树糖尿病模型肝脏功能及形态学变化与TNF-α的关系

目的 :探讨树糖尿病模型肝脏功能及形态学变化与肿瘤坏死因子 (Tum or necrosis factor- alpha,TNF- α)的关系。方法 :用链脲佐菌素 (STZ)诱发树糖尿病模型 ,并于注药前及成模后 2、4、6周测血清 TBIL、AL T、TNF- α;6周肝活检行常规HE染色、PAS - DPAS染色、苏丹 染色、Masson染色及电镜检查 ,以及免疫组化检测肝组织 TNF-α。结果 :正常组及未成模组实验前后 FBS、TBIL、AL T、TNF-α浓度变化差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,肝组织 TNF-α免疫组化各有 1例阳性 ,统计学分析差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,光镜、电镜无异常发现。糖尿病组实验前后 AL T及 TBIL经统计学分析差异无统计学意义 (P>0 .0 5 ) ;血清 TNF- α浓度随实验时间延长逐渐升高 ,4、6周值与实验前比较差异有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ;肝组织TNF- α免疫组化免疫组化发现 7例阳性。光镜下糖尿病组肝脏表现 :细胞质内糖原颗粒增多 ,细胞水肿 ,部分空泡样变 ,肝实质点状坏死 ,嗜酸性变 ,汇管区浸润。电镜下改变 :细胞质内糖原颗粒明显增多及脂肪变性 ,线粒体肿胀模糊电子密度增高 ,异染色质增多 ,粗面内质网脱粒 ,光面内质网增多。结论 :糖尿病树动物模型早期即可出现明显的肝脏病理改变 ,病理改变与肝功能异常程度无明显相关     

糖尿病树鼩肝脏病理分析

目的 对注射链脲佐菌素（STZ）8周后糖尿病树鼩动物肝脏进行病理分析。方法 将树鼩随机分为正常对照组和STZ处理组；静脉注射STZ，共持续8周给药，根据血糖水平，再分为糖尿病组（血糖≥11．1mmol／L）和STZ对照组（血糖〈11．1mmol／L）。分别于成模前和成模后4、8周测定3组动物的血清ALT、AST、IV—C、LN和HA。8周末行肝组织活检，经HE、PAS、D—PAS及Masson染色后光镜下观察。用病理图像分析系统对肝脏胶原纤维面积密度进行分析。以透射电镜观察肝超微结构。结果 注射STZ8周后糖尿病模型动物出现早期肝纤维化的电镜及光镜病理组织学变化。结论 糖尿病树口动物模型注射STZ8周后可出现早期肝纤维化病理改变。     

重组8型腺相关病毒（rAAV8-1.3HBV）介导HBV急性感染树鼩模型建立

【摘要】 目的 利用重组8型腺相关病毒介导1.3拷贝HBV基因组（1.3HBV,ayw亚型）在树鼩肝脏表达,建立HBV急性感染树鼩模型。 方法 通过大腿内侧静脉注射将携带有1.3 HBV的重组8型腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus 8,rAAV8-1.3HBV）导入树鼩肝脏,通过ELISA检测树鼩血清中HBsAg、HBeAg、HBsAb、HBeAb、HBcAb,荧光定量PCR检测树鼩肝脏和血清中HBV DNA,全自动生化分析仪检测血清中ALT水平,并观察感染后肝脏的病变情况。结果 HBV感染主要血清标志物1-2周内均检测阳性;30天后肝组织仍可检测到病毒抗原阳性细胞;55天时肝组织HBV DNA拷贝数仍可达到104 -105 ;树鼩血清中HBV DNA拷贝数持续一个月高于正常组;肝组织炎细胞略增多,血清ALT水平持续升高。 结论 rAAV8所携带的HBV基因组高效专一导入树鼩肝细胞并复制表达,成功建立HBV急性感染树鼩模型,为进一步探索rAAV8树鼩慢性感染模型打下一定的基础。     

糖尿病性肝病的病理研究

应用光镜、电镜及特殊染色方法对２１例糖尿病性肝病的肝穿、手术切除和尸检肝组织进行病理研究。结果：光镜主要变化为核内糖原空洞、脂肪变性、脂肪性肉芽肿及间质纤维组织增生；电镜变化为肝细胞核内染色质呈絮状并中心空虚，胞质有脂肪滴、糖原颗粒增多。线粒体减少、模糊。粗面内质网减少、脱粒。滑央内质网和溶酶体增多、间隙胶元纤维增生。３例进行治疗前后对比，治疗后病变减轻或消失，提示糖悄病性肝病的病理变化是可逆的。     

消脂利肝方对非酒精性脂肪肝病患者的临床研究

目的 观察消脂利肝方治疗NAFLD患者临床疗效和肿瘤坏死因子α、胰岛素抵抗的影响。方法：将符合诊断标准的72例NAFLD患者随机分为消脂利肝方组和西医对照组各36例,两组均给予健康教育和生活方式指导,西医对照组给予易善复治疗,消脂利肝方组给予消脂利肝方联合易善复治疗,疗程8周,治疗前后均检测ALT、AST、TBIL、TC、TG、HDL-C、LDL-C、FFA、TNF-α、FINS,计算HOMA-IR,肝脏超声检查,评定临床疗效和各观察指标。结果：（1)临床疗效比较：消脂利肝方组有效率为86.11％;西医对照组有效率为63.89％,两组有效率比较有统计学意义(P＜0．01);（2）肝功能、血脂比较：治疗前后ALT、AST、TBIL、TC、TG、HDL-C、LDL-C均有统计学意义（P＜0.01）;两组治疗后ALT、AST、TC、TG比较有统计学意义（P＜0.05）。（3）FFA、TNF-α和HOMA-IR的比较：治疗前后FFA、TNF-α、HOMA-IR有统计学意义（P＜0.01）;两组治疗后FFA、TNF-α、HOMA-IR比较有统计学意义（P＜0.05）。结论：消脂利肝方组治疗NAFLD较西医对照组疗效明显,并降低TNF-α和HOMA-IR的水平。     

高迁移率族蛋白B1在糖尿病伴牙周炎患者牙周组织中的表达及与肝脏脂代谢的关系

摘要：目的 探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）与其下游的晚期糖基化终产物受体（RAGE）,肿瘤坏死因子α（TNF⁃α）在糖尿病及牙周炎大鼠牙周组织中的表达,及与免疫代谢重要器官肝脏脂代谢之间的关系。方法 建立糖尿病（DM）、牙周炎（CP）、糖尿病复合牙周炎（DM+CP）大鼠模型。免疫组化染色检测牙周组织中HMGB1、RAGE、TNF-α 的表达,光谱法检测血清中的脂代谢相关指标和肝损生化指标,并进行统计学分析。结果 DM组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE表达显著性高于对照组（P<0.05）,TNF-α表达量与对照组无差异;CP组HMGB1及TNF-α表达显著性高于对照组,RAGE表达显著性低于DM及DM+CP组,与对 照组无显著性差异;DM+CP组大鼠牙周组织中HMGB1,RAGE,TNF-α表达均高于对照组。与对照组相比较,DM,CP,DM+CP组可见多项肝脏脂代谢指标异常,其中肝脏损伤指标ALT表达在3组中均显著性升高（P<0.05）。结论 HMGB1,RAGE参与糖尿病大鼠的牙周组织炎症进程,糖尿病导致牙周组织中HMGB1表达升高。在高血糖、牙周炎及高血糖复合牙周炎情况下,均能导致一定程度的肝脏代谢功能紊乱,HMGB1-RAGE为解释糖尿病与牙周炎互为易感的信号通路研究提供了一定的线索。     

GDF-15对糖尿病小鼠肝损伤保护作用的实验研究

目的 探讨GDF-15对STZ所致C57BL/6J小鼠糖尿病肝脏损伤保护作用.方法 将成模小鼠随机分为模型组、对照组及GDF-15注射组.监测血糖和体重.30 d后采集样本,检测各组小鼠血清中ALT、AST以及肝组织中TG、TC、SOD、MDA、HK及PK的表达.ELISA检测各组小鼠血清及肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6的表达.HE染色观察各组小鼠肝细胞形态,免疫组织化学染色和Western Blot检测各组小鼠肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达.结果 与模型组比较,GDF-15组多饮、多食、多尿情况改善;体重升高,血糖降低;血清中ALT、AST水平降低;肝脏组织中TG、TC含量降低,SOD含量增高、MDA含量降低,HK、PK酶的活力增加.血清和肝组织中TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显下降.肝细胞脂肪变性明显改善.免疫组织化学显示,TNF-α、IL-1β、IL-6在肝细胞中低表达.Western Blot显示,TNF-α、IL-1β、IL-6低表达.结论 GDF-15对糖尿病肝损伤有一定的保护作用.GDF-15可能是通过抑制炎症反应减轻糖尿病肝损伤.     

秋水仙碱预防肝纤维化作用的观察

目的观察秋水仙碱预防肝纤维化的作用。方法大鼠腹腔注射CC l48周制作肝纤维化模型,同时给予秋水仙碱,8周后检测血清学指标ALT、AST、HA、PC-Ⅲ、TGFβ-、TNF-α;取肝脏组织行HE及M asson染色观察肝脏病理改变并行SSS计分评估肝纤维化程度。结果秋水仙碱可以明显降低肝纤维化异常升高的血清指标ALT、AST、HA、PC-Ⅲ、TGFβ-、TNF-α等(P<0.05),减轻肝纤维化程度(P<0.05)。结论秋水仙碱具有预防CC l4所致肝纤维化的作用。     

抗TNF-α单抗对刀豆蛋白A诱导急性肝损伤的保护作用

为探讨TNF-α在刀豆蛋白A（ConA）诱导的肝损伤中的作用,在ConA诱导的小鼠急性肝损伤模型上,观察血浆TNF-α含量、ALT活性、光镜和电镜下肝组织病理变化及应用抗TNF-α单抗的肝损伤阻断作用。结果发现,与正常对照组比较,模型组TNF-α、ALT明显增高[分别为（0.19±0.06)ng/ml,(1414±567)U/L,均为P<0.01],肝损伤在光镜、电镜下表现为肝细胞凋亡和坏死;抗TNF-α单抗组的TNF-α、ALT分别较模型组和无关单抗组明显降低,未见肝细胞凋亡和坏死。结果表明肝细胞凋亡可能为ConA诱导肝细胞死亡的机制;TNF-α在ConA性肝损伤模型中起重要的介导作用;抗TNF-α单抗可以阻断ConA性肝损伤的发生,即有肝细胞保护作用。     

肝糖原在肝热缺血再灌注中的作用及相关机制的实验研究

目的：探讨不同水平肝糖原含量在肝热缺血再灌注中的拮抗作用及相关机制。方法：对3组糖原含量显著不同的兔肝热缺血再灌注模型中的肝脏酶学、肝细胞膜Ca^2 -ATP酶活性及血清TNF—α(肿瘤坏死因子)浓度进行了观察。结果：糖原含量高的肝脏，其细胞能量代谢旺盛。细胞膜Ca^2 -ATP酶活性强，血清TNF-α浓度相对较低，肝脏酶学指标ALT（丙氨酸转氨酶)值较低，肝功能损伤轻。结论：增加肝糖原含量可通过提高Ca^2 -ATP酶活性，减少TNF-α的产生来拮抗肝热缺血再灌注损伤。