不同比例黄连-吴茱萸配方颗粒/单/合煎对比分析

目的： 通过考察不同比例的黄连与吴茱萸药对,其配方颗粒与单煎液、合煎液的关键成分含量差异,探索药对配方颗粒与传统煎法的等效性。方法： 采用高效液相色谱法测定不同制法下6种生物碱含量,并利用SPSS18.0进行统计检验。结果： 与单煎相比,配方颗粒中4种黄连生物碱和吴茱萸次碱含量均与合煎中没有明显差异（小檗碱P=0.881;表小檗碱P=0.810;黄连碱P=0.961;巴马汀P=0.220;吴茱萸次碱P=0.137）,单煎中黄连生物碱含量平均值约为配方颗粒或合煎的2倍（P<0.01）,吴茱萸次碱单煎含量明显降低（配方颗粒/合煎平均值为单煎的3倍以上,P<0.01）,而吴茱萸碱在配方颗粒与单煎中的差异小（P=0.314）,平均值均在合煎液含量的40%以下（P<0.01）。另外,随着吴茱萸占比提高,合煎液中4种黄连生物碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量明显降低,但比例对配方颗粒和单煎影响不大。结论： 在黄连和吴茱萸药对中,黄连生物碱配方颗粒与合煎差异不显著,吴茱萸生物碱在配方颗粒中可能发生转变,导致与合煎有差异,而且配方颗粒并不能重现合煎中药对比例对成分含量的影响趋势。     

四君子煮散饮片与传统饮片的煎出效果对比研究

目的:比较四君子煮散饮片与四君子传统饮片在不同时间点煎出液中有效成分含量和干膏收率的变化。方法:在不同时间点测定人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、甘草苷、甘草酸的含量和干膏收率,比较四君子煮散饮片与四君子传统饮片的煎出效果。结果:相同煎煮条件下四君子煮散饮片煎液中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、甘草苷、甘草酸含量及干膏收率均显著高于传统饮片。结论:相同煎煮条件下四君子煮散饮片的煎出效果优于传统饮片,四君子煮散饮片的临床配方应用具有一定的合理性。     

吉林省不同产地白屈菜药效学的比较

目的： 探讨吉林省不同产地白屈菜的药效成分含量及其止咳平喘作用,确定白屈菜的最优产地,指导临床更加合理的使用白屈菜。方法： 采用HPLC法测定9个产地白屈菜中白屈菜红碱的含量,通过观察诱咳模型小鼠咳嗽潜伏期、咳嗽次数、炎症因子IL-1、IL-6水平;哮喘模型豚鼠哮喘潜伏期、行为学评分、气道黏多糖含量、CD4⁺/CD8⁺变化及肺组织病理学改变,评价不同产地白屈菜的药效作用差异。结果： 9组不同产地的白屈菜浓缩液均能延长小鼠咳嗽潜伏期,降低3 min内咳嗽次数（P<0.05或P<0.01）,延长豚鼠哮喘潜伏期,降低行为学评分（P<0.05或P<0.01）;其中靖宇产白屈菜控制小鼠咳嗽发生的潜伏期、3 min内咳嗽次数、豚鼠发生哮喘潜伏期、哮喘发生的行为状态、气道黏多糖含量及CD4⁺/CD8⁺值明显优于其他8组（P<0.05或P<0.01）。结论： 不同产地的白屈菜均有止咳平喘作用,但作用效果不同,其中靖宇地区产白屈菜在治疗咳嗽、哮喘症状方面具有一定的优势。     

人参皂苷Rd对乳腺增生及伴发疼痛的治疗作用及机制研究

目的：研究人参皂苷Rd（ginsenoside Rd， GSRd）抗乳腺增生和镇痛的作用，并探讨其相关作用机制。方法：采用雌二醇（E₂）和黄体酮诱导雌性未孕大鼠形成乳腺增生模型，给予GSRd干预后观察大鼠乳腺组织病理学的变化；酶联免疫法（ELISA）检测血清中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量；免疫印迹法检测大鼠乳腺组织中Bcl-2与P53蛋白的表达；采用扭体和福尔马林舔足法观察GSRd的镇痛作用。结果：与模型组比较，GSRd可明显抑制乳腺组织的增生，升高血清中SOD的含量，增加GSH-px活力，降低MDA的含量（P<0.05，P<0.01）；免疫印迹的实验结果表明GSRd可增加BCL-2的蛋白表达（P<0.05，P<0.01），抑制P53蛋白蛋的表达（P<0.05，P<0.01）；镇痛实验结果显示GSRd对冰醋酸致小鼠扭体反应和福尔马林所致的Ⅰ、Ⅱ相反应均有抑制作用（P<0.05，P<0.01）。结论：GSRd对乳腺增生的治疗作用可能与增强体内抗氧化能力调节Bcl-2与P53蛋白的表达有关，并对乳腺增生所伴随的疼痛有明显的缓解作用。     

HPLC-DAD/ELSD、UPLC-MS/MS分析复方五仁醇胶囊中皂苷类成分

目的：分析复方五仁醇胶囊中皂苷类成分。方法：分别采用HPLC—DAD／ELSD、UPLC—MS／MS检测,通过与对照品色谱图比对及比较制剂和对照品提取离子流色谱图（EIC）。并通过质谱图相关离子峰分析,鉴别制剂中的皂苷类成分。结果：HPLC—DAD／ELSD检测出三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1,未检测到柴胡皂苷A和D;UPLC—MS／MS除检测到上述3种三七皂苷类成分外,还检测到柴胡皂苷D,但柴胡皂苷A仍未检测到。结论：复方五仁醇胶囊中存在三七和柴胡所含皂苷类成分。     

一测多评法同时测定三七伤药片中6种活性成分

摘 要 目的：建立一测多评法(QAMS) 测定三七伤药片中6种活性成分含量。方法: 采用HPLC法,以Waters Sunfire ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,流动相为乙腈 水,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为可变波长（0 min,230 nm;10 min,283 nm;25 min,203 nm）,柱温：30℃,进样量：10 μl。以柚皮苷为参照物,应用QAMS测定芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1和人参皂苷Re的相对较正因子并计算其含量,同时用外标法测定以上6种有效成分的含量,并将两种结果进行分析比校。结果: 一测多评法测得的芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1和人参皂苷Re 5种成分计算值与外标法测定值差异无统计学意义(P＞0.05)。结论: QAMS法可用于三七伤药片6种指标性成分的含量测定,且方法简单、有效、结果准确。     

HPLC法测定活血舒脉胶囊中人参皂苷Rg_1、Rb_1及三七皂苷R_1的含量

目的考察活血舒脉胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1的含量,为制订活血舒脉胶囊质量标准提供科学的实验依据。方法采用HPLC法对10个批号的活血舒脉胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1进行含量测定。结果10批样品中人参皂苷Rg1、Rb1、三七皂苷R1最低含量分别为14.862、14.258、2.864mg.g-1;RSD分别为2.53%、1.12%、2.11%。结论10批样品测定结果表明各成分含量稳定,RSD均小于3.0%,可以作为制订活血舒脉胶囊质量标准的依据。     

激光散斑衬比成像技术观察补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注后脑微血流的影响

目的：建立脑缺血再灌注大鼠模型,观察补阳还五汤对大鼠脑缺血再灌注后脑微血流的影响。方法：将动物分为对照组、模型组、补阳还五汤组、重组人血管内皮抑制素组、补阳还五汤+重组人血管内皮抑制素组,应用激光散斑衬比成像技术观察大鼠梗死区域脑血流状态,测定脑组织的含水量,并检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）蛋白及基因表达水平。结果：与对照组相比,脑缺血再灌注大鼠模型大鼠脑血流速度明显降低（P<0.01）,脑组织含水量增高（P<0.01）,VEGF蛋白和基因的表达减少（P<0.01）;与模型组相比,补阳还五汤组能明显提高脑缺血再灌注大鼠模型大鼠脑血流速度（P<0.01）,降低脑组织含水量（P<0.01）,提高VEGF蛋白和基因的表达（P<0.01）。结论：补阳还五汤具有改善缺血再灌注后脑血流的作用,而调节VEGF蛋白及基因的表达水平是其参与改善脑血流的主要途径之一。     

经典名方温胆汤物质基准量值传递分析

目的: 建立温胆汤物质基准的高效液相色谱指纹图谱及指标性成分含量测定的方法,结合化学模式识别法探索饮片-物质基准的量值传递关系。方法: 据古法制备15批温胆汤物质基准,经高效液相色谱法对15批饮片和物质基准的指纹图谱、指标性成分含量进行测定,结合出膏率、指纹图谱相似度、特征峰的归属及指标性成分的转移率进行量值传递研究。结果: 15批温胆汤物质基准的指纹图谱的相似度均大于0.9;共归属20个共有峰,陈皮3个、竹茹1个、枳实5个、生姜1个、甘草2个、陈皮和枳实共有6个、陈皮和竹茹共有1个、陈皮和枳实及甘草共有1个;15批温胆汤物质基准中鸟苷、尿苷、6-姜辣素和橙皮苷的含量范围分别为0.020 1%~0.037 2%、0.032 5%~0.058 3%、0.034 1%~0.085 3%和1.433 8%~3.419 0%,鸟苷、尿苷和6-姜辣素转移率范围分别为53.01%~93.42%、90.11%~248.31%和19.35%~33.97%;出膏率范围19.34%~24.53%。结论: 采用指纹图谱、出膏率及指标性成分含量相结合的模式对经典名方物质基准的量值传递过程进行分析,初步拟定的物质基准质量标准可为后续现代制剂的开发提供依据与参考。     

不同煎煮方法对半夏泻心汤质量的影响

摘要：目的:探讨不同煎煮方法对半夏泻心汤中盐酸小檗碱、黄芩苷、甘草苷及甘草酸铵的含量的影响。方法:按半夏泻心汤处方量,一法遵循传统的记载,去滓再煎（Ⅰ法）制备标准汤液,另法直接合煎（Ⅱ法）制备成标准汤液。用HPLC法分别测定两种方法制备的汤液的出膏率、浸出物含量,以及黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草苷、甘草酸铵等成分含量。结果:Ⅰ法汤液的出膏率、浸出物含量明显低于Ⅱ法汤液（P<0.01）,Ⅰ法汤液黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草苷、甘草酸铵含量均明显高于Ⅱ法汤液（P<0.01）。结论:两种煎煮方法所得的半夏泻心汤质量存在差异,但由于出膏率和浸出物含量不完全等同于汤液中有效成分含量的提取程度,故以黄芩苷、盐酸小檗碱、甘草苷、甘草酸铵含量为评价指标,半夏泻心汤原方记载煎煮方法更为科学。     

仿生化提取人参皂苷类成分的初步研究

目的:对人参中的皂苷类成分进行仿生化提取。方法:以人参超微粉为原料,分别以仿生溶媒和水作为提取溶剂提取人参皂苷类成分。采用紫外-可见分光光度法测定人参总皂苷的含量;高效液相色谱法测定人参皂苷Rg1和人参皂苷Re含量之和,并分析色谱图特征;以成分的提取率为指标比较仿生化和水提取法的优劣。结果:仿生化提取人参总皂苷的提取率为61.31%,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总提取率为62.63%;水提取人参总皂苷的提取率为54.26%,人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的总提取率为43.09%。结论:仿生化提取法对人参总皂苷、人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的提取效率高于水提取法,且仿生化提取物色谱图中显示有新成分产生。     

鹿茸多肽对阿霉素诱导H9c2细胞损伤保护作用的研究

目的：探讨鹿茸多肽对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤的保护作用与其作用机制。方法：培养H9c2细胞，采用CCK-8方法考察ADR和PAP对H9c2细胞存活率的影响，选择最优给药时间与浓度，分成4组，空白对照组（BCG组）、阿霉素诱导组（ADR组）、鹿茸多肽组（PAP组）、阿霉素与鹿茸多肽联合诱导组（ADR+PAP组），ELISA检测H9c2上清液中cTnT和cTnI的含量，免疫荧光法检测Caspase9的表达水平，Western blot法检测各组细胞相关蛋白TGF-β₁、SMAD7、PKC表达。结果：与BCG组比较，ADR组cTnT和cTnI含量显著升高（P<0.05），Caspase9活性表达降低，TGF-β₁蛋白表达升高（P<0.01），SMAD7、PKC蛋白表达降低（P<0.01），PAP组无显著性差异（P>0.05），与ADR组比较，ADR+PAP组cTnT和cTnI含量减少（P<0.05），Caspase9活性表达升高，TGF-β₁蛋白表达降低（P<0.05），SMAD7、PKC蛋白表达升高（P<0.01，P<0.05）。结论：鹿茸多肽可以对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤有保护作用，其作用机制可能与调控TGF-β₁、SMAD7、PKC蛋白表达量有关。     

人参与附子配伍后不同制备条件下人参皂苷含量变化的研究

目的:研究人参与附子配伍后不同制备条件对人参皂苷Rg1、Re、Rb1含量的影响。方法:采用高效液相色谱法测定人参配伍附子后水煎液、浓缩膏及不同温度下的干燥细粉中人参皂苷的含量。结果:人参与附子配伍后,浓缩、干燥是人参皂苷类成分损失最多的制备工序。结论:人参与附子配伍浓缩、干燥温度不宜高于80℃。     

3种方法制备中药汤剂的对比研究

目的：比较ＧＮＧ 中药抽出机与直火加热法、蒸气煎药法制备中药汤剂的质量。方法：以总固体含量的微生物限度为指标,比较３ 种方法制备中药汤剂的质量。结果：ＧＮＧ 中药抽出机制备中药汤剂的总固体含量是其余２ 种方法的２ 倍以上,保存时间较其余２ 种方法长。结论：ＧＮＧ 中药抽出机制备的汤剂质量优于直火加热法和蒸气煎药法,适宜于临床应用。     

3种方法制备的胃肠复原汤中黄芪甲苷含量的比较

目的:测定3种方法(传统单剂煎煮法、煎药机多剂煎煮法、配方颗粒溶解法)制备的胃肠复原汤中黄芪甲苷的含量并进行比较。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为KromasilC18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(31:69),流速为1.0mL.min-1,检测器为Alltech2000ES蒸发光散射检测器,漂移管温度为105℃,气体流速为2.0mL.min-1。结果:黄芪甲苷进样量在0.4832～1.4496μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9993);平均加样回收率为97.21%,RSD=1.45%(n=6)。胃肠复原汤3批传统煎剂平均含量为0.2250mg.g-1,3批机制煎剂平均含量为0.1545mg.g-1,3批配方颗粒平均含量为0.2742mg.g-1。结论:胃肠复原汤中黄芪甲苷含量配方颗粒稍高于传统煎剂,二者均远远高于机制煎剂。批间差异配方颗粒与传统煎剂接近,而机制煎剂差异较大。     

人参叶中三萜皂苷类成分的研究

目的 研究人参叶中的微量皂苷类化合物.方法 利用正相硅胶柱层析和反相硅胶制备色谱技术,分离人参叶中的微量成分,并运用质谱和核磁共振技术鉴定其结构.结果 从人参叶中分离得到5个微量成分,分别鉴定为:人参皂苷Rk1(Ⅰ)、Rk3(Ⅱ)、Rh4(Ⅲ)、RgS(Ⅳ)和Rg6(Ⅴ).结论 化合物Ⅰ～Ⅳ为首次从人参叶中分离得到.     

经典名方保元汤物质基准指纹图谱及多指标量值传递研究

目的:建立经典名方保元汤物质基准的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别进行分析,并建立人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁及毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷的含量测定方法,以人参、黄芪为例阐明药材-饮片-物质基准量值传递关系,结合有效成分转移率评价物质基准制备过程的合理性,为其质量控制提供参考。方法:按照古籍记载方法制备15批物质基准样品,建立HPLC指纹图谱;采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012A版)进行相似度分析;采用Me V-4.9.0及SIMCA 14.1软件进行聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等化学模式识别研究。采用HPLC色谱法对样品中人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁及毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷的含量,结合有效成分转移率进行量值传递关系分析。结果:对15批样品进行研究,在254 nm及203 nm下建立HPLC指纹图谱,其相似度均大于0.9;254 nm下标定了27个共有峰,并指认5个色谱峰(毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸、肉桂醇、肉桂酸),203 nm下标定了22个共有峰,并指认4个色谱峰(人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁及6-姜辣素);供试品溶液在48 h内稳定;精密度、重复性良好。3种化学模式识别分析方法均可将物质基准分为3类,筛选出导致批次间质量差异的14种主要成分;人参皂苷Rg₁与Re之和、人参皂苷Rb₁、毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷药材-饮片转移率平均值分别为103.67%、102.68%、110.30%,饮片-物质基准转移率平均值分别为65.03%、68.44%、59.77%。结论:本文建立的物质基准指纹图谱方法简便、稳定,结合化学模式识别技术及指标性成分含量转移率,可更加系统、全面地进行保元汤物质基准的质量控制。     

HPLC法同时测定人参北芪片中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量

目的建立测定人参北芪片中人参的有效成分人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的高效液相色谱（HPLC）测定方法。方法采用ODS-2HYPERSIL柱（250mm×4.6mm5μm）;乙腈-0.1%磷酸溶液（20∶80）为流动相;检测波长为203nm;流速1.0ml/min;柱温35℃。结果人参皂苷Rg1在0.2024～5.0600μg具有良好的线性关系（r=0.9995）,平均回收率为99.0%,RSD为1.04%（n=9）;人参皂苷Re在0.2152～5.3800μg的范围具有良好的线性关系（r=0.9998）,平均回收率为98.2%,RSD为0.70%（n=9）。结论本法快速、准确,可同时测定人参北芪片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的含量。