钙离子拮抗药调控群体感应系统对铜绿假单胞菌毒力因子表达的影响

摘要：目的:考察钙离子拮抗药（CCB）硝苯地平、维拉帕米、地尔硫■调控铜绿假单胞菌（PA）群体感应系统对毒力因子表达的影响。方法:倍比稀释法测定CCB对PA的最小抑菌浓度（MIC）和生长抑制;测定CCB对PA绿脓毒素、弹性蛋白酶、蛋白水解酶表达的影响。结果:硝苯地平、维拉帕米、地尔硫■对PA均有抑制作用,硝苯地平的MIC50为64μg·ml-1,MIC90为256μg·ml-1,MICrange为64～256μg·ml-1;维拉帕米的MIC50为128μg·ml-1,MIC90为512μg·ml-1,MICrange为128～512μg·ml-1;地尔硫■的MIC50为256μg·ml-1,MIC90?> 512μg·ml-1,MICrange?≥256μg·ml-1。生长抑制实验中,与对照组相比,硝苯地平、维拉帕米、地尔硫■浓度≥16μg·ml-1可显著抑制PA的生长（P<0.05或P<0.01）,随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强,其中硝苯地平的抑制作用最强。毒力因子表达实验中,与对照组相比,硝苯地平、维拉帕米、地尔硫■浓度≥16μg·ml-1可显著影响绿脓毒素、弹性蛋白酶、蛋白水解酶的表达（P<0.05或P<0.01）,且随着浓度的增加,影响作用增强,其中硝苯地平的影响作用最强。结论:CCB可抑制PA生长,调控PA的群体感应系统从而影响毒力因子的表达,可作为抗菌增效的潜在药物。     

原白头翁素对铜绿假单胞菌群体感应系统调控的毒力因子表达量的影响

目的 研究原白头翁素对铜绿假单胞菌(PA)的生长及群体感应系统(QS系统)调控的毒力因子表达的影响.方法 测定原白头翁素对PA的最低抑菌浓度和生长曲线,以40 μmol/L的呋喃酮C-30作为阳性对照,测定原白头翁素(40、80μmol/L)对铜绿假单胞菌标准株PA01生长曲线的影响以及QS系统调控的毒力因子中胞外3种毒力因子(绿脓菌素、蛋白水解酶和弹性蛋白酶)表达量的影响.结果 在实验所采用的浓度下,原白头翁素对铜绿假单胞菌的生长未表现出明显的抑制作用,但对PA01的3种毒力因子均有抑制作用,并呈现出剂量相关性.结论 原白头翁素抗感染的机制可能是作用于 铜绿假单胞菌的QS系统,抑制毒力因子表达,从而降低该菌的毒力.     

黄连解毒汤干预铜绿假单胞菌密度感应系统调控毒力因子和生物膜的作用初探

摘要：目的:探索黄连解毒汤铜对绿假单胞菌生长与毒力因子的干预作用。方法:将铜绿假单胞菌分别与不同浓度梯度的黄连解毒汤、黄连、黄柏、黄芩、栀子共同培养,观察对细菌生长、毒力因子、生物膜的影响。倍比稀释法观察黄连解毒汤对细菌生长的影响。刚果红弹性蛋白降解试验检测弹性蛋白酶活性,氯仿盐酸法测定绿脓菌素分泌量,结晶紫染色法观察生物被膜起始量,荧光定量PCR检测细菌密度感应（QS）基因转录水平。结果:黄连解毒汤最低抑菌浓度（MIC）为12.5 mg·ml-1,黄连、黄芩、黄柏均为25 mg·ml-1,栀子为50 mg·ml-1。黄连解毒汤和黄连抑制绿脓菌素最低浓度均为6.25 mg·ml-1,黄芩与黄柏为12.5 mg·ml-1,栀子为50 mg·ml-1。黄连解毒汤抑制弹性蛋白酶最低浓度为6.25 mg·ml-1,黄连与黄柏均为12.5 mg·ml-1,黄芩和栀子均为25 mg·ml-1。黄连解毒汤抑制生物被膜的最低浓度为6.25 mg·ml-1,黄连和黄芩均为12.5 mg·ml-1,黄柏和栀子均为25mg·ml-1。在低于最小抑菌浓度梯度之下,6.25 mg·ml-1黄连解毒汤和12.5 mg·ml-1黄连抑制las B、las I、lasR、rhl I、rhlR基因转录,12.5 mg·ml-1黄岑和25.0 mg·ml-1栀子抑制las B和las I基因转录,12.5 mg·ml-1黄柏抑制las B和rhl I基因转录。结论:黄连解毒汤4种组分通过协同作用对细菌生长和密度感应系统调控的毒力因子发挥抑制作用。     

左氧氟沙星对铜绿假单胞菌密度感应系统及毒力因子的调控

目的：评价铜绿假单胞菌在亚抑制浓度（ SIC）的左氧氟沙星作用下毒力因子表型及基因表达的变化并探索其可能的调控途径。方法用临床标准菌株PAO1及其密度感应系统（ QS）的基因突变株,测定不同浓度下菌株生长曲线,以不影响细菌生长的最高抗菌素浓度为亚抑制浓度。分别测定各菌株在SIC的抗菌素作用下生物膜形成、绿脓菌素和鼠李糖脂的变化。用实时定量聚合酶链式反应（ RT－PCR）测定菌株毒力蛋白编码基因以及QS基因在SIC的左氧氟沙星作用下表达的变化。用生物发光法测定QS信号分子在SIC的抗菌素作用下的变化。结果在SIC的左氧氟沙星作用下,PAO1的毒力因子编码基因和QS调控基因（lasR、rhlR）表达均显著增加,PAO1野生株的毒力因子也增加,但lasR、rhlR突变株无此变化,同时QS信号分子水平也无显著变化。结论亚抑制浓度的左氧氟沙星促进铜绿假单胞菌毒力因子的产生,这一效应是通过lasR和rhlR调节实现的,但这一调控作用可能并不是直接通过AHL信号分子完成。     

苦豆碱对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡的影响

摘要：目的:考察苦豆碱（ALO）对宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Hela细胞,采用CCK-8法检测ALO对Hela细胞增殖的影响,实验设置对照组（不作给药处理）以及ALO浓度分别为80,90,100,110,120,130μg·ml-1的实验组,给药时间设置为24 h和48 h。采用流式细胞术检测ALO对Hela细胞凋亡的影响,根据CCK-8结果,设置实验分组为:对照组、ALO低(90μg·ml-1)、中(110μg·ml-1)、高(130μg·ml-1)浓度组; Western blot法测定ALO对Hela细胞中凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）和周期蛋白G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1）相对表达量的影响,实验分组同流式细胞术。结果:与对照组相比,ALO各浓度组细胞在培养24和48 h后,增殖抑制率显著升高（P<0.05或P<0.01）,各实验组细胞凋亡均明显增多（P<0.05或P<0.01）,各实验组ALO作用于Hela细胞48 h后,均能够显著增加凋亡蛋白caspase-3的表达（P<0.01）,下调细胞周期蛋白表达量（P<0.01）,各指标变化呈剂量和时间依赖性。结论:ALO能够明显抑制宫颈癌Hela细胞的增殖,同时抑制周期蛋白表达,进一步抑制细胞增殖。并促进其凋亡蛋白的表达,进而促进凋亡。     

蛇床子素对肝癌Huh7细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响及机制研究

摘要：目的:探讨蛇床子素对人肝癌Huh7细胞增殖、凋亡及放射敏感性的影响,并初步探究其作用机制。方法:采用不同浓度(0,2.5,5,10,20,40μg·ml-1)的蛇床子素干预人肝癌Huh7细胞,噻唑蓝（MTT）法检测蛇床子素对肝癌Huh7细胞增殖的影响,并计算半数抑制浓度(IC50);10μg·ml-1蛇床子素联合不同照射剂量（0,2,4,6,8 Gy）的X射线处理Huh7细胞,MTT检测细胞增殖能力,筛选照射剂量;克隆形成实验检测Huh7细胞放射敏感性变化,分别采用10μg·ml-1蛇床子素、4 GyX射线照射及两者联合干预Huh7细胞,流式细胞术检测Huh7细胞凋亡率,Western Blot检测Huh7细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（cleaved caspase-9）的表达水平。结果:蛇床子素对肝癌Huh7细胞增殖有明显抑制作用,IC50为20.14μg·ml-1;与单纯照射组相比,蛇床子素联合不同剂量X射线照射下均能够明显抑制细胞存活率,筛选出4 Gy剂量用于后续放射实验。与单纯照射组相比,蛇床子素联合照射组Huh7细胞的放射敏感性、Huh7细胞凋亡率、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达显著升高（P<0.05）。结论:蛇床子素能够抑制肝癌Huh7细胞增殖,促进细胞凋亡,并增强细胞对放射的敏感性,其作用机制可能与蛇床子素上调cleaved caspase-3和cleaved caspase-9蛋白表达有关。     

扁蒴藤素通过下调integrin β1抑制肺癌A549细胞侵袭、迁移

摘要：目的:研究扁蒴藤素下调整合素β1（integrinβ1）对肺癌A549细胞侵袭、迁移的影响。方法:体外培养肺癌A549细胞,完全培养液稀释后扁蒴藤素终浓度分别为0,5,10,20,40,80μg·ml-1继续培养48 h,检测450 nm下各孔细胞光密度（OD）值,并计算半抑制浓度(IC50)。实验分为空白对照组、扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂（HMIβ1-1）组、扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组。空白对照组仅添加培养液,扁蒴藤素组添加终浓度为25.39μg·ml-1扁蒴藤素的培养液,integrinβ1抑制剂组添加终浓度为10μg·ml-1HMIβ1-1的培养液,扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组在扁蒴藤素组基础上添加10μg·ml-1?HMIβ1-1。Transwell检测细胞侵袭和迁移情况;划痕实验检测细胞迁移情况;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测细胞中integrinβ1 mRNA表达情况;蛋白免疫印迹检测细胞中integrinβ1、纤维粘连蛋白（FN）、基质金属蛋白酶2（MMP2）蛋白表达情况。结果:与0和5μg·ml-1扁蒴藤素相比,10,20,40,80μg·ml-1扁蒴藤素OD值依次降低（P<0.05）,IC50为25.39μg·ml-1。与空白对照组相比,扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂组侵袭、迁移细胞数量、划痕愈合率、细胞中integrinβ1 mRNA和蛋白水平、FN、MMP2蛋白水平显著降低（P<0.05）;与扁蒴藤素组、integrinβ1抑制剂组相比,扁蒴藤素+integrinβ1抑制剂组侵袭、迁移细胞数量,划痕愈合率、细胞中integrinβ1 mRNA和蛋白水平、FN蛋白水平显著降低（P<0.05）。结论:扁蒴藤素可下调integrinβ1从而抑制肺癌A549细胞侵袭、迁移。     

氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌生长和空泡毒素A表达和活性的影响

目的评价氢溴酸槟榔碱对幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)的抑制作用及其对H.pylori空泡毒素A表达水平和活性的影响。方法使用平皿稀释固体法和脑心浸液液体法测定中药活性成分氢溴酸槟榔碱对H.pylori的最低抑菌浓度(MIC),以反映药物对H.pylori的抑制作用。通过中性红摄入法评价药物干预后H.pylori培养上清中空泡毒素A对胃癌细胞BGC-823的毒性作用,并通过RT-PCR方法和Western blot方法检测经药物处理后H.pylori菌体及分泌上清中空泡毒素A mRNA和蛋白的表达水平,以反映药物对H.pylori空泡毒素A活性和表达的影响。结果高浓度氢溴酸槟榔碱对H.pylori具有抑制作用,MIC为:固体法和液体法均为1.25 g·L-1。低浓度氢溴酸槟榔碱可不同程度抑制H.pylori空泡毒素A的活性(P<0.01);抑制H.pylori菌体和分泌上清中空泡毒素A mRNA(P<0.05)和蛋白(P<0.05)的表达。结论氢溴酸槟榔碱在较高浓度(1.25 g·L-1)时具有抑制H.pylori生长作用,而在较低浓度(0.15 g·L-1)时,即可抑制H.pylori空泡毒素A的表达和活性。     

丙泊酚对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响及其机制研究

摘要：目的:探究麻醉药丙泊酚对人胃癌SGC-7901细胞体外增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,分别使用不同浓度(0,2,4,6μg·ml-1)的丙泊酚干预SGC-7901细胞(其中0μg·ml-1为对照组),采用克隆形成实验测定丙泊酚对SGC-7901细胞克隆形成能力的影响,噻唑蓝（MTT）法检测丙泊酚对SGC-7901细胞活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测增殖细胞核抗原、凋亡相关蛋白以及Wnt/β-连环蛋白（Wnt/β-catenin）信号转导途径相关蛋白水平。在4μg·ml-1的丙泊酚处理的SGC-7901细胞组施加Wnt/β-catenin信号转导途径特异性激活剂氯化锂（Li Cl）,检测对SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。结果:与对照组比较,丙泊酚组SGC-7901细胞克隆形成数目、光密度（OD）值、增殖细胞核抗原（PCNA）和Ki-67、β-连环蛋白（β-catenin）、c-myc和细胞周期蛋白D1（cyclin D1）蛋白水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,凋亡率、Bcl-2相关X蛋白（Bax）和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved caspase-3）蛋白水平明显升高（P<0.01）。而Wnt/β-catenin激活剂LiCl可减弱丙泊酚对SGC-7901细胞的增殖抑制的作用,部分逆转丙泊酚对SGC-7901细胞凋亡诱导的作用。结论:丙泊酚抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖,促进细胞凋亡,其潜在分子机制是通过抑制Wnt/β-catenin信号转导途径来实现的。     

银杏叶总黄酮通过抑制c-Met介导的上皮-间充质转化对人肺癌细胞迁移和侵袭的影响

摘要：目的:探讨银杏叶总黄酮通过抑制肝细胞生长因子受体（c-Met）介导的上皮-间充质转化对人肺癌细胞迁移和侵袭的影响。方法:体外培养A549细胞进行实验,采用细胞计数试剂盒8 （CCK-8）法确定银杏叶总黄酮对A549细胞的半数抑制浓度,对照组加入无血清RPMI-1640培养基,银杏叶总黄酮低、中、高剂量组加入终浓度为50,100,200μg·ml-1的银杏叶总黄酮,顺铂组给予终浓度为5μg·ml-1的顺铂,继续培养24 h后检测细胞迁移和侵袭能力,同时检测A549细胞内肝细胞生长因子（HGF）、c-Met、磷酸化c-Met（p-c-Met）、上皮型钙黏蛋白（E-cadherin）和抗波形蛋白（Vimentin）表达水平。结果:随着银杏叶总黄酮浓度增加,A549细胞增殖率降低,与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。当银杏叶总黄酮浓度为200μg·ml-1时,抑制率为52.45%,故选200μg·ml-1作为半数抑制浓度;各剂量组A549细胞内c-Met水平变化不显著,差异无统计学意义（P>0.05）;与对照组相比,各银杏叶总黄酮组和顺铂组A549细胞迁移能力、细胞侵袭数、HGF、p-c-Met、Vimentin水平降低,E-cadherin水平增加,差异有统计学意义（P<0.05）,各银杏叶总黄酮组之间呈剂量依赖性,但效果不如顺铂组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:银杏叶总黄酮通过下调c-Met信号,有效抑制A549细胞的上皮-间充质转化,从而发挥抗迁移和侵袭作用,该发现可能为肺癌的治疗提供新的思路。     

珠子参总皂苷通过上调miR-325-3p抑制脂多糖诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症因子释放

摘要：目的:探讨珠子参总皂苷对脂多糖诱导的星形胶质细胞凋亡和炎症因子表达的影响及可能机制。方法:体外培养大鼠星形胶质细胞,不同剂量(50,100,200μg·ml-1)的珠子参总皂苷作用于脂多糖诱导的星形胶质细胞24 h、脂多糖处理转染miR-325-3p模拟物的星形胶质细胞24 h或200μg·ml-1的珠子参总皂苷作用于脂多糖诱导的的转染miR-325-3p抑制剂的星形胶质细胞24 h后,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹法检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（cleaved-caspase3）和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（cleaved-caspase9）蛋白表达,试剂盒检测细胞培养上清中肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）水平,实时定量聚合酶链式反应（RT-qPCR）检测细胞中微小RNA-325-3p（miR-325-3p）表达。结果:珠子参总皂苷可降低脂多糖诱导的星形胶质细胞凋亡率、细胞中cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达及TNF-α和IL-6的分泌（P<0.05）,促进miR-325-3p表达（P<0.05）,且呈剂量依赖性。过表达miR-325-3p可降低脂多糖诱导的星形胶质细胞凋亡率、细胞中cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达及TNF-α和IL-6的分泌（P<0.05）。敲减miR-325-3p逆转珠子参总皂苷对脂多糖诱导的星形胶质细胞凋亡及TNF-α和IL-6表达的抑制作用（P<0.05）。结论:珠子参总皂苷可能通过上调miR-325-3p表达抑制脂多糖诱导的大鼠星形胶质细胞凋亡和炎症反应。     

罗浮山百草油体外抗腺病毒研究

摘要：目的:研究罗浮山百草油（LHO）体外抗腺病毒感染的作用。方法:采用细胞病变CPE法及噻唑蓝（MTT）法检测LHO对于Hep-2细胞的安全剂量,同法检测腺病毒感染及LHO给药前后对腺病毒体外感染的抑制作用。结果:MTT法测得LHO对Hep-2细胞的半数细胞毒性浓度(CC50)为92.41μg·ml-1;腺病毒感染Hep-2细胞后7 d,细胞产生明显病变,LHO给药后能够明显抑制腺病毒感染引起的细胞病变;MTT法测得LHO对腺病毒半数抑制率(EC50)为55.18μg·ml-1,选择指数（SI）为1.67。结论:LHO可以抑制腺病毒的体外感染引起的细胞活性降低及细胞病变。     

藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞作用研究

目的:研究藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞的作用。方法:以MTT法、细胞生长曲线法、集落形成法观察藤茶提取物对人肝癌BEL7404细胞的体外抑制作用。结果:藤茶总黄酮能显著抑制体外培养的BEL7404细胞的生长。MTT法测得的半数抑制浓度(IC50)为28·59μg·mL-1;细胞生长曲线法提示藤茶总黄酮对BEL7404细胞的生长有显著的抑制作用;集落形成法提示当药物浓度在22·22μg·mL-1以上时IC50为100%,当药物浓度在14·81μg·mL-1时IC50为58·05%。结论:藤茶总黄酮对体外培养的BEL7404细胞有显著的抑制作用。     

替米沙坦对人脐带动脉平滑肌细胞增殖的影响

摘 要 目的： 考察替米沙坦对体外培养的人脐带动脉平滑肌细胞（HUASMCs）增殖的抑制作用及对白细胞介素 6（IL-6）表达的影响。方法: 组织块贴壁法,HUASMCs原代培养,传3代细胞实验。MTT比色法检测同一浓度替米沙坦（50 μg·ml^-1）在不同作用时间（3～96 h）和不同浓度替米沙坦（0.5～500 μg·ml^-1）在同一作用时间（48 h）,对HUASMCs增殖的抑制作用。RT PCR和ELISA法检测低、中、高3种浓度的替米沙坦（1,10,100 μg·ml^-1）对HUASMCs表达IL-6 mRNA和因子的影响。结果: 不同作用时间的替米沙坦（50 μg·ml^-1）对HUASMCs的增殖有抑制作用(P<0.05),作用时间为48 h时,抑制作用最强,抑制率为（29.12±2.89）%。其后的作用时间72 h和96 h的抑制作用与48 h比无显著变化（P>0.05）。不同浓度的替米沙坦对HUASMCs增殖有抑制作用(P<0.05),当浓度为100 μg·ml^-1时,抑制作用最强,抑制率为（41.46±3.36）%。其后各浓度的抑制作用与100 μg·ml^-1比无显著变化（P>0.05）。低、中、高3种浓度的替米沙坦对HUASMCs表达的IL-6 mRNA和IL-6 含量均有抑制作用(P<0.05),并呈浓度依赖性(P<0.05)。结论: 替米沙坦抑制体外培养的HUASMCs增殖,对HUASMCs表达的IL-6 mRNA和因子分泌均有抑制作用。     

漏芦乙醇提取物抑制E2F1的表达调控甲状腺癌细胞的生物行为

摘要：目的:研究漏芦乙醇提取物调控E2F1的表达对甲状腺癌细胞活性、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法:采用50,100,150μg·ml-1浓度的漏芦提取物处理甲状腺癌细胞SW579,噻唑蓝（MTT）和细胞克隆实验检测细胞活性与克隆形成,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭,蛋白质印迹法（Western blot）检测P21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）、E-钙黏蛋白（E-cadherin）、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、转录因子E2F1蛋白表达,实时荧光定量PCR（q PCR）检测E2F1 mRNA表达。在SW579细胞中转染pc DNA3.1-E2F1,并使用漏芦提取物处理,观察过表达E2F1对漏芦提取物作用的细胞活性、凋亡、迁移、侵袭的影响。结果:与对照组(0μg·ml-1)相比,50,100,150μg·ml-1的漏芦提取物明显减少细胞SW579的细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量、E2F1 mRNA、E2F1蛋白表达量,明显提高细胞SW579的凋亡率、P21、caspase-3、E-cadherin蛋白水平（P<0.01）,均呈浓度依赖性。过表达E2F1显著增加漏芦提取物作用的细胞SW579的E2F1表达量、细胞存活率、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数、MMP-2蛋白表达量,明显降低细胞凋亡率、P21、caspase-3、E-cadherin蛋白水平（P<0.01）。结论:漏芦乙醇提取物通过下调E2F1的表达,抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并诱导细胞凋亡。     

马甲子提取物调控HCG18对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

摘要：目的:探索马甲子提取物对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法:分别使用0,25,50,75μg·ml-1马甲子提取物处理宫颈癌细胞SiHa,噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、P21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达,实时荧光定量PCR（qPCR）检测长链非编码RNA（lncRNA）人类白细胞抗原复合体18（HCG18）表达。在细胞中转染si-HCG18,观察抑制HCG18对细胞SiHa增殖、凋亡的影响。在细胞中转染pc DNA 3.1-HCG18,并使用75μg·ml-1马甲子提取物进行处理,探讨过表达HCG18对马甲子提取物诱导的SiHa增殖、凋亡的影响。结果:与0μg·ml-1马甲子提取物组比较,25,50,75μg·ml-1马甲子提取物显著提高SiHa细胞的增殖抑制率、凋亡率、P21、Bax蛋白水平,显著减少Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量及HCG18表达量,且呈浓度依赖性（P<0.05）。抑制HCG18显著减少SiHa细胞HCG18表达量及Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量,显著提高P21、Bax蛋白水平、细胞增殖抑制率、凋亡率（P<0.05）。过表达HCG18能逆转马甲子提取物抑制细胞SiHa增殖、Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达,以及促进细胞SiHa凋亡、P21、Bax蛋白表达的作用。结论:马甲子提取物通过调控lnc RNA HCG18表达抑制宫颈癌细胞增殖和诱导细胞凋亡。     

黄芩苷磷脂复合物固体分散体的药动学研究

摘要：目的:研究黄芩苷磷脂复合物固体分散体在体内的药动学特征。方法:分别灌胃给予SD大鼠黄芩苷、黄芩苷磷脂复合物及其固体分散体,给药剂量为70 mg·kg-1。HPLC法测定黄芩苷血药浓度,绘制药-时曲线,DAS2.0计算药动学参数。结果:黄芩苷磷脂复合物固体分散体的平均达峰浓度Cmax为2.707μg·ml-1,较黄芩苷原料药的Cmax0.745μg·ml-1与磷脂复合物的Cmax2.219μg·ml-1,差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;黄芩苷磷脂复合物固体分散体组AUC0-t27.182 g·h·ml-1,较黄芩苷原料药的AUC0-t7.673 g·h·ml-1与磷脂复合物的AUC0-t20.188 g·h·ml-1,差异均具有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论:黄芩苷磷脂复合物制备成固体分散体后,黄芩苷口服生物利用度得到进一步提高。     

HPLC波长切换法同时测定鼻咽清毒颗粒中8种成分的含量

摘要：目的:建立HPLC法同时测定鼻咽清毒颗粒中8种活性成分的含量。方法:采用Waters XTERRA C18色谱柱（250mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈（A）-0.15%磷酸溶液（B）,梯度洗脱;检测波长为210 nm（重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ）、254nm（3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸）、270 nm（龙胆苦苷）、334 nm（绿原酸、新绿原酸、木犀草苷、蒙花苷）,流速:1.0 ml·min-1,柱温:35℃,进样量:10μl。结果:绿原酸、木犀草苷、蒙花苷、新绿原酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、龙胆苦苷、重楼皂苷Ⅰ和重楼皂苷Ⅱ检测质量浓度的线性范围分别为4.420～44.200μg·ml-1,2.404～24.040μg·ml-1,4.868～48.680μg·ml-1,2.672～26.720μg·ml-1,0.411～4.112μg·ml-1,1.038～10.380μg·ml-1,0.854～8.536μg·ml-1,1.634～16.340μg·ml-1（r值范围0.999 3～0.999 9）;平均加样回收率分别为99.78%,98.95%,99.58%,98.87%,98.42%,99.04%,99.27%,99.17%（RSD<1.0%,n=6）。结论:所建立的方法简便、有效、准确,可用于鼻咽清毒颗粒中上述8种活性成分含量的同时测定。     

HPLC法同时测定宝咳宁颗粒中8个成分的含量

摘要：目的:建立同时测定宝咳宁中苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸铵、白花前胡甲素、白花前胡乙素、黄芩苷、橙皮苷和新橙皮苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml·min-1,检测波长为210 nm（苦杏仁苷）、237 nm（甘草苷、甘草酸铵）、321 nm（白花前胡甲素、白花前胡乙素）、280 nm（黄芩苷、橙皮苷、新橙皮苷）,柱温30℃,进样量20μl。结果:苦杏仁苷、甘草苷、甘草酸铵、白花前胡甲素、白花前胡乙素、黄芩苷、橙皮苷和新橙皮苷检测质量浓度的线性范围分别为20.47～327.52μg·ml-1,3.13～50.05μg·ml-1,1.54～24.67μg·ml-1,11.26～180.19μg·ml-1,6.75～108.00μg·ml-1,7.43～118.88μg·ml-1,3.17～50.69μg·ml-1,4.91～78.59μg·ml-1（r为0.999 3～0.999 9）;平均加样回收率分别为101.2%,101.0%,100.8%,98.6%,101.3%,100.0%,99.2%,100.8%（RSD<2.0%,n=6）。结论:该方法可用于宝咳宁颗粒的质量评价。     

HPLC法同时测定附桂骨痛胶囊中的8个成分的含量

摘要：目的:建立HPLC法同时测定附桂骨痛胶囊中8个成分的含量。方法:采用HPLC法,同时测定附桂骨痛胶囊中芍药苷内酯、芍药苷、阿魏酸、蒿苯内酯、淫羊藿苷、党参炔苷、桂皮酸、桂皮醛的含量,采用Shim-pack GIST C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（B）,梯度洗脱;检测波长:220 nm、280 nm,流速:1.0ml·min-1,柱温:30℃,进样量:10μl。结果:芍药苷内酯、芍药苷、阿魏酸、蒿苯内酯、淫羊藿苷、党参炔苷、桂皮酸、桂皮醛检测质量浓度的线性范围分别为9.125～82.125μg·ml-1、11.215～100.935μg·ml-1、2.266～20.394μg·ml-1、18.120～163.080μg·ml-1、6.280～56.520μg·ml-1、2.821～25.389μg·ml-1、3.181～28.625μg·ml-1、1.220～10.976μg·ml-1（r为0.999 3～0.999 9）;定量限分别为1.023,0.989,1.214,1.362,0.974,0.865,1.033,0.972μg·ml-1;检测限分别为0.402,0.334,0.406,0.447,0.318,0.291,0.351,0.328μg·ml-1;平均加样回收率分别为98.8%,98.5%,98.6%,99.2%,98.5%,99.0%,98.5%,99.3%（RSD分别为1.1%,0.9%,1.3%,0.8%,1.2%,1.0%,0.6%,1.0%,n=6）。结论:该方法简单、有效、结果准确,可用于附桂骨痛胶囊中上述8个成分含量的同时测定。