头孢他啶/阿维巴坦治疗碳青霉烯耐药革兰阴性菌的临床应用及研究进展

近年来，多重耐药细菌特别是碳青霉烯类耐药革兰阴性菌(如碳青霉烯耐药肠杆菌)的高感染率和高死亡率已成为全球性的公共卫生危机。头孢他啶/阿维巴坦是第三代头孢菌素类药物和新型非β-内酰胺类β-内酰胺酶抑制剂的混合制剂，能抑制大部分碳青霉烯酶，治疗碳青霉烯耐药革兰阴性菌感染的疗效显著且耐受性好。本综述主要总结头孢他啶/阿维巴坦的药学特性、治疗碳青霉烯耐药革兰阴性菌的疗效、安全性和耐药情况，以期为临床科学使用头孢他啶/阿维巴坦提供理论基础，促进合理用药。     

金华市中心医院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌药物敏感性及流行病学研究

目的了解金华市中心医院碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌(Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)对常用抗菌药的敏感性及流行病学。方法收集2019年7-11月临床分离的CRKP菌株,采用微量肉汤稀释法测定其对17种临床常用抗菌药物的敏感性;采用酶抑制剂复合纸片法检测菌株产碳青霉烯酶表型;采用聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)方法检测碳青霉烯酶基因、ESBLs基因和AmpC酶基因;采用多位点序列分型(Multiple-locus sequence typing,MLST)方法检测菌株的序列型(Sequence type,ST)。结果共25株CRKP主要分离自痰液(64%,16/25);标本主要来源于神经外科病区(48%,12/25)和康复病区(16%,4/25)。药敏试验结果显示,CRKP对大多数抗菌药高度耐药,对多黏菌素、替加环素和头孢他啶/阿维巴坦均敏感。全部菌株均产KPC-2型碳青霉烯酶,未检测到其他碳青霉烯酶基因和AmpC酶基因;bla_(TEM)、bla_(SHV)和bla_(CTX-M)基因检出率分别为60%(15/25)、100%(25/25)和88%(22/25),分别以bla_(TEM-1)(100%,15/15)、bla_(SHV-12)(52%,13/25)和bla_(CTX-M-14)(59.1%,13/22)为主。25株CRKP菌株主要以ST11型(60%,15/25)和ST290型(24%,6/25)菌株为主。结论金华市中心医院分离的CRKP菌株对除外多黏菌素、替加环素和头孢他啶/阿维巴坦以外的多数临床常用抗菌药物均高度耐药,其主要耐药机制是产KPC-2型碳青霉烯酶。该耐药菌株流行菌株以ST11型为主。     

北京与银川两家医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的流行特征研究#br#

目的 调查研究北京与银川两家医院耐碳青霉烯类肠杆菌(carbapenem-resistance Enterobacteriaceae, CRE)的流行病学特征，为CRE的临床诊治及其传播控制提供依据。方法 收集2008年1月至2017年12月间北京地区解放军302医院及银川地区宁夏医科大学总医院的临床标本中分离的CRE，分析其流行趋势、标本来源、病原特点及基因型组成，探讨CRE的流行病学特征。结果 两地区10年间分离鉴定出266株CRE，呈上升趋势，北京地区CRE检出率由2008年为0.45%上升到2017年的5.84%；银川地区CRE检出率由2008年的0.26%上升到2017年的3.1%。CRE感染患者以男性为主(159例，59.77%)，主要来自重症监护病房(intensive care unit，ICU)70例(26.31%)。北京与银川两家医院分离出CRE的主要标本为痰液(29.4%与26.3%)，血液(18.4%与6.5%)和尿液(10.5%与19.7%)，血液和尿液标本占比差异显著(P=0.015和0.045)。北京与银川两家医院CRE菌株以克雷伯菌属(66.32%和44.74%)、埃希菌属(20.00%和9.21%)及肠杆菌属(7.89%和36.84%)为主，差异均具有统计学意义(比较P值分别为0.0012、0.0340和0)。266株CRE总体对碳青霉烯类和头孢类抗生素的耐药率较高，对其他类抗生素包括磷霉素和左氧氟沙星的耐药率达到80%以上，对阿米卡星的耐药率近60%；对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为42.86%，耐药率较低的包括替加环素(4.51%)和多黏菌素B(4.14%)；北京地区CRE对阿米卡星和左氧氟沙星的耐药率显著高于银川地区。北京地区的blaKPC在克雷伯菌、埃希菌属和肠杆菌属中均占绝对优势(93.75%、61.9%和80%)，而blaNDM仅在埃希菌属中检测到；银川地区均以blaNDM基因为主，三个菌属中占比分别为36%、74%和85.71%，两地碳青霉烯酶耐药基因分布差异明显(P=0)。结论 北京与银川两地区的CRE菌株流行呈增长趋势，在标本来源、病原特点、碳青霉烯酶耐药基因分布等方面特征鲜明，临床应根据本地区的CRE流行特点采取针对性治疗。     

头孢他啶/阿维巴坦耐药肺炎克雷伯菌的体外抗菌药物治疗方案研究

目的 探索对头孢他啶/阿维巴坦耐药的肺炎克雷伯菌体外抗菌药物治疗方案，为临床治疗方案选择提供理论依据。方法 采用PCR对2株肺炎克雷伯菌株可能耐药基因进行鉴定，并对扩增产物进行测序。采用体外时间杀菌试验评估不同抗菌药物单药或联合用药对耐药菌株生长的影响。结果 膜孔蛋白严重缺失和产金属酶分别介导了两菌株对头孢他啶/阿维巴坦耐药；多黏菌素B、亚胺培南、美罗培南和磷霉素单药或两药合并不能显示足够抗菌效果，而多黏菌素B-美罗培南-磷霉素或多黏菌素B-头孢他啶-阿维巴坦三药联合方案可分别对这2株耐药株产生强大持续的杀菌作用。结论 多黏菌素B为基础三药联合可能是对抗具有不同机制介导的头孢他啶/阿维巴坦耐药肺炎克雷伯菌的有效方案。     

北京与银川两家医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的流行特征研究#br#

目的 调查研究北京与银川两家医院耐碳青霉烯类肠杆菌(carbapenem-resistance Enterobacteriaceae, CRE)的流行病学特征，为CRE的临床诊治及其传播控制提供依据。方法 收集2008年1月至2017年12月间北京地区解放军302医院及银川地区宁夏医科大学总医院的临床标本中分离的CRE，分析其流行趋势、标本来源、病原特点及基因型组成，探讨CRE的流行病学特征。结果 两地区10年间分离鉴定出266株CRE，呈上升趋势，北京地区CRE检出率由2008年为0.45%上升到2017年的5.84%；银川地区CRE检出率由2008年的0.26%上升到2017年的3.1%。CRE感染患者以男性为主(159例，59.77%)，主要来自重症监护病房(intensive care unit，ICU)70例(26.31%)。北京与银川两家医院分离出CRE的主要标本为痰液(29.4%与26.3%)，血液(18.4%与6.5%)和尿液(10.5%与19.7%)，血液和尿液标本占比差异显著(P=0.015和0.045)。北京与银川两家医院CRE菌株以克雷伯菌属(66.32%和44.74%)、埃希菌属(20.00%和9.21%)及肠杆菌属(7.89%和36.84%)为主，差异均具有统计学意义(比较P值分别为0.0012、0.0340和0)。266株CRE总体对碳青霉烯类和头孢类抗生素的耐药率较高，对其他类抗生素包括磷霉素和左氧氟沙星的耐药率达到80%以上，对阿米卡星的耐药率近60%；对头孢他啶/阿维巴坦的耐药率为42.86%，耐药率较低的包括替加环素(4.51%)和多黏菌素B(4.14%)；北京地区CRE对阿米卡星和左氧氟沙星的耐药率显著高于银川地区。北京地区的blaKPC在克雷伯菌、埃希菌属和肠杆菌属中均占绝对优势(93.75%、61.9%和80%)，而blaNDM仅在埃希菌属中检测到；银川地区均以blaNDM基因为主，三个菌属中占比分别为36%、74%和85.71%，两地碳青霉烯酶耐药基因分布差异明显(P=0)。结论 北京与银川两地区的CRE菌株流行呈增长趋势，在标本来源、病原特点、碳青霉烯酶耐药基因分布等方面特征鲜明，临床应根据本地区的CRE流行特点采取针对性治疗。     

碳青霉烯类耐药大肠埃希菌耐药基因型检测及同源性分析

目的检测临床分离碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的耐药基因型,并对其同源性进行分析,研究其流行情况。方法收集铜陵市人民医院 2012年 9月至 2016年 10月临床分离碳青霉烯类耐药大肠埃希菌,采用 VITEK?2 Compact全自动微生物鉴定仪进行鉴定,改良 Hodge试验检测碳青霉烯酶表型, EDTA双纸片协同试验进行金属酶初筛,聚合酶链反应( PCR)检测碳青霉烯酶基因( blaKPC、blaIMP、blaVIM、blaNDM和 blaOXA?48)并对阳性扩增产物进行基因测序;同源性分析采用肠杆菌科基因间重复一致序列聚合酶链反应技术( ERIC?PCR)。结果共收,集碳青霉烯类耐药大肠埃希菌 25株, 8株改良 Hodge试验阳性, 13株金属酶初筛试验阳性,其中 4株携带 blaNDM?1基因, 1株携带 blaIMP?4基因, 1株携带 blaKPC?2基因; ERIC?PCR检测分为 10种型别。结论碳青霉烯类耐药大肠埃希菌的耐药机制主要是产金属酶,携带 NDM?1型碳青霉烯酶大肠埃希菌需重点监测;碳青霉烯类耐药大肠埃希菌未在医院引起克隆流行。     

产KPC酶肺炎克雷伯菌对头孢他啶/阿维巴坦耐药机制研究进展

头孢他啶/阿维巴坦(Ceftazidime/Avibactam,CZA)是头孢他啶和一种新型β-内酰胺酶抑制剂(阿维巴坦)的组合，已被美国食品药品监督管理局和国家市场监督管理总局批准，主要用于治疗复杂的腹部和尿道感染、医院获得性细菌性肺炎和呼吸机相关的细菌性肺炎，特别是由肺炎克雷伯菌引起的感染和炎症。然而，CZA临床应用导致了多重耐药肺炎克雷伯菌的出现。其耐药机制主要有三种：blaKPC基因的突变、细菌细胞膜孔蛋白突变和KPC酶的表达量增加。本文就耐CZA的肺炎克雷伯菌流行情况和耐药机制进行综述，旨在为临床防治CZA的耐药菌株提供科学依据，并为新药开发提供指导。     

碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌IMP型金属β-内酰胺酶研究

目的:探讨肺炎克雷伯菌产金属酶的临床分离情况并对产金属酶菌株进行耐药性分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法:收集2009年1月—2009年10月天津医科大学总医院142株临床分离肺炎克雷伯菌,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测其碳青霉烯酶,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,用纸片法和VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行药物敏感性试验。结果:142株肺炎克雷伯菌中,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测出2株产碳青霉烯酶菌株,这2株菌通过EDTA协同试验检测为阳性,提示这2株菌产金属酶经PCR证实为产IMP型金属酶,MIC方法显示2株产金属酶的菌株对氨曲南敏感,而对青霉素类、头孢菌素类耐药,κ-B法检测显示碳青霉烯类抗菌药物耐药。结论:天津地区已出现产金属酶肺炎克雷伯菌,该酶是引起肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的主要原因。     

碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌IMP型金属β-内酞胺酶研究

目的:探讨肺炎克雷伯菌产金属酶的临床分离情况并对产金属酶菌株进行耐药性分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据.方法:收集2009年1月-2009年10月天津医科大学总医院142株临床分离肺炎克雷伯菌,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测其碳青霉烯酶,乙二胺四乙酸(EDTA)协同试验检测金属酶,PCR法扩增金属酶基因,用纸片法和VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行药物敏感性试验.结果:142株肺炎克雷伯菌中,通过改良Hodge试验、改良三维试验检测出2株产碳青霉烯酶菌株,这2株菌通过EDTA协同试验检测为阳性,提示这2株菌产金属酶经PCR证实为产IMP型金属酶,MIC方法显示2株产金属酶的菌株对氨曲南敏感,而对青霉素类、头孢菌素类耐药,k-B法检测显示碳青霉烯类抗菌药物耐药.结论:天津地区已出现产金属酶肺炎克雷伯菌,该酶是引起肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯类抗生素的主要原因.     

头孢他啶/阿维巴坦对耐碳青霉烯肠杆菌科细菌的体外抗菌活性研究

目的 头孢他啶/阿维巴坦(CAZ/AVI)是第三代头孢菌素和新型的非β-内酰胺酶类的β-内酰胺酶抑制剂阿维巴坦相 结合的抗生素,对多重耐药菌具有抗菌活性,本研究评价CAZ/AVI对临床分离耐碳青霉烯肠杆菌科细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的体外抗菌活性,同时评价CAZ/AVI对不同菌属的CRE菌和携带不同耐药基因型的CRE菌的体外抗菌 活性。方法 对收集来自解放军302医院和宁夏医科大学总医院2008年1月至2017年12月临床分离的266株CRE菌株进行了最低抑 菌浓度(minimum bacteriostatic concentration, MIC)的测定;采用特异引物扩增法进行耐药基因型的测定,进一步分析CAZ/AVI对 携带不同耐药基因型的CRE菌的体外抗菌活性。结果 CAZ/AVI体对临床分离CRE菌的体外抑菌活性为49.62%,明显优于头孢 他啶和其他对照药物(P=0),但弱于多黏菌素B和替加环素(P=0.003);对克雷伯菌属CRE菌的体外抑菌效果明显,可达到63.75% 的体外活性抑菌率,其次为肠杆菌属CRE菌(23.81%),对埃希菌属CRE菌的体外抑菌率最低(13.33%);对于携带blaKPC-2 基因型 的CRE菌株体外抑菌率可达到69.23%,而对于携带blaNDM 和blaIMP 的基因型的CRE菌株作用相当(P=0.889),体外抑菌率分别为 2.22%和8.33%。结论 CAZ/AVI坦对CRE菌表现出了一定的体外抗菌活性优势,尤其是增强了头孢他啶的体外抗菌活性。对克 雷伯菌属CRE菌的体外抑菌活性明显,并且能够很好的抑制携带blaKPC-2 基因型的CRE菌。     

Real-time TaqMan PCR for rapid detection of genes encoding five types of non-metallo- (class A and D) carbapenemases in Enterobacteriaceae

A real-time TaqMan multiplex polymerase chain reaction (PCR) assay was developed to detect genes encoding five types of serine carbapenemases (GES, IMI/NMC, KPC, OXA-48 and SME). The assay was validated using control strains known to produce each of these types of enzyme and was then further assessed by ‘blindly’ testing 59 previously characterised clinical isolates, including 19 with serine (KPC or OXA-48) carbapenemases, 22 with metallo- (IMP, VIM or NDM) carbapenemases, and 18 with carbapenem resistance contingent upon extended-spectrum β-lactamase (ESBL) or AmpC production combined with porin loss. The assay detected and correctly assigned the serine carbapenemases in all five positive control strains and in 19 clinical isolates. No false-positive results were seen for isolates with metallo-enzymes or for those that lacked a carbapenemase. The five serine carbapenemase genotypes could also be distinguished by melt-curve analysis or the molecular size of the amplicons.     

2016—2018年成都某院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药变迁#br# 及耐药机制分析

目的 分析2016—2018年四川省中医医院临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae, CRKP)的耐药性变迁及耐药机制。方法 收集本院临床分离的CRKP菌株,PCR扩增碳青霉烯酶基因A类(blaKPC、blaGES、blaSME、blaIMI和blaNMC),B类(blaNDM、blaVIM、blaIMP、blaSPM、blaGIM、blaSIM)和D类(blaOXA)。结果 近3年分离的CRKP对临床常用抗生素呈高水平耐药。经PCR扩增及测序确认,74株CRKP中,82.43%携带blaKPC-2型,10.81%携带blaNDM-1型,5.41%携带blaKPC-19型。结论 3年间本院分离的CRKP对临床常用抗生素呈高度耐药,菌株产blaKPC-2和blaNDM-1是本院CRKP最主要的耐药机制。     

重症监护病房耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌6种耐药基因检测

目的 研究医院重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者感染鲍曼不动杆菌的耐药性及耐药基因,以指导临床合理用药,控制ICU病房感染暴发流行。方法 采用VITEK2-Compact全自动细菌鉴定药敏系统对细菌进行鉴定及药敏试验,用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)方法检测6种常见碳青霉烯酶耐药基因(blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-23、blaOXA-24和blaOXA-58)。结果 38株耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对15种临床常用青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类及β-内酰胺酶抑制剂类抗菌药物全部耐药,对头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素的耐药率分别为92.1%和81.6%,仅对替加环素保持较高敏感性,敏感率为94.7%。38株CRAB中携带blaOXA-23基因共36株(94.7%),未检出blaIMP、blaVIM、blaNDM、blaOXA-24和blaOXA-58基因。结论 我院ICU分离耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药物耐药广泛,携带blaOXA-23基因是可能该院ICU耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药的主要原因。临床医生应合理使用抗菌药物,加强细菌耐药性监测,防止耐药菌株的产生和进一步传播。     

Treatment options for infections caused by carbapenem-resistant Enterobacteriaceae: can we apply “precision medicine” to antimicrobial chemotherapy?

Introduction: For the past three decades, carbapenems played a central role in our antibiotic armamentarium, trusted to effectively treat infections caused by drug-resistant bacteria. The utility of this class of antibiotics has been compromised by the emergence of resistance especially among Enterobacteriaceae.

Areas covered: We review the current mainstays of pharmacotherapy against infections caused by carbapenem-resistant Enterobacteriaceae (CRE) including tigecycline, aminoglycosides, and rediscovered ‘old’ antibiotics such as fosfomycin and polymyxins, and discuss their efficacy and potential toxicity. We also summarize the contemporary clinical experience treating CRE infections with antibiotic combination therapy. Finally, we discuss ceftazidime/avibactam and imipenem/relebactam, containig a new generation of beta-lactamase inhibitors, which may offer alternatives to treat CRE infections. We critically evaluate the published literature, identify relevant clinical trials and review documents submitted to the United States Food and Drug Administration.

Expert opinion: Defining the molecular mechanisms of resistance and applying insights about pharmacodynamic and pharmacokinetic properties of antibiotics, in order to maximize the impact of old and new therapeutic approaches should be the new paradigm in treating infections caused by CRE. A concerted effort is needed to carry out high-quality clinical trials that: i) establish the superiority of combination therapy vs. monotherapy; ii) confirm the role of novel beta-lactam/beta-lactamase inhibitor combinations as therapy against KPC- and OXA-48 producing Enterobacteriaceae; and, iii) evaluate new antibiotics active against CRE as they are introduced into the clinic.     

The impact of carbapenemases on antimicrobial development and therapy

Carbapenems have been the most successful beta-lactam antibiotics in evading bacterial resistance. Nevertheless, acquired carbapenemases are increasingly reported, mostly in Pseudomonas and Acinetobacter isolates but occasionally also in Enterobacteriaceae. They include beta-lactamases of classes B (IMP and VIM), D (OXA-23 to -27) and A (IMI, KPC, NMC and SME). Major outbreaks of producers have occurred in a few centers and, in the US, there has been progressive erosion of carbapenem activity against Acinetobacter species, maybe due to carbapenemases. Acquired carbapenemases are still sufficiently rare not to have placed widespread constraints on chemotherapy, but there is reasonable concern that they will become a greater problem in the future. This is a good argument for continued caution with carbapenem use, and for extending this prudence to the oral and long half-life carbapenems shortly to become available. Most carbapenemase producers are broadly resistant to beta-lactams, and many are also resistant to fluoroquinolones and aminoglycosides. Clinicians facing infections caused by carbapenemase producers consequently are forced to use 'unusual' antibiotics such as polymyxins, isepamicin, minocycline and sulbactam (Pfizer Inc), which has inherent activity against A baumannii. Carbapenemase inhibitors might be developed in the future, despite difficulties in choosing the range of enzymes to target and obtaining broad-spectrum inhibition. For now, the best pharmaceutical strategy seems to lie in the development of novel antimicrobial classes with anti-Gram-negative activity, rather than in overcoming carbapenemases directly.     

2013-2017年临床耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌感染检测结果分析

目的 了解我院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(carbapenem resistant Enterobacteriaceae，CRE)分布特征以及耐药特点。方法 采用Phoenix-100全自动细菌鉴定/药敏系统、联合纸片扩散法(K-B法)、改良Hodge试验及EDTA协同试验对我院2013-2017年CRE检出情况、感染特征、药敏试验及耐药性进行检测。结果 共检出CRE菌株1020株，总检出率约为5.5%，改良Hodge试验阳性率为96.6%(985/1020)。2013-2017年CRE各年检出率依次为0.8%(24/2858)、8.6%(271/3156)、5.9%(249/4205)、6.2%(245/3935)、5.4%(231/4293)；1020株CRE菌株以肺炎克雷伯菌988株(96.8%)为主，主要分离自呼吸道标本779株(76.2%)、血液标本87株(8.4%)、导管尖端45株(4.5%)，主要来自重症医学科478株(46.9%)、神经内科重症病房315株(30.8%)。药敏试验结果显示：CRE菌株对庆大霉素、阿米卡星、复方磺胺甲噁唑、多黏菌素和替加环素的耐药率分别为53.2%、39.4%、45.9%、0和0，对其他临床常用抗菌药物的耐药率均高于97.5%；对庆大霉素耐药率由80%下降至48.3%；对复方磺胺甲噁唑耐药率由33.3%上升至60.0%；对多黏菌素和替加环素一直较敏感，未发现对多黏菌素和替加环素耐药的CRE菌株。结论 CRE菌株的分离率呈现出较高水平，其中以对碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌为主。我院流行的CRE菌株主要分离自重症医学科和神经内科重症病房，应对其感染的风险因素进行调查，并有针对性的采取感染预防措施进行防控。     

What remains against carbapenem-resistant Enterobacteriaceae? Evaluation of chloramphenicol,ciprofloxacin, colistin,fosfomycin, minocycline,nitrofurantoin, temocillin and tigecycline

Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae present an increasing and diverse problem, including strains of multiple species with metallo-β-lactamases (IMP, NDM or VIM) and non-metallo (KPC and OXA-48) enzymes as well as those combining an extended-spectrum β-lactamase (ESBL) or AmpC enzyme with porin loss. Most strains, except those with OXA-48 alone, are broadly resistant to β-lactams and have multiple aminoglycoside-modifying enzymes; those with NDM-1 carbapenemase typically also have 16S rRNA methylases, conferring complete aminoglycoside resistance. In this study, the activity of chloramphenicol, ciprofloxacin, colistin, fosfomycin, minocycline, nitrofurantoin, temocillin and tigecycline was evaluated against 81 carbapenem-resistant Enterobacteriaceae isolates from the UK. Testing was performed by the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) agar dilution method. Chloramphenicol, ciprofloxacin and nitrofurantoin inhibited <25% of the isolates at the breakpoint, whereas colistin was active against 75/81 isolates (92.6%), the exceptions being four Klebsiella pneumoniae and Enterobacter cloacae isolates along with members of inherently resistant genera. Fosfomycin was active against 49/81 isolates (60.5%), including 7/7 Escherichia coli, 16/20 Enterobacter and Citrobacter spp., but only 25/52 Klebsiella spp. Tigecycline was active against 38/81 isolates (46.9%) and was intermediate against another 27 (33.3%), with resistance scattered amongst K. pneumoniae and Enterobacter spp. The activity of colistin, fosfomycin and tigecycline was unrelated to the isolates' carbapenem resistance mechanisms. Temocillin was fully active [minimum inhibitory concentration (MIC) ≤8 mg/L] against only 4/81 isolates (4.9%), but inhibited a further 22 isolates (27.2%) at the British Society for Antimicrobial Chemotherapy (BSAC) urinary breakpoint (32 mg/L), predominantly comprising those isolates with combinations of impermeability and an ESBL or AmpC enzyme, along with 6/11 isolates producing KPC carbapenemases. Studies with transconjugants and transformants confirmed the small effect of KPC enzymes against temocillin, whereas OXA-48 and NDM-1 conferred clear resistance.