鱼腥草注射液体内抗流感病毒药效学研究

本研究评价新、老两种鱼腥草注射液制剂在体内对H1N1流感病毒感染的防治作用。采用甲型H1N1流感病毒FM1和PR8株, 滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠造成肺炎模型, 分别进行治疗性和预防性给药, 观察小鼠肺指数。结果显示: 鱼腥草注射液新、老两种制剂对两种流感病毒感染引起的小鼠肺部炎症均有明显治疗作用, 且小剂量时新制剂对FM1株治疗作用优于老制剂; 新、老两种制剂对两种病毒感染免疫低下小鼠引起的肺部炎症有明显预防作用, 且小剂量时老制剂对PR8病毒株的预防作用优于新制剂。鱼腥草注射液可改善流感病毒引起的小鼠肺炎症状, 降低H1N1感染小鼠的肺指数, 在体内对H1N1流感病毒感染有较好的防治作用。     

疾病氧化应激损伤机制与药物干预研究专栏

<正>氧化还原反应（redox reactions）是机体和细胞的重要的生命化学反应过程。在正常情况下，细胞生命过程产生的氧化型小分子（如自由基等）可以直接或者特异性修饰生物大分子来调控一些重要的信号通路，发挥正常的生理功能；而氧化还原系统平衡受到破坏时，细胞内氧化产物大量堆积，则可能导致机体处于疾病“易感”状态，并加速衰老、神经退行、炎症、肿瘤、糖尿病等疾病的发生。尽管抗氧化剂被认为具有一定保护作用，但事实上单纯抗氧化不但不能恢复氧化还原稳态，在研究论文方面，暨南大学何蓉蓉教授探讨了清热消炎宁通过干预铁死亡从而抑制情志应激诱导的疱疹病毒HSV-1激活复发的机制。此外，何教授团队还发现心肌缺血损伤的“易感性”的增加与亚油酸摄入过量密切相关，其机制是亚油酸增加了心肌细胞膜磷脂的不饱和度，加剧了磷脂氧化酶介导的磷脂过氧化反应。暨南大学李怡芳教授课题组的研究表明，清肝泻肺方通过抑制磷脂过氧化降低情志应激诱导的流感病毒易感性，缓解病毒性肺炎症状。合肥工业大学张爽教授研究发现，依帕列净治疗心衰的功能依赖于FGF21，其作用机制可能与FGF21改善纤维化、炎症和氧化应激的作用有关。广东...     

喉咽清提取物对流感病毒感染肺炎小鼠模型的保护作用

目的研究中药复方喉咽清对甲型H1N1流感病毒感染小鼠肺炎模型的治疗作用。方法采用ICR小鼠随机分为正常组,模型组,喉咽清高、中、低剂量组(15.60,7.80,3.90 g·kg~(-1)),阳性对照药磷酸奥司他韦胶囊组(0.04 g·kg~(-1)),采用滴鼻感染甲型H1N1流感病毒FM1株建立小鼠流感病毒肺炎模型,给药5 d,感染第6日测定小鼠体重、肺指数值以及14 d内小鼠存活时间、死亡率,感染第3、6、9日采用Real time PCR方法检测小鼠肺组织中病毒载量表达。结果与模型组比较,喉咽清高剂量组小鼠肺指数值、死亡率明显降低,喉咽清高、中、低剂量组体重明显增加,喉咽清高、中剂量组存活时间明显延长,感染第6、9日喉咽清高剂量组肺组织病毒载量明显降低。结论喉咽清对甲型流感病毒性肺炎具有治疗作用,其可能是通过降低小鼠肺组织中流感病毒载量发挥作用,该作用值得进一步研究。     

基于网络药理学探讨葶苈大枣泻肺汤对儿童肺炎的作用机制研究

目的通过网络药理学方法探讨葶苈大枣泻肺汤治疗儿童肺炎的潜在分子生物学机制。方法从中药系统药理学分析平台(TCMSP)及文献资料中寻找与葶苈大枣泻肺汤中中药相关的所有成分和作用靶点,并构建药物分子-靶点网络;利用疾病靶点数据库(GeneCards和OMIM)选取检索出来的所有与疾病相关的靶点,利用蛋白-蛋白相互作用网络平台STRING V11.0构建药物-疾病蛋白互作网络,利用Biocondoctor生物软件信息包进行GO和KEGG富集分析,预测其作用机制。结果最终筛选得到18个活性化合物,71个有效靶点。GO功能富集分析得到1378个条目(P<0.05),KEGG通路富集分析得到127条信号通路(P<0.05)。结论葶苈大枣泻肺汤治疗儿童肺炎是多成分、多靶点共同作用的结果,为葶苈大枣泻肺汤的临床应用以及儿童肺炎的研究提供了一定理论依据。     

黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺组织细胞凋亡FAS/FAS-L系统的影响

目的研究黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺组织细胞凋亡FAS/FAS-L系统的影响,探索黄芩苷抗流感病毒感染机制。方法制备小鼠甲型流感病毒性肺炎模型,通过死亡保护实验确定黄芩苷的最小有效浓度,TUNEL法观察小鼠肺组织细胞凋亡情况,RT-PCR技术检测肺组织FAS(CD95)、FAS-L(CD178)、Caspase-3 mRNA表达,Western blot方法测定肺组织FAS、FAS-L、Caspase-3蛋白表达。结果与模型组相比,黄芩苷187.5、375 mg.kg-1剂量均能明显降低肺组织细胞凋亡率,明显降低肺组织FAS、FAS-L及Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论黄芩苷能够明显抑制FM1肺炎小鼠肺组织细胞的凋亡,其可能通过影响细胞凋亡受体途径FAS/FAS-L系统而发挥抗流感病毒感染作用。     

双黄连片对小鼠流感病毒和腺病毒感染的保护作用

目的观察双黄连片在实验动物体内抗流感病毒和腺病毒的作用,为临床用药提供试验依据。方法建立流感病毒鼠肺适应株FM1感染小鼠模型和腺病毒ADV3株感染小鼠模型,分别灌胃给予高、中、低剂量双黄连片,设立病毒唑对照和正常对照组,观察各组小鼠的死亡数、测定小鼠存活时间、肺指数和肺组织流感病毒滴度。结果双黄连片可明显降低流感病毒和腺病毒感染小鼠的死亡率,延长肺炎小鼠的存活时间,降低肺炎小鼠的肺指数;同时,双黄连片还能降低肺组织中流感病毒的滴度。结论双黄连片在小鼠体内有明显抑制流感病毒和腺病毒的作用。     

石荠芋提取物对流感病毒感染小鼠氧自由基损伤的保护作用

目的观察石荠芋提取物对流感病毒感染小鼠氧自由基损伤的预防作用。方法建立小鼠流感病毒性肺炎的生物模型,用不同剂量石荠芋提取物灌胃给药,检测小鼠肺指数、肺组织病毒载量并观察其病理形态变化,测定肺组织匀浆丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSn—Px）、总一氧化氮舍酶（NOS）和诱导型一氧化氮合酶（iN0s）活性。结果石荠芋提取物能明显降低感染小鼠肺指数和病毒载量,减轻肺组织病变程度及过氧化水平。结论石荠芋提取物可通过抑制流感病毒性肺炎小鼠脂质过氧化水平及氧自由基损伤而发挥保护作用。     

一清胶囊抗甲型H1N1流感病毒作用

目的 研究一清胶囊抗甲型H1N1流感病毒作用。方法 采用小鼠气管内注入甲型流感病毒鼠肺适应株A/PR/8/34(H1N1)病毒液建立病毒感染小鼠模型,以肺指数、肺指数抑制率、小鼠累积死亡率为指标,评价一清胶囊体内抗甲型H1N1流感病毒作用。结果 7.3 g·kg^-1一清胶囊(原生药)可降低病毒感染小鼠的肺脏指数(P<0.05)和小鼠感染病毒后7~9 d内的死亡率(P<0.01)。结论 一清胶囊具有明显的抗甲型H1N1流感病毒作用。     

清热消炎宁抑制潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒激活的作用研究

本研究采用情志应激诱导的潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)复发的“肝郁化火”动物模型,研究清热消炎宁对HSV-1激活复发的作用及机制。实验方案经暨南大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。实验分为正常组、潜伏组、激活组、清热消炎宁低剂量组(0.658 g·kg^-1·day^-1)、高剂量组(1.316 g·kg^-1·day^-1)和阳性药阿昔洛韦组(0.206 g·kg^-1·day^-1)。除正常组和潜伏组外,其他组小鼠在给药的第4天开始每天拘束12 h,连续拘束4天,在给药7天结束以后,记录小鼠的体质量变化和眼部炎症复发情况。乙醚麻醉小鼠后,取脑组织进行以下指标的检测:免疫组化实验方法检测HSV-1抗原分布情况;空斑法检测病毒滴度; RT-PCR法检测HSV-1相关病毒基因感染细胞多肽27 (ICP27)和糖蛋白B (gB)的表达水平; Western blot法检测HSV-1相关病毒蛋白ICP27和gB的表达、脂质过氧化产...     

宣肺止咳胶囊的体内抗流感病毒作用

目的　观察宣肺止咳胶囊体内抗流感病毒作用。方法　用宣肺止咳胶囊灌胃给药 ,计算流感病毒性肺炎小鼠的肺指数和肺指数抑制率。结果　预防给药对流感病毒引起的小鼠肺炎病理改变有明显抑制作用 ,在1 1 .3 g· kg-1和 5 .6 5 g· kg-1组 ,病毒性肺炎小鼠的肺指数显著低于对照组 (P <0 .0 1 ) ,其抑制率分别为5 0 .5 %和 45 .9%。结论　宣肺止咳胶囊有抗病毒作用     

银翘解毒软胶囊对流感病毒感染小鼠肺炎模型肺组织病毒载量及M1蛋白表达的影响

为探讨银翘解毒软胶囊对甲型H1N1流感病毒PR8株感染小鼠肺炎模型的治疗作用机制,在滴鼻感染正常小鼠建立流感病毒肺炎模型的基础上,观察小鼠肺指数、病死率,并进一步进行分子机制研究。分别采用实时荧光定量PCR(real time RT-PCR)及Western blotting技术,在流感病毒感染后1、3、5、7天,检测小鼠肺组织中病毒载量的变化以及肺组织中M1蛋白相对含量的变化。结果显示,银翘解毒软胶囊(1和0.5 g.kg-1)在感染后第3、5、7天可明显降低正常小鼠感染后肺指数,并且两剂量组动物的死亡数显著降低,存活天数显著增加;银翘解毒软胶囊可以降低肺组织病毒载量,其中1 g.kg-1剂量组在各时间点均可降低其表达量(P<0.05,P<0.01),0.5 g.kg-1剂量组在第3、5、7天均可降低病毒载量(P<0.05,P<0.01);银翘解毒软胶囊可以降低肺组织M1蛋白相对表达量,其中1和0.5 g.kg-1剂量组在感染后第3、7天,与模型对照组相比明显低表达(P<0.05,P<0.01)。结果表明,银翘解毒软胶囊对甲型流感病毒有良好的治疗作用,并可能通过下调小鼠肺组织内病毒载量及M1蛋白相对表达量,...     

葡萄糖酸锌喷鼻剂对小鼠流感病毒感染的保护作用

目的：考察葡萄糖酸锌喷鼻剂对小鼠病毒性肺炎的保护作用。方法：采用流感病毒A1型(H1N1)鼠肺适应株FM1感染小鼠致肺炎模型,肺炎小鼠随机分为基质对照组,葡萄糖酸锌喷鼻剂大、中、小剂量组(6.4,1.6,0.4 mg·kg~(-1)),Zicam组(1.6 mg·kg~(-1)),利巴韦林组(25 mg·kg~(-1)),共给药5 d,每日3次,观察小鼠的死亡数和死亡时间。另外通过对肺炎小鼠的肺指数,肺病变程度以及小鼠肺部病毒滴度的测定来观察葡萄糖酸锌喷鼻剂的体内抗病毒作用。结果：葡萄糖酸锌喷鼻剂6.4 mg·kg~(-1)可降低流感病毒感染小鼠的死亡率,死亡保护率为54%(P＜0.01),1.6,6.4 mg·k~(-1)可延长小鼠存活时间,生命延长率分别为94%,114%(P＜0.05,P＜0.01)；葡萄糖酸锌喷鼻剂3个剂量(0.4,1.6,6.4 mg·kg~(-1))均有显著降低小鼠肺指数和抑制肺部病毒滴度的作用(P＜0.01),肺指数抑制率分别为25%,32%,33%。结论：葡萄糖酸锌喷鼻剂有明显抑制小鼠流感病毒性肺炎的作用。     

金柴抗病毒胶囊对IFITM3蛋白表达的影响

探讨金柴抗病毒胶囊对甲型H1N1流感病毒FM/1/47株感染小鼠肺炎模型的治疗作用机制。滴鼻感染正常小鼠,建立流感病毒肺炎模型并进行治疗性给药。采用实时荧光定量PCR法、Western blot在流感病毒感染后第1、3、5、7天检测小鼠肺组织中病毒载量、干扰素诱导跨膜蛋白的动态变化。实验结果显示,金柴抗病毒胶囊可降低肺组织病毒载量,其中大、中、小3个剂量组在病毒感染正常小鼠后各检测时间点均能明显降低肺组织中病毒载量的表达(P<0.05,P<0.01)。金柴抗病毒胶囊可上调干扰素诱导跨膜蛋白相对表达量。与模型对照组比较,其中大剂量在各个时间点均明显高表达(P<0.05,P<0.01),中剂量在第3、5天具有明显高表达(P<0.05);小剂量组在第3天表现显著高表达(P<0.05)。实验结果表明:金柴抗病毒胶囊可能通过上调流感病毒感染小鼠肺组织内干扰素诱导跨膜蛋白表达量来发挥抗流感病毒的作用。     

黄金方对流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量及免疫功能的影响

目的:观察黄金方对甲型H1N1流感病毒FM1株感染小鼠肺组织病毒载量I,FN-γ及血清CD 4+/CD 8+比值的影响。方法:采用滴鼻感染流感病毒FM1株建立小鼠肺炎模型,治疗4 d后采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测肺组织中相对病毒载量,采用双抗体夹心ELISA法测定血清中CD4+和CD 8+含量及肺组织IFN-γ含量。结果:黄金方大、中、小剂量组(6,3,1.5 g.kg-1)均可明显降低感染流感病毒FM1株小鼠肺组织病毒载量,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01,P<0.05),大、中剂量组可明显提高肺组织中IFN-γ水平(与模型对照组比较,P<0.01),中、小剂量组可提高血清CD4+/CD8+比值,与模型对照组比较差异显著(P<0.05)。结论:黄金方在体内对H1N1流感病毒FM1株感染有较好的治疗作用,其治疗作用可能是通过调节免疫功能来实现的。     

肺炎链球菌肺炎模型小鼠肺组织趋化因子表达变化

目的检测肺炎链球菌肺炎模型小鼠肺组织趋化因子CXCL1,CXCL2,CCL5和CCL7表达变化,探讨这些趋化因子在肺炎链球菌发生时的病理意义。方法取无特定病原体(SPF)级的小鼠30只,随机分为肺炎链球菌性肺炎实验组与热灭活细菌对照组,利用实时聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验法检测实验组和对照组小鼠肺组织CXCL1,CXCL2,CCL5和CCL7的表达差异。结果肺炎链球菌肺炎小鼠肺组织CXCL1和CCL5表达高于热灭活细菌对照组且差异有统计学意义(P<0.05),而CXCL2和CCL7表达在2组之间的比较差异无统计学意义。结论肺炎链球菌肺炎发病时,受感染的肺组织通过过表达趋化因子CXCL1和CCL5,与免疫细胞的相应配体相互作用,募集免疫细胞至感染部位,促进炎症发生。     

云南民族药理肺散防治急性肺损伤的作用及网络药理学分析

摘要：目的:考察云南民族药理肺散防治急性肺损伤（ALI）的作用及机制。方法:复制小鼠气管滴注脂多糖（LPS）致ALI模型,以及尾静脉注射花生四烯酸（AA）诱导小鼠急性肺栓塞模型,考察理肺散的作用。采用网络药理学方法,利用SwissADME与SwissTargetPrediction分析平台,筛选理肺散的化学成分及对应靶点,采用GeneCards、OMIM和TTD数据库检索ALI疾病相关靶点,构建“药物-成分-疾病-靶点”网络,进行信号通路富集分析。结果:理肺散对AA诱导的急性肺栓塞有明显的保护作用,可显著提高肺栓塞小鼠的存活率（P＜0.01）。小鼠气管滴注LPS后,肺组织湿/干质量比值（W/D）、肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和髓过氧化物酶（MPO）等炎症因子含量显著升高,超氧化物歧化酶（SOD）水平显著下降（P＜0.01）;给予高剂量理肺散预处理后,可明显降低肺组织W/D值,减轻肺水肿,降低肺泡灌洗液中TNF-α、MPO的含量,并提高SOD的水平（P＜0.05或P＜0.01）。“药物-成分-疾病-靶点”网络及基因功能注释结果显示,理肺散对ALI的防治作用与调控炎症、氧化应激、血小板激活等通路相关。结论:理肺散可能通过调控炎症等信号通路发挥防治急性肺损伤的作用。     

黄芩苷对FM1肺炎小鼠肺损伤的作用机制研究

目的研究黄芩苷对甲型流感病毒性肺炎小鼠肺组织炎性损伤的作用机制。方法将96只ICR鼠随机分为正常对照组、模型组、利巴韦林组(100 mg.kg-1),黄芩苷组(1 500、750、375 mg.kg-1)[5],每组16只。用流感病毒亚甲型鼠肺适应株A/FM/1/47(H1N1)感染小鼠,制备小鼠流感病毒性肺炎模型,用不同剂量黄芩苷溶液灌胃治疗后,观察肺组织H-E染色切片病理变化,采用RT-PCR测定肺组织c-jun、c-fos mRNA表达,采用Western blot测定肺组织c-jun、磷酸化c-jun蛋白表达,应用ELISA检测肺匀浆炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的含量。结果黄芩苷750、375 mg.kg-1剂量均能明显减轻肺组织炎性损伤;明显降低c-jun、c-fosmRNA的表达(P<0.05,P<0.01),明显降低c-jun、磷酸化c-jun蛋白表达(P<0.01);明显抑制TNF-α、IL-1β的分泌(P<0.01)。结论黄芩苷能够缓解甲型流感病毒诱导的炎性病理损伤,其可能通过抑制流感病毒感染引起的转录因子AP-1高表达而降低炎性细胞因子的分泌水平,从而发挥抗流感病毒感染的作用。     

柴芩解热颗粒抗菌抗病毒作用的实验研究

目的观察柴芩解热颗粒的抗菌抗病毒作用。方法通过体内外抗菌实验观察柴芩解热颗粒对相关细菌的抗菌作用及对细菌感染的小鼠保护作用;以甲型HlNl流感病毒致MDCK病变,采用MTT比色法检测柴芩解热颗粒体外抗病毒作用,通过体内抗病毒观察其对流感病毒感染小鼠的保护作用和对小鼠肺炎的影响。结果柴芩解热颗粒对金黄色葡萄球菌和肺炎链球菌有较强的体外抗菌作用,对细菌引起小鼠死亡有一定的保护作用;抑制流感病毒致MDCK细胞病变的半数有效浓度（IC50）为1．57g·L-1,治疗指数（TI）为73．5,能降低感染甲型H1N1流感病毒的小鼠死亡率,有效抑制流感病毒所致的小鼠肺损伤。结论柴芩解热颗粒具有明显的抗菌抗病毒作用。     

黄金方防治甲型H_1N_1流感病毒感染小鼠肺炎的实验研究

目的:观察黄金方对甲型H1N1流感病毒FM1株和PR8株感染小鼠肺炎的防治作用。方法:采用滴鼻感染正常小鼠和免疫低下小鼠建立流感病毒感染肺炎模型,分别采用治疗和预防性给药,观察对小鼠肺指数、死亡率、生存时间的影响。结果:治疗给药试验中黄金方大剂量组(6 g.kg-1)、中剂量组(3g.kg-1)可明显降低正常小鼠感染流感病毒FM1株或PR8株后肺指数(与模型组比较,P<0.05),3个剂量组均可明显减少正常小鼠感染流感病毒FM1株或PR8株后死亡率并延长生存时间(与模型组比较,P<0.01);预防给药试验中黄金方大剂量组(6 g.kg-1)、中剂量组(3 g.kg-1)可明显降低免疫低下小鼠感染流感病毒FM1株或PR8株后肺指数(与模型组比较,P<0.05),3个剂量组均可减少正常小鼠感染流感病毒FM1株后死亡率并明显延长生存时间(与模型组比较,P<0.01)。结论:黄金方在体内对H1N1流感病毒感染有较好的治疗和预防作用。     

结合网络药理学从JAK2/STAT3信号通路探讨麻杏甘石汤抗流感病毒的效应机制

目的结合网络药理学探索JAK2/STAT3信号通路在A型流感病毒感染所致肺组织损伤中的影响,并探讨麻杏甘石汤对该通路的干预作用。方法通过网络药理学方法筛选麻杏甘石汤作用于流感病毒的潜在靶点所富集的信号通路;以BLAB/c小鼠为研究对象,用A型流感病毒进行滴鼻感染,设置正常对照组、模型对照组、奥司他韦组、抗病毒颗粒组和麻杏甘石汤组,给予相应药物3、7 d后,处理动物。常规法检测小鼠体质量并计算肺指数,观察肺组织病理变化,RT-PCR法检测肺组织中JAK2、STAT3、IL^-1β、IL-4 mRNA表达水平,Western blot法或ELISA法检测肺组织中JAK2、STAT3、IL^-1β和IL-4的蛋白的表达水平;利用AutoDock Vina软件对STAT3与靶点化合物进行分子对接。结果麻杏甘石汤主要活性成分与流感病毒有110个交集靶点,富集于170条信号通路;麻杏甘石汤治疗组小鼠体质量增加,肺组织病理损伤减轻,肺指数下调,肺组织中JAK2、STAT3、IL-1βmRNA和蛋白的表达水平下调,IL-4 mRNA和蛋白的表达水平上调;STAT3与麻杏甘石汤中活性化合物甘草查尔酮A有较好的结合活性。结论麻杏甘石汤能有效地减轻肺部病理变化、调节免疫平衡,其可能的作用机制是通过抑制JAK2/STAT3信号通路的激活而缓解A型流感病毒感染所致的肺损伤。