体外观察维甲酸对NIH/3T3细胞的抑制作用

目的评价维甲酸(RA)对NIH/3T     

SRSV/3T3和NIH/3T3细胞膜的分离和蛋白质组分的初步比较

应用甘油低渗两相分配法分离了SRSV/3T3细胞质膜(SM)和NIH/3T3细胞质膜(NM)。经Na~+、K~+-ATP酶和葡萄糖-6-磷酸酶等标志酶活性鉴定,表明SM和NM纯度较高。经SDS-PAGE分析比较,发现SM和NM的蛋白质组分有较明显差异。SM有7种独特的组分,分子量分别为2.29×10~(-22)、2.18×10~(-22)、9.79×10~(-23)、9.60×10~(-23)、8.63×10~(-23)、5.49×10~(-23)和4.78×10~(-23)kg。NM有两种特有的组分(1.15×10~(-22)和4.17×10~(-23)kg)。在彼此共有的蛋白质组分中,也有许多组分在含量和电泳迁移速度上存在着程度不同的区别。     

体外观察维甲酸对NIH/3T_3细胞的抑制作用

目的　评价维甲酸 (RA)对NIH/3T3 细胞生长的影响。方法　体外观察 5种浓度RA对NIH/3T3 细胞生长的作用。结果　 5种浓度的RA均能抑制NIH/3T3 细胞的生长 ,且随着浓度的升高 ,RA抑制细胞增殖的作用增强。结论　RA能抑制NIH/3T3 细胞的增殖     

Galectin-3重组真核表达载体的构建及其在NIH/3T3细胞中的表达

目的:构建半乳糖凝集素-3(Gal-3)的真核表达载体,在NIH/3T3细胞中表达,并检测其表达?方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人肿瘤细胞克隆Gal-3基因,插入真核表达载体pEGFP-N1中,通过酶切和测序鉴定重组载体的正确性;采用脂质体转染技术将重组质粒pEGFP-Gal-3瞬时转染NIH/3T3细胞,经荧光和Western blot方法检测Gal-3表达,MTT法检测Gal-3对NIH/3T3细胞增殖的影响?结果:限制性内切酶鉴定和核酸序列测序证实成功构建含Gal-3的重组真核表达载体pEGFP-Gal-3?以重组质粒瞬时转染NIH/3T3细胞,检测到Gal-3蛋白表达,并证实Gal-3蛋白促进NIH/3T3细胞增殖?结论:成功构建的pEGFP-Gal-3真核表达载体在小鼠NIH/3T3细胞中成功表达,并促进NIH/3T3细胞增殖?     

CX3CL1/CX3CR1表达异常与复发性流产关系研究

目的 探讨CX₃CL1/CX₃CR1的表达与复发性流产的关系。方法 选择2022年1月～10月安丘市人民医院妇科门诊就诊的复发性流产患者为实验组，共30例，主动要求终止妊娠的健康早孕患者为对照组，共30例。刮宫后获取两组绒毛及蜕膜组织，免疫组化观察CX₃CL1和CX₃CR1的表达情况。结果 实验组绒毛合体滋养层细胞及蜕膜组织中CX₃CL1的表达强度均明显高于对照组(P<0.05)。实验组和对照组中的绒毛及蜕膜组织中均有CX₃CR1表达，两组表达强度相似(P>0.05)。结论 CX₃CL1/CX₃CR1在维持正常妊娠中起重要作用，CX₃CL1的过度表达与复发性流产有关。     

黄地安消胶囊调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗

目的:观察黄地安消胶囊改善HepG2细胞胰岛素抵抗的分子生物学机制.方法:MTT实验分离出黄地安消胶囊含药血清最佳作用浓度和作用时间,免疫荧光技术检测p-IRS-1、PI3 K、p-Akt、p-GSK-3β的表达情况;RT-PCR技术检测细胞中IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β的mRNA表达,Western blot技术检测细胞中p-IRS-1、PI3 K、p-Akt、p-GSK-3β的相对表达.结果:与正常组相比,模型组中IRS-1、PI3K、Akt表达降低(P<0.05);GSK-3β表达升高(P<0.05);与模型组相比,黄地安消胶囊含药血清组IRS-1、PI3K、Akt升高(P<0.05),GSK-3β表达降低(P<0.05).结论:黄地安消胶囊可能通过调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路调节蛋白活性,促进糖原合成,降低血糖,改善胰岛素抵抗.     

VEGF-C/VEGF-D/VEGFR-3信号通路与肿瘤淋巴转移

侵袭和转移是肿瘤恶性特征的主要表现,是导致肿瘤患者死亡的主要原因。经淋巴管转移为多种肿瘤早期的转移方式。随着一些特异性淋巴管内皮细胞分子被发现,对肿瘤淋巴管系统的生成及其与肿瘤的生物学行为有了进一步的认识,尤其是新近对肿瘤淋巴管生成机制的研究表明,VEGF-C和VEGF-D作为目前公认的主要淋巴管生成因子,经与受体     

FEV3/FVC在肺功能检查中临床意义的研究

目的 研究FEV3/FVC在肺功能检查中的临床意义.方法 将608人分为A、B、C三组,A组FEV1/FVC、FEV3/FVC正常（n=208）,B组仅FEV3/FVC下降（n=198）,C组FEV1/FVC下降（n=202）,观察各组肺功能各项指标的变化.结果 与A组比较,B组有较高的TLC（96.5±15.3％ vs 99.5±18.3％,P＜0.01）,RV （112.5±32.1％ vs 101.3±26.6％,P＜ 0.01）,RV/TLC（115.8±27％vs 101.3±31.3％,P＜0.01）.有较低的FEV1 （82.4±16.7％ vs 90.2±13.5％,P＜0.01）,IC（98.2±21.5％ vs 92.5±31.2％,P＜0.01）,DLCO （80.7±19.4％ vs 73.2±16.8％,P＜0.01）.B组的年纪则更偏大些（57.2±11.3 vs 61.2±12.5,P＜0.01）.B组与C组比较,C组有更高的TLC、RV、RV/TLC改变P＜0.01）,而FEV1、IC、DLCO的降低更明显,两组比较有显著差异（P＜0.01）.结论 FEV3/FVC应在肺功能中常规检查,FEV3/FVC的单独下降可能提示气道早期轻度功能障碍.     

新风胶囊通过miR-23a-3p/PTEN/PI3K/AKT/mTOR抑制骨关节炎CD4+T与软骨细胞共培养的免疫炎症

目的 观察新风胶囊（XFC）含药血清通过调控miR-23a-3p /PTEN/PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制骨关节炎（OA）CD4+T与软骨细胞共培养中免疫炎症反应的作用机制。方法 选取30例OA患者（OA组）及30例正常人（NC组）检测miR-23a-3p、10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（AKT）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的表达,观察临床指标：红细胞沉降率（ESR）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、IgA、IgG、IgM、补体 C3、补体C4的表达,并观察通路与临床指标的相关性。观察 30 例 OA 患者经 XFC 治疗后通路及临床指标的变化。分离及提取 OA-CD4 +T 细胞,transwell小室培养OA-CD4+T细胞与OA-CH,SD大鼠给药灌胃制备XFC含药血清;采用CCK8法检测OA-软骨细胞的细胞增殖;双荧光素酶报告实验分析miR-23a-3p和PTEN的靶向关系;RT-PCR技术检测共培养细胞中miR-23a-3p、PTENmRNA、PI3KmRNA、AKTmRNA、mTORmRNA 的表达;采用 ELISA 法检测 IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的水平;Western blotting 检测PTEN、PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达。结果 与NC组相比,OA组miR-23a-3p、PTEN、PI3K、AKT、IL-1β、IL-6、TNF-α表达显著上调,而PTEN、IL-10表达显著下调（P<0.01）;相关性分析表明：miR-23a-3p与IL-6呈正相关（P<0.01）,PI3K与IL-10呈正相关,mTOR与IL-6、IL-10、补体C3、补体C4呈正相关（P<0.01或P<0.05）;加入XFC含药血清,miR-23a-3p及PI3K/AKT/mTOR通路被抑制,L-1β、IL-6、TNF-α表达水平下降、IL-10表达水平升高（P<0.01）;Model组miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平升高,PTEN、IL-10表达水平降低（P<0.01）;miR-23a-3p经过表达后,miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR、IL-1β、IL-6和TNF-α表达水平显著升高,PTEN、IL-10表达水平显著降低（P<0.01或P<0.05）;XFC组IL-1β、IL-6、TNF-α表达降低,IL-10表达升高,miR-23a-3p、PI3K、AKT、mTOR表达下调,PTEN表达上调（P<0.01或P<0.05）。结论 XFC可通过下调miR-23a-3p的表达,抑制PTEN/PI3K/AKT/mTOR通路的活化,改善IL-1β、IL-6,IL-10和TNF-α的表达,降低OA患者炎症反应。     

唾液酸Tn抗原与半乳糖凝集素-3在膀胱癌 PI3K/Akt/mTOR信号通路中的研究进展

膀胱癌为泌尿系统最常见的肿瘤之一,其发生率呈现上升趋势。研究证实唾液酸Tn(sialyl Tn, sTn)抗原与半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在膀胱癌中高表达,且与不良预后相关,sTn抗原与Galectin-3可通过磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase, PI₃K)/蛋白激酶B(protein kinase B, PKB),通常也被称为Akt/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路在膀胱癌的发生、发展中发挥作用。本文就sTn抗原与Galectin-3在膀胱癌PI₃K/Akt/mTOR通路中的进展进行综述。     

剖宫产手术L2/3和L3/4节段腰麻盐酸布比卡因用量分析

目的 探讨剖宫产手术L2/3和L3/4不同节段腰麻所需盐酸布比卡因的用量,为临床应用提供参考.方法 选取2018年2月至2020年2月于阜阳市妇女儿童医院行择期剖宫产产妇170例,按照随机数字表法,分为A组、B组、C组、D组和E组,每组34例.A、B组行L2/3间隙穿刺,分别注射0.5％盐酸布比卡因1.5 mL、2.0 mL,C、D组行L3/4节段穿刺,分别注射0.5％盐酸布比卡因1.5 mL、2.0 mL,E组行L3/4节段穿刺注射0.5％盐酸罗哌卡因2.0 mL,记录各组麻醉后生命体征[收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血氧饱和度(SpO2)]变化,比较各组麻醉效果和不良反应发生情况,检测各组麻醉前、麻醉后45分钟、术后1天血清皮质醇(Cor)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平变化.结果 麻醉后,各组SBP、DBP、SpO2均有不同程度下降,但组间差异无统计学意义(P>0.05),各组麻醉后10分钟SBP、DBP、SpO2值均低于麻醉前(P<0.05);A、D组的麻醉有效率均为100.00％,优于其余各组(P<0.05);C组麻醉平面到达T6时间、追加利多卡因例数长,并多于其余各组(P<0.05);B组恶心发生率高于其余各组(P<0.05),E组肌松效果差(P<0.05);B组麻醉后45分钟、术后1天血清Cor、hs-CRP水平高于其余各组(P<0.05),而C、E组麻醉45分钟后,血清Cor水平低于A、B、D组(P<0.05);各组新生儿出生后1分钟、5分钟Apgar评分比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 采用0.5％的盐酸布比卡因1.5 mL于L2/3节段或2.0 mL于L3/4节段实施腰麻穿刺在剖宫产中麻醉效果较佳,副反应较少,可显著减轻手术引起的应激反应.     

大鼠压疮局部不同温度治疗对PI3K/Akt/GSK3β 信号通路的影响

目的 探讨不同局部温度对大鼠压疮PI3K/Akt/GSK3β 通路的影响，为压疮的临床治疗提供基础实验依据。方法 用缺血再灌注（IRI）法复制大鼠压疮模型。将40 例无特定病原体级（SPF）健康成年雄性SD 大鼠随机分为4 组：假手术组（Sham 组）、常温IRI 组（NTI）、低温IRI 组（LTI）和高温IRI 组（HTI）。HE 染色观察骨骼肌病理变化；Western blot 检测Akt、GSK3β 的磷酸化情况；免疫荧光观察p-Akt、p-GSK3β 的表达情况。TUNEL 检测大鼠压疮组织细胞凋亡情况。结果 与常温IRI 组比较，高温IRI 组的骨骼肌细胞病理损伤加重，凋亡细胞增加，Western blot 和免疫荧光结果显示Akt 和GSK3β 的磷酸化水平均降低（P <0.05）；而低温IRI 组骨骼肌细胞病理损伤减轻，Western blot 和免疫荧光结果显示Akt 和GSK3β 的磷酸化水平均上升（P <0.05）。结论 局部高温能抑制Akt 和GSK3β 的磷酸化水平而加重大鼠压疮损伤，局部低温能提高Akt 和GSK3β 的磷酸化水平减轻大鼠压疮损伤。     

PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌中的研究进展

胃癌的形成是一个十分复杂的过程,不但涉及到基因的突变,还涉及到细胞内信号传导通路的改变.PI3K/AKT/mTOR通路是细胞内重要的信号传导通路之一,该通路活化可以抑制多种刺激诱发的胃癌细胞凋亡,促进细胞周期进展,促进血管形成,参与胃癌的侵袭和转移[1-2].现就PI3K/AKT/mTOR通路的结构特点及在胃癌发生、发展中作用的研究进展进行综述.     

葛根素通过抑制PI3K/Akt/GSK-3β信号通路诱导人肾癌786-O细胞凋亡的研究

目的 研究葛根素对人肾癌786-O细胞凋亡的影响及其机制。方法 分别以DMSO(空白对照组)、不同浓度葛根素10、20、40 mg/L和LY294002(PI3K抑制剂)15 mg/L干预对数生长期人肾癌786-O细胞48 h，采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率，流式细胞术检测细胞凋亡水平，Western blot法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(Tyr317) [p-PI3K(Tyr317)]、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(Ser473)[p-Akt(Ser473)]、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、磷酸化GSK-3β (Ser21)[p-GSK-3β(Ser21)]、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、激活型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax）表达。结果 与空白对照组比较，葛根素10、20、40 mg/L组和LY294002 15 mg/L组786-O细胞增殖抑制率升高[(17.04±2.92)%、(26.48±4.77)%、(42.79±6.81)%、(35.73±6.12)%比(3.47±0.53)%，P<0.01]、凋亡率升高[(13.72±2.38)%、(30.41±4.05)%、(55.39±6.72)%、(36.08±4.32)%比(2.64±0.51)%，P<0.01]；。与空白对照组比较，葛根素20、40 mg/L组和LY294002 15 mg/L组786-O细胞p-PI3K(Tyr317)、p-Akt(Ser473)、p-GSK-3β(Ser21)、Bcl-2表达下调[p-PI3K(Tyr317)：(0.58±0.13)、(0.32±0.07)、(0.38±0.08)比(1.03±0.24)；p-Akt(Ser473)：(0.25±0.06)、(0.09±0.03)、(0.11±0.03)比(0.51±0.12)；p-GSK-3β(Ser21)：(0.12±0.03)、(0.07±0.02)、(0.09±0.03)比(0.58±0.13)；Bcl-2：(0.31±0.08)、(0.18±0.05)、(0.21±0.07)比(0.48±0.12)，P均<0.01]，Caspase-9、Cleaved Caspase-3、Bax表达上调[Caspase-9：(0.37±0.08)、(0.66±0.13)、(0.58±0.11)比(0.17±0.04)；Cleaved Caspase-3：(0.25±0.06)、(0.72±0.16)、(0.43±0.12)比(0.11±0.03)；Bax：(0.36±0.08)、(0.62±0.12)、(0.20±0.05)比(0.08±0.02)，P均<0.01]，PI3K、Akt、GSK-3β磷酸化率降低[PI3K磷酸化率：(0.55±0.15)、(0.29±0.08)、(0.34±0.09)比(0.92±0.28)；Akt磷酸化率：(0.24±0.07)、(0.09±0.03)、(0.11±0.04)比(0.53±0.14)；GSK-3β磷酸化率：(0.14±0.04)、(0.08±0.03)、(0.10±0.04)比(0.62±0.15)，P均<0.01]，Bax/Bcl-2比值升高[(1.16±0.27)、(3.41±0.65)、(0.95±0.22)比(0.17±0.04)，P<0.01]。与LY294002 15 mg/L组比较，葛根素40 mg/L组786-O细胞增殖抑制率升高[(42.79±6.81)%比(35.73±6.12)%，P<0.05]、凋亡率升高[(55.39±6.72)%比(36.08±4.32)%，P<0.01]，Cleaved Caspase-3、Bax表达上调[Cleaved Caspase-3：(0.72±0.16)比(0.43±0.12)；Bax：(0.62±0.12)比(0.20±0.05)，P均<0.01]，Bax/Bcl-2比值升高[(3.41±0.65)比(0.95±0.22)，P<0.01]，两组间其他指标比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论 葛根素具有诱导人肾癌786-O细胞凋亡的作用，其机制可能与抑制PI3K/Akt/GSK-3β信号通路有关。     

氯化锂对脑缺血预处理后PI3K/AKT/GSK3β通路的影响机制

目的：研究脑缺血预处理（CIPC）中氯化锂对PI3K/AKT/GSK3β信号通路调节变化及影响。方法：制作脑缺血、CIPC及氯化锂干预模型,进行神经功能缺损评分;TTC法脑组织染色计算脑梗死体积;应用Western blotting检测AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β（ser9）、Mcl-1的蛋白表达。结果：与脑缺血组比较,氯化锂组及CIPC组p-AKT、Mcl-1、p-GSK-3β（ser9）的蛋白表达均增高,神经功能缺损评分及脑梗死体积降低（P〈0.05）;与CIPC组比较,氯化锂组进一步提高了p-AKT、Mcl-1、p-GSK-3β（ser9）的蛋白表达、降低了神经功能缺损评分及脑梗死体积（P〈0.05）。结论：脑缺血预处理增高p-GSK-3β（ser9）表达,增加p-AKT、Mcl-1的表达。氯化锂可加强脑缺血预处理的这一神经保护作用。     

小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

 目的构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法提取小鼠乳腺上皮细胞系
C127 的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测
序并转染到腺样囊性癌细胞系ACC-2 中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用免疫荧光显微镜观察pEGFP-m3D3/LYRIC
在腺样囊性癌ACC-2 细胞内的定位。结果3D3/LYRIC全长基因序列克隆到真核表达载体pEGFP-C1 中,酶切鉴定片段大小
为1 740 bp。Western blot 检测到融合蛋白GFP-m3D3/LYRIC 表达,分子量约为91 kDa。pEGFP-C1-m3D3/LYRIC主要在细胞质
内定位,在细胞核内未见表达。结论成功构建了3D3/LYRIC全长基因真核表达载体,pEGFP-m3D3/LYRIC 蛋白主要定位于
细胞质内。     

PI-3K-Akt/PKB信号转导通路与宫颈癌

PI-3K-Akt/PKB信号转导通路作为细胞内重要信号转导通路之一,能够调节基因的表达及细胞周期、抑制细胞的凋亡,与人类多种肿瘤的发生、发展密切相关。以PI-3K-Akt/PKB信号转导通路中关键分子为靶点的治疗宫颈癌策略方面的研究近年来备受关注。本文就PI-3K-Akt/PKB信号转导通路的组成与功能、调节以及其在宫颈癌防治方面的研究进展作一综述。