血管抑素基因转染联合化疗药物对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的治疗作用

目的研究血管抑素(angiostatin)基因转染联合化疗药物顺铂对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的协同治疗作用及其相关机制。方法使用人卵巢癌细胞株SKOV3建立人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为4组,分别注射空质粒PcDNA3、angiostatin/PcDNA3、化疗药物顺铂、angiostatin/PcDNA3 顺铂,质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的腹水量及腹腔荷瘤量,检测各组肿瘤组织中angiostatin的表达和微血管密度,利用TUNEL染色法行原位细胞凋亡分析。结果联合治疗组裸鼠的腹水量(P<0.01)及腹腔瘤负荷(P<0.005)均显著低于其他实验组;肿瘤组织中angiostatin蛋白局部高表达,微血管密度显著低于其他实验组(P<0.01),细胞凋亡指数显著高于其他实验组(P<0.05)。结论Angiostatin基因联合化疗治疗人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤可以产生协同抑制作用,多途径联合用药是提高疗效的有效方法之一。     

5一FU静脉、腹腔化疗诱导小鼠腹水瘤细胞凋亡研究

为探讨5－Fu静脉和腹腔给药途径诱导小鼠腹水瘤细胞凋亡的规律及其抗肿瘤作用机制，将45只腹腔内接种H22细胞的小鼠随机分为对照、静脉和腹腔内化疗3组。各组于注药后第3、5、7d分别收集腹水细胞行细胞形态观察、DNA电泳分析和流式细胞仪检测。结果显示，化疗组腹水细胞均呈现典型细胞凋亡形态学特征，同时可见细胞坏死。细胞凋亡率呈时间依赖性（P＜0．01），且腹腔内化疗组细胞凋亡率各时间点均明显高于静脉组（P＜0．01），提示5－Fu抗肿瘤作用机制是引起肿瘤细胞死亡和诱导和诱导肿瘤细胞凋亡共同作用的结果：腹腔内化疗效果明显优于静脉化疗。     

体外射频热疗配合腹腔热灌注化疗治疗晚期卵巢癌疗效观察

目的 观察体外射频热疗配合腹腔热灌注化疗对晚期卵巢癌的治疗效果,探讨治疗方法.方法 对15例晚期卵巢癌患者全部行常规腹腔穿刺,注入已预热到45℃的生理盐水+顺铂并用射频热疗机进行体外热疗,每周热灌注化疗1次,单纯热疗1次;共治疗2～3周.观察患者治疗后腹水控制及肿瘤病灶情况等.结果 15例患者腹水全部控制,病灶缩小或消失.结论 腹腔热灌注化疗结合体外射频热疗治疗晚期卵巢癌的效果明显.     

腹腔化疗的新进展

中晚期卵巢癌常播散,种植于盆腔,腹腔内并发生腹水。腹腔内灌注化疗可提高腹腔内肿瘤转移灶局部药物浓度,减轻全身副作用,故腹腔内化疗已成为妇科恶性肿瘤施行细胞减灭术(Cytoreducing operation)后化疗的常规手段之一。本文就腹腔化疗问题进行综述。     

腹腔化疗治疗卵巢癌合并腹水的护理

卵巢癌已成为最致命的妇科恶性肿瘤之一。因为卵巢癌病人早期无自觉症状，无意中发现腹部包块大多已到晚期，常常伴有腹水。选择腹腔化疗是卵巢癌合并腹水最为理想的治疗途径之一。就目前的临床资料看，通常每4周进行一次先期化疗，可持续1～2个疗程腹腔化疗，可直接作用于种植在腹腔脏器表面或腹膜表面的微小病灶，控制恶性腹水生长。然后再进行手术治疗。我科于2001年1月至2003年8月收治81例卵巢癌病人，其中选择35例卵巢癌伴有大量腹水不能进行手术治疗的病人，采用腹腔穿刺放腹水行细胞学检查，找到癌细胞明确诊断后，经腹腔灌注大剂量化疗药物治疗1～2个疗程后，观察腹水消失、肿瘤缩小，为手术创造条件。     

人卵巢癌动物模型中循环无细胞DNA含量与瘤负荷及细胞凋亡的关系

目的 研究循环无细胞DNA(cfDNA)的来源,探讨血清cfDNA水平在卵巢上皮性癌临床诊断及病情监测中的意义.方法 利用裸鼠制备人卵巢癌细胞荷瘤模型及腹水模型,并对部分裸鼠实施化疗.应用半定量PCR法检测裸鼠血清及腹水中ALU115、ALU247以及CA125-cfDNA舍量,TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况,并且对荷瘤裸鼠化疗前后血清cfDNA水平变化进行检测.结果 cfDNA在各组荷瘤裸鼠的血清及腹水中均有表达,在腹水中的表达值与同一个体血清中含量相比没有显著性差异.血清cfDNA水平与瘤负荷成正相关.cfDNA在化疗后1 d达最大值,而后缓慢下降,在化疗10 d其值明显低于化疗前水平.化疗前后cfDNA与肿瘤细胞的凋亡率呈正相关.结论 血清cfDNA来源于肿瘤细胞,并与细胞凋亡和坏死有关,可能为卵巢上皮性癌的诊断及病情监测提供理论依据.     

腹腔持续热化疗治疗卵巢癌腹水的疗效与Ca125的相关性研究

目的:研究腹腔持续热化疗对晚期卵巢癌腹水患者血清Ca125水平变化与评估疗效的关系.方法:对132例卵巢癌腹水患者随机分成两组,腹腔持续热化疗组与对照组,均静脉滴注紫杉醇175mg/m2,dl,腹腔持续热化疗组70例:放腹水后通过恒温系统腹腔持续循环灌注入腹温度为44～45℃生理盐水2000～2500ml,1小时,循环液中加入顺铂20mg,循环放水后直接腹腔保留顺铂30mg.对照组62例:放腹水后灌注顺铂50mg.两组均隔天1次,共3次,3周为1周期,共2～4周期.治疗后4周、3个月、6个月年分别观察腹水变化及测血清Ca125值.结果:腹腔持续热化疗组总有效率85.7%,对照组总有效率54.8%,两组比较有显著性差异(P<0.01).结论:腹腔持续热化疗治疗晚期卵巢痛腹水的疗效较好,血清Ca125水平明显下降,对Ca125水平影响显著.     

卵巢癌腹水的综合治疗(附19例疗效分析)

我科对1990～1993收治的19例中晚期卵巢癌出现腹水的患者采用了腹腔内化疗与全身化疗相结合的治疗方法，取得了较好的疗效。现报道如下。1材料与方法1．l临床资料。全部病例均经细胞学或病理证实为卵巢癌，其中上皮性肿瘤10例，生殖细胞肿瘤4例，未分化腺癌5例。按FIGO临床分期，血期15例，IV期4例。腹水诊断由B超确定，腹水量为中等量以上。1．2治疗办法。回．2．l腹腔化疗：每次抽腹水量800ml一1500ml后，再将顺拍针80mg溶于3Oml生理盐水中注入腹腔，7～10d重复1次，5～6次为1疗程。1．2．2全身化疗：于腹腔化疗后第2周开始。阿霉素针…     

VCBP方案超大剂量化疗消除卵巢癌块

根据药理学的研究 ,抗癌药一般难以渗入并溶解大于 2ｃｍ以上的卵巢癌块。但对化疗敏感的较大肿瘤 ,只要反复多次局部用药 ,死亡的细胞层被消除 ,药物仍可继续产生细胞毒作用而发挥连续效应〔1〕。我们结合卵巢癌的细胞周期规律 ,设计用对卵巢癌有显效的顺铂 ,以短期超大剂量腹腔化疗为主的ＶＣＢＰ(长春新碱、环磷酰胺、平阳霉素加顺铂 )方案治疗。治疗中发现 3例卵巢癌块消失。1　资料及方法1 1　临床资料　该 3例均为我院经病理确诊的卵巢癌患者 ,其中 2例分别为化疗后手术 ,确诊为浆液性乳头状囊腺癌和转移卵巢癌 ,1例经腹水细胞检查确…     

腹腔热化疗对大鼠卵巢癌细胞凋亡的影响

目的 观察顺铂腹腔热化疗对卵巢癌大鼠的疗效,并且从细胞凋亡角度进一步探讨腹腔热化疗治疗卵巢癌的机制,为临床应用腹腔热化疗治疗卵巢癌提供实验依据.方法 体外培养近交系Fischer 344大鼠低分化上皮性卵巢癌细胞株NuTu-19,将一定数昔的培养细胞分别注入24只雌性近交系Fischer344大鼠腹腔中,建立卵巢癌腹腔转移瘤动物模型;实验动物随机分组后,应用顺铂及不同加热方式进行治疗;治疗结束后处死大鼠,提取腹腔积液中游离卵巢癌细胞,应用流式细胞仪、PI染色检测其细胞周期比率及细胞凋亡率;取卵巢癌腹腔转移瘤组织进行免疫组化分析,检测凋亡相关基冈bcl-2及bax的表达.结果 ①所有实验动物均表现出不同程度的血性腹腔积液及腹腔转移瘤微小结节病灶;②顺铂或加热治疗均町提高大鼠腹腔积液中卵巢癌细胞的凋亡率（P〈0.05）,顺铂与微波持续加热同时应用后细胞凋亡率进一步升高（P〈0.05）;③顺铂或一次性加热治疗可降低大鼠腹腔积液中游离卵巢癌细胞G0/G1期比率（P〈0.05）;微波持续加热治疗或与顺铂同时应用均可降低腹腔积液中卵巢癌细胞S期细胞比率（P〈0.05）;④顺铂或微波持续加热治疗的大鼠腹腔转移瘤组织中bcl-2基因表达降低（P〈0.05）,bax基因表达升高（P〈0.05）,两种疗法联合治疗具有正向协同作用（P〈0.05）.结论 ①顺铂及不同加热方式治疗可通过促进细胞凋亡或抑制细胞进入增殖期从而起到治疗卵巢癌的作用,且顺铂联合微波持续加热治疗效果最佳.②顺铂及微波持续加热治疗均可降低卵巢癌组织中bcl-2基因表达,增加bax基因表达,从而诱导卵巢癌细胞凋亡,并且两法同时应用效果更佳.     

雷帕霉素增强Ishikawa细胞化疗敏感性实验研究

目的:研究雷帕霉素(RA)单独或联合阿霉素、顺铂及紫杉醇对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响,为临床应用RA治疗子宫内膜癌提供理论依据。方法:应用10μmol/L RA与各1/2的半数抑制浓度(IC50)量的阿霉素、顺铂及紫杉醇联合,细胞克隆形成法和流式法检测细胞存活率和凋亡率;RT-PCR法检测RA、阿霉素、顺铂及紫杉醇对细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达影响;Western blot法检测10μmol/L RA作用6,12,24h后细胞Bcl-2蛋白表达水平。结果:RA联合化疗可显著提高各组化疗药的作用效果,降低细胞存活率,诱导细胞凋亡,与单纯化疗组相比有统计学差异(P<0.05);RA可显著降低宫颈癌细胞mTOR基因mRNA水平,抑制Bcl-2蛋白表达。结论:RA通过抑制mTOR通路,降低抗凋亡蛋白Bcl-2表达,提高化疗药物对子宫内膜癌细胞的杀伤作用。     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的 探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法 采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等6种化疗药物诱导4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果。并与三磷酸腺苷生物发光法（ATP法）检测结果进行对比。结果 同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同，与ATP法比较二者的检测结果存在一致性（P0=0.75)。结论 上述结果提示，细胞凋亡检测能直接用于 了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度，若作为一种药物敏感性试验方法与ATP法组合应用，将有可能提高临床应用效果。     

Apoptosis of drug-resistant human ovarian carcinoma cell line COC1/DDP induced by survivin antisense oligonucleotides

Currently, surgery-oriented treatment plays a major role in the treatment of ovarian cancer patients. But 5-year survival rate of patients is still around 30%. One of the main reasons for the Iow survival rate is the drug resistance of tumor cells against chemotherapy.1,2 The function of antiapoptosis in the course of initiation and progress of cancer has a close relationship with drug resistance of tumor cells. Survivin is a new discovered anti-apoptosis gene, its expression levels correlating with more aggressive disease and poor clinical outcome in many of these tumors. It has been reported that survivin is expressed during fetal development and in cancer tissues.3 Furthermore,survivin overexpression, by disrupting the balance between cell proliferation/differentiation and apoptosis, may relate with the resistance to a variety of apoptotic stimuli, including chemotherapy.4,5 We designed antisense oligonucleotides of survivin to treat the drug-resistant human ovarian carcinoma cell line COC1/DDP, and studied its effects on inducing COC1/DDP apoptosis. The purpose of this study was to find a novel approach to improve the sensitivity of ovarian carcinoma chemotherapy.     

细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验及其与ATP法的比较

目的　探讨细胞凋亡检测用于卵巢癌化疗药物敏感性试验的可行性。方法　采用末端标记法直接检测顺氯胺铂等 6种化疗药物诱导 4例卵巢癌实体瘤细胞凋亡的结果 ,并与三磷酸腺苷生物发光法 (ATP法 )检测结果进行对比。结果　同一种化疗药物对不同来源的癌细胞的细胞凋亡诱导程度不同 ,与 ATP法比较二者的检测结果存在一致性 (P0 =0 .75 )。结论　上述结果提示 ,细胞凋亡检测能直接用于了解药物诱导肿瘤细胞凋亡的程度 ,若作为一种药物敏感性试验方法与 ATP法组合应用 ,将有可能提高临床应用效果     

上皮性卵巢癌组织中COX-2表达及塞来昔布对卵巢癌细胞株生长抑制作用的研究

目的：探讨环氧合酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在上皮性卵巢癌中的表达及其选择性抑制剂塞来昔布对卵巢癌细胞株生长的影响.方法：应用免疫组化的方法检测正常卵巢、卵巢良性肿瘤、上皮性卵巢癌组织及卵巢癌细胞株0VCAR3、SKOV3中COX-2的表达,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）快速比色法、吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）染色结合荧光显微镜等技术,研究塞来昔布对0VCAR3细胞增殖和凋亡的影响.结果：COX-2在上皮性卵巢癌组织中高表达,阳性率为71.1%,而在正常卵巢和良性卵巢肿瘤中未见表达.COX-2在上皮性卵巢癌组织中的表达与临床分期、组织学类型、组织学分级无关（P＞0.05）,而与淋巴结转移有关（P＜0.05）.塞来昔布可抑制OVCAR3、SKOV3细胞生长,呈浓度和时间依赖性,S-N-K分析及最小显著差（LSD）检验组间两两比较,P均＜0.05.荧光显微镜下见典型的凋亡形态学改变,凋亡比例呈剂量和时间依赖,S-N-K分析组间两两比较,P均＜0.05.结论：上皮性卵巢癌组织及细胞株0VCAR3、SKOV3中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制卵巢癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡,塞来昔布可能成为卵巢癌化疗的有效药物.     

正态水抗肿瘤作用的研究

目的：探讨正态水对多种肿瘤细胞系的生长抑制作用及机制。方法以正态水为溶剂配制的培养液培养乳腺癌、卵巢癌、肺癌、前列腺癌、肝癌、胃癌、黑色素瘤等细胞系的肿瘤细胞,观察正态水对肿瘤细胞生存率的影响;同时,观察正态水对阿霉素敏抗肿瘤作用的影响;应用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率。结果采用正态水配制的培养液培养多种肿瘤细胞24 h后,细胞增殖率均有所下降;用正态水配制的培养液培养乳腺癌MCF-7细胞传代22代后,生长速度下降;正态水增加了低浓度阿霉素对肿瘤细胞杀伤的敏感性。应用流式细胞术检测显示肿瘤细胞生长抑制系由肿瘤细胞凋亡所致。结论正态水对肿瘤细胞增殖有抑制作用,且可增加阿霉素抗肿瘤敏感性。其抗肿瘤作用机制可能与诱导肿瘤细胞发生凋亡有关。     

凋亡抑制基因survivin与卵巢癌的研究新进展

卵巢癌是女性生殖器官最常见的恶性肿瘤之一,其发病率高而存活率低,对女性的健康造成极大的威胁.尽管目前采用手术、化疗、放疗等治疗手段使卵巢癌的存活率有了很大提高,但晚期患者即使经过系统治疗达完全缓解,仍有很高的复发率.而耐药又是治疗失败的主要原因.Survivin是迄今发现的最强的凋亡抑制基因,其高表达使肿瘤细胞对多种化疗药物的耐受性增加,并介导肿瘤多药耐药的形成.鉴于survivin在卵巢癌细胞周期调控、凋亡与血管形成中的发挥着重要作用,探索各种新的分子生物学技术和基因治疗方法,阻断survivin表达而拮抗其抑制细胞凋亡的能力,降低细胞凋亡的阈值,恢复肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,进而使卵巢癌获得根治成为可能,从而避免卵巢癌细胞耐药和转移扩散给病人带来的痛苦,具有深刻的指导意义.     

钙通道阻滞剂-心痛定提高卵巢癌化疗效果

目的探讨钙通道阻滞剂-心痛定对促进化疗药物诱使卵巢癌细胞凋亡的作用.方法从27例复发卵巢癌患者腹水中提取富含癌细胞的悬液,应用2种荧光单克隆抗体P170、CD95标记,经流式细胞仪检测.结果 应用心痛定组化疗后癌细胞CD95表达含量均高于对照组(P＜0.05);心痛定对癌细胞P170表达含量无明显影响;化疗可使外周血淋巴细胞CD95表达含量增加.结论心痛定对加强化疗药物疗效有明确的作用,特别是对耐药性患者具有重要的临床应用价值.