β内啡肽的抗血清制备及其放射免疫测定

本工作通过用碳二亚胺将β内啡肽与甲状腺球蛋白相偶联,并以此免疫家免,获得了高滴度(1:16000),高亲和力(最小检出量为5 fmol/管,IC_(50)为260 fmol/管,亲和常数为6.35×10~9L/mol)和较好特异性的抗血清,并建立了稳定、可靠的放射免疫测定。用此技术测定大鼠垂体及各脑区的β内啡肽免疫活性物质,结果与文献一致。     

小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用

目的应用敏感、特异性强的检测方法检测呼吸道感染患儿血清肺炎支原体(MP)特异性抗体IgM(抗MP-IgM),协助临床早期诊断MP感染及早期治疗,缩短病程.方法日本富士肺炎支原体检测试剂-SERODIA-MYCOⅡ凝集试验.结果1772例呼吸道感染患儿检出MP-IgM阳性389例,检出率为21.9%.年龄＜3岁、3～6岁、6～13岁3个年龄组患儿的MP-IgM阳性检出率分别为14.5%(147/1 012),30.5%(139/456)和33.9%(103/304).取860例呼吸道感染患儿,符合临床支原体诊断标准有的205例,抗MP-IgM阳性156例,阳性率为76.1%;不符合诊断标准的655例中,抗MP-IgM阳性仅为26例,假阳性率为4.0%.两组经统计χ2=48.2,P＜0.01,有显著性差异.结论SERODIA-MYCOⅡ凝集试验检测小儿MP感染具有操作简便、省时快捷、敏感度高、特异性强的优点,可作为早期诊断MP的客观指标.     

体外基因扩增制备艾滋病毒核酸探针

作者利用DNA合成仪合成艾滋病毒ARV—2前病毒序列6 310～6 328,6 666～6 684及HT_LV-Ⅲ前病毒序列6339～6374,6385～6419两对寡核苷酸引物,应用体外基因扩增(Polymerase chainreaction,PCR),以pARV-2/7A质粒为模板扩增出两个DNA片段。~(32)P标记后,以pCP10(含HBV基因)、M56(含出血热汉坦株M片段cDNA)、人染色体DNA乙型脑炎病毒(JEV)为对照,经Southern杂交及斑点杂交,证明PCR扩增制备HIV核酸探针特异性强、敏感性高。     

尿中白蛋白的酶免疫测定法及其临床应用

报道酶免疫双抗体夹心法测定尿中白蛋白,方法简便,灵敏度高,特异性强,平均回收率为101.8,组内、组间变异系数分别为5.3％和5.0％。测定正常男女各37例,尿中白蛋白分別为0.3～18.1mg/L(平均为3.8mg/L)和0.2～17.1mg/L(平均力5.8mg/L)。糖尿病和高血压病与正常人尿中白蛋白的量相差非常显著和显著。     

ELISA法检测HBsAg出现假阳性的原因探讨

目的探讨采用ELISA法检测HBsAg出现假阳性的原因。方法采用ELISA法检测的不同年龄段人群乙肝表面抗原阳性率,并与采用胶体金标法检测作比较。结果采用ELISA法检测的乙肝表面抗原阳性率敏感性为92.3%(48/52),明显高于采用胶体金标法检测的乙肝表面抗原阳性率,敏感性为72.7%(48/66),特异性为96.0%(430/448),略低于采用胶体金标法检测的特异性99.1%(430/434)。采用ELISA法检测的乙肝表面抗原的假阳性率为4.02%(18/448),假阴性率为7.69%(4/52),χ2=8.34,P0.05。结论 ELISA法检测乙肝HBsAg灵敏度高、特异性强,易造成假阳性。     

支气管哮喘患者血清过敏原IgE增高的意义

目的探讨外源性过敏原特异性IgE增高在诊断支气管哮喘发病中的意义。方法采用德国默克公司的CAP试剂盒检测102例支气管哮喘患者和79例慢性支气管炎患者的过敏原特异性IgE。结果支气管哮喘患者以螨、霉、蒿类花粉过敏原阳性检出为高,慢性支气管炎患者以各种真菌／尘过敏原阳性为高（P〈0．05）;观察组患者屋尘／粉尘螨、狗／猫毛、烟曲霉／芽枝孢霉定量检测阳性值与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;当外源性哮喘在发作期时,血清中IgE含量大大高于其缓解期。两组患者的过敏反应有将强的季节性,高发于3～10月份。结论过敏原特异性IgE测定对寻找哮喘外源性病因特异性较好,血清总IgE水平对支气管哮喘的诊断起到协助作用,值得临床应用。     

利用SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测大鼠P物质mRNA方法的建立

目的：建立检测大鼠P物质（SP）mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法，为检测大鼠SP基因表达提供有效的手段。方法：提取大鼠中脑总RNA，扩增SP基因片段，将其克隆入pMD-18T载体，制作标准品质粒；应用SYBR Green Ⅰ双链嵌合染料，对连续稀释的标准品质粒进行实时PCR分析，评价所建立方法的检测灵敏度；对PCR产物进行溶解曲线分析评价其特异性。结果：标准品质粒构建成功，经酶切及测序鉴定，目的片段已插入pMD-18T载体；所建立的实时定量PCR方法的最低检测限度为10⁴个拷贝/反应，在每反应10⁴～10⁹拷贝范围内，Ct值（荧光信号达到设定阈值所经历的循环数）与起始模板浓度具有良好的线性关系，r=0.998。结论：所建立的检测大鼠SP mRNA的SYBR Green Ⅰ实时定量PCR方法具有敏感性高、特异性强和线性范围广等特点，适用于对大鼠各种组织SP的大量样本检测。     

2种方法检测乙型肝炎表面抗原的比较

目的:比较金标法(GICA)与酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的结果。方法:对5 632份血清标本同时采用GICA和ELISA检测HBsAg,以ELISA为标准,对GICA的灵敏度、特异性进行评价。结果:5 632份血清中以ELISA为标准,HBsAg阳性507例,阳性率为9.00%;GICA有34份假阴性,31份假阳性,灵敏度为93.84%,特异性为99.34%。34例假阴性中HBsAg均为弱阳性OD/CO值在1.50～4.76。2种方法测定的HBsAg结果差异无统计学意义(P0.05),且具有高度一致性(Kappa=0.929 4,P0.01)。结论:GICA适用于单份检测,无需任何仪器,且快速简便,但灵敏度、特异性稍差,特别是针对HBsAg弱阳性有漏诊可能;ELISA虽然步骤多,时间长,但灵敏度高,特异性强,适合批量检测。实验室应根据实际需要结合工作情况选用。     

化学发光免疫测定及其在医学上的应用

放射免疫测定法(RIA)的灵敏度高,特异性强,已广泛应用于生物体液中激素及其代谢产物、药物等物质的定量分析。但由于RIA需要核素标记物,因而不可避免地带来了与核素有关的不利因素。如核素标记物半衰期     

心电高频信息与冠心病

自1917年Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍｅｒ发现心电图ＱＲＳ波上的细小切迹以后,许多学者进行了广泛而深入的研究,肯定了心电高频成分对冠心病(ｃｏｒｏｎａｒｙｈｅａｒｔｄｉｓｅａｓｅ,ＣＨＤ)的诊断意义。然而到目前为止尚存在着不少问题,如特异性差,重复率低,诊断标准不统一等。为进一步解决这些问题,探讨出一种敏感性高、特异性强、安全可靠的非创性冠心病诊断方法,实为临床所急需。1　心电高频信息的定义和分析方法11　心电高频信息的定义　用频响在0.05～1000Ｈｚ以上,扫描速度100～700ｍｍ/ｓ、灵敏度20～40ｍｍ/ｍＶ的心电检查系统,在体表…