松杉灵芝菌丝体多糖(FI_0-c)对人组织瘤细胞和人外周血白细胞产生炎症性细胞因子的影响(Ⅱ)(英文)

目的:比较研究水溶性多糖(FI_0-c)及其氯磺酸修饰产物(FI_0-c-S)对人炎症性细胞因子产生的影响.方法:应用氯磺酸修饰法对多糖进行化学修饰.用放射免疫分析法(RIA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测FI_0-c和FI_0-c-S对人组织瘤细胞(THP-1)和人外周血单核细胞(PBMC)分泌各种与炎症有关的细胞因子,白介素-1(IL-1α)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的影响及对mRNA表达的影响.结果:FI_0-c和FI_0-c-S(浓度分别为4,40,400 mg/L)显著提高 低剂量组LPS 10 mg/L协同PMA 200 nmol/L诱导的THP-1细胞产生TNFα的量,然而,这些多糖明显地抑制高剂量组LPS 100 mg/L协同PMA诱导的THP-1细胞产生TNFα.在无刺激的条件下FI_0-c能够诱导比较多量的IL-1α产生,但是FI_0-c或FI_0-c-S却都明显抑制高剂量或低剂量LPS和PMA诱导的THP-1细胞产生IL-1α.低浓度FI_0-c 4 mg/L显著抑制高剂量组LPS 100 mg/L协同PMA诱导的THP-1细胞产生IL-1或TNFα mRNA及蛋白质的量.结论:松杉灵芝菌丝体水溶性多糖在不同的刺激条件下具有双向免疫调节作用.化学修饰的多糖可改变原多糖对细胞因子产生的调节方向.     

松杉灵芝菌丝体多糖(FI_0-b)对人组织瘤细胞和人外周血白细胞产生炎症性细胞因子的影响(Ⅰ)(英文)

目的:比较研究松杉灵芝水溶性多糖(Fl_0-b)及其甲酸修饰产物(FI_0-b-H)对人炎症性细胞因子产生的影响.方法:用放射免疫分析法(RIA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析法研究FI_0-b和Fl_0-b-H对人组织瘤细胞(THP-1)和人外周血单核细胞(PBMC)分泌的各种与炎症有关的细胞因子(白介素-1 α,6,8,肿瘤坏死因子α)及对白介素-1α,肿瘤坏死因子αmRNA表达的影响.结果:FI_0-b和FI_0-b-H(浓度分别为4,40,400 mg/L)显著抑制LPS 10 mg/L协同PMA 200 nmol/L诱导的THP-1细胞和PBMC细胞产生IL-1α和TNF α的量.当低浓度刺激剂(LPS 1mg/L协同PMA 200 nmol/L)刺激THP-1细胞时,FI_0-b-H明显提高白介素-8的产生;但当高浓度刺激剂(LPS 10 mg/L协同200 nmol/L PMA)刺激THP-1-细胞时,FI_0-b-H却明显抑制白介素-8的产生.FI_0-b-和FI_0-b-H对THP-1细胞白介素-1α和肿瘤坏死因子α的mRNA表达有显著作用.结论:与FI_0-b相比,FI_0-b-H在人炎症性细胞因子的产生方面表现出较强的活性.松杉灵芝菌丝体水溶性多糖在不同的刺激条件下,具有双向免疫调节作用,并具有一定的剂量依赖关系.     

银杏叶提取物对兔血管平滑肌细胞分泌细胞因子的影响

目的 :探讨氧化低密度脂蛋白 (oxLDL)对兔血管平滑肌细胞 (VSMC)分泌细胞因子的影响 ,以及银杏叶提取物 (GbE)的干预作用。方法 :兔血管平滑肌细胞分 6组处理 ,以酶联免疫法检测培养上清液中细胞因子肿瘤坏死因子α(TNFα) ,白细胞介素 6(IL 6) ,白细胞介素 8(IL 8)水平。结果 :oxLDL(5 0mg·L-1)对TNFα,IL 6,IL 8分泌水平的增加于刺激后 8h达 6.4～ 8.5倍 ;GbE呈浓度 (1～ 2 0 0mg·L-1)、时间 (1～ 2 4h)依赖地抑制细胞因子分泌 ,并可显著降低oxLDL的上述作用 (与对照组比较均P <0 .0 5 )。结论 :oxLDL可促进兔VSMC分泌细胞因子TNFα,IL 6和IL 8。GbE可能通过抑制基础的及oxLDL刺激的细胞因子分泌对兔VSMC生物学功能发挥调控效用     

芬太尼对人外周血NF-κB活性的影响

目的　验证芬太尼是否影响免疫炎症反应中的某些因素 ,如同吗啡。方法　外周血取自 7个正常志愿者 ,实验分为正常对照组、芬太尼 ( 2 0 μg·L-1和 2mg·L-1)组、模型组(脂多糖 ,LPS组 )和治疗组 (芬太尼 2 0 μg·L-1+LPS、芬太尼 2mg·L-1+LPS)。用流式细胞术检测人外周血中性粒细胞和单核细胞中核因子(NF κB)活性 ,用ELISA检测血清中肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白介素 6(IL 6)含量。结果　芬太尼组NF κB活性及TNF α和IL 6含量与正常对照组比较 ,均无明显差异 (P >0 .0 5 )。治疗组 (芬太尼 2 0 μg·L-1+LPS、芬太尼 2mg·L-1+LPS)中NF κB的活性分别为 81 .9% ,76.1 % (中性粒细胞 )和 78.6% ,72 .6%(单核细胞) ,明显低于模型组 88.9%和 85 .1 % (P <0 .0 1 )。TNF α含量在治疗组 (芬太尼 2 0 μg·L-1+LPS、芬太尼 2mg·L-1+LPS)为 45 9和 3 5 7ng·L-1,IL 6为 796和 72 0ng·L-1,两者均低于模型组 (其中TNF α为 1 2 2 6ng·L-1,IL 6为 1 5 63ng·L-1) (P <0 .0 1 )。结论　芬太尼对NF κB的活性及TNF α和IL 6的含量无影响 ,但可抑制LPS诱导的NF κB的活性及TNF α和IL 6的含量 ,且高剂量芬太尼的抑制作用大于低剂量芬太尼的作用     

重组人胸腺素α原体外对IFN-γ、IFN-α及TNF-α的影响

目的　在体外实验中考察克隆并表达的人胸腺素α原 (prothymosinα ,ProTα)对几种重要细胞因子IFN γ、IFN α和TNF α分泌的影响。方法　在体外分离脾淋巴细胞、脾巨噬细胞及腹腔巨噬细胞 ,用ELISA法检测ProTα对IFN γ、IFN α和TNF α分泌的影响。结果　 10 - 7mol·L- 1 ProTα明显促进脾细胞分泌IFN γ(P <0 .0 5 ) ,该浓度的ProTα也明显刺激小鼠脾巨噬细胞分泌IFN α(P <0 .0 1) ;在小鼠腹腔巨噬细胞中 ,ProTα能明显刺激IFN α和TNF α的分泌 (P <0 .0 1)。结论　在体外实验中 ,ProTα对细胞因子IFN γ、IFN α和TNF α的分泌均有促进作用 ,这为ProTα进一步体内研究奠定了基础     

重组人胸腺素α原体外对IFN-γ,IFN-α及TNF-α的影响

目的　体外观察重组人胸腺素α原 (prothymosinα ,ProTα)对几种重要细胞因子分泌的影响。方法　用脾淋巴细胞、脾巨噬细胞及腹腔巨噬细胞 ,以ELISA法检测ProTα对IFN γ ,IFN α和TNF α分泌的影响。结果　 1× 10 - 7mol·L- 1 ProTα明显促进脾细胞分泌IFN γ(P <0 0 5 ) ,该浓度的ProTα也明显刺激小鼠脾巨噬细胞分泌IFN α(P <0 0 1) ;在小鼠腹腔巨噬细胞中 ,ProTα能明显刺激IFN α和TNF α的分泌 (P <0 0 1)。结论　ProTα对细胞因子IFN γ ,IFN α和TNF α的分泌均有促进作用。     

细胞因子对膀胱平滑肌细胞内诱导性一氧化氮合酶的激活作用(英文)

探讨肿瘤坏死因子α (TNFα)和γ干扰素(INFγ)对大鼠膀胱平滑肌细胞诱导性一氧化氮合酶(iNOS )的影响 .将TNFα (1nmol·L- 1)或INFγ(5 0kU·L- 1)分别或同时加入膀胱平滑肌细胞培养液 ,2 4h后测定细胞培养液中一氧化氮 (NO)水平 ,并用Western印迹方法检测iNOS的表达 .结果显示 ,TNFα或INFγ单独不能诱导iNOS表达 ,也不能引起NO水平显著提高 .但当TNFα和INFγ联合诱导细胞 2 4h ,则细胞培养液中NO水平明显升高 ,用Western印迹分析可见iNOS表达 ,说明TNFα和INFγ具有协同诱导作用 .在TNFα和INFγ加入膀胱平滑肌细胞前 30min ,加入NOS抑制剂L 氮 精氨酸甲酯 (L NAME) ,可显著抑制TNFα和INFγ对NO的生成诱导 .结果提示 ,TNFα和INFγ联合应用可激活膀胱平滑肌细胞iNOS .     

18α-甘草酸下调“胶原蛋白凝胶三明治”培养的大鼠肝细胞P450酶活性及mRNA表达

研究 18α 甘草酸 (18α GA)对肝细胞主要细胞色素P4 50 (CYP)药物代谢酶的影响 ,并初步探讨其分子机理 .采用“胶原蛋白凝胶三明治”培养的原代大鼠肝细胞 ,加 18α GA孵育 ,酶学测定CYP1A1(7 乙氧基异口恶唑O 脱乙基酶 ,EROD) ,CYP2E1(苯胺羟化酶 ,ANH)和CYP3A(红霉素N 脱甲基酶 ,ERD)活性 ,逆转录聚合酶链反应测定CYP1A1,CYP2E1和CYP3A1mRNA表达水平 .结果可见 ,18α GA浓度依赖性 (50～ 4 0 0mg·L- 1)抑制大鼠肝细胞EROD ,ANH和ERD活性 ,2 0 0mg·L- 1作用最强 ,抑制率分别可达 59.6 % ,6 9.7%和 4 4 .7% ,且呈时间依赖性 ,于d 4达高峰 ;浓度依赖性 (50～ 2 0 0mg·L- 1)抑制CYP1A1,CYP2E1和CYP3A1mRNA表达水平 ,分别可达 4 4 .5% ,58.1%和 37.0 % .上述结果表明 18α GA在转录水平下调大鼠肝细胞CYP1A1,CYP2E1和CYP3A1表达     

吗啡和芬太尼对人外周血肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-6表达的影响

目的 :研究吗啡和芬太尼对人外周血肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白细胞介素 6(IL 6)表达的影响并探讨其机制。方法 :试验分单独药物组 (A1:吗啡 2 0 0mg·L-1,A2 :吗啡 2mg·L-1,A3 :芬太尼 2mg·L-1和A4:芬太尼 2 0 μg·L-1)、激活组〔A1,A2 ,A3 和A4组加入脂多糖 (LPS) ,称为B1,B2 ,B3 和B4组〕和对照组 (C1:空白对照和C2 :LPS对照 ) ,共 1 0组。检测 7份正常人血标本。用ELISA检测TNF α和IL 6含量。结果 :A组TNF α浓度为 1 84～2 5 1ng·L-1;IL 6为 3 96～ 490ng·L-1。与C1组 (TNF α:2 79ng·L-1;IL 6:5 61ng·L-1)比较 ,差异无显著意义 (P >0 .0 5 )。B组TNF α浓度为 3 5 7～5 3 4ng·L-1;IL 6为 72 0～ 1 3 1 0ng·L-1,明显低于C2 组(TNF α:1 2 2 6ng·L-1;IL 6:1 5 63ng·L-1) (P <0 .0 5 ;P <0 .0 1 ) ,且高剂量组低于其低剂量组。结论 :吗啡和芬太尼不影响静息状态下TNF α和IL 6的表达 ,但可抑制LPS诱导的TNF α和IL 6表达 ,且具有明显量效关系     

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞活性氧自由基的影响

为进一步探讨灵芝多糖 ( GLP)免疫调节作用机理 ,采用激光扫描共聚焦显微镜技术 ,动态监测灵芝多糖均一体 GLB7对小鼠腹腔巨噬细胞 ( M )活性氧自由基含量的影响 .以 GLB7( 2 0 mg· L-1)刺激 M ,发现探针 DCHF- DA的荧光强度明显下降 ,与静息水平相比 ,平均下降 ( 36± 6) % ( n=6,P<0 .0 5) ;同时还能拮抗 PMA引起的 M 呼吸爆发 ,荧光强度下降幅度为 ( 1 9± 4) % ( n=6,P<0 .0 5) .结果证明 :GLB7能减少 M 内活性氧自由基的生成 ,具有清除活性氧的作用 ,这也是 GLB7产生免疫增强和抗衰老作用的重要途径 .     

四环素抑制活化的内皮细胞表达粘附分子

目的　研究四环素对肿瘤坏死因子 α(TNF α)或细菌内毒素 (LPS)活化的内皮细胞表达粘附分子E 选择素和细胞间粘附分子 1(ICAM 1)的影响 ,为探讨四环素类药物的抗炎作用提供新的实验依据。方法　用TNF α(0 5～ 5 0 μg·L-1)或LPS(0 5～ 5 0mg·L-1)孵育培养的人脐静脉内皮细胞使其活化 ;用四环素 (10 -6～ 10 -4 mol·L-1)预孵育内皮细胞 1h再与TNF α(1μg·L-1)或LPS(5mg·L-1)共同孵育4h或 18h ;应用细胞 酶联免疫吸附分析方法检测E 选择素和ICAM 1的表达。结果　TNF α或LPS孵育内皮细胞 4h明显诱导E 选择素的表达 ,TNF α或LPS孵育内皮细胞 18h明显增加ICAM 1的构成表达 (P <0 0 1) ;用四环素处理后则明显抑制TNF α或LPS诱导的E 选择素和ICAM 1的表达 (P <0 0 1) ,并呈现剂量依赖性。结论　四环素可抑制TNF α或LPS活化的人脐静脉内皮细胞表达粘附分子E 选择素和细胞间粘附分子 1。     

炎性细胞因子抑制剂高通量筛选方法的研究

目的　建立能够同时作用于炎症相关细胞因子的药物筛选模型 ,探讨多指标综合筛选方法 ,为发现新的抗炎先导化合物提供快速有效的方法。方法　采用人血白细胞为研究对象 ,以脂多糖 (LPS)刺激诱发炎性因子生成 ,探讨最佳刺激条件 ,建立多指标检测方法和综合评价药物作用的分析方法。观察不同浓度脂多糖 (0 5～ 5 0mg·L-1)及不同作用时间 (0～ 4h)炎性因子IL 1、IL 8、TNF α生成水平的变化。同时观察 5 LO抑制剂NDGA (nordihydroguaiareticacid)和COX 2抑制剂Diclofenac在多种细胞因子筛选模型上的应用。结果　脂多糖可浓度依赖性 (0 5～ 5 0mg·L-1)和时间依赖性 (0～ 4h)地刺激人血白细胞释放IL 1、IL 8和TNF α。脂多糖 (终浓度 5mg·L-1)刺激人血白细胞 4h有较高释放 ,与对照组比差异明显。NDGA和Diclofenac在脂多糖刺激 4h对炎性因子释放有显著抑制作用。结论　这种脂多糖体外刺激人血白细胞释放多种炎性因子的筛选模型可用于高通量大规模筛选具有抗炎作用的先导化合物 ,提高了筛选效率     

oridonin部分通过TNFα信号转导途径诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡

目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24·8±1·2)μmol·L-1和(20·9±1·9)μg·L-1。Oridonin和TNFα均能引起L929细胞凋亡形态学变化,TNFα处理过的细胞在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的凋亡DNA梯状条带,但是oridonin处理的细胞却不能,称之为非典型凋亡;caspase-3,-8抑制剂和caspase家族抑制剂能明显得促进25μmol·L-1oridonin和20μg·L-1TNFα诱导的L929细胞凋亡,caspase-9抑制剂只能促进oridonin诱导的L929细胞凋亡;ERK的抑制剂PD98059能明显的抑制oridonin和TNFα诱导的L929细胞凋亡,但是p38的抑制剂SB203580只能抑制TNFα诱导的L929细胞凋亡;在L929细胞中oridonin能促进内源性pro-TNFα的表达和其上游蛋白IκB的磷酸化。结论Oridonin通过激活转录因子NF-κB而促进内源性pro-TNFα的表达,并且部分通过细胞因子TNFα信号转到途径诱导L929细胞凋亡。     

国产硫酸安普霉素药代动力学研究

目的　试验选用 1 6只健康猪进行静注、肌注及口服硫酸安普霉素 (Apramycin sulfate,AP)药物代谢动力学研究。方法　采用微生物法测定血清药物浓度 ,药时数据经 Mcpkp程序处理。结果　给猪静注药时数据适合二室开放型模型 ,主要药代动力学参数 (平均值 )为 T1 / 2α =0 .75 h,T1 / 2β =3.1 9h,K e =0 .4 4h-1 ,AUC =1 2 9.6 6 mg· h· L-1。给猪肌注给药的药时数据适合一室模型 ,主要药代动力学参数 (平均值 )为 :T1 / 2 Ka =0 .5 5 h,T1 / 2 K=1 .0 4 h,Tmax =1 .0 6 h,Cmax =36 .74 mg·L-1 ,AUC =1 1 2 .5 4mg· h· L-1 ,F =86 .86 %。猪口服给药的药时数据适合一室模型 ,主要药代动力学参数 (平均值 )为 :T1 / 2 Ka =2 .0 2 h,T1 / 2 k =7.36 h,Tmax =5 .1 2 h,Cmax=0 .2 4 mg· L-1 ,AUC =4 .1 4 mg· h· L-1 ,F =3.1 9%。结论　肌注硫酸安普霉素吸收好 ,生物利用度高 ,口服硫酸安普霉素吸收利用较低     

黑灵芝多糖对体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的研究黑灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响。方法用不同浓度的黑灵芝多糖作用于正常的和LPS活化的腹腔巨噬细胞;测定巨噬细胞代谢MTT活力;Griess法测定NO的产生;ELISA法检测巨噬细胞培养上清中TNF-α、IL-1β的分泌水平。结果黑灵芝多糖对细胞代谢MTT活力有增强作用;在20～160mg·L-1范围内,多糖呈剂量依赖性地促进正常的巨噬细胞分泌NO、TNF-α、IL-1β,增强免疫;而巨噬细胞经LPS激活后,与LPS组比较,多糖不同程度地抑制NO、TNF-α、IL-1β的过量分泌。结论黑灵芝多糖能有效地增强小鼠腹腔巨噬细胞的免疫,可改善LPS对小鼠腹腔巨噬细胞的诱导作用。     

蝎毒组分Ⅲ对人头颈部鳞状细胞癌细胞生长的影响

目的 :观察蝎毒组分Ⅲ (SVC Ⅲ )对人头颈部鳞状细胞癌细胞株 (AGZY 973)生长的影响 ,试图找出SVCⅢ抑制鳞状细胞癌的最佳浓度。方法 :采用噻唑蓝 (MTT)法检测经不同浓度SVC Ⅲ作用下AGZY 973生长抑制率。结果 :SVCⅢ能抑制该细胞的生长 ,SVC Ⅲ可导致AGZY 973细胞代谢MTT的能力显著低于对照组 ,生长抑制率达 6 8.96 % (P <0 .0 1)。当SVCⅢ的浓度 <4 0mg·L- 1时 ,剂量效应关系明显 ;而SVC Ⅲ的浓度 >4 0mg·L- 1时无剂量效应关系。 5 Fu治疗组生长抑制率达 5 5 .2 7%P <0 .0 1)。结论 :SVC Ⅲ是存在于东亚钳蝎蝎毒中的一种抗肿瘤成分 ,能够抑制AGZY 973的生长 ,并在一定浓度范围内存在剂量效应关系     

原钒酸钠对小肠糖吸收的影响

目的　观察原钒酸钠对葡萄糖及麦芽糖吸收的影响 ,并初步探讨其影响糖吸收的机制。方法　①正常Wistar大鼠分为正常对照组、生理盐水对照组、阿卡波糖组 (30mg·kg-1)、原钒酸钠大剂量 (16mg·kg-1)、中剂量 (4mg·kg-1)和小剂量 (1mg·kg-1)组 ,分别灌胃葡萄糖和麦芽糖后 ,用氧化酶法测空腹血糖值及糖耐量。②从小肠上段提取α 葡萄糖苷酶 ,检测原钒酸钠对酶的抑制作用。结果　①原钒酸钠可延迟灌胃葡萄糖 (2 2g·kg-1)引起的血糖升高且 3个剂量组血糖曲线下面积 (AUC)均低于对照组 ,分别为 (8 2 4±0 6 3)mmol·h-1·L-1(P <0 0 1) ,(9 6 9± 0 38)mmol·h-1·L-1(P <0 0 1) ,(13 76± 0 39)mmol·h-1·L-1(P <0 0 5 ) ;②原钒酸钠和阳性对照组均可延缓灌胃麦芽糖 (2 2g·kg-1)引起的血糖升高 ,且大、中剂量可抑制血糖峰值升高 (P <0 0 5 ) ,各给药组AUC均低于对照组 ,大剂量和中剂量为(8 97± 1 5 6 )和 (6 19± 0 4 7)mmol·h-1·L-1均低于阳性对照组 (13 10± 0 4 3)mmol·h-1·L-1(P <0 0 5 ) ;③原钒酸钠 1、10、10 0 μmol·L-1均可抑制正常大鼠小肠α 葡萄糖苷酶的活性 ,其抑制百分率分别为 5 9 76 %、6 8 18%、87 2 2 % ,且大剂量和中剂量均大于阳性对照组的 6 0 94 % ,分别为P<0     

硝酸异山梨酯针剂对不稳定型心绞痛病人血小板活性的抑制作用

目的 :观察体内外不同浓度硝酸异山梨酯(ISDN)对不稳定型心绞痛 (UAP)病人血浆P 选择素、凝血烷B2 (TXB2 )、6 酮 前列腺素F1α(6 keto PGF1α)水平的影响及其量效关系。方法 :体内实验 ,4 5例UAP病人分为 3组 ,分别给予ISDN 2 ,4 ,8mg·h- 1静脉滴注。体外实验 ,16例UAP病人清晨空腹采静脉血与不同浓度ISDN体外培养。测定用药前后血中P 选择素 ,TXB2 ,6 keto PGF1α的含量 ,计算TXB2 / 6 keto PGF1α。健康对照 2 0人。结果 :体内实验中 ,P 选择素和TXB2 在各剂量组 ,用药后 2h和 8h均明显抑制 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。6 keto PGF1α 在 2mg·h- 1组用药后变化不明显(P >0 .0 5 ) ,其余均较用药前升高 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。体外实验中 30min时 12 5mg·L- 1组P 选择素和TXB2 表达下降 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,2h时12 .5mg·L- 1及 12 5mg·L- 1组P 选择素和TXB2均表达下降 (P <0 .0 1)。 6 keto PGF1α无明显变化。结论 :ISDN在体内外均可抑制UAP病人血小板P 选择素和TXB2 的表达且存在量效依赖关系 ,体外起效浓度远远大于体内浓度。     

灵芝多糖肽对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响

目的　研究灵芝多糖肽 (GLPP)对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响并探讨其作用机制。方法　以Griess法 ,观察GLPP对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮(NO)产生的影响 ;以免疫组化法检测诱导型一氧化氮合成酶 (iNOS)的表达 ,观察GLPP对iNOS的影响。结果　GLPP(2 5～ 2 0 0mg·kg-1)灌胃给药 5d或体外给药 (3 12 5～ 2 0 0mg·L-1)均可促进巨噬细胞NO释放 ,但对LPS刺激NO的释放影响不大 ;GLPP(10 0mg·kg-1)灌胃给药 5d或体外给药 (10mg·L-1)均可使巨噬细胞iNOS含量增加。结论　GLPP可增加小鼠腹腔巨噬细胞NO产生 ,其机制可能与其促进巨噬细胞iNOS合成有关。     

过敏性疾病关键启动因子在人角质形成细胞中表达的适宜刺激方法探索

目的研究不同刺激条件对人角质形成细胞Ha Ca T细胞中TSLP、IL-33表达水平的影响,探讨过敏性疾病中关键启动因子TSLP、IL-33体外表达细胞模型的最佳刺激方法。方法应用角质形成细胞无血清培养液(K-SFM)体外培养Ha Ca T细胞,给予不同刺激剂,筛选出明显促进Ha Ca T细胞中TSLP和IL-33表达的刺激剂。进而考察单独与联合刺激剂时的量效关系,最后对选出的刺激剂进行时效关系考察。TSLP和IL-33表达水平采用ELISA和免疫荧光法检测。结果 (1)Poly(I:C)与TNF-α两种刺激剂单独使用时均能明显刺激Ha Ca T细胞分泌TSLP和IL-33,其余刺激剂在本实验浓度范围内未见明显差异。(2)Poly(I:C)100 mg·L-1与TNF-α20μg·L-1联合刺激对Ha Ca T细胞表达TSLP和IL-33的促进作用最为明显。(3)对Poly(I:C)100 mg·L-1与TNF-α20μg·L-1联合刺激Ha Ca T细胞的时效关系考察发现,刺激12 h Ha Ca T细胞中TSLP和IL-33的表达水平最高。结论不同刺激剂和刺激时间对体外刺激Ha Ca T细胞表达细胞因子TSLP和IL-33的效应不同,其中以Poly(I:C)100 mg·L-1与TNF-α20μg·L-1联合刺激Ha Ca T细胞12 h后,TSLP和IL-33的表达水平升高最为明显。该结果为过敏性疾病的病理机制及药物作用研究提供了合适的方法。