解毒化浊和胃方阻断大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变的分子生物学机制

目的:观察解毒化浊和胃方对大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变(PLGC)的增殖作用的影响,探讨解毒化浊和胃方阻断大鼠CAG PLGC发展的分子生物学机制。方法:将75只大鼠分为空白对照组、模型对照组、治疗前模型对照组、中药组、西药组,每组15只,除空白对照组外,各组以甲基亚硝基胍造模,造模后模型组给予双蒸水灌胃,中药组给予解毒化浊和胃方灌胃,西药组给予叶酸灌胃。采用免疫组化及原位分子杂交标记的方法测定EGFR蛋白翻译和mRNA转录水平以及病变粘膜组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、p21H-ras基因蛋白。结果:对照组PLGC组织EGFR蛋白翻译和mRNA转录水平均有过表达,表达随病变的进展而递增;解毒化浊和胃组EGFR蛋白及mRNA的表达下调,PCNA指数、p21H-ras基因蛋白阳性指数明显低于对照组(P<0．05)。结论:解毒化浊和胃方对大鼠CAG胃癌前病变细胞的增殖有良好的阻断作用,该作用可能与下调PLGC组织EGFR蛋白及mRNA的表达有关。     

气阴两虚型胃癌前病变凋亡相关基因的表达及中药的影响

目的 探讨气阴两虚证型患者凋亡相关基因的表达,观察善胃Ⅲ号治疗气阴两虚型胃癌前病变的疗效,并从细胞凋亡和相关基因的表达方面探讨其作用机理.方法 77例患者均经胃镜与病理检查证实为胃癌前病变,随机分成两组,光镜观察治疗前后胃黏膜的增生情况,并采用Tunel法检测细胞凋亡,免疫组化检测fas、fas-L、bcl-2、bax的表达.结果 治疗组(善胃Ⅲ号,气阴两虚型)有效率79.31%(29例),优于对照组(猴头菌片)29.17%(48例).治疗组细胞凋亡率和fas-L、bax表达率分别从(15.46±11.91)%、46.67%、42.88%升高至(71.43±19.87)%、76.92%、68.42%;而bcl-2表达率从87.50%下降至20.00%.对照组猴头菌片对上述指标无明显作用.结论 善胃Ⅲ号能有效治疗气阴两虚型胃癌前病变,明显诱导胃癌前病变胃黏膜细胞凋亡,增强fas-L、bax表达而抑制bcl-2表达.     

消痰和胃方对胃癌前病变大鼠IL-1β蛋白及mRNA表达的影响

目的观察消痰和胃方对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织中IL-1β蛋白及基因表达的影响。方法 Wistar大鼠50只随机分为正常组、模型组、验证组、维酶素组、中药组5组,每组10只。除正常组外其他4组采用高剂量N-甲基-N'硝基-N-亚硝基胍(MNNG)综合造模法干预32周建立大鼠胃癌前病变(PLGC)模型。验证组处死后取胃,验证造模成功,其余4组按照各自给药方法干预12周。Western Blot法检测4组大鼠胃黏膜组织中白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达含量;RTPCR法检测4组大鼠胃黏膜组织中IL-1βmRNA表达含量。结果模型组、维酶素组IL-1β蛋白及IL-1βmRNA表达较正常组显著升高(P0.05,P0.01)。中药组IL-1β蛋白表达较模型组、维酶素组下降(P0.05),与正常组相比差异无统计学意义(P0.05);中药组IL-1βmRNA平均相对表达量较模型组显著降低(P0.01)。结论消痰和胃方可下调胃癌前病变大鼠IL-1β蛋白及基因表达。     

善胃I号对血瘀热毒型胃癌前病变凋亡相关基因表达的影响

【目的】探讨血瘀热毒证型患者凋亡相关基因的表达,观察善胃I号治疗血瘀热毒型胃癌前病变、促使胃癌前病变向正常胃黏膜逆转的作用,并从细胞凋亡和相关基因表达方面探讨其作用机理。【方法】82例患者均经胃镜与病理检查证实为胃癌前病变,随机分成2组,光镜观察治疗前后胃黏膜的增生情况,并采用原位末端标记法（Tunel）检测细胞凋亡,免疫组化检测fas、fas-L、bel-2、bax的表达。【结果】治疗组（善胃I号,血瘀热毒型）有效率85．29％（34例）,优于对照组（猴头菌片）29．17％（48例）。治疗组细胞凋亡率和fas、fas-L表达率分别从（20．13±11．23）％、42．88％、40．00％升高至（39．45±16．24）％、72．00％、60．00％;而bcl-2表达率从88．46％下降至24％（P〈0．05）。对照组猴头菌片无明显作用。【结论】血瘀热毒证型的发生可能与细胞凋亡相关基因有关,善胃T号能有效治疗血瘀热毒型胃癌前病变,明显诱导胃癌前病变细胞凋亡,增强fas、fas-L表达而抑制bel-2表达。     

胃痞消对胃癌前病变大鼠胃黏膜微血管超微结构的影响

【目的】观察胃痞消对脾虚型胃癌前病变（PLGC）模型大鼠胃黏膜微血管超微结构的影响。【方法】将SD大鼠分为6组：正常对照组,模型组,维酶素组（剂量为0．2 g·kg－1·d－1）,胃痞消高、中、低剂量组（剂量为15、7．5、3．75 g·kg－1·d－1）。采用N－甲基－N’－硝基－N’－亚硝基胍（MNNG）溶液（200μg／mL）自由饮用、小承气汤（2 mL／只,生药1 g／mL）灌胃及饥饱失常的多因素造模方法复制大鼠脾虚PLGC模型,连续18周,观察各组胃组织病理变化,并采用透射电镜观察各组大鼠胃黏膜微血管的超微结构。【结果】成功造模;电镜及病理检查结果显示：模型组大鼠胃黏膜微血管内皮细胞严重肿胀,血管管腔严重狭窄甚至闭塞,基底膜毛糙不连续,周细胞肿胀甚至退变消失;胃痞消高、中、低剂量组均可改善PLGC大鼠胃黏膜血管的超微结构,其中低剂量组效果为佳。【结论】胃痞消能改善脾虚PLGC大鼠胃黏膜微血管超微结构,这可能是其改善黏膜微循环从而改善脾虚PLGC大鼠组织病理学改变的机制之一。     

善胃Ⅰ号对血瘀热毒型胃癌前病变凋亡相关基因表达的影响

[目的]探讨血瘀热毒证型患者凋亡相关基因的表达,观察善胃Ⅰ号治疗血瘀热毒型胃癌前病变、促使胃癌前病变向正常胃黏膜逆转的作用,并从细胞凋亡和相关基因表达方面探讨其作用机理.[方法]82例患者均经胃镜与病理检查证实为胃癌前病变,随机分成2组,光镜观察治疗前后胃黏膜的增生情况,并采用原位末端标记法(Tunel)检测细胞凋亡,免疫组化检测fas、fas-L、bcl-2、bax的表达.[结果]治疗组(善胃Ⅰ号,血瘀热毒型)有效率85.29%(34例),优于对照组(猴头菌片)29.17%(48例).治疗组细胞凋亡率和fas、fas-L表达率分别从(20.13±11.23)%、42.88%、40.00%升高至(39.45±16.24)%、72.00%、60.00%;而bcl-2表达率从88.46%下降至24%(P<0.05).对照组猴头菌片无明显作用.[结论]血瘀热毒证型的发生可能与细胞凋亡相关基因有关,善胃I号能有效治疗血瘀热毒型胃癌前病变,明显诱导胃癌前病变细胞凋亡,增强fas、fas-L表达而抑制bcl-2表达.     

加味七方胃痛颗粒对胃癌癌前病变大鼠CDK2/4的干预效应

目的:探讨加味七方胃痛颗粒对胃癌癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)大鼠CDK2/4基因的干预效应。方法:采用化学致癌物N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-nitro-N-nitroso-guanidine,MNNG)建立胃癌癌前病变动物模型,采用免疫组化检测CDK2/4基因表达,Western blot法检测各组大鼠PLGC胃黏膜组织CDK2/4的表达水平。结果:与模型组比较,加味七方胃痛颗粒组和胃复春组的胃黏膜萎缩程度、胃黏膜肠化生程度明显减轻;加味七方胃痛颗粒组、胃复春组CDK2/4基因蛋白表达显著降低(P0.01);相对于胃复春组,加味七方胃痛颗粒CDK2/4蛋白表达显著降低(P0.01)。结论:加味七方胃痛颗粒可能是通过下调CDK2/4基因蛋白的表达,改善胃黏膜病理变化,抑制细胞分裂与增殖,从而干预PLGC进展。     

胃痞消对脾虚型慢性萎缩性胃炎癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞增殖周期分布及凋亡基因表达的影响

【目的】观察健脾化瘀解毒中药胃痞消(由黄芪、太子参、白术、丹参、白花蛇舌草等组成)对脾虚型慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞的增殖周期分布及凋亡基因表达的影响。【方法】选用SD大鼠,随机分为6组,即正常对照组,模型组,胃痞消高、中、低剂量组(剂量分别为15、7.5、3.75g·kg-1·d-1),维酶素组(剂量为0.27g·kg-1·d-1)。除正常对照组外,其他组均采用N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)液自由饮用结合饥饱失常加耗气泻下法复制脾虚型CAG胃癌前病变模型,观察胃痞消各剂量组连续治疗4周后对大鼠胃黏膜上皮细胞增殖周期分布、凋亡率、凋亡基因p53、Bcl-2和Bax表达的影响。【结果】胃痞消各剂量组可显著增加胃黏膜上皮细胞凋亡率,增加G0/G1期、减少S期细胞分布,促进p53表达,抑制Bcl-2表达(均P0.01),胃痞消高剂量组可显著促进Bax表达(P0.05)。【结论】胃痞消可抑制CAG癌前病变大鼠胃黏膜上皮细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与其能促进p53和Bax表达,抑制Bcl-2表达有关。     

胃康宁治疗Hp相关性胃癌前病变的效果及对胃黏膜Ki-67蛋白表达的影响分析

目的:探讨胃康宁治疗幽门螺杆菌(Hp)相关性胃癌前病变(PLGC)的临床效果,观察对胃黏膜Ki-67蛋白表达的影响。方法:选取2015年9月—2017年10月期间我院收治的98例Hp相关性PLGC患者,随机分为两组,各49例,两组均行常规三联方案(奥美拉唑+克拉霉素+阿莫西林)治疗以根除Hp感染,观察组在此基础上给予中成药胃康宁治疗,比较两组患者综合疗效与治疗前、后胃黏膜Ki-67蛋白表达情况。结果:观察组治疗总有效率明显高于对照组,且治疗后胃黏膜Ki-67蛋白表达阳性率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:胃康宁治疗Hp相关性PLGC疗效确切,能够降低胃黏膜Ki-67蛋白表达,具有较高的临床应用价值。     

胃灵颗粒对胃癌前病变细胞凋亡基因影响的实验研究

目的:探讨中药冲剂胃灵颗粒对大鼠胃癌前病变(GPL)细胞凋亡基因表达的影响及其相关机制。方法:N-甲基N-硝基-N-亚硝基胍加饥饱失常法造大鼠GPL模型,用胃灵颗粒与维酶素治疗,观察对病变黏膜组织中Bcl-2、Bax、p53基因蛋白水平的影响。结果:中药组治疗后Bcl-2、Bax、p53基因蛋白阳性指数明显低于病理对照组(P<0.05)。结论:健脾养阴活血为主的胃灵颗粒通过改善GPL大鼠气阴两虚兼挟血瘀的病理基础,降低病变组织增殖水平,诱导细胞正常凋亡,从而对GPL细胞的增殖有良好的阻断作用。     

善胃系列方治疗胃癌前病变的相关基因蛋白表达试验研究*

[目的]观察中药善胃系列方对慢性萎缩性胃炎(CAG)伴有胃黏膜异型增生(Dys)和(或)肠上皮化生(IM)的治疗效果,并观察相关基因蛋白在治疗前后的表达情况.[方法]将确诊为慢性萎缩性胃炎伴胃黏膜异型增生和(或)肠上皮化生(IM)的患者154例,随机分为观察组106例,口服善胃系列方中药,根据辨证分型又分为3组血瘀热毒型(善胃Ⅰ号方)组34例,阴虚有热型(善胃Ⅱ号方)组43例,气阴两虚型(善胃Ⅲ号方)组29例;对照组48例,口服猴头菌片,连续治疗6个月,观察两组患者临床症状改善情况、胃镜所见及胃黏膜病理组织学改善情况;利用免疫组化方法观察服药前后胃黏膜组织中ras癌基因P21蛋白和抑癌基因P16蛋白的表达情况.[结果]观察组患者治疗后总有效率为83.96％;对照组患者治疗后总有效率为29.17％,两组有显著性差异,P＞0.01;观察组治疗后多数患者腺体萎缩程度、肠上皮化生、胃黏膜异型增生均有改善,P＜0.01;而对照组改善不明显;观察组明显优于对照组,P＜0.5;观察组治疗后癌基因蛋白P21显著降低,P＜0.05;抑癌基因蛋白P16表达显著提高,P＜0.05.[结论]中药善胃系列方对胃癌前期病变临床疗效确切,并通过降低P21的表达水平,提高P16的表达水平,在一定程度上使胃黏膜病理逆转.     

化浊解毒法治疗胃癌前病变患者的疗效观察

目的：探讨化浊解毒法治疗PLGC的疗效机理。方法：将60例胃癌前病变（PLGC）患者随机分为治疗组30例和对照组30例,治疗组予化浊解毒法治疗,对照组予胃复春治疗,疗程3个月。观察两组患者治疗前后胃黏膜的病理组织学改变,计数各组肠化生（IM）、不典型增生（ATP）,及对胃黏膜癌胚抗原（CEA）、环氧合酶2（COX-2）的影响。结果：用药1个疗程后,治疗组IM、ATP阳性率明显小于对照组,差异有显著性（P〈0.05）,治疗组胃黏膜CEA、COX-2均明显降低,两组之间差异有显著性（P〈0.05）。结论：化浊解毒法能显著降低胃癌前病变组织中的IM、ATP。改善胃黏膜CEA、COX-2含量。     

解毒化浊和胃方阻断大鼠CAG癌前病变的分子生物学机制

目的探讨解毒化浊和胃方阻断大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变(PLGC)发展的分子生物学机制。方法将60只大鼠分为空白对照组15只,模型对照组15只,中药组15只,西药组15只,除空白对照组外,各组以甲基亚硝基胍造模,模型对照组给予双蒸水灌胃,中药组给予解毒化浊和胃方灌胃,西药组给予叶酸灌胃。采用免疫组化及原位分子杂交标记的方法测EGFR蛋白翻译和mRNA转录水平以及病变黏膜组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、H-ras癌基因蛋白表达情况。结果模型对照组眦组织EGFR蛋白翻译和mRNA转录均有表达.表达随病变的进展而递增;中药组EGFR蛋白及mR- NA的表达下调,PCNA指数、H-ras癌基因蛋白阳性指数明显低于模型对照组(P<0.05)。结论解毒化浊和胃方对大鼠PLGC细胞的增殖有良好的阻断作用,该作用可能与下调PLGC组织EGFR蛋白及mRNA的表达有关。     

中医药治疗胃癌前病变机制研究进展

在分析中医药防治胃癌前病变（PLGC）的临床和实验研究文献基础上,综述中医药治疗PLGC的机制,包括保护胃黏膜、抗幽门螺杆菌、抑制癌基因蛋白表达及调节细胞增殖和凋亡、抗氧化和增强免疫力、调节细胞因子、降低胃液pH值等。     

胶体果胶铋胶囊对胃癌前病变Bcl-2、P53基因蛋白影响的研究

目的 探讨胃癌前病变(PLGC)Bcl-2、P53基因蛋白的表达及胶体果胶铋胶囊的治疗机制.方法 选取临床胃镜诊断胃癌前病变病例共120例,随机分为两组,分别用胶体果胶铋胶囊与维酶素治疗,观察对病变粘膜组织中Bcl-2、P53基因蛋白水平的影响.结果 治疗组能明显阻断化学致癌物对粘膜的炎症损伤,改善癌前病变组织粘膜不典型增生程度.同时应用胶体果胶铋胶囊治疗后Bcl-2、P53基因蛋白阳性指数亦明显低于病理对照组(P＜0.05).结论 胶体果胶铋胶囊通过降低PLGC患者病变组织增殖水平,诱导细胞正常凋亡,从而对胃癌前病变细胞的增殖有良好的阻断作用.     

和胃1号促进胃干细胞定向分化的动物实验研究

目的 探讨和胃1号促进胃干细胞定向分化的作用机制.方法 以水杨酸钠法复制慢性萎缩性胃炎（CAG）模型.免疫组化法检测各组胃黏膜腺体泌酸细胞数量;半定量实时荧光PCR法检测胃黏膜三叶因子（TFF）TFF1,TFF2和musashi-1 mRNA的表达;琼脂糖凝胶电泳检测表达产物的特异性.结果 模型组小鼠胃黏膜TFFI,TFF2 mRNA表达水平及泌酸细胞数量显著低于正常组（P〈0.05）,干预组TFF1,TFF2 mRNA的表达水平及泌酸细胞数量显著高于模型组（P〈0.05）.模型组小鼠胃黏膜musashi-1 mRNA表达水平显著高于干预组与正常组（P〈0.01）,干预组表达减少.结论 和胃1号可促进胃干细胞定向分化,主要作用机制为上调TFF1,TFF2表达,下调musashi-1表达.     

和胃反流康对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及COX-2mRNA表达的影响

目的 利用分子生物学技术,通过体内实验,观察和胃反流康对实验性胆汁反流性胃炎模型大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA表达的影响.方法 将60只SPF级大鼠随机分为6组,即空白组、模型组、和胃反流康高、中、低剂量组(54.6 g·kg-1,27.3 g·kg-1,13.7 g·kg-1)、阳性药物(吗丁啉)组,每组10只.配制反流液,除空白组外,其余各组均采用灌胃方式建立胆汁反流性胃炎大鼠模型.分别通过Western blot法及实时荧光定量PCR法,检测大鼠胃窦部胃黏膜组织中p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA的表达,观察和胃反流康对胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA表达水平的影响.结果 和胃反流康可显著抑制大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA的表达水平(P<0.01).结论 和胃反流康可显著抑制胆汁反流性胃炎大鼠胃黏膜p38MAPK蛋白及胃黏膜细胞COX-2mRNA的表达,减轻反流液对胃黏膜的炎性损害,具有防止BRG模型大鼠胃黏膜肠上皮化生及不典型增生等癌前病变发生的作用.     

化痰消瘀方对胃癌前病变大鼠Caspase-3、Cyclind1及mTOR表达的影响

目的：观察中药化痰消瘀方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Caspase-3、CyclinD1、mTOR表达的影响,探讨化痰消瘀方逆转胃癌前病变的机制。方法：将100只SD大鼠按随机数字表法分为空白组17只,造模组83只,采用N-甲基-N-硝基N-亚硝基胍综合饥饱失常制备胃癌前病变大鼠模型。造模成功后,空白组随机抽取15只,造模组抽取75只随机平均分为模型组,化痰消瘀方高剂量组、中剂量组、低剂量组及维酶素组。分别给药干预8周,观察各组大鼠一般情况和胃黏膜病理改变,并采用酶标仪法及免疫组织化学法检测胃黏膜Caspase-3、Cyclind1、mTOR的表达。结果：与空白组比较,模型组大鼠Caspase-3表达显著下降,CyclinD1、mTOR表达显著增高,差异均有统计学意义（P〈0.01）;与模型组比较,化痰消瘀方各剂量组与维酶素组大鼠Caspase-3表达显著升高,CyclinD1、mTOR表达显著下降,差异均有统计学意义（P〈0.01）;且化痰消瘀方高剂量组、中剂量组下调CyclinD1、mTOR表达作用优于维酶素组（P〈0.05）。结论：中药化痰消瘀方可显著改善大鼠胃黏膜组织病理学状况,逆转胃癌前病变,其逆转机制可能是通过上调Caspase-3表达、下调CyclinD1、mTOR表达,调节细胞周期。     

Bcl-2、Bax在胃癌及胃癌前病变中的表达与细胞凋亡的关系

目的 探讨胃癌及胃癌前病变组织中Bcl-2、Bax的表达情况及其与细胞凋亡的相互关系.方法 采用免疫组织化学SP法分别检测10例正常胃黏膜、60例慢性萎缩性胃炎伴肠化生、30例异型增生、50例胃癌中Bcl-2、Bax蛋白的表达情况,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记技术（TUNEL法）检测组织切片中细胞凋亡的情况.结果 慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生、胃癌中Bcl-2蛋白表达阳性率分别为31.7％,43.3％,62.0％,均显著高于正常胃黏膜（P＜0.01）.慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生中Bax蛋白阳性率分别为55.0％,30.0％,其阳性率均显著高于胃癌（P＜0.01,P＜0.05）.Bcl-2蛋白表达阳性慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生和胃癌中凋亡细胞指数（AI）显著低于Bcl-2蛋白阴性组（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达阳性率与AI值呈负相关.Bax蛋白表达阳性慢性萎缩性胃炎伴肠化生、异型增生和胃癌中AI显著高于Bax蛋白阴性组（P＜0.05）,Bax蛋白表达阳性率与AI值呈正相关.结论 胃黏膜癌变过程中,AI、凋亡调控基因Bcl-2和Bax的比值逐渐增加,说明它们在胃癌演变过程中可能起重要作用.     

复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃癌前病变大鼠IKKβ、VEGF表达的影响

目的:研究复方蜥蜴散不同微粒组合剂(简称FFXY)治疗对胃癌前病变(PLGC)大鼠凋亡相关蛋白IKKβ及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,揭示其治疗PLGC的可能作用机制。方法:将120只SPF级SD大鼠随机分为6组,各治疗组均采取单功能烷化剂甲基硝基亚硝基胍(MNNG)配合饥饱失常及情绪刺激综合造模,空白组正常供应标准饲料及清洁蒸馏水。造模成功后分别作相应处理,应用免疫组化法检测胃黏膜组织IKKβ、VEGF蛋白的表达,并对实验结果进行统计分析。结果:IKKβ、VEGF两种蛋白的表达情况,模型组阳性表达高于空白对照组(P0.01);其他各治疗组阳性表达均低于模型对照(P0.05);FFXY各治疗组阳性表达均低于维酶素治疗组(P0.05);80目100目等量混合组两种因子阳性表达低于80目组和100目组(P0.05)。结论:FFXY各组和维酶素组治疗PLGC均有效,其中,FFXY各组对PLGC大鼠疗效均优于维酶素组,尤以80目100目等量混合剂量组疗效最显著。提示复方蜥蜴散不同微粒组合剂对胃黏膜损伤可能具有保护、修复作用,其作用机制可能是通过降低或抑制PLGC组织中IKKβ、VEGF的表达,从而促进细胞凋亡和抑制血管生成来实现的。