高效液相色谱法和生物效价测定法在缩宫素注射剂质量控制中的对照研究

目的 采用高效液相色谱法(HPLC)对缩宫素注射剂进行质量控制,同时与传统的生物效价测定法进行比照,观察两种方法的优劣。方法 选取8个企业生产的100个批次的缩宫素注射剂,分别采用HPLC法和生物效价法对样本进行测定,并将结果进行比较,并进一步观察样品的长期稳定性。结果 两种方法检测的缩宫素含量除两家药企外(P=0.027、P=0.011),其他企业生产的缩宫素含量差异无统计学意义(P=0.556、0.637、0.614、0.559、0.315、0.429);8家药企的缩宫素注射剂含量在55.9%～126.1%之间,平均98.5%,其中有三个企业生产的缩宫素注射剂含量相对偏低;缩宫素注射剂储存2年后其效价显著降低,差异有统计学意义(P=0.025)。结论 采用HPLC法对缩宫素注射剂测定,操作相对简便,灵敏度和准确度高,有效避免了生物效价测定法因动物个体差异造成的误差,同时也能将人为测定的误差控制在较小的范围内。另缩宫素注射剂最佳存贮期为2年,时间过长会导致药剂中部分有效成分降解。     

大鼠离体子宫法与高效液相色谱法测定缩宫素效价的相关性分析

目的 探讨大鼠离体子宫法与高效液相色谱法测定缩宫素效价的相关性.方法 采用〈中国药典〉2010年版二部附录缩宫素生物测定法和欧洲药典HPLC法,分别对合成缩宫素标准品溶液和国内不同生产厂家多批样品的缩宫素效价进行测定.结果 两法测定合成缩宫素标准品溶液的缩宫素效价结果吻合;国内4个厂家14批样品测定结果的Pearson相关性分析表明HPLC法与大鼠离体子宫法之间具有显著相关性（P＜0.01,r＝0.802）,但HPLC法测定结果在部分厂家的样品存在明显超出生物检定可信限范围的偏差.结论 无干扰情况下两法结果吻合;HPLC法测定结果在国内部分厂家的样品明显超出生物检定本身允许的误差范围可能主要缘于样品中辅料和杂质的干扰或多肽生物活性的差异.该研究为缩宫素效价测定质量标准的提高提供了参考.     

第3批缩宫素国家标准品的建立

目的 建立首批HPLC含量测定用缩宫素国家标准品。方法 第3批缩宫素国家标准品采用冻干制备。使用核磁共振和HPLC法对缩宫素进行结构确证;采用HPLC法测定待标品的质量分数,并测定待标品水分及氨基酸比值;以缩宫素USP对照品为标准,采用HPLC外标法和大鼠子宫法分别测定待标品的生物效价。结果 经核磁共振和HPLC法确证缩宫素的结构;待标品水分含量为4.8%,各氨基酸比值均在限度范围内,经HPLC检测质量分数为99.69%;待标品经HPLC法测定每支含量为274 IU,经大鼠子宫法测定每支含量为275 IU。结论 建立的待标品可作为第3批缩宫素国家标准品,供缩宫素效价测定及鉴别使用。     

缩宫素效价测定能力验证研究

摘要：目的:全面了解我国缩宫素效价测定的技术水平,并对参加能力验证实验室测定缩宫素效价的能力进行评价。方法:制备能力验证考核样品,并进行均匀性及稳定性考察。各实验室自愿报名参加,按照中国药典2015年版四部通则1210缩宫素生物测定法测定考核样品的效价,对参加实验室的反馈结果进行统计分析,采用z比分数法评价实验室检测能力。结果:能力验证考核样品经均匀性及稳定性考察合格,满足能力验证计划要求。本次能力验证24家实验室中20家实验室的检测结果评定为"满意",满意率为83.3%。结论:本次能力验证可真实地反映参加实验室的检测水平,大多数参加能力验证的实验室具备检测缩宫素效价的能力。     

克拉霉素的高效液相色谱法与微生物效价测定法分析比较

目的 :比较克拉霉素含量测定的HPLC法和微生物效价测定法两种方法的平行性。方法 :采用HPLC法和微生物法测定 3批样品的标示量。结果 :HPLC法测定的 3批样品的标示量为 97.98% ,99.83 % ,10 1.5 % ,微生物效价测定法为 97.3 % ,97.6% ,98.5 %。结论 :两种结果经t检验分析 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。     

HPLC法和生物测定法测定鲑鱼降钙素肠溶胶囊含量的比较

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法测定鲑鱼降钙素肠溶胶囊中降钙素的含量,并与生物测定法进行比较。方法:HPLC法色谱柱为依利特ODS2 C18,流动相为0.4%四丁基氢氧化铵水溶液(pH 3.8)-乙腈(334∶166,V/V),流速为1 ml/min,检测波长为220 nm;生物测定法参照《中国药典》相关方法进行。结果:HPLC法降钙素检测质量浓度线性范围为5²00μg/ml(r=0.999 3),辅料对主药测定无干扰,精密度试验RSD<5%,平均回收率为96.5%,含量测定结果为99.96%;生物测定法可信限率为28.84%,虽符合要求(<45%),但含量测定结果为111.62%,估计与制剂中含吸收促进剂有关。结论:与生物测定法相比,HPLC法测定鲑鱼降钙素肠溶胶囊含量,操作简便、成本低、重复性好,结果更为可靠。     

缩宫素的毛细管区带电泳法测定

建立了毛细管区带电泳法测定缩宫素.采用未涂层石英毛细管,25 mmol/L磷酸二氢钾溶液(以磷酸调至pH 4.0)为运行缓冲液,分离电压15 kV,检测波长220 nm.结果缩宫素在5.4～135.2 IU/ml范围内线性关系良好,检测限为0.8 IU/ml,主峰迁移时间的RSD为2.4%,主峰校正峰面积(A/t)的RSD为2.8%.该法所测定缩宫素效价及纯度,与HPLC法比较,结果基本一致,并且本法对缩官素具有更高的杂质分离度.     

缩宫素注射液效价测定的不确定度评定

目的:建立缩宫素注射液效价测定的不确定度评定方法。方法:建立评定缩宫素注射液效价测定的不确定度的数学模型,分析其测定不确定度的影响因素,并将由之引起的不确定度分量进行量化分析,计算扩展不确定度。结果:缩宫素注射液效价测定的扩展不确定度为0.20 u/ml,其效价可表示为(9.29±0.20)u/ml,包含因子K=2。结论:该方法适用于缩宫素注射液效价测定的不确定度评定。     

缩宫素注射液的有关物质研究

目的:针对缩宫素注射液现行标准中未对注射液中有关物质进行控制的情况,建立了缩宫素注射液有关物质的HPLC测定法,并对2010年国家评价性抽验中178批缩宫素注射液样品进行了测定。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以0.1 mol.L-1磷酸盐缓冲液作为流动相A,以水-乙腈(1∶1)作为流动相B,梯度洗脱,柱温40℃,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为220 nm。结果:在本文色谱条件下,主峰和杂质峰能得到良好的分离;缩宫素在浓度0.36～23.04 IU.mL-1范围内峰面积与浓度呈良好线性关系,r=0.9999;平均回收率99.1%(n=9)。178批缩宫素注射液总杂质为25.9%～36.0%,单个最大杂质为6.1%～13.0%。结论:该法专属性强,灵敏、准确,可作为缩宫素注射液的质量控制方法。现行标准不能有效控制药品质量,体现在有关物质偏高。研究表明制剂中的有关物质部分是由原料引入,因此,必须修订并提高原料和制剂的质量标准,增加有关物质检查。建议原料生产企业采用固相合成工艺的缩宫素提高原料质量,加强生产过程中各个环节的质量意识。     

小鼠肛尾肌作为缩宫素生物检定的标本

为测定缩宫素在血浆及组织提取液中的浓度,免疫测定法在很大程度上取代了生物检定法。但是生物检定法仍作为合成缩宫素定量测定的常规方法。虽然英国药典(1980版)列出了缩宫素生物检定的三种标本:鸡血压、大鼠子宫、泌乳大鼠射乳。但是每种标本都存在一定问题。作者报道另一种实用而价廉的可用于合成缩宫素生物检定的标本——雄性小鼠的肛尾肌。业已表明,低浓度的缩     

宫缩乏力性产后出血使用缩宫素联合米索前列醇的效果分析

目的：分析宫缩乏力性产后出血使用缩宫素联合米索前列醇的效果。方法：随机将60例宫缩乏力性产后出血分成两组，对照组采用缩宫素治疗，实验组采用缩宫素联合米索前列醇治疗。结果：实验组临床治疗总有效率显著高于对照组（P＜0.05）；在不良反应发生率方面两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：临床中在对宫缩乏力性产后出血进行治疗时，缩宫素联合米索前列醇具有比较显著的临床效果，安全可靠，具有临床推广价值。     

畲药山里黄根品质生物效价检测

摘 要 目的：建立畲药山里黄根的抑菌效价测定方法,测定山里黄根的抑菌效价值。方法: 采用抑菌试验考察山里黄根水提液对5种标准菌株（大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、铜绿假单胞菌）的抑菌性;采用微生物比浊仪建立山里黄根生物效价评价方法,并与HPLC法测得的竹节参皂苷Ⅳa含量进行对比。结果: 山里黄根对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌敏感度较高;所建立的比浊法回收率在90.0%～110.0%范围内,可信限率均在5%以内;山里黄根中竹节参皂苷Ⅳa含量与效价测定结果不尽相同。结论: 所建立的生物效价检测方法可作为畲药山里黄根质量评价的方法之一。     

HPLC法测定缩宫素注射液中三氯叔丁醇的含量及其应用

目的: 针对缩宫素注射液现行标准中未对抑菌剂三氯叔丁醇进行控制的情况,建立缩宫素注射液中三氯叔丁醇的HPLC测定法,并对不同企业生产的401批缩宫素注射液样品进行测定。方法: 采用Waters XBridge-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250mm,5μm),以0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液作为流动相A,以水-乙腈(1:1)作为流动相B,梯度洗脱,柱温40℃,流量为1.0 mL·min^-1,检测波长为220 nm。结果: 在选定的色谱条件下,三氯叔丁醇主峰和缩宫素主峰、杂质峰分离良好;三氯叔丁醇在浓度15.62~2000μg·mL^-1范围内峰面积与浓度呈良好线性关系,r=1.0000;平均回收率98.6% (n=9)。401批缩宫素注射液中,三氯叔丁醇含量为0~1.78 mg·mL^-1,不同企业间差异显著,且与处方量有一定差异。结论: 该法专属性强,灵敏、准确,可作为缩宫素注射液中三氯叔丁醇的质量控制方法。市售制剂中的三氯叔丁醇含量在企业之间、企业内批间差异较大,且与处方标示量对应性较差。因此,有必要在缩宫素注射液中,增加三氯叔丁醇含量的检测项,以监控该品种中抑菌剂含量,促进企业稳定生产工艺,确保产品质量稳定、安全、有效。     

高效液相色谱法测定土霉素片的含量

土霉素为广谱抗生素,属四环素类抗生素.2000年版<中国药典>二部[1]收载有盐酸土霉素及其制剂,含量测定采用HPLC.土霉素及其制剂的含量仍采用生物测定法[2].生物测定法操作繁琐,费时,误差率比较大,其他测定方法未见报道.为寻找快速、准确、方便、省时的测定方法,本实验利用HPLC对土霉素片进行含量测定.     

麦迪霉素化学效价测定法

麦迪霉素的效价一般用生物测定法测定,结果准确但测定时间长,尤其不能满足生产中发酵液效价测定对时间上的要求。本文所述化学效价测定法经在生产中使用,结果基本与生物效价法相符。 试验运用麦迪霉素与27N硫酸作用水解生成紫色产物,其颜色深浅与麦迪霉素强度之间关系符合比耳定律的原理,采用分光光度法测定。样品为四川抗菌素工业研究所提供的标准品及四川长征制药厂试验室生产的麦迪霉素。测定用72型分光光度计。     

注射用两性霉素B脂质体效价测定法的改进

目的 建立准确测定注射用两性霉素B脂质体效价含量的生物测定方法,解决现有质控标准中培养体系下无法形成抑菌圈的难点问题。方法 效价测定方法：管碟法,沙氏培养基(含1%氯化钠)pH6.0~6.2,磷酸盐缓冲液(pH7.0,含1%聚山梨醇),检定菌为啤酒酵母(ATCC9763)。桥接液相方法：色谱柱：CAPCELLPAK MG ⅡC18(250mm×4.6mm, 5μm);流动相：乙腈：磷酸溶液(pH1.00±0.05)(370:630, V/V);流速：0.8mL/min;柱温：25℃;检测波长：383nm;进样量：10μL。结果 改进后的方法：抑菌圈边缘清晰,且其抑菌圈直径大小符合生物测定法的方法学要求;在1.0~11.9u/mL浓度范围内线性良好(r=0.9995);可信限率符合中国药典要求(不大于5%);通过HPLC间接桥接方式验证,效价含量测定结果准确,可满足预期用途。结论     

HPLC测定缩宫素原料药的含量

目的 采用HPLC测定缩宫素原料药的含量.方法 色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μn),流动相A为15.6 g·L-1磷酸二氢钠,流动相B为50％乙腈,流速1.0 mL· min-1,检测波长220 nm,进样量25 μL,外标法定量.结果 缩宫素的线性范围为150～350 μg· mL-1(r=0.9992);定量限为0.025μg· mL-1.结论 所用方法简便、快速、准确,专属性好,可用于缩宫素原料药的含量测定.     

烟酸注射剂质量评价研究

摘要：目的:评价国产烟酸注射剂的质量。方法:采用法定标准检验方法与探索性研究相结合,对抽验样品进行研究,分析检验结果,综合评价产品质量及其质量标准。结果:按现行质量标准对25批样品进行检验,合格率为100%。探索性研究建立了HPLC法测定烟酸注射剂含量,并同标准方法（UV法）进行比较,两种方法测定结果间的差异无统计学意义（P>0.05）。建立了HPLC法测定烟酸原料和注射剂的有关物质,结果显示注射用烟酸中杂质检出个数与杂质总量多于其标准方法,各企业原料及制剂中杂质个数和杂质含量相当,按拟定限度均符合规定。对烟酸注射剂进行血管刺激、热原、异常毒性、溶血与凝聚等方面考察,结果显示该产品有一定血管刺激性,其余各项指标均符合规定。结论:目前烟酸注射剂的产品质量状况较好,现行质量标准存在不足,建议完善或补充有关物质检查方法。     

产前应用缩宫素对新生儿高胆红素血症的影响观察

目的观察产前应用缩宫素对新生儿高胆红素血症发生率的影响。方法产前应用缩宫素孕妇分娩的足月新生儿48例为观察组,未用缩宫素孕妇分娩的新生儿48例为对照组,两组均于出生后48h采静脉血测定血清总胆红素值,并对检测结果进行统计学处理。结果观察组高胆红素血症发生率为37.5%,对照组为22.9%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;产前应用不同剂量的缩宫素的孕妇,分娩的足月新生儿高胆红素血症发生率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论产前应用缩宫素明显增加新生儿高胆红素血症的发生率,避免或减少缩宫素的使用,及早监测新生儿血清胆红素浓度并进行有效的干预,能减少或减轻新生儿高胆红素血症。     

胃蛋白酶片质量分析及探索性研究

目的：评价国内不同企业生产的胃蛋白酶片的质量,并从溶出线、纯度、比活力等方面进行探索性研究,为企业提高产品质量提供改进方法。方法：采用4种溶出介质考察各企业产品的溶出行为;采用HPLC法,以1.7mol?L-1硫酸铵磷酸盐缓冲液（pH7.0）为流动相,梯度洗脱的方法测定胃蛋白酶片的纯度,并与SDS-PAGE蛋白电泳进行比对;采用蛋白质测定法与效价测定法对比活力进行研究。结果：（1）53批样品中,溶出度最大值为112%,最小值为28%;（2）HPLC结果与SDS-PAGE电泳结果显示胃蛋白酶为多组份物质;（3）原料比活力为12.2~13.2单位?mg -1蛋白,片剂比活力为8.0~15.3 单位?mg -1蛋白。结论：胃蛋白酶片现行质量标准安全性和有效性指标控制不足,建议企业加强药品生产全过程风险管理,降低产品批次间的批间差异,进一步提高制剂工艺的稳定性。本文为全面评价胃蛋白酶片的质量和完善其质量标准提供借鉴和参考。