自体游离骨膜移植修复关节软骨大面积缺损的实验研究

目的 采用自体游离骨膜移植修复关节软骨大面积缺损，并对其组织形态学进行观察。方法 24只新西兰幼兔随机分成两组，用利刀切除股骨头全层关节软骨达关节软骨表面积的1/3，制成关节软骨大面积缺损模型。实验组取股骨全层游离骨膜，移植修复股骨头关节软骨缺损，对照组关节软骨缺损不作任何处理，于术后第4、8、12、24周取股骨头关节软骨进行大体，光镜观察，Wston-blot法检测关节软骨缺损的修复组织中Ⅱ型胶原蛋白。结果 骨膜移植24周后，肉眼下实验组关节软骨缺损区被透明，光滑的软骨覆盖，与周围正常关节软骨组织已难以区分，而对照组软骨缺损区在24周后仍清晰可见，基底部少量暗红色纤维结缔组织，光镜下，实验组移植4周后软骨缺损区被骨膜再生组织完全填充，为幼稚透明软骨；12周后新生软骨细胞明显增多，逐渐成熟，但排列紊乱；24周后新生软骨排列趋于规则，与周围正常透明关节软骨结构相似，甲苯胺蓝呈异染性。对照组24周后软骨缺损区由纤维样结缔组织覆盖，与周围正常组织分界清晰，边缘可见少量幼稚软骨细胞，甲苯胺蓝异染性不明显，通过Wston-blot法检测证实自体骨膜移植后第4周起关节软骨缺损的修复组织中Ⅱ型胶原蛋白呈持续高度表达。结论 自体游离骨膜移植于受损关节软骨，在一定条件下能演化形成关节透明软骨，可用于修复关节软骨大面积缺损。     

两种微囊化成猪胰岛体内体外功能的比较

目的：观察两种微囊化成猪胰岛体内，体外功能，明确两者间的优劣。方法：采用两种不同的免疫隔离材料对同一来源的成猪胰岛进行微囊化包裹，进行体外培养及四组糖尿病大鼠腹腔内移植。结果：（1）三组胰岛细胞培养液中胰岛素水平，除第6天时未微囊化组较海藻酸钠微囊化组和琼脂糖微囊化组胰岛素水平明显下降，有显著性差异（P＜0．05），余时相各组间无显著性差异；胰岛素刺激释放试验结果三组产无显著性差异。2）四组糖尿病大鼠胰岛移植前血糖水平无显著性差异，移植后1周时琼脂糖微囊化组和海藻酸钠微囊化相与未微囊化组和对照组相比均有显著性差异，且生存期明显长于后两组，但琼脂糖微囊化胰岛组的生存期明显短于海藻酸钠微囊化胰岛组（分别为平均57．10天和145．17天）。结论：两种包膜材料制备的微囊化成猪胰岛在体外具有相似的生物活性，均可存活于糖尿病大鼠体内发挥生物功能，但海藻酸钠微囊化胰岛组较琼脂糖微囊化胰岛组的存活期明显延长。     

垂体移植实验研究：Ⅱ. 不同供体的移植效果

近交系WKY成年或幼年大鼠垂体,移植于去垂体的异体WKY成年鼠正中隆起下方的促垂体区。3周后血清TSH均达术前正常水平,提示垂体激素分泌功能均重建成功。由于幼鼠垂体缺乏PRL分泌细胞,故PRL水平明显低于成年供体组。     

壳聚糖细胞微囊的结构表征及其功能活性

目的考察海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(ACA)微囊的结构和功能活性,评价以壳聚糖替代多聚赖氨酸的ACA微囊在细胞移植中作为运载工具的可行性。方法分别制备ACA微囊和海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊,采用IR、37℃摇床振荡对这两种微囊的膜结构表征及机械强度进行比较研究;以胰蛋白酶、牛血清白蛋白及免疫球蛋白为分子标蛋白,考察囊膜的通透性。用ACA微囊包封C2C12细胞,并植入小鼠腹腔,定期回收微囊,观察囊内细胞存活情况及微囊的生物相容性。结果ACA和APA微囊的囊膜均为聚电解质配合物,两者机械强度良好;所制备的微囊允许胰蛋白酶分子通过,限制大分子免疫球蛋白透过。回收移植5周的ACA细胞微囊,其形态保持不变,囊内细胞存活率为68.80%±2.17%。回收微囊化的C2C12细胞在体外进行再次培养,3 d后细胞贴壁生长特性恢复,形态正常,增殖良好。结论ACA微囊是细胞移植中包裹、保护细胞的合适载体。     

妊娠期甲状腺功能减退症的药物治疗

妊娠期胎儿甲状腺激素的来源人类甲状腺在孕第三周开始发育,甲状腺组织在孕第45至50天合并并移行至最终的位置,孕第70天后甲状腺基本发育完全。自妊娠11周起,胎儿的下丘脑和垂体开始分泌促甲状腺激素释放激素(TRH)和促甲状腺激素(TSH),甲状腺组织亦具备了摄碘能力。尽管自妊娠12周起,胎儿甲状腺开始分泌甲状腺     

微囊肾上腺髓质嗜铬细胞蛛网膜下隙移植治疗晚期癌痛病人的疗效观察

目的:观察微囊肾上腺髓质嗜铬细胞移植到晚期癌痛病人蛛网膜下隙后的镇痛效果,并检测血儿茶酚胺浓度变化。方法:选择15例晚期癌症伴剧烈疼痛的病人,将经过提取、分离、纯化并以微囊包裹的牛肾上腺髓质嗜铬细胞移植到病人的蛛网膜下隙,移植后采用VAS法评价镇痛效果,并观察移植前后血中儿茶酚胺浓度变化、哌替啶用量改变及副作用。结果;移植后病人疼痛明显缓解,移植前后VAS有显著性差异(P<0.01)　显效率为26.7％,有效率为60％,总有效率为86.67％) 移植后血儿茶酚胺浓度与移植前相比具有显著性意义(P<0.01)移植后哌替啶用量明显低于移植前(P<0.01).结论:采用微囊肾上腺髓质嗜铬细胞蛛网膜下隙移植可明显缓解晚期癌痛病人疼痛,且副作用少。     

海藻酸钠--氯化钡微囊牢固度和生物相容性的实验研究

目的 研究海藻酸钠—氯化钡微囊的牢固性、生物相容性。方法 以海藻酸钠和氯化钡为材料，采用气体吹喷制囊法制成微囊，将其置于生理盐水中37℃孵育2个月或置于生理盐水中37℃、150次／分水浴振荡1小时，观察微囊的破损率及形态改变。将5000个空微囊分别注射于12只大鼠腹腔内，于2、6、10周各取4只大鼠处死后用生理盐水灌洗腹腔，将灌洗液离心后计算其中空微囊数并观察微囊的形态改变。结果 海藻酸钠—氯化钡微囊在37℃培养箱孵育2个月，微囊破损率为10％；空微囊于37℃150次／分水浴振荡1小时，微囊破损率为18％；植入空微囊后第2周时腹腔灌洗，每只大鼠可洗出空微囊约3000个，微囊形状均呈圆形，完整，无纤维化；6～10周时每只大鼠可洗出空微囊约1000～1500个，其中50％～60％微囊形态完整，仍呈圆形，未见明显纤维化；20％～25％仍呈圆形，但纤维化明显；10％～15％微囊变形或有裂口，部分微囊有明显纤维化。结论 用海藻酸钠—氯化钡制成的微囊具有较好的牢固度及生物相容性。     

同种异体骨髓基质干细胞移植对兔激素性股骨头缺血性坏死血清肿瘤坏死因子α的影响

目的研究同种异体骨髓基质干细胞（MSC）移植对兔激素性股骨头缺血性坏死（SAN-FH）血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）的影响。方法将45只健康新西兰兔随机分为三组：空白组、每组各15只。模型组和治疗组,模型组和治疗组,第1、3周马血清10ml/kg耳缘静脉注射,于第5周腹腔注射醋酸泼尼松龙7.5mg/kg,1次/d,连续3d;空白组,第1、3周生理盐水10ml/kg兔耳缘静脉注射,于第5周腹腔注射生理盐水1ml,1次/d,连续3d。治疗组于第6周行MSC移植。第10周测血清中TNF-α水平。结果治疗组兔血清TNF-α水平较模型组明显偏低（P〈0.01）。结论MSC移植使兔SANFH模型血清TNF-α水平降低。     

同种异体骨髓基质干细胞移植对兔激素性股骨头缺血性坏死血清血管内皮生长因子的影响

目的研究同种异体骨髓基质干细胞（MSC）移植对兔激素性股骨头缺血性坏死（SAN—FH）血清血管内皮生长因子（VEGF）的影响。方法将45只健康新西兰兔随机分为3组：空白组、模型组和治疗组,每组各15只。模型组和治疗组,第1、3周马血清10ml／kg耳缘静脉注射,于第5周腹腔注射醋酸泼尼松龙7．5mg／kg,1次／d,连续3d;空白组,第1、3周生理盐水10ml／kg兔耳缘静脉注射,于第5周腹腔注射生理盐水1ml,1次／d,连续3d。治疗组于第6周行MSC移植。第10周测血清中VEGF水平。结果治疗组兔血清VEGF水平较模型组明显偏高（P〈0．01）。结论MSC移植使兔SANFH模型血清VEGF水平升高。     

通心络对实验家兔血清OX-LDL的影响

目的通过构建家兔主动脉粥样硬化(AS)模型,观察通心络对血清氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)的影响。方法应用胆固醇、高脂灌胃法制作兔AS模型,实验设正常组、模型组和药物组(通心络),采用酶联免疫法测定3组血清OX-LDL的含量。结果实验开始前3组OX-LDL水平无显著差异(P>0.05)。正常组OX-LDL水平在整个实验过程中无明显变化。模型组OX-LDL水平随着时间的推移逐渐增高。药物(通心络)组OX-LDL水平在第5、10周时高于正常组,且明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.01)。实验结束(第10周)时,药物(通心络)组OX-LDL水平与第5周时比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论通心络可降低血清OX-LDL的浓度,通心络可增加粥样斑块稳定性,延缓动脉粥样硬化的进程。     

Neutrophil migration during liver cirrhosis in rabbits

1. The aim of the present study was to investigate neutrophil chemotaxis during the induction of liver cirrhosis in rabbits. 2. Liver cirrhosis was induced in male New Zealand white rabbits. The study consisted of three experimental groups: (i) group A (n=16) served as the control and received only normal chow and all rabbits in this group were killed at 16 weeks; (ii) group B rabbits (n=8) were killed immediately after the chemotaxis assay, which was performed 24 h after CCl4 administration, at weeks 2, 4, 6 and 8; and (iii) in group C rabbits (n=19), the chemotaxis assay was performed every second week on the day before CCl4 administration for 16 weeks and all animals in this group were killed at 16 weeks. 3. Four of six rabbits in group B had liver cirrhosis at week 8. In group C, liver cirrhosis occurred in seven of eight animals. All rabbits with liver cirrhosis had an inflammatory infiltrate of neutrophils. In group B, there was a significant increase in polymorphonuclear cells and neutrophil chemotaxis and a significant reduction in mononuclear leucocytes at week 8. The rabbits in group C showed a significant increase in total leucocyte and polymorphonuclear numbers at week 10. A significant increase in neutrophil chemotaxis was also observed from week 2 through to week 6. 4. The presence of neutrophils in the liver of all rabbits with cirrhosis, associated with an increase in polymorphonuclear cell chemotaxis during this process, supports the view that this cell type has an important role in the development of toxic liver damage.     

同种异体游离骨骺移植修复股骨头部分坏死缺损的实验研究

研究同种异体游离骨骺移植修复股骨头及关节软骨的部分缺损。方法选用出生１个月的新西兰大白兔的髂骨骨骺作为供体，成年同种兔作为受体。术后３、６、１２和２４周进行股骨头及移植骨骺的大体，组织学和组织化学、超微结构的观察。结论利用同种异体游离骨移植修复成人部分股骨头及关节软骨的坏死缺损，具有一定的临床意义。     

Suppression of immunoreactive macrophages in atheromatous lesions of rabbits by clodronate

Bisphosphonates inhibit the development of experimental atherosclerosis and decrease the intima-media thickness of human carotid artery. Since arterial macrophages have a key role in atherogenesis, we studied whether clodronate, an antiatherogenic bisphosphonate, will suppress the appearance of macrophages generated by atheromatous process in the rabbit aorta. The atherosclerosis was caused in rabbits by means of a high-cholesterol (1%) diet, and the animals were treated simultaneously with saline (n = 11) or 25 mg/kg of clodronate disodium (n= 12) intravenously twice a week for 6 to 12 weeks. The cholesterol diet for 6 weeks caused no visible atheromatous plaques in the aorta, but feeding for 6 more weeks produced progressively atheromatous lesions. Immunohistochemistry with specific antimacrophage antibody showed an intensive accumulation of macrophages in the subendothelial layer of the aorta in cholesterol-fed rabbits treated with saline or clodronate for 6 weeks. In the aorta of rabbits treated with cholesterol diet + saline for 12 weeks, the area of immunoreactive macrophages extended from the internal elastic lamina up to the luminal surface of the aorta. However, far less immunoreactive macrophages were present in the atheromatous regions of the aorta of rabbits medicated with clodronate for 12 weeks; in the clodronate-treated animals the macrophages were located closer to the luminal surface of the aorta than in controls on saline. No atheromatous lesions and macrophages appeared in the aorta of rabbits on standard diet (n = 7). The results suggest that clodronate suppresses the appearance of cholesterol-phagocyting macrophages in arterial walls during atherogenesis.     

应用超声心动图评价阿霉素所致兔扩张型心肌病模型的实验研究

目的 :探讨阿霉素诱导兔心肌病模型的可行性 ,并利用经胸超声心动图进行评估。方法 :2 0只兔每周静脉注射阿霉素 2mg·kg-1,共计 8周 (总剂量 16mg·kg-1) ,另 8只每周注射同等剂量的生理盐水作为对照组。基础状态 (未注药前 )、12周时分别进行兔超声心动图检查 ,分别测量左室舒张期末、收缩期末内径 ,室间隔和左室后壁厚度 ,以及射血分数和短轴缩短率。 12周时阿霉素组和对照组分别取 2只进行心肌病理切片检查。结果 :阿霉素组与基础状态相比 ,12周时左室舒张期末内径显著扩大(10 .5± 1.3和 15 .8± 2 .1mm ,P <0 .0 5 ) ,收缩期末内径显著扩大 (8.7± 1.0和 10 .3± 1.1mm ,P <0 .0 5 ) ,射血分数显著降低 (6 3.4± 8.4和 38.8±7.6 ,P <0 .0 5 ) ,短轴缩短率显著降低 (P <0 .0 1) ,室间隔和左室后壁厚度无显著性变化 (37.6± 7.6和 2 1.2± 6 .7,P >0 .0 5 ) ;对照组左室舒张期末、收缩期末内径、室间隔和左室后壁厚度、射血分数和短周缩短率均无显著性变化 (P >0 .0 5 )。阿霉素组病理结果显示了与人类阿霉素心肌毒性相似的改变 ,心肌细胞变性、线粒体和肌浆网水肿、细胞内空泡增多。结论 :静脉注射阿霉素可以诱导形成非缺血性心肌病模型 ,结果可靠 ,成功率高。经胸超声心动图可以用来监测评估模型     

伊班膦酸钠治疗糖皮质激素诱导的家兔骨质疏松症

目的:应用骨生物力学和组织形态学,研究伊班膦酸钠在糖皮质激素诱导的骨质疏松症家兔模型中的治疗作用。方法:50只家兔随机分为:对照组1和2(注射生理盐水)、模型组1(注射地塞米松,连续6周)、模型组2(注射地塞米松,连续12周)和治疗组(注射地塞米松6周后,注射1次伊班膦酸钠)。6周后将对照组1和模型组1家兔处死;12周后将其他组家兔处死。结果:组织形态学和骨生物力学结果显示骨质疏松症家兔模型成功建立。12周时,治疗组家兔腰椎压缩和股骨3点弯曲最大负荷及肱骨抗扭转最大扭矩比模型组2分别提高了54.36%,21.38%和105.75%(P<0.05),骨质疏松症形态学改变得到明显改善,骨小梁排列较密集,连接增多,成骨活跃,医学图像分析腰椎和股骨颈面密度增加(P<0.05)。结论:伊班膦酸钠可有效治疗糖皮质激素引起的骨质疏松症,提高模型家兔的骨生物力学特性,改善骨小梁的组织结构。     

兔VX2肝癌模型的改良制作及其生长特性

目的：探讨兔VX2肝癌模型的改良种植方式，并分析该肿瘤的生长特性。方法：将30只新西兰白兔随机分为3组，每组10只。再将瘤块组织经剖腹途径植入肝脏。观察肿瘤7、14、21、28、35天时的体积（B超测），并计算肿瘤生长率，大体及镜下（光镜）痛组形态特征以及VX2移植性肝癌的CT影像特征。结果：2～3周生长最旺盛，其体积迅速增大，进行实验研究时，不宜太晚。一般不超过4周为宜，以免因肿瘤坏死和转移影响实验结果。结论：改良的肿增种植方式是建立兔肝癌模型的可靠方式，该模型是肝癌的基础及临床的理想动物模型。     

三七对高脂血症家兔血浆TXB2、GMP-140含量的影响

目的探讨三七粉对高脂血症家兔的降脂作用及对血浆血栓烷B2(TXB2)、α-颗粒膜蛋白140(GMP-140)含量的影响。方法 18只健康家兔随机均分为高脂血症组(A组)、高脂血症治疗组(B组)和对照组(C组)。A、B组饲喂高脂饲料,C组饲喂普通饲料,共6周。第3周开始,B组灌服三七粉0.23g.kg-1.d-1,A、C组灌以等体积的生理盐水。分别于实验前、第3、6周时检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,第6周时检测血浆中TXB2、GMP-140含量。结果与A组相比,第6周时B组血清TG、HDL-C水平明显下降(P<0.05),血浆TXB2、GMP-140含量显著降低(P<0.01)。结论三七能降低血脂,抑制TXB2、GMP-140表达,对动脉粥样硬化和血栓性心脑血管疾病有较好的防治作用。     

不同时期家兔动脉粥样硬化模型的比较

目的 从动脉粥样硬化（AS）发生进展的不同时期,对家兔模型进行比较和研究。方法 新西兰白兔30只,随机分为5组,包括对照组和模型组,模型组又分为AS 4周组、AS 8周组、AS 12周组和AS 16周组,每组6只。对照组给予普通饲料喂养,模型组给予高脂饲料喂养。分别于实验0、4、8、12、16周给各组动物称质量,耳缘静脉取血,测定血清胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白（LDL）和高密度脂蛋白（HGL）含量;通过石蜡切片HE染色及冰冻切片油红O染色对胸主动脉进行病理形态学观察。结果 实验4周时,模型组家兔体质量增加值明显高于对照组,而在实验8、12、16周时,二者比较没有明显差异。血脂测定显示,模型组TC和LDL水平增加幅度较大,TG和HDL水平增加幅度较小,但是与对照组比较差异有显著性（P<0.05、0.01）。组织病理学检查结果显示,实验4周时,模型组家兔在主动脉内皮下可见少量脂质沉积,油红O染色呈红色;实验8周和12周时,处于动脉粥样硬化脂纹期的不同阶段,病灶处内皮下可见大量的泡沫细胞聚集;实验16周时,处于动脉粥样硬化纤维斑块期,病灶表层可见覆盖以纤维帽,纤维帽下有数量不等的泡沫细胞,平滑肌细胞、炎细胞等。结论 家兔单纯给予高脂饲料喂饲4～16周,可造成不同病理分期的动脉粥样硬化模型。     

以珊瑚转化羟基磷灰石为支架材料构建组织工程骨的实验研究

目的 :探讨珊瑚转化羟基磷灰石 (CHA)作为骨组织工程支架材料的可行性 ,寻找最佳支架材料 ,为组织工程研究开辟新的途径。方法 :取 4周龄兔骨髓 ,分离骨髓基质细胞 ,体外培养 ,经诱导分化为成骨细胞 ,胰酶消化后离心收集细胞 ,接种至高温灭菌的CHA材料 ,无菌条件下植入裸鼠皮下组织中 ;对照组单纯植入CHA。分别于 6、8周取材 ,行大体观察、X线摄影及组织学染色 ,观察新骨形成情况。结果 :6周时X线片有高密度阻射影像 ,HE染色可见有新骨形成 ;8周时X线阻射影像密度更高 ,HE染色可见大量新骨形成并相互连接成骨梁样结构 ,骨细胞位于陷窝中。结论 :CHA可以作为骨组织工程的支架材料 ,并具有广阔的应用前景     

Ⅱ型超敏反应家兔模型的建立

目的建立Ⅱ型超敏反应家兔模型,为免疫毒理学或药效学研究提供新方法。方法家兔耳缘静脉注射绵羊红细胞(SRBC)5×108kg-1,每天1次,每周连续6d,停药1d,连续6周,诱导Ⅱ型超敏反应。每周观察呼吸和喷嚏等症状,并监测体温,检测血清游离血红蛋白和游离胆红素及尿隐血,计数外周血网织红细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和血小板,测定血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性及尿素氮和肌酐浓度,用Coombs实验法检测血清抗SRBC抗体水平。6周后处死家兔,测定肝、肾、脾和胸腺指数,并观察组织病理变化。结果与对照组相比,注射SRBC后1～6周,家兔呼吸和喷嚏等症状及体温未见明显变化,外周血网织红细胞数目和血清游离胆红素浓度未见明显变化。但从第1周开始出现尿隐血,第5周时血清游离血红蛋白显著增加,提示出现血管内溶血。外周血淋巴细胞从第1周开始显著增加,第4周时中性粒细胞明显减少,血小板数目未见明显变化,提示粒细胞受损伤。第1和第2周时血清GPT活性增加,第6周时GOT活性增加,尿素氮和肌酐水平未见明显变化。第3周时血清中出现抗SRBC抗体,第6周时脾脏和胸腺显著肿大,提示免疫系统参与此过程。第6周时肾脏、脾脏和胸腺组织未见明显变化,肝脏组织出现肝小叶排列紊乱、炎症细胞浸润和大量空泡等现象,提示肝脏有变性性损伤。结论家兔耳缘静脉注射SRBC6周可导致Ⅱ型超敏反应。