近红外荧光染料在胃癌人源性肿瘤组织异种移植模型研究中的应用

【摘要】 目的 建立人胃癌PDX裸鼠移植模型,探讨近红外荧光染料IR-783在胃癌PDX模型活体成像研究中的应用。方法 取临床胃癌新鲜手术切除标本,裸鼠肾包膜移植建立PDX模型,HE染色比较移植肿瘤组织与病人肿瘤组织形态结构的一致性。将移植肿瘤组织裸鼠皮下接种,20天后,荷瘤小鼠腹腔注射近红外荧光染料IR-783（10nmol/mouse）,活体成像连续测定肿瘤部位近红外荧光强度并分析肿瘤体积与荧光强度的相关性;免疫组织化学检测移植肿瘤组织中HIF1?与OATP1B3的表达强度。结果 成功建立了3个人胃癌PDX模型,移植肿瘤组织较好的保持了原发肿瘤的特征,近红外荧光活体成像早期检测到肾包膜部位荧光信号。PDX模型中肿瘤体积与荧光强度的相关性均在98%以上。移植肿瘤组织中HIF1?与OATP1B3表达呈强阳性。结论 近红外荧光染料IR-783可在PDX模型肿瘤部位特异性聚集,用于PDX模型的早期检测,这种肿瘤靶向性可能与HIF1?和OATP1B3的表达相关。     

肿瘤患者来源的异种移植(PDX)模型

将患者新鲜肿瘤组织移植于免疫缺陷小鼠建立的患者来源异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型较好地保持了原发肿瘤的遗传特性和异质性,在肿瘤的个体化治疗研究中具有独特的优势。常用PDX模型的移植方法主要有皮下移植、肾包膜移植和原位移植。移植瘤的溯源方法包括组织形态学比较、肿瘤特异性标志物分析、短片段重复序列分型和测序分析。在PDX模型研究中,需要重点关注影响模型成功率的因素、人源化问题、淋巴瘤的发生和药物评价中治疗策略的选择。虽然从目前临床数据来看,基于PDX模型的个体化治疗还没有显示出实质性疗效,仍处于临床验证阶段,但PDX模型的建立和应用为肿瘤学研究,特别是肿瘤的个体化治疗提供了良好的实验平台。我们在强调PDX模型个体化的同时,要善于应用共性思维,开展基于PDX模型基因组学的肿瘤靶向药物筛选。     

结直肠癌人体肿瘤移植小鼠模型的研究进展

 人体肿瘤移植( patient-derived tumor xenograft, PDX) 模型通过将患者新鲜的肿瘤组织直接移植到免疫缺陷小鼠, 可以较好地保持原发肿瘤的生物学特性及与患者相似的遗传特性和肿瘤异质性, 在临床肿瘤的精准治疗研究中可起到不可替代的作用, 但在其模型建立成功率、时效性和成本控制等方面仍存在不足。本文就人结直肠癌PDX模型构建的实验动物及移植组织类型和方式的选择、最新应用进展和面临的挑战进行综述。     

肝癌人源肿瘤异种移植模型构建及初步应用

目的建立肝癌人源肿瘤异种移植(patient-derived xenografts,PDX)模型,探讨其在肝癌精准医疗中的作用。方法取临床肝癌新鲜手术切除标本,NCG小鼠皮下接种肿瘤组织建立PDX模型,HE染色比较移植肿瘤组织与患者肿瘤组织形态结构的一致性。将成功传至第三代的PDX模型制备肿瘤细胞悬液,BALB/c裸鼠皮下接种制作肝癌移植瘤模型15只,成瘤后随机分为5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组、索拉非尼(sorafenib)组和阴性对照组,每组5只。定期监测各组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量,根据瘤重计算抑瘤率,评估疗效。结果本研究共建成肝癌PDX模型6例,成功率为33.3%(6/18),模型较好的保持了原发肿瘤的特征。1例PDX模型中,5-FU与索拉非尼组肿瘤抑瘤率分别为63.7%和29.6%,5-FU组抑瘤率比较差异有显著性(P0.05),索拉非尼组抑瘤率比较差异无统计学意义,与临床结果相符。结论肝癌PDX模型保持了患者肿瘤组织的组织形态,可以适用于肝癌患者的精准医疗。     

人脑胶质母细胞瘤PDX模型的建立

目的：探讨患者来源的异种移植（patient derived xenograft,PDX）胶质母细胞瘤模型的建立方法,为临床和生物学研究提供重要的理论依据和技术支持。方法：收集胶质母细胞瘤组织,建立皮下肿瘤模型,待皮下肿瘤生长取出肿瘤,分散肿瘤细胞并种于小鼠颅内。HE染色比较原发肿瘤组织与PDX肿瘤形态学特点,免疫组织化学染色方法检测Ki?67的表达,比较肿瘤增殖能力。结果：成功建立人脑胶质母细胞PDX模型,原发肿瘤和PDX肿瘤形态学特点相似,PDX肿瘤保留了原发肿瘤的增殖能力。结论：通过建立PDX模型,可以将PDX作为胶质母细胞瘤患者个体化治疗的重要临床前研究工具。     

肺癌人源性肿瘤组织异种移植模型的组织学变化及其p63、napsinA和TTF-1的表达差异

目的建立肺癌人源性肿瘤组织异种移植(patient-derived tumor xenograft,PDX)裸鼠模型,检测原代肺癌组织标本和第三代(F3)PDX模型组织标本内组织形态结构的变化和p63、napsin A和TTF-1的表达差异性。方法取临床肺癌新鲜手术切除标本12例,裸鼠皮下移植建立PDX模型,HE染色比较原代患者肿瘤组织与移植瘤组织结构和细胞形态变化与否;免疫组化的方法检测原代组织和F3代组织标本内p63、napsin A和TTF-1的表达水平的差异性。显微镜观察。结果成功建立传至第三代的PDX模型5例,4例肺鳞癌,1例肺腺癌。PDX模型和患者原代肿瘤具有相同的组织学特点和排列结构;p63在肺鳞癌患者及其PDX模型癌细胞中表达阳性率为84.3%和96%,两者之间差异无显著性(P0.05),而在肺腺癌中呈阴性表达。Napsin A在肺腺癌患者及其PDX F3癌细胞中阳性表达率分别为66%和72.4%,两者之间差异无显著性(P0.05)。TTF-1在肺腺癌患者及其PDX F3癌细胞中阳性表达率分别为91%和85%,两者之间差异也无显著性(P0.05)。Napsin A和TTF-1在肺鳞癌中均呈阴性表达。结论本实验室所建立的肺癌PDX模型基本保留了部分原代肿瘤的组织学特性,为临床前药效的个性化筛选评估以及生物标志物的鉴定提供了有效的研发资源。     

前列腺癌人源性异种移植裸鼠模型的建立与治疗

目的建立前列腺癌人源性异种移植(patient-derived xenograft,PDX)模型,评价不同治疗方案的抗肿瘤效果。方法将人新鲜的前列腺癌手术标本与基质胶混合后移植入补充有外源性雄激素的裸鼠皮下,连续监测肿瘤生长,评估其保真度并连续传代;将荷瘤鼠分为四组:多西他赛组、去势组、多西他赛联合去势组以及对照组,治疗期间测量肿瘤体积及小鼠体重变化,治疗结束后,检测血清中总前列腺特异性抗原(total prostate specific antigen,tPSA)浓度及组织病理学变化,评估治疗效果。结果成功建立了前列腺癌PDX模型,包括激素敏感型(D17225)和去势抵抗型(C40019)肿瘤,病理学分析发现移植瘤较好的保持了患者原发瘤的主要特征;病理组织学及血清tPSA检测发现多西他赛组及多西他赛联合去势组在D17225模型中显示出良好的治疗效果,且后者抑瘤效果更为明显。结论成功建立了前列腺癌PDX模型并稳定传代,多西他赛单药或联合去势处理对激素敏感型(D17225)前列腺癌PDX模型具有显著治疗效果。     

基于胰腺癌患者来源异种移植模型的化疗药物筛选

目的 利用胰腺癌PDX 模型,评估临床化疗药物治疗效果,筛选个体化治疗方案?方法 将新鲜的胰腺癌手术标本移植裸鼠皮下,建立PDX 模型并稳定传代;利用STR 基因分型检测PDX 模型肿瘤组织的溯源性;选择临床使用的奥沙利铂?吉西他滨和伊立替康三种化疗药物进行治疗,并测量肿瘤体积;利用TGD 值数学模型方法,辅以血浆CA19 -9 检测评估三种化疗药物的治疗效果?结果 PDX 模型肿瘤组织样本的溯源性为99.99%,与原发瘤保持一致;与对照组相比,伊立替康组和吉西他滨组均具有显著的治疗效果(c =0.001),且吉西他滨抑瘤效果更为明显;伊立替康的药物毒性作用最小,吉西他滨次之?结论 成功建立胰腺癌PDX 模型并稳定传代,通过TGD 值数学模型法筛选,发现吉西他滨抑制肿瘤生长效果最为显著,推荐其作为该胰腺癌个体化治疗首选药物?     

食管鳞癌患者来源移植瘤模型：B-NDG®小鼠与BALB/c裸鼠的比较

目的 探讨不同品系的小鼠对于食管鳞癌患者来源的异种移植瘤（ESCC PDX）成瘤率的影响,为ESCC的临床个体化治疗建立更优势的临床前动物模型。方法 收集22例ESCC患者手术切除的肿瘤组织,分别利用B-NDG®（NSG）鼠和BALB/c裸鼠来建立ESCC PDX模型。通过观察移植瘤成瘤情况,测量移植瘤体积,绘制生长曲线图,计算成瘤率和成瘤时间,HE染色、免疫组化及基因组测序等实验,比较移植瘤组织与原患者肿瘤组织的一致性。结果 22例标本的PDX模型移植结束,发现NSG小鼠ESCC肿瘤发生率（50%,11/22）高于BALB/c裸鼠（18.18%,4/22）（P=0.027）。NSG小鼠的平均肿瘤成瘤时间为75.95 d短于BALB/c小鼠的91.67 d,差异具有统计学意义（P<0.001）。在NSG小鼠和BALB/c小鼠异种移植模型中,肿瘤均能保持病人ESCC肿瘤组织的形态学特征。基因分析结果显示,与BALB/c裸鼠相比,NSG小鼠肿瘤与亲代患者肿瘤样本间的基因相似度更高（P<0.0001）。结论 成功构建了NSG小鼠和BALB/c裸鼠ESCC皮下移植瘤模型,并发现NSG小鼠对于模型成功的建立更具有优势。     

患者来源肿瘤异种移植模型的建立与应用

癌症是世界范围内重大的公共卫生问题之一,需要不断进行深入研究。建立合适的临床前模型对于肿瘤学转化研究至关重要。通过肿瘤细胞系建立的异种移植模型方便易用,广泛应用于肿瘤研究中,但在临床前药物的研发过程中存在明显局限性。而患者来源异种移植(PDX)模型直接将患者的肿瘤组织或细胞植入免疫缺陷小鼠体内,根据植入部位可分为异位植入和原位植入两类,从而保留其供体肿瘤的主要组织学和遗传特征,在肿瘤研究领域中显示出优势。本文介绍PDX模型的建立方法和特征,并就其在筛选抗肿瘤药物、鉴定生物标志物、共临床试验、个性化治疗等方面的应用及其局限性进行综述。     

不同麻醉深度对快速外科康复腹腔镜全子宫切除术患者应激反应的影响

目的 探讨不同麻醉深度对快速外科康复(enhanced recovery after surgery,ERAS)妇科腹腔镜全子宫切除术患者应激反应的影响.方法 选取择期行腹腔镜全子宫切除术患者60例,ASAⅠ～Ⅱ级,BMI 20～28 kg/m2,采用随机数字表法分为两组:浅麻醉组(L组,n=30)和深麻醉组(D组,n...     

螺旋CT联合多平面重建技术对老年股骨颈骨折患者临床诊断价值研究

目的 研究螺旋CT三维重建(CT3D)及多平面重建(multiplanar reformation,MPR)对老年股骨颈骨折患者的临床诊断价值.方法 选取宜君县人民医院外科及陕西省人民医院骨科2017年3月至2019年5月收治且最终经手术确诊的91例老年股骨颈骨折患者作为研究对象进行回顾性研究.根据术前影像学检查方法不...     

自体富血小板血浆痛点注射治疗肩周炎的临床疗效评估

目的 评估自体富血小板血浆(Platelet-rich plasma,PRP)痛点注射治疗肩周炎的临床疗效.方法 本研究以2018年1月至2019年10月在空军军医大学第二附属医院骨科门诊就诊的肩周炎患者共74例为研究对象.根据治疗方式分为两组:对照组采用普鲁卡因和醋酸氢化可的松治疗,观察组采用PRP治疗,每组37例....     

典必殊眼膏治疗睑板腺功能障碍相关干眼临床疗效观察

目的 观察典必殊眼膏外用联合物理治疗睑板腺功能障碍干眼症的临床疗效。 方法 将宜川县人民医院眼科门诊2017年01月至2019年12月诊断为睑板腺功能障碍相关干眼症患者45例,采用随机数字表法分为三组：A组、B组及C组;A组：给予妥布霉素地塞米松眼膏物理治疗+玻璃酸钠滴眼液4次/d。B组：给予普拉洛芬滴眼液+玻璃酸钠滴眼液4次/d+物理治疗。C组：给予玻璃酸钠滴眼液4次/d+物理治疗。分别观察各组在治疗14 d、28 d后,泪河高度、泪膜破裂时间（tear break-up time,TBUT）、基础泪液分泌试验（schirmer I test,SIT）和临床症状。 结果 治疗14 d后各组患者在泪河高度、TBUT、SIT及临床症状上均有明显改善（P<0.05）。随着治疗时间的延长,治疗28 d后各组间在泪河高度、TBUT、SIT和临床症状改善方面差异均具有统计学意义。且随着治疗时间延长各组内在泪河高度、TBUT、SIT和临床症状改善方面差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论 妥布霉素地塞米松眼膏+玻璃酸钠滴眼液联合物理治疗能有效地改善睑板腺功能障碍干眼症患者的泪河高度、TBUT、SIT及临床症状,改善睑板腺功能。     

肝脏硬度、层粘连蛋白及AFP值对HBV相关HCC的诊断价值

目的 评估血清甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、肝脏弹性(也称为硬度)测量值(liver stiffness measurement,LSM)、层粘连蛋白(laminin,LN)检测在HBV相关性肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)诊断中价值.方法 采用回顾性研...     

金龙胶囊联合化疗治疗结直肠癌肝转移的临床观察

目的评价金龙胶囊联合化疗治疗结直肠癌肝转移的疗效、血液毒性和对体力状况、血CEA以及免疫功能的影响。方法 62例结直肠癌肝转移患者被分为治疗组和对照组,均行伊立替康联合氟尿嘧啶方案化疗,治疗组同时口服金龙胶囊;对照组口服利血生。结果治疗组近期临床受益率、血CEA下降比率、体力状况好于对照组（P〈0.05）,白细胞降低程度明显低于对照组（P〈0.05）。CD3、CD4、CD4/CD8明显好于对照组（P〈0.01）。结论金龙胶囊联合化疗治疗结直肠癌肝转移具有增效减毒不提高免疫功能的作用,可作为化疗的辅助治疗药物。     

运动康复疗法对老年慢性心衰患者生活质量的系统评价

目的 系统评析运动康复疗法对老年慢性心衰患者生活质量的影响.方法 计算机检索中国知网(CNKI)、SinoMed、万方和维普数据库、PubMed、Embase、Web of Science、The Cochrane Library,收集有关运动康复疗法用于老年慢性心衰患者的随机对照试验(randomized contr...     

CPT-11联合5-FU/CF治疗晚期结直肠癌的研究

目的评价CPT—11联合5-FU／CF方案治疗晚期结直肠癌构临床疗效及毒副反应。方法全组29例，CPT-11180mg／m^2静滴90min，d1；CF200mg／m^2静滴2h，d1-2，5-FU 400mg／m^2静推后，5-FU 600mg／m^2用微量化疗泵持续静推22h，d1-2，每2周重复。治疗2周期后评价疗效。结果29例患者中CR 0例，PR11例，SD13例，PD5例，总有效率34.48％。主要毒副反应为迟发胜腹泻（Ⅲ/Ⅳ度发生率为34．48％）及中性粒细胞减少（Ⅲ/Ⅳ度发生率为27．59％。结论CPT-11联合5-FU／CF方案治疗晚期结直肠癌有效率高，毒副反应可以耐受，可作为晚期结直肠癌的一线或二线化疗方案。     

阴式瘢痕妊娠病灶切除联合子宫修补对Ⅱ型剖宫产瘢痕妊娠患者子宫内膜容受性的影响

目的 探究阴式瘢痕妊娠病灶切除联合子宫瘢痕修补术对Ⅱ型剖宫产瘢痕妊娠（cesarean scar pregnancy,CSP）患者子宫内膜容受性的影响。 方法 采用随机入院单双序列分组法对84例Ⅱ型CSP患者进行分组。对照组38例接受宫腔镜妊娠病灶切除治疗;研究组46例接受阴式瘢痕妊娠病灶切除联合子宫瘢痕修补术。对比两组术中失血量、术后康复及随访瘢痕形态、子宫内膜恢复妊娠情况。 结果 与对照组相比,研究组术中失血量明显减少,住院时间、人绒毛促性腺激素（human chorionic gonadotropin）转阴及月经恢复时间均明显缩短,术后月经量正常者占比升高,月经量增多人数减少。术后6个月时剖宫产瘢痕的长、宽和深度明显缩小,子宫内膜残存肌层比下降,子宫内膜厚度增大,远期随访再妊娠总不良事件发生率显著下降,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论 对有生育需求的Ⅱ型CSP实施阴式瘢痕妊娠病灶切除联合子宫瘢痕修补治疗,能有效地减少术中出血,促进子宫形态、功能和身体机能恢复,改善患者远期妊娠结局。     

十全大补汤对化疗药物治疗小鼠移植性大肠癌减毒增效作用实验研究

目的：研究经典方剂十全大补汤（以下简称sqdbt）联合化疗药物5-氟尿嘧啶（以下简称5-fu）对HT29移植性大肠癌小鼠的抑瘤作用及其作用机制。方法：采用HT29移植性大肠癌瘤株制作大肠癌小鼠模型。24h后随机分成单纯肿瘤组、sqdbt组、5-fu组、sqdbt＋5-fu组,给药4周后,计算抑瘤率,对肿瘤组织进行病理切片HE染色观察及免疫组化方法检测γ-IFN值。结果：经药物治疗后,HT29大肠癌小鼠体内肿瘤生长受到不同程度的抑制,sqdbt＋5-fu组抑瘤率最高;病理切片可见治疗组肿瘤细胞数目、形态、大小均好于对照组;免疫组化检测γ-IFN值sqdbt＋5-fu组最高。结论：十全大补汤具有提高HT29大肠癌小鼠生存质量的作用,并可以抑制HT29大肠癌小鼠肿瘤生长、提高机体免疫力、对化疗药物治疗肿瘤有减毒增效的作用。