单胺氧化酶抑制剂氯吉灵抑制结肠癌的作用及机制研究

目的：研究单胺氧化酶A （monoamine oxidase A,MAO-A）抑制剂氯吉灵（Clorgyline）对结肠癌细胞增殖、转移的作用,以及其对MAO-A的酶活、MAO-A、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。方法：MTS法检测不同浓度Clorgyline对结肠癌细胞SW480增殖的作用;划痕实验研究Clorgyline对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验研究Clorgyline对SW480细胞侵袭的影响;裸鼠移植瘤模型研究Clorgyline对SW480细胞体内增殖的抑制作用;酶活试剂盒检测Clorgyline对裸鼠移植瘤组织中MAO-A的作用;Western blot检测Clorgyline对裸鼠移植瘤组织中的MAO-A、MMP-2和MMP-9蛋白表达的影响。结果：Clorgyline对SW480细胞增殖有抑制作用,且呈现剂量依赖性;Clorgyline 10 μmol·L^-1和20 μmol·L^-1浓度均能够抑制SW480细胞迁移和侵袭能力,与对照组相比具有显著性差异（P<0.01）;Clorgyline 20和40 mg·kg^-1均能够抑制SW480细胞裸鼠移植瘤的生长（P<0.01）,抑制裸鼠移植瘤组织中MAO-A的酶活（P<0.05）,抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平,而对MAO-A蛋白的表达水平没有影响。结论：Clorgyline抑制SW480结肠癌细胞的增殖和转移,其机制可能与抑制MAO-A酶活和转移相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达有关。     

姜黄素体内外逆转结肠癌的5-氟尿嘧啶耐药研究及机制探讨

摘要：目的 探究姜黄素在体内外对结肠癌5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药的逆转作用及其相关机制。 方法 以SW480结肠癌细胞为亲代细胞,构建5-FU耐药细胞株SW480R,采用MTT法检测SW480R细胞的耐药指数以及不同浓度的姜黄素对SW480R细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测姜黄素对SW480R细胞周期和凋亡的影响;Western blot检测姜黄素对SW480R细胞上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关蛋白以及Wnt信号通路相关蛋白的影响;采用裸鼠移植瘤模型检测肿瘤体积变化情况,计算姜黄素的体内抑瘤率,Western blot检测肿瘤组织中相关蛋白变化。结果 SW480R的耐药指数为12.16,姜黄素能够剂量依赖性地抑制SW480R细胞的增殖,阻滞SW480R细胞周期于G0/G1期,以及诱导SW480R细胞凋亡;Western blot结果表明姜黄素能够在体内外抑制EMT和Wnt信号通路的活性;体内实验表明姜黄素能够有效抑制裸鼠移植瘤的生长。结论 姜黄素能够在体内外逆转结肠癌的5-FU耐药,其机制可能是通过调控Wnt信号通路从而抑制EMT的发生。     

山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制

目的 探讨山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法 选择人结直肠癌SW480细胞株,分为空白对照组,不同浓度山慈菇组（200 mg·L^-1、400 mg·L^-1）,5-Fu组（10 μmol·L^-1）,分别进行划痕实验、细胞增殖抑制实验、细胞迁移与侵袭实验。同时,通过细胞转染技术沉默SW480细胞中的AEG-1基因,采用Western blotting检测AEG-1基因沉默对SW480细胞AEG-1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响,并观察不同浓度山慈菇组各蛋白表达的变化。结果 不同浓度山慈菇组和5-Fu组SW480细胞的划痕愈合率、细胞迁移率及侵袭率均较空白对照组明显下降,而细胞生长增殖抑制率较空白对照组明显升高（P<0.05）;山慈菇提取物具有与5-Fu相似的抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭的效果,且与SW480细胞的迁移与侵袭率呈浓度依赖性,与细胞增殖抑制率呈浓度、时间依赖性;不同浓度山慈菇组和5-Fu组SW480细胞中AEG-1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。结论 山慈菇提取物可能通过抑制AEG-1蛋白表达来上调E-cadherin蛋白表达,下调MMP-2、MMP-9蛋白表达,从而抑制人结直肠癌SW480细胞的迁移与侵袭。     

二烯丙基二硫下调LIMK1抑制人结肠癌SW480细胞迁移与侵袭

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人结肠癌SW480细胞LIMK1表达及迁移、侵袭能力的影响,阐明其抑制肿瘤细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学检测DADS对SW480细胞LIMK1表达的作用;划痕愈合和侵袭实验检测DADS对SW480细胞迁移、侵袭能力的影响。结果 RT-PCR结果显示,与对照组相比,DADS处理SW480细胞后其LIMK1 mR-NA表达明显下调。免疫细胞化学检测发现LIMK1蛋白在人结肠癌SW480细胞中高表达,DADS作用后LIMK1蛋白表达明显下调。Western blot检测显示,DADS呈时间浓度依赖性下调SW480细胞LIMK1蛋白表达。划痕愈合实验结果显示,随着DADS浓度增高,细胞划痕距离增宽,表明DADS呈浓度依赖性抑制SW480细胞迁移能力。Transwell侵袭实验结果表明,随着DADS浓度增高,细胞穿膜数逐渐减少,表明DADS呈浓度依赖性抑制SW480细胞侵袭能力。结论 DADS下调LIMK1表达可抑制人结肠癌SW480细胞迁移、侵袭,DADS抑制人结肠癌SW480细胞迁移、侵袭的分子机制可能与降低LIMK1蛋白表达水平有关。     

靶向DcR3的siRNA抑制人结肠癌裸鼠皮下移植瘤的实验研究

目的以脂质体为载体,探讨靶向诱骗受体3(decoy receptor 3,DcR3)的siRNA对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法裸鼠背部皮下种植结肠癌SW480细胞,建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型。针对靶标DcR3基因,利用Dharmacon公司软件设计并合成siRNA序列,通过瘤体局部多点注射脂质体与DcR3 siRNA混合物,将DcR3 siRNA转染到裸鼠背部皮下移植瘤内。同时设立阴性对照组和空白对照组。观察肿瘤治疗前后体积变化,评价DcR3 siRNA对肿瘤的抑制作用;比较肿瘤治疗前后的细胞形态学改变;免疫组织化学及RT-PCR检测DcR3基因表达;原位细胞凋亡检测肿瘤的凋亡情况。结果治疗组肿瘤体积明显小于对照组,肿瘤组织内坏死面积增大,细胞凋亡率显著增高,DcR3蛋白表达水平降低。治疗过程中裸鼠生长良好,无明显毒性反应。结论脂质体介导的DcR3 siRNA对裸鼠皮下结肠癌SW480细胞移植瘤有明显抑制、杀伤作用,细胞凋亡是DcR3 siRNA所致肿瘤细胞死亡的重要形式。     

沙利度胺调控PD-L1抑制HT-29结肠癌细胞的作用及机制研究

目的：探讨沙利度胺对HT-29结肠癌细胞的抑制作用及其机制。方法：CCK-8检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞增殖的作用;流式细胞术检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞凋亡的作用和对HT-29结肠癌细胞PD-L1表达的作用;Western Blot检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白表达的影响。结果：沙利度胺各浓度（40、80、160、320 μmol·L-1）明显抑制HT-29结肠癌细胞的增殖;沙利度胺各浓度（20、40、80 μmol·L-1）明显促进HT-29结肠癌细胞的凋亡,明显减少HT-29结肠癌细胞表面PD-L1的表达,明显减少HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白的表达。结论：沙利度胺对HT-29结肠癌细胞具有抑制作用,其机制可能与减少PD-L1表达及抑制癌细胞上游c-Myc、STAT3、HIF-1信号分子表达有关。     

沙利度胺调控PD-L1抑制HT-29结肠癌细胞的作用及机制研究

目的：探讨沙利度胺对HT-29结肠癌细胞的抑制作用及其机制。方法：CCK-8检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞增殖的作用;流式细胞术检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞凋亡的作用和对HT-29结肠癌细胞PD-L1表达的作用;Western Blot检测沙利度胺对HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白表达的影响。结果：沙利度胺各浓度（40、80、160、320 μmol·L-1）明显抑制HT-29结肠癌细胞的增殖;沙利度胺各浓度（20、40、80 μmol·L-1）明显促进HT-29结肠癌细胞的凋亡,明显减少HT-29结肠癌细胞表面PD-L1的表达,明显减少HT-29结肠癌细胞c-Myc、STAT3、HIF-1蛋白的表达。结论：沙利度胺对HT-29结肠癌细胞具有抑制作用,其机制可能与减少PD-L1表达及抑制癌细胞上游c-Myc、STAT3、HIF-1信号分子表达有关。     

建立结肠癌SW480细胞原位移植瘤模型的实验研究

目的建立接近于临床表现的结肠癌动物模型,以便了解结肠癌生长及形态学变化。方法选SPF级Balb／c品系裸鼠,皮下接种SW480细胞,4周后取出瘤体,种植于裸鼠结肠系膜根部,建立结肠癌外科原位手术移植动物模型,4周后取出结肠原位肿瘤,应用病理学方法对结肠癌原位移植动物模型进行评价和鉴定。结果5只裸鼠皮下接种SW480细胞后4周,皮下成瘤3只;10只裸鼠结肠原位移植肿瘤,8只结肠成瘤,显微镜下可见肿瘤浸润肠壁。结论实验成功建立了结肠癌SW480细胞动物结肠原位移植瘤模型,为结肠癌相关实验提供临床研究动物模型。     

HFI对卵巢癌裸鼠移植瘤的疗效

目的研究HFI对卵巢癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法建立人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,当瘤体积增长到100～200mm3时,随机分成4组(n=10),然后分别给予不同浓度(0.5mg·kg-1,0.25mg·kg-1)的HFI,裸鼠移植瘤体积及裸鼠体重每隔一天监测一次。结果各组的裸鼠体重没有显著性差异(P>0.05)。HFI(0.5mg·kg-1)剂量组和(mg.kg-1)剂量组的肿瘤体积增长速度显著低于阴性对照组(P<0.05)。移植瘤体积及瘤体重量在HFI(0.5mg·kg-1)剂量组和(0.25mg·kg-1)剂量组分别为[(911±286.631)mm3,(0.495±0.115)g]和[(1291.545±827.216)mm3,(0.542±0.237)g]显著低于阴性对照组[(1410.965±341.340)mm3,(0.714±0.124)g(P<0.05)]。HFI(0.5mg·kg-1)剂量组和(0.25mg·kg-1)剂量组的移植瘤瘤体抑瘤率分别为40.04%,16.07%,显著高于阴性对照组(0%)。HFI(0.5mg·kg-1)剂量组的裸鼠移植瘤体积与裸鼠体重之比的增长速度明显低于阴性对照组(P<0.05)。结论HFI能够显著抑制裸鼠移植瘤的生长。     

银杏叶提取物对结肠癌SW480细胞增殖的影响

目的研究银杏叶提取物（EGB）对SW480结肠癌细胞生长增殖的影响。方法体外培养人结肠癌SW480细胞后,给予不同浓度（100,200,300,400,500 mg·L^-1）银杏叶提取物干预后,采用CCK-8检测人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率,选择最佳作用浓度;随后,在此作用浓度下观察EGB作用不同时间对人结肠癌SW480细胞增殖抑制率的影响,并通过Western blot检测人结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达情况。结果银杏叶提取物可抑制结肠癌SW480细胞的增殖,且随着作用浓度增加和作用时间的延长其抑制作用逐渐增强;300 mg·L^-1银杏叶提取物对结肠癌SW480细胞增殖的抑制效果最明显。银杏叶提取物干预的结肠癌SW480细胞内Ki67和PCNA的表达均明显下调。结论银杏叶提取物可呈浓度和时间依赖性地抑制结肠癌SW480细胞的增殖。     

成骨细胞的功能与损伤和骨质疏松的防治

骨质疏松是一种全身性骨骼疾病,导致骨折风险增加。成人的骨量通过破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成作用来维持动态平衡,治疗骨质疏松症的理想策略是抑制破骨细胞的骨吸收和/或增强成骨细胞的骨形成功能。目前针对保护成骨细胞及增强其功能的骨质疏松疗法相对较少。因此,本文针对成骨细胞相关功能蛋白、各种细胞损伤机制（内质网应激、氧化应激、机械过载、微小RNA和长链非编码RNA的影响等）及骨质疏松的治疗与预防作一综述,以期为针对增强成骨细胞功能的骨质疏松治疗策略提供新思路。     

PTEN和DNA含量与非小细胞肺癌侵袭转移的关系探讨

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中抑癌基因PTEN的表达和DNA含量与NSCLC侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP方法检测PTEN在78例肺癌标本中的表达,并用流式细胞术检测30例肺癌标本中DNA含量.结果:肺癌标本中PTEN蛋白总缺失率为42.3%,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组肺癌表达缺失率分别为52.1%和26.7%(P＜0.05),其表达缺失率随TNM分期增加而上升,分期越晚表达缺失率越高.PTEN缺失率高者生存时间短.DNA指数(DI)的分布范围在1.04～1.93.异倍体肿瘤24例,DI值随TNM分期增加而增加(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关.结论 肺癌组织中PTEN的表达与肺癌淋巴结转移有显著相关性,肺癌细胞DNA含量与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.检测PTEN蛋白表达和DNA含量将有助于判断肺癌的转移及预后.     

CD44与肿瘤侵袭、转移及预后的关系

CD44是一种跨膜受体蛋白 ,属于黏附分子家族 ,可与透明质酸等配体结合 ,介导细胞与细胞、细胞与基质之间的黏附。近年来发现CD44及其变异体在许多肿瘤细胞中异常表达 ,且与肿瘤的发生发展及患者的预后存在着一定的关系 ,因此 ,可作为一个辅助性指标预测肿瘤的发展情况     

Seasonal variation of alkaloids of Adhatoda vasica and detection of glycosides and N-Oxides of vasicine and vasicinone

The distribution pattern of the alkaloids of A. Vasica has been studied with change of season. The study also resulted in the detection of glycosides and N-oxides of vasicine and vasicinone.