大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中AmpC酶的检测

目的了解我院大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中AmpC酶产生情况.方法按NCCLS推荐的超广谱β内酰胺酶（ESBLs）确证试验,对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测,并用三维试验法、三维试验抑制试验进行AmpC酶检测.结果236株大肠埃希菌和135株肺炎克雷伯菌中,检到产ESBLs大肠埃希菌104株和产ESBLs肺炎克雷伯菌29株,其中106株耐头孢西丁菌株检到3株产AmpC酶.结论我院这两种细菌主要耐药机制仍是产生ESBLs,耐头孢西丁可能是膜孔蛋白缺失所致.     

老年人下呼吸道革兰阴性杆菌感染耐药机制研究

目的研究本院老年人下呼吸道感染革兰阴性杆菌产灭活酶耐药机制。包括超广谱β内酰胺酶(ESBLs)、高产头孢菌素酶(AmpC)和金属酶。通过对临床常见致病菌大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单孢菌、不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌等的检测结果分析,掌握本院老年患者下呼吸道感染主要病原菌的耐药规律及主要基因型,为临床经验治疗提供参考依据。方法单纸片扩散初试产ESBL菌株,用双纸片增效确认试验或自动细菌鉴定和药敏系统(VITEK)确定ESBL 菌株;用改良三维法检测去阻遏头孢菌素酶;Etest金属酶试条测定铜绿假单孢菌产金属酶的情况。用等电聚胶和测序方法对ESBL阳性株作分子基因分型。结果 80株肺炎克雷伯菌及143株大肠埃希菌产ESBL(超广谱β内酰胺酶)频率分别为27.5％和28.7％,CTX-M基因型分别占48％和56％。124株阴沟肠杆菌中有21.8％单独高产AmpC酶,8.1％单独产ESBL,3.2％即产ESBL又高产AmpC酶。71株耐亚胺培南的绿脓假单胞菌中有18.3％产金属β内酰胺酶。结论产ESBL、高产AmpC酶和金属β内酰胺酶是住院老年患者下呼吸道感染难以治愈的重要因素。CTX-M基因型是我院ESBLs流行的主要基因型。     

我院2012年10月-2013年3月革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶检测及耐药性分析

目的:了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)革兰阴性杆菌的耐药性,为临床合理用药提供参考。方法:收集我院2012年10月-2013年3月临床分离出的革兰阴性杆菌。用头孢硝噻吩纸片检测革兰阴性杆菌产β-内酰胺酶情况,双纸片法检测产ESBLs情况,头孢西丁三维试验检测产AmpC酶情况,以确定产酶表型。用K-B法进行药敏检测。结果:103株革兰阴性杆菌中,单产AmpC酶菌42株(40.8%),单产ESBLs菌21株(20.4%),同时产ESBLs和AmpC酶菌12株(11.7%)。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对含酶抑制剂复方制剂如哌拉西林/他唑巴坦,以及碳青霉烯类抗生素亚胺培南和氨基糖苷类抗生素阿米卡星的耐药率均较低。非发酵菌铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对各抗生素耐药率均较高。结论:各革兰阴性杆菌产酶菌株对多种抗生素的耐药率较高,产ESBLs和AmpC酶可能是导致革兰阴性杆菌耐药的主要机制之一。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药机制检测

目的筛查大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌膜孔蛋白基因情况,分析其与耐药的关系。方法随机抽取2008—2010年耐3代头孢菌素(头孢他啶)的大肠埃希菌72株和肺炎克雷伯菌57株,56株头孢他啶敏感的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为对照组;三维试验确定细菌头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的产生情况;超广谱β-内酰胺酶(ESBL)确证试验检测细菌产ESBL的情况;多重聚合酶链反应(PCR)扩增AmpC基因和膜孔蛋白ompF、ompk35、ompk36基因;纸片扩散法检测抗菌药物的敏感性。结果 72株大肠埃希菌中,14株产AmpC酶,23株产ESBL,3株膜孔蛋白基因缺失;57株肺炎克雷伯菌中,13株产AmpC酶,19株产ESBL,5株膜孔蛋白缺失,膜孔蛋白缺失株4代头孢均出现耐药。结论我院大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢类抗生素的耐药机制主要是产AmpC酶和ESBLs,同时膜孔蛋白基因的缺失会造成耐药程度增高。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药的敏感性

目的：了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的发生率和耐药情况。方法：用确证试验对119株大肠埃希菌和73株肺炎克雷伯菌做ESBLs检测，K—B法做药敏试验。结果：119株大肠埃希菌检出产ESBLs54株，阳性率45．4％。73株肺炎克雷伯菌检出产ESBLs36株，阳性率49．3％。产ESBLs菌株对抗菌药的耐药率显著高于非产ESBLs菌株（P〈0．05）。结论：我院大肠埃希茵和肺炎克雷伯菌产ESBLs比例增高及对多种抗菌药呈交叉耐药和多重耐药。     

革兰阴性杆菌产酶耐药表型的检测

目的 探讨革兰阴性杆菌的产酶表型及耐药分析。方法 分别用纸片扩散法及双纸片协同法检测5282株革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶（extanded spectrum β—lactamases，ESBLs）、头孢西丁初筛试验筛选头孢菌素酶（AmpC酶）。再应用头孢西丁提取物三维试验确认AmpC酶。抗菌药物敏感试验用K—B琼脂扩散法。结果 282株革兰阴性杆菌中检出ESBLs 146株，占51．8％，其中以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌多见，分别为41株（28％）、28株（19．2％）、15株（10．3％）。检出AmpC酶41株，占14．5％，以阴沟肠杆菌、不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为多，分别为12株（29．3％）、6株（14．6％）、5株（12．2％）、3株（7．3％）。同时检出ESBLs和AmpC酶者21株，占7．4％，其中大肠埃希菌7株、肺炎克雷伯菌6株、阴沟肠杆菌5株、不动杆菌3株。大部分产酶菌对临床常用抗菌药耐药。结论 当前耐药产酶菌株已成为患者感染的主要病原菌。     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性观察

目的 探讨大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率及其耐药现状，为临床合理用药提供依据。方法 对54株大肠埃希氏菌和74株肺炎克雷伯氏菌采用纸片扩散初筛法和复合纸片表型确证试验进行检测。结果 超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)发生率大肠埃希氏菌为40．7％，肺炎克雷伯氏菌为56．8％，超广谱β-内酰胺酶阳性菌株对多种抗生素耐药性高。结论 大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯氏茵超广谱β-内酰胺酶发生率高，临床应慎用三代头孢菌素和氨曲南。     

570例儿童社区获得性肺炎致病菌及耐药情况的分析

目的了解儿童社区获得性肺炎常见病原菌分布及耐药情况,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法对570例儿童社区获得性肺炎的痰标本进行培养并做药敏试验。结果 570例标本共检出致病菌224株,总阳性率为39.3%,其中革兰阳性菌、革兰阴性菌分别占28.2%、71.8%。主要致病菌依次为肺炎克雷伯菌47株、大肠埃希菌25株、产酸克雷伯菌18株、表皮葡萄球菌18株、中间葡萄球菌14株、金黄色葡萄球菌12株。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌、产酸克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性率分别为:59.6%(28/47)、64%(16/25)、55.6%(10/18)。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA为0%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌株(MRCON)52.9%(27/51)。前3位革兰阴性菌对哌拉西林他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星敏感度高,对氨苄西林耐药率达100%;对头孢类(除头孢西丁外)及氨曲南耐药率几乎均超过50%。金黄色葡萄球菌对青霉素均耐药。表皮葡萄球菌的耐药性明显高于金黄色葡萄球菌。结论儿童社区获得性肺炎致病菌以革兰阴性菌为主,主要病原菌有较强耐药性。加强细菌监测分析,有利于指导临床合理用药及对多重耐药菌的管理。     

基层医院产ESBLs 病原菌耐药性分析

目的 分析致病菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 对688株致病菌检验结果进行统计学分析,了解产ESBLs病原菌的耐药情况.结果 致病菌688株中革兰氏阴性菌392株占57.0%,其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共179株占45.7%,产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共84株,产酶率为46.9%(84/179),其对青霉素类和1、2、3代头孢菌素高度耐药,对亚胺培南、美罗培南高度敏感.结论 大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌是产ESBLs的主要阴性杆菌,碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南等是治疗产ESBLs菌感染的较佳药物.     

儿童下呼吸道感染的病原菌及其耐药性分析

目的 分析本院儿科病房下呼吸道感染患儿的致病菌及其耐药情况,为临床合理用药提供依据.方法 标本经分离培养,做菌株鉴定和药敏试验.结果 在1 015份痰标本中,共分离病原菌355株,阳性率34.98%.其中革兰阴性菌247株,主要为肺炎克雷伯菌(106株)和大肠埃希菌(72株),28.30%的肺炎克雷伯菌和47.22%的大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶;革兰阳性菌92株,主要为金黄色葡萄球菌(62株),金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离率为25.80%.致病菌对大部分抗生素有耐药性.结论 本院儿科下呼吸道感染病原菌主要为革兰阴性菌,且呈多重耐药性,临床应根据药敏结果合理选用抗生素,以减少耐药菌株的出现.     

尿路感染大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解尿路感染患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药性分析。方法:采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。结果:130株大肠埃希菌中检出单产ESBLs45株,AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs共5株,检出率分别为34.6%、6.2%和3.8%;产酶菌株对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株。结论:大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

台州地区肺炎支原体肺炎患儿诱导痰细菌培养及药敏分析

目的了解肺炎支原体肺炎患儿合并细菌感染的致病菌及耐药情况。方法对408例确诊为肺炎支原体肺炎的患儿痰标本进行培养及药敏试验。结果 408例标本检出致病菌203株,其中革兰阴性菌154株（75.9%）、革兰阳性菌28株（13.8%）、真菌19株（9.4%）。主要致病菌依次为肺炎克雷伯菌75株（36.9%）、大肠埃希菌53株（26.1%）、金黄色葡萄球菌18株（8.9%）、产气肠杆菌10株（4.9%）、铜绿假单胞菌8株（4.0%）。结论肺炎支原体肺炎患儿合并细菌感染的病原菌以革兰阴性菌为主,不同的细菌对常用的抗生素存在不同程度的耐药,临床上应针对非典型病原体使用抗生素的同时合理使用其它抗生素。     

生物被膜肺炎克雷伯杆菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶的检测

目的：探讨生物被膜（BF）菌的耐药机制,为临床合理应用抗生素提供理论依据。方法：应用改进的平板培养法建立肺炎克雷伯杆菌BF模型,用银染法和扫描电镜观察鉴定。采用改良三维试验法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）及AmpC酶。结果：浮游肺炎克雷伯杆菌单产AmpC酶,单产ESBLs酶及同时产ESBLs和AmpC酶的菌株分别为2.5%（1/40）、20.0%（8/40）、2.5%（1/40）;BF肺炎克雷伯杆菌单产AmpC酶,单产ESBLs及同时产ESBLs和AmpC酶的菌株分别为20.0%（8/40）、45.0%（18/40）、22.5%（9/40）。对浮游组和BF组的检出率两两分别进行χ2检验,BF组各酶的检出率均明显高于普通浮游组各酶的检出率（P〈0.05）。产酶BF肺炎克雷伯杆菌对8种抗生素（除亚胺培南全部敏感外）的耐药率均较高。结论：BF的形成和产生ESBL及AmpC酶的协同作用是肺炎克雷伯杆菌耐药的主要原因之一。     

住院肺肿瘤患者痰液病原菌分布及药物敏感性分析

目的：分析住院肺肿瘤患者痰液病原菌的分布及耐药性,为临床合理用药提供参考。方法：收集2009-2013年浦南医院肺肿瘤住院患者痰标本618份,分离病原菌,并对其分布及耐药情况进行回顾性分析。结果：618份标本中检出病原菌689株,其中革兰阴性菌429株,占62.3%,主要为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌;革兰阳性菌140株,占20.3%,以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主;真菌120株,占17.4%,主要为白色假丝酵母。不同菌属对抗生素的耐药率有差别,铜绿假单胞菌对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率相对较低。肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌对碳青霉烯类抗菌药物有较高的敏感性,但对青霉素类和头孢呋辛有较高的耐药性。革兰阳性球菌对万古霉素和替考拉宁的敏感性较高。结论：住院肺肿瘤患者痰液病原菌以革兰阴性菌为主,且主要的致病菌对常用抗菌药物耐药严重,需要对病原菌的分布变化及耐药性给予高度重视,以指导临床进行合理规范的抗感染治疗。     

尿路感染病原菌中产超广谱β-内酰胺酶菌的药敏分析

目的研究尿路感染病原菌中产超广谱β-内酰胺酶菌的耐药状况,为临床合理用药提供参考。方法收集本院2008年1月～2008年12月尿液标本分离出的病原菌326株,用Kirby-Bauer纸片扩散法进行抗菌药物的敏感性实验,ESBLs纸片法筛选和确证试验。操作按NCCLS-2006年标准进行。结果326株病原菌中分离出革兰阴性杆菌223株,其中产ESBLs的有99株,占44．40％,分别为大肠埃希菌73株,肺炎克雷伯菌26株。产ESBLs大肠埃希菌对20种抗菌药的敏感性排在前3位的是美罗培南（100％）、亚胺培南-西司他丁（100％）、阿米卡星（84．9％）。产ESBLs肺炎克雷伯菌对20种抗菌药物的敏感性排在前3位的是芙罗培南（100％）、亚胺培南-西司他丁（100％）、哌拉西林-他唑巴坦（73．1％）。结论本院尿路感染病原菌中分离出的产超广谱β-内酰胺酶菌多重耐药率高,临床应参考药敏结果,合理选用抗菌药物。     

临床分离病原菌耐药性分析及对策

目的：了解本院2009年临床分离病原菌对常用抗菌药物的耐药情况。方法：采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验,以WHONET5.4软件进行数据分析。结果：1101株临床分离病原菌中,革兰阳性球菌占24.16%（266/1101）,革兰阴性杆菌占59.67%（657/1101）。真菌占16.17%（178/1101）。结论：加强细菌耐药性监测,完善抗菌药物临床应用预警机制,促进临床合理使用抗菌药物。     

2010—2012年我院临床细菌分布及耐药性分析

目的：了解2010—2012年我院常见病原菌分布特点及对各种临床常用抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法：统计和整理2010—2012年我院送检细菌培养标本中分离出的病原菌,并对其耐药性进行分析。结果：2010—2012年我院共分离出病原菌5 992株,其中革兰阳性菌13 94株,占23.26%;革兰阴性菌4 691株,占78.29%。革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）菌株平均占68.37%,表皮葡萄球菌中耐甲氧西林表皮葡萄球菌（MRSE）菌株平均占69.51%。革兰阴性菌中,肠杆菌科细菌以大肠埃希菌最多见,非发酵菌科以铜绿假单胞菌多见。肠杆菌科细菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBL）大肠埃希菌的检出率为64.5%;产ESBL肺炎克雷伯菌的检出率为47.3%。结论：院内感染以革兰阴性杆菌为主,细菌耐药性呈增长趋势,需加强耐药性监测,尤其是对产酶菌和多重耐药菌的监测,应采取有效的控制措施,为临床正确使用抗菌药物提供参考。     

小儿阑尾炎病原学分析

目的 了解儿童阑尾炎病原菌及抗生素耐药情况,为临床正确使用抗生素提供参考.方法 对2009年11月至2011年11月住院的阑尾炎患儿进脓液涂片及培养,按照<全国临床检验技术操作规程>进行细菌分离及鉴定,用K-B纸片扩散法进行药物敏感试验.结果 140株病原菌中,以革兰阴性杆菌118株,占84.29%,而其中大肠埃希菌90株,其次为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌;革兰阳性球菌19株,占13.57%,金黄色葡萄球菌居首位,其次为粪肠球菌及屎肠球菌;真菌3株,占2.14%.混合感染10例.结论 儿童阑尾炎病原菌革兰阴性菌以大肠埃希菌为主,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌为主.临床医师应对阑尾炎患儿及早进行病原学检测及药物敏感实验,并特别关注超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和MRSA的病例.参考细菌药敏结果合理使用抗生素.     

ICU内呼吸机相关性肺炎的病原茵分布及耐药性分析

目的探讨ICU内呼吸机相关性肺炎（VAP）的病原菌分布及其耐药性,为临床防治提供依据。方法对我院ICU科60例呼吸机相关性肺炎患者的病原菌构成及耐药率进行分析。结果共检出病原菌73株,其中革兰阴性（G-）杆菌占72.6%;革兰阳性（G＋）球菌占23.3%;真菌占4.1%。铜绿假单胞菌分离率最高为30.1%,其次为不动杆菌和金黄色葡萄球菌（分别为27.4%和11.0%）。G-杆菌对氨苄西林耐药率最高（90%以上）,对碳青霉烯类耐药率最低（15%以下）;G＋球菌对青霉素类及红霉素耐药率高（60%以上）,未发现耐万古霉素的葡萄球菌。结论 ICU呼吸机相关性肺炎病原菌以G-杆菌为主,并且G-杆菌的耐药呈多重耐药性,临床应重视病原菌的检查,有针对性使用抗生素。