~214.73μg/mL(r=0.999 9)、5.73~366.44μg/mL(r=0.999 9)、3.77~241.56μg/mL(r=0.999 9)、7.31~468.11μg/mL(r=0.9999)、5.18~331.56μg/mL(r=0.999 9);定量限分别为1.10、0.85、1.02、0.34、0.84、1.43、0.94、3.66、2.59μg/mL,检测限分别为0.27、0.21、0.51、0.17、0.42、0.72、0.47、0.91、1.30μg/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD<3.0%;加样回收率分别为96.35%~103.10%(RSD=2.72%,n=6)、96.76%~103.24%(RSD=2.49%,n=6)、97.01%~101.39%(RSD=1.64%,n=6)、97.32%~104.01%(RSD=2.61%,n=6)、95.76%~103.60%(RSD=2.92%,n=6)、95.07%~102.59%(RSD=2.92%,n=6)、95.77%~101.43%(RSD=2.03%,n=6)、95.11%~103.72(RSD=3.19%,n=6)、95.23%~103.34(RSD=3.24%,n=6)。结论:该方法简便快速、准确可靠、重复性好,适用于同时测定六神丸中蟾蜍二烯内酯类成分的含量。     

蟾皮中蟾毒配基类成分的分离与鉴定

目的研究中华大蟾蜍(Bufo bufo gargarizansCantor)皮中的蟾毒配基类成分。方法利用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱、重结晶等手段分离纯化蟾皮中的蟾毒配基类成分,根据化合物的理化性质和各种波谱学数据鉴定其化学结构。结果分离得到11个蟾毒配基类化合物,分别鉴定为脂蟾毒配基(resibufogenin,1)、华蟾毒精(cinobufagin,2)、蟾毒灵(bufalin,3)、远华蟾毒精(telocinobufagin,4)、蟾毒它灵(bufotalin,5)、去乙酰华蟾毒它灵(desace-tylcinobufotalin,6)、嚏根草苷元(hellebrigenin,7)、沙蟾毒精(arenobufagin,8)、日蟾毒它灵(gam-abufotalin,9)、11β-羟基脂蟾毒配基(11β-hydroxylresibufogenin,10)、华蟾毒它灵(cinobufotalin,11)。结论化合物10和11为首次从中华大蟾蜍皮中分离得到。     

心灵丸质量控制方法研究

目的:建立心灵丸的质量标准.方法:采用薄层色谱(TLC)法鉴别处方中冰片、人参、三七、人工麝香、人工牛黄;用高效液相色谱(HPLC)法测定心灵丸中蟾酥(华蟾酥毒基和脂蟾毒配基)的含量.色谱柱为Hypersil ODS2(5μm,4.6mm×200 mm),流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH至3.2)(45:55),检测波长为296 mm,柱温30℃.结果:华蟾酥毒基在0.9～22.5 rng·L-1的范围内,脂蟾毒配基在0.9～22.2 nag·L-1的范围内呈良好线性关系,心灵丸中华蟾酥毒基平均回收率为99.79%(RSD=1.6%,n=9),脂蟾毒配基平均回收率为100.32%(RSD=1.7%,n=9).结论:所建立的TLC和HPLC方法专属性强,重复性好,可用于心灵丸的质量控制.     

HPLC同时测定人参强心滴丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

目的:建立测定人参强心滴丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量的HPLC方法。方法:采用Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.5%磷酸二氢钾溶液-乙腈(45∶55,用磷酸调节pH为3.2),流速1.0 mL·min-1,检测波长为296 nm,柱温为室温。结果:华蟾酥毒基、脂蟾毒配基线性范围分别为2.54～50.8μg·mL-1(r=0.9999)和2.48～49.6μg·mL-1(r=0.9999),平均回收率(n=6)分别为99.9%(RSD=1.0%)和99.5%(RSD=0.59%)。结论:本法简便准确,专属性强,可作为人参强心滴丸中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量的控制方法。     

高效液相色谱法测定蟾酥药材中脂蟾毒配基和华蟾酥毒基的含量

目的建立蟾酥药材中脂蟾毒配基和华蟾酥毒基的含量测定方法 ,并对不同品质的药材中2种成分进行含量测定。方法采用高效液相色谱法,色谱柱：Phenomenex C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-0.3%乙酸溶液,梯度洗脱,流速：0.7 mL.min-1;检测波长：296 nm;柱温：30℃。结果脂蟾毒配基在0.032 52.080μg与峰面积线性关系良好（r=0.999 7）,回收率为99.6%,RSD=2.0%;华蟾酥毒基在0.031 92.040μg与峰面积线性关系良好（r=0.999 6）,回收率为102.5%,RSD=2.0%。结论该法可靠、准确、简便,可作为蟾酥药材的质量控制方法 。     

反相高效液相色谱法测定利咽灵气雾剂中脂蟾毒配基和华蟾酥毒基的含量

目的建立同时测定利咽灵气雾剂中脂蟾毒配基和华蟾酥毒基含量的方法。方法采用RP-HPLC法,色谱柱Agilent ZORBAX-C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.5%磷酸二氢钾溶液（55∶45）（磷酸调pH 3.2）,流速为0.8 mL.min-1,柱温：30℃,检测波长为296 nm。结果脂蟾毒配基和华蟾酥毒基分别在5.15-103.00μg.mL-1（r=0.999 4）和2.70-54.00μg.mL-1（r=0.999 8）均有良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.7%、99.0%;RSD分别为1.36%、1.92%。结论本方法简便、快速、准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定益肝康胶囊中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定益肝康胶囊中华蟾酥毒基与脂蟾毒配基含量的方法。方法:色谱柱为SpherigelODSC18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为0.5%磷酸二氢钾-乙腈(50∶50,用磷酸调pH3.2),流速为1.0mL·min-1,检测波长为296nm,柱温为40℃。结果:华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的进样量分别在0.22～1.09μg(r=0.9998)、0.26～1.30μg(r=0.9999)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;二者平均回收率分别为99.4%(RSD=1.9%,n=9)和98.7%(RSD=1.4%,n=9)。结论:本法灵敏度高、操作简便、结果准确、专属性强,可用于益肝康胶囊的质量控制。     

HPLC测定混合糖电解质注射液中果糖、葡萄糖和木糖醇的含量

目的建立混合糖电解质注射液中果糖、葡萄糖和木糖醇的含量测定方法。方法色谱柱：Waters SugarPakI（300mm×6．5mm）;流动相：水;流速：0．5mL.min^-1’;示差折光检测器。结果果糖、葡萄糖和木糖醇峰分离度良好;果糖的线性范围为20～100μg（r=0．9999）;平均回收率为99．53％,RSD=O．81％（n=9）;葡萄糖的线性范围为40-200μg（r=0．9997）;平均回收率为99．75％,RSD=0．47％（n=9）;木糖醇的线性范围为10-50ug（r=0．9997）;平均回收率为99．78％,RSD=1．02％（n=9）。结论本方法简便、准确,可用于混合糖电解质注射液中果糖、葡萄糖和木糖醇的含量测定。     

高效液相色谱法测定消炎解毒软膏中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量

目的建立消炎解毒软膏中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基含量测定方法。方法采用HPLC法测定消炎解毒软膏中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量,色谱条件为Alltima C18：色谱柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：水-乙腈（50∶50）,流速：1mL·min-1;检测波长：296nm;柱温：35℃。结果华蟾酥毒基的进样量在0.427～17.080μg峰面积积分值与进样量有良好的线性关系（r=0.9999）,平均回收率为98.3%,RSD为2.0%（n=6）;脂蟾毒配基的进样量在0.262～10.480μg峰面积积分值与进样量有良好的线性关系（r=0.9999）;平均回收率为98.9%,RSD为1.8%（n=6）。结论本方法简便、快速准确、灵敏度高、重现性好,可作为该制剂的含量测定方法。     

蟾饲五谷虫中华蟾酥毒基的含量测定

目的建立反相高效液相色谱法测定蟾饲五谷虫中华蟾酥毒基的含量。方法采用Ecosil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-5 g.L-1磷酸二氢钾溶液(体积比38∶62)(用磷酸调节pH值为3.2)为流动相,检测波长为296 nm,柱温为40℃,流速为1.0 mL.min-1。结果华蟾酥毒基的线性范围为6.0～30.0 mg.L-1(r=0.998 7,n=5),平均回收率为100.0%(RSD=1.54%,n=6)。结论该方法操作简便、结果准确,可用于蟾饲五谷虫的质量控制。     

气相色谱法测定依托泊苷注射液中乙二醇与二甘醇的量

目的采用气相色谱（GC）法测定依托泊苷注射液中乙二醇与二甘醇的量。方法色谱柱为DB-WAXetr毛细管柱（30m×0.32mm,1.0μm）,采用程序升温方式。结果乙二醇检测质量浓度在1.60～667.8μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,线性回归方程为Y=523.59X-2.8439（r=0.9998）,平均回收率为103.1%,RSD为1.9%（n=9）;二甘醇检测质量浓度在1.61～670.2μg/mL范围内与峰面积线性关系良好,线性回归方程为Y=567.48X-1.8425（r=0.9999）,平均回收率为99.8%,RSD为1.6%（n=9）。结论 GC法简单、灵敏,可用于依托泊苷注射液的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定三拗片中盐酸麻黄碱和苦杏仁苷的含量

目的建立高效液相色谱同时测定三拗片中盐酸麻黄碱和苦杏仁苷含量的方法。方法采用Hypersil BDSC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3%磷酸溶液(20∶80),检测波长为217 nm,流速为1.0 mL.min-1,柱温为30℃,外标法计算含量。结果盐酸麻黄碱在0.019 9~0.398μg与峰面积有良好的线性关系,r=0.999 8,平均回收率为97.6%,RSD为1.2%(n=9);苦杏仁苷在0.104 2~2.084μg与峰面积有良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为98.2%,RSD为1.0%(n=9)。结论该方法简便、准确、重复性好,可同时测定三拗片中盐酸麻黄碱和苦杏仁苷的含量。     

HPLC法同时测定小儿伪麻美芬滴剂中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬的含量

目的:建立以高效液相色谱(HPLC)法同时测定小儿伪麻美芬滴剂中盐酸伪麻黄碱和氢溴酸右美沙芬含量的方法。方法μL:。色结谱果柱:为盐A酸gi伪len麻tC黄18碱,流、氢动相溴为酸甲右醇美-沙水芬-检三乙测胺浓(度56的0线∶43性0∶范10围,p分H别3.0为),7检.34测～波73长.4为μg2·0m9Lnm-(1,流r=速0为.9909.69,mnL=·m5)in、-21.,5进5～样25量.5为μg1·0mL-(1r=0.9999,n=5),平均回收率分别为99.1%(RSD=0.76%,n=9)、98.0%(RSD=0.87%,n=9)。结论:本方法结果准确,重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法同时测定杠板归中阿魏酸与香草酸的含量

目的:建立同时测定杠板归中阿魏酸与香草酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1.0%甲酸-甲醇(40∶60),流速为1.0mL·min-1,检测波长为290nm。结果:阿魏酸进样量的线性范围为0.6～3.0μg(r=0.9995),平均回收率为99.32%,RSD=1.06%(n=9);香草酸进样量的线性范围为0.454～2.270μg(r=0.9999),平均回收率为99.92%,RSD=2.17%(n=9)。结论:本方法灵敏、准确、重复性好,可用于杠板归药材的质量控制。