鹿茸多肽对骨关节疾病及生殖系统作用的研究进展

鹿茸多肽对骨关节疾病具有良好防治效果,并具有一定的改善生殖系统功能的作用.本文将诸多对于鹿茸多肽对于骨关节疾病、生殖系统作用予以分类总结.     

鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞增殖及凋亡调节作用的实验研究

目的观察鹿茸多肽对骨性关节炎细胞增殖和凋亡的保护、调节作用。方法建立兔骨性关节炎模型,体外分离培养软骨细胞,以假手术组细胞为正常对照组细胞,造模组细胞为骨关节炎软骨,分别加入6．25μg／mL鹿茸多肽为低剂量组,加入12．5μg／mL鹿茸多肽为中剂量组,加入25μg／mL鹿茸多肽为高剂量组,通过流式细胞仪检测骨性关节炎细胞增殖及凋亡。结果与正常对照组比较,模型组G0／G1期细胞比例显著降低（P〈0．01）,G2／M和S期细胞比例明显升高（P〈0．05）。鹿茸多肽对骨关节炎软骨细胞周期各时相并无明显的调控作用,可明显降低早期凋亡细胞比例,且有一定的量效关系。结论鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞的早期凋亡有明显抑制作用。     

鹿茸的化学成分及其生物活性研究进展

鹿茸含有微量元素、多肽、多糖、多胺等多种生物活性物质。鹿茸多肽具有促进神经再生及表皮细胞和成纤维细胞增殖等作用;鹿茸多糖能调节免疫;鹿茸多胺具有抗氧化作用;鹿茸提取物对机体的免疫功能、性功能、心血管系统有良好的调节作用,从而能提高机体的抗氧化作用,延缓衰老,有助于恢复和保持机体的健康。     

鹿茸多肽对实验性骨折的治疗作用及机理研究

目的：探讨鹿茸多肽（ Ｐ Ａ Ｐ）治疗骨折的作用机理。方法：离体观察鹿茸多肽对３ Ｈ Ｔｄ Ｒ 掺入家兔肋软骨、人胚关节软骨及鸡胚头盖骨成骨样细胞的影响;整体利用大鼠完全缺损性挠骨骨折模型,观察鹿茸多肽 １０ 和 ２０ ｍ ｇ·ｋｇ－ １剂量对骨痂的形成、骨折的愈合以及骨痂内羟脯氨酸和钙含量的影响。结果：离体试验表明,鹿茸多肽１０～５０ ｍ ｇ· Ｌ－ １对家兔和人胚软骨细胞以及鸡胚头盖骨成骨样细胞都有促进有丝分裂作用,提示鹿茸多肽的细胞增殖作用无种属特异性。整体鹿茸多肽能明显加速骨痂的形成及骨折的愈合,明显增加骨痂内羟脯氨酸和钙含量。结论：鹿茸多肽通过促进骨、软骨细胞增殖及促进骨痂内骨胶原的积累和钙盐沉积而加速骨折愈合。     

鹿茸多肽药理作用的研究进展

鹿茸是鹿科动物梅花鹿或马鹿雄鹿未骨化密生茸毛的幼角,具有免疫增强、神经保护、生殖促进、抗骨质疏松、抗衰老、抗肝纤维化和抗关节炎等多种功效.本文对鹿茸多肽的药理作用及未来展望进行综述.     

鹿茸多肽对冈田酸致大鼠海马神经元损伤时Tau、Bcl-2和Caspase-3表达的影响

目的：观察冈田酸诱导大鼠海马神经元（HT22细胞）损伤时神经元微管相关蛋白（Tau蛋白）和凋亡相关因子的变化,探讨鹿茸多肽对神经细胞损伤的保护作用,阐明其相关作用机制。方法：大鼠HT22细胞体外传代培养,冈田酸诱导HT22细胞损伤。HT22细胞分为正常对照组、DMSO对照组、冈田酸损伤模型组和不同浓度鹿茸多肽组（终浓度分别为50、500及1000 mg·L^-1）,37℃、5% CO₂孵育24 h。采用免疫细胞化学染色法、Western blotting法和RT-PCR法检测各组细胞中Tau蛋白磷酸化水平及凋亡相关因子Bcl-2和Caspase-3的表达。结果：免疫细胞化学染色法染色,磷酸化Tau蛋白的表达呈棕黄色颗粒,与正常对照组比较,冈田酸损伤模型组细胞中棕黄色颗粒明显增多;与冈田酸损伤模型组比较,500和1000 mg·L^-1鹿茸多肽组细胞中棕黄色颗粒明显减少。Western blotting法检测,与冈田酸损伤模型组比较,各浓度鹿茸多肽组细胞中Tau蛋白表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）,1000 mg·L^-1鹿茸多肽组细胞中Bcl-2表达水平明显升高（P<0.05）,各浓度鹿茸多肽组细胞中Caspase-3表达水平均无明显变化（P>0.05）。RT-PCR法检测,与冈田酸损伤模型组比较,各浓度鹿茸多肽组细胞中Tau mRNA表达水平明显降低、Bcl-2mRNA表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,500和1000mg·L^-1鹿茸多肽组细胞中Caspase-3mRNA表达水平明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论：鹿茸多肽可能通过抑制Tau过度磷酸化及抑制细胞凋亡调控机制,对冈田酸诱导的神经细胞损伤起到保护作用。     

鹿茸活性成分现代药理研究进展

通过查询2000年以后的文献对鹿茸及其活性成分的现代药理做了归纳总结,主要从鹿茸多肽、鹿茸多胺、鹿茸多糖、鹿茸精及鹿茸醇提物等几个方面进行综述.     

鹿茸多肽对β-淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞凋亡的保护作用

[目的]探讨鹿茸多肽对β-淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞凋亡的保护作用。[方法]体外进行胎鼠脊髓神经元细胞培养传代,细胞进入对数生长期后进行实验。MTT比色法检测不同浓度β-淀粉样蛋白作用24h后细胞活力变化;检测25μmol／L β-淀粉样蛋白作用24h后,细胞凋亡百分数和观察细胞caspase-3表达情况。[结果]不同浓度的β-淀粉样蛋白作用24h后对细胞活力均明显下降,并呈剂量依赖性（P〈0．05）;鹿茸多肽可明显抑制β-淀粉样蛋白诱导的脊髓神经元细胞凋亡现象（P〈0．05）,且可使caspase-3的表达量下降。[结论]鹿茸多肽通过抑制β-淀粉样蛋白诱导脊髓神经元细胞caspase-3表达增高而对其细胞凋亡发挥保护作用,本实验为探索新的治疗脊髓神经损伤的药物提供了重要的理论基础。     

中药调节兔膝骨关节软骨代谢作用的研究

目的研究中药对软骨细胞活性及代谢反应的调节规律,探讨中药治疗骨关节炎的作用机理。方法从细胞增殖(MTT法)、细胞DNA合成(3H-TdR掺入率)、蛋白多糖的形成(甲苯胺蓝染色)和Ⅱ型胶原的合成(3H-脯氨酸掺入)观察兔膝骨关节软骨细胞代谢变化。结果鹿茸多肽及维骨力对细胞增殖及蛋白多糖合成有促进作用,益气通络方对细胞增殖及蛋白多糖合成起抑制作用。益气通络组、鹿茸多肽组及维骨力组对软骨细胞的增殖有促进作用,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);鹿茸多肽组及维骨力组对软骨细胞DNA及Ⅱ型胶原的合成有促进作用,与对照组相比有显著性差异(P<0.05);益气通络组对软骨细胞代谢起抑制作用(P<0.05)。结论益气通络方阻断分解代谢细胞因子,防止胶原纤维转型而促进细胞增殖;鹿茸多肽促进软骨细胞合成代谢而促进软骨细胞增殖,维骨力保护软骨细胞而促进软骨细胞增殖。     

鹿茸多肽对实验性骨折的治疗作用及机理研究

目的：探讨鹿茸多肽（ＰＡＰ）治疗骨折的作用机理,方法：离体观察鹿茸多肽对＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入家兔肋软骨,人胚关节软骨及鸡胚头盖骨成骨样细胞的影响。整体利用大鼠完全缺损性桡骨骨折模型,观察鹿茸多肽１０和２０ｍｇ·ｋｇ＾－１剂量对骨痂形成,骨折的愈合以及骨痂内羟脯氨酸和钙含量的影响。结果：离体试验表明,鹿茸多肽１０～５０ｍｇ·Ｌ＾－１对家兔和人胚软骨细胞以及鸡胚头盖骨成骨样细胞都有促进有丝分裂作用,提示     

鹿茸多肽的提取工艺研究

目的建立鹿茸粉中提取鹿茸多肽的最佳提取工艺条件,为制剂的研发提供基础。方法采用L9(34)正交设计法,以鹿茸多肽提取率为评价指标,考察加水量、提取时间、提取次数三因素对水提取工艺的影响。结果确定以水为溶剂超声提取的最优工艺条件:用10倍量水,提取3次,每次30 min。乙醇提取鹿茸多肽的最优条件。结论经过验证试验该鹿茸多肽的提取工艺稳定、简便、合理、可行。     

响应面法优化超声提取梅花鹿鹿茸多肽工艺

目的:采用响应面法优化梅花鹿鹿茸多肽的提取工艺。方法:以鹿茸多肽含量为评价指标,通过单因素试验分别考察粉碎粒度、液料比和提取时间3个因素对多肽含量的影响,采用Box-Behnken的中心组合实验设计原理优化梅花鹿鹿茸多肽的提取工艺。结果:最佳提取工艺:粉碎粒度为80~100目,液料比为12,提取时间为40 min。结论:响应面法优化梅花鹿茸多肽提取工艺合理,具有较好的应用价值。     

鹿茸多肽对轻度认知功能障碍模型大鼠海马组织中ADAM10、BACE-1表达的影响

目的观察鹿茸多肽对轻度认知功能障碍模型大鼠学习记忆功能及海马组织中解聚素和金属蛋白酶10(A DisintegrinAnd Metalloproteinase 10,ADAM10)、β-淀粉样前体蛋白水解酶1(β-site APP cleavage enzyme-1,BACE-1)表达的影响,探讨鹿茸改善MCI学习记忆障碍的相关作用机制。方法 Wistar大鼠60只随机分为6组,即空白对照组、模型组、阳性对照组、鹿茸多肽高、中、低剂量组,连续给药21 d,末次给药后1 h,腹腔注射氢溴酸东莨菪碱复制MCI大鼠模型。Morris水迷宫观察各组大鼠行为学变化,Elisa法检测各组大鼠海马组织中ADAM10和BACE-1含量,RT-PCR法检测各组大鼠海马组织中m RNA表达水平。结果 Morris水迷宫结果表明,与模型组比较,鹿茸多肽可以延长模型动物的平台穿越次数,增加有效区停留时间(P 0.05或P 0.01)。Elisa检测结果表明,与模型组比较,鹿茸多肽可明显提高模型动物海马组织中的AMAM10、降低BACE-1含量(P 0.05)。RT-PCR检测结果表明,与模型组比较,鹿茸多肽可明显提高模型动物海马组织中的AMAM10、降低BACE-1 mRNA表达水平(P 0.05或P 0.01)。结论鹿茸多肽可以提高氢溴酸东莨菪碱所致的MCI模型大鼠的学习记忆能力,其作用机制与提高海马组织中ADAM10m RNA表达水平,抑制BACE-1 mRNA表达有关。     

鹿茸多肽对IL-1β诱导退变的椎间盘终板软骨细胞保护作用

目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠椎间盘终板软骨细胞的影响,分析其对终板软骨细胞保护的作用机制。方法:选取1月龄的健康SD大鼠,并对其椎间盘终板软骨细胞进行分离与培养,诱导组单加入10μg/L的IL-1β,药物处理组分3组,分别在培养基中加入10μg/L的IL-1β和10、30、50μg/mL的鹿茸多肽,MTT比色法检测3个时间节点(24、48、72 h)各组椎间盘终板软骨细胞的增殖情况;流式细胞仪检测大鼠椎间盘终板软骨细胞的凋亡;qPCR法检测Collagen Ⅱ、Collagen X、caspase-3、MMP-13、Bax、Bcl-2基因的表达水平。结果:在24、48、72 h时间点,MTT法检测10μg/mL鹿茸多肽组在各时间点终板软骨细胞增殖情况与IL-1β诱导组比较,差异不具有统计学意义(P0.05);而30μg/mL组和50μg/mL组均能拮抗IL-1β对软骨终板细胞増殖的抑制作用,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01);流式分析结果表明,不同浓度的鹿茸多肽均能够降低IL-1β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例(P0.05,P0.01);qPCR检测结果表明,IL-1β诱导组的Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达减弱,Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达增强,与空白对照组对比差异具有统计学意义(P0.05);各浓度鹿茸多肽组均能够上调Cllagen Ⅱ、Bcl-2基因的表达(P0.05,P0.01),下调Collagen X、caspase-3、Bax、MMP-13基因的表达(P0.05,P0.01),以50μg/mL组效果最为显著(P0.01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽通过抑制软骨终板细胞的凋亡,促进其増殖,调控其相关基质蛋白及基质降解酶、凋亡因子等基因的表达,起到了对退变的椎间盘终板软骨细胞的保护作用。     

鹿茸对大鼠急性心肌缺血后期心肌组织SOD、MDA含量的影响

目的:研究鹿茸对大鼠急性心肌缺血后期心肌组织SOD、MDA含量的影响.方法:通过结扎大鼠左冠状动脉前降支复制心肌缺血模型,用分光光度法检测心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量.结果:鹿茸可通过提高缺血心肌组织SOD活性、降低MDA含量对缺血心肌的继发性损伤起到一定程度的保护作用.结论:鹿茸对动物结扎冠状动脉实验性心肌缺血具有保护作用.     

鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞金属蛋白酶mRNA表达的影响

目的:在家兔膝关节骨性关节炎模型的基础上观察鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞的影响。方法:随机分成两组,实验组建立Hulth骨性关节炎模型,对照组仅行双侧膝关节切开术,以建立模型。以正常新西兰大白兔膝关节软骨为正常对照组,以鹿茸多肽为实验药,法滋隆为阳性对照药。分别进行MTT法检测、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测及琼脂糖电泳检测,获取前后软骨细胞核酸中金属蛋白酶表达情况。结果:鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞具有促进增殖作用;骨性节炎软骨细胞直接分泌到胞外的金属蛋白酶含量变化不明显;骨性关节炎软骨细胞核酸中金属蛋白酶出现高表达。结论:骨性关节炎软骨细胞在软骨细胞正常分化及增殖发生改变的过程中,骨性关节炎软骨基质降解可能是金属蛋白酶与其他因子协同作用的结果;鹿茸多肽可促进骨性关节炎软骨细胞增殖,并可抑制骨性关节炎软骨细胞中金属蛋白酶的过度表达,可能对治疗骨性关节炎有较好的作用。     

鹿茸多肽对IL-1β诱导的大鼠软骨终板细胞增殖和Collagen Ⅰ、Collagen Ⅱ、IL-6mRNA表达的影响

目的:观察不同浓度的鹿茸多肽对IL~(-1)β诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞增殖和Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,CollagenⅠ)、CollagenⅡ、白细胞介素(interleukin-6,IL-6) mRNA表达的影响。方法:选取健康SD大鼠(1个月龄),取其脊柱椎间盘软骨终板细胞,并培养至第3代软骨终板细胞进行实验。空白对照组不做任何处理,诱导组只加入10μg·L~(-1)的IL~(-1)β,给药组在培养基中加入10μg·L~(-1)的IL~(-1)β和不同质量浓度的鹿茸多肽(分别为10 mg·L~(-1)、30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1))。用MTT比色法检测3个时间点(24 h、48 h、72 h)各组椎间盘软骨终板细胞的增殖情况; qP CR法检测CollagenⅠ、CollagenⅡ及IL-6 mRNA的表达。结果:MTT法检测结果:鹿茸多肽10 mg·L~(-1)组的软骨终板细胞增殖与诱导组比较,差异无统计学意义(P 0. 05);鹿茸多肽30 mg·L~(-1)组和鹿茸多肽50 mg·L~(-1)组能促进软骨终板细胞的增殖,与诱导组比较,差异有统计学意义(P 0. 05,P 0. 01)。qP CR检测结果:IL~(-1)β诱导组的CollagenⅡmRNA的表达降低,CollagenⅠ、CollagenⅡ、IL-6的mRNA的表达升高,与空白对照组比较,差异有统计学意义(P 0. 05);不同质量浓度的鹿茸多肽均能增强CollagenⅡmRNA的表达,降低CollagenⅠ和IL-6 mRNA的表达,差异均有统计学意义(P 0. 05,P 0. 01),30 mg·L~(-1)、50 mg·L~(-1)鹿茸多肽效果更加显著(P 0. 01)。结论:一定浓度的鹿茸多肽能减轻IL~(-1)β对软骨终板细胞增殖的抑制,升高CollagenⅡmRNA的表达,降低CollaoenⅠ、IL-6 mRNA的表达,从而延缓椎间盘的退变。     

鹿茸多肽加速顽固性鼓膜穿孔愈合的疗效观察

鼓膜穿孔,是耳鼻喉科常见病、多发病,多由外伤或中耳炎未彻底治愈所致,近年来发病率有所上升.鼓膜由上皮层、纤维层、粘膜层构成,依据鹿茸多肽有促进表皮细胞和成纤维细胞增殖的功效,将其涂于残余鼓膜边缘,目的通过此项临床研究而得出鹿茸多肽缩短鼓膜愈合时间,提高疗效.本研究联合三家三级甲等医院,采取随机分组对照的方法,观察200例患者,重点在于规范操作方法,观察治疗效果.     

鹿茸多肽介导心肌干细胞分化对终末心肌分化基因ANP和MLC-2v表达的影响

目的：探讨鹿茸多肽介导心肌干细胞（CSC）分化对终末心肌分化基因心房钠尿肽（ANP）和心肌肌凝蛋白轻链2（MLC-2v）表达的影响,阐明其修复受损心肌的作用机制。方法：选取出生2d的雄性Wistar大鼠,提取CSC,免疫荧光鉴定CSC表面标志物c-Kit,流式细胞术鉴定CSC纯度。以培养皿为实验单位,分为空白对照组（加等量缓冲液）、5-氮胞苷组（终浓度3 μmol·L^-1）、鹿茸多肽组（终浓度800 mg·L^-1）和联合组（3 μmol·L^-1 5-氮胞苷＋800 mg·L^-1鹿茸多肽）,于37℃、5% CO₂培养箱中培养48 h。ELISA法检测各组细胞上清液中ANP和MLC-2v表达水平,RT-PCR法检测各组细胞中ANP和MLC-2v mRNA表达水平。结果：获得纯度>95%的CSC。ELISA法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组细胞上清中ANP和MLC-2v表达水平明显升高（P<0.05）;联合组ANP和MLC-2v表达水平高于5-氮胞苷组和鹿茸多肽组,但差异无统计学意义（P>0.05）。RT-PCR法检测,与空白对照组比较,5-氮胞苷组、鹿茸多肽组和联合组ANP和MLC-2v mRNA表达水平明显升高（P<0.05）。结论：鹿茸多肽可以通过增强心肌分化基因ANP和MLC-2v表达介导CSC分化为心肌细胞,且在一定程度上减轻5-氮胞苷所致的细胞毒性。     

鹿茸多肽对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和胶原蛋白分泌能力的影响及其机制

目的：探讨鹿茸多肽对小鼠胚胎成纤维细胞NIH/3T3增殖和胶原蛋白分泌能力的影响,并阐明其相关作用机制。方法：选取对数生长期的NIH/3T3细胞,加入不同剂量（1.56、3.13、6.25、12.50、25.00、50.00、100.00和200.00 mg·L^-1）鹿茸多肽作为实验组,以加入0 mg·L^-1鹿茸多肽的细胞作为空白对照组,以加入50μg·L^-1碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的细胞作为阳性对照组。MTT法检测各组NIH/3T3细胞存活率,ELISA法检测各组NIH/3T3细胞中胶原蛋白分泌情况,划痕愈合实验检测各组NIH/3T3细胞的迁移能力,Western blotting法检测各组NIH/3T3细胞的细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK 1/2）的磷酸化蛋白（p-ERK 1/2）表达水平,免疫荧光法检测转化生长因子β1（TGF-β1）的表达情况。结果：与空白对照组比较,阳性对照组和6.25、12.50、25.00、50.00、100.00及200.00 mg·L^-1鹿茸多肽组细胞存活率明显升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,阳性对照组和6.25、12.50、25.00和50.00mg·L^-1鹿茸多肽组NIH/3T3细胞培养液中Ⅰ型胶原蛋白水平明显升高（P<0.05或P<0.01）,阳性对照组和12.50及25.00 mg·L^-1鹿茸多肽组NIH/3T3细胞培养液中Ⅲ型胶原蛋白水平明显升高（P<0.05）。与空白对照组比较,阳性对照组和12.50mg·L^-1鹿茸多肽组细胞划痕愈合率、NIH/3T3细胞中p-ERK 1/2表达水平及NIH/3T3细胞质中TGF-β1表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）。结论：鹿茸多肽能促进NIH/3T3细胞增殖和胶原蛋白分泌,并提高其迁移能力,其作用机制是可能是通过激活ERK 1/2磷酸化及增加TGF-β1表达实现的。