结直肠癌患者Kras基因突变与分化程度及组织类型的相关性研究

目的:探究结直肠癌KRAS基因突变与分化程度及组织类型的相关性研究.方法:选取结直肠癌患者89例,其中26例KRAS突变阳性患者纳入突变组,63例KRAS突变阴性且无其他突变患者纳入未突变组.采用荧光定量PCR Taqman-ARMS探针法测定KRAS基因突变,比较组间的差异性与相关性.结果:结直肠癌患者KRAS突变阳...     

ctDNA检测KRAS基因在结直肠癌预后中价值的临床研究及Meta分析

目的通过临床病例数据研究,探讨ctDNA检测结直肠癌患者外周血中KRAS等基因突变在患者预后中的意义,并根据探索的结果做进一步的Meta分析,分析ctDNA检测KRAS突变对结直肠癌患者术后无病生存期的影响。方法采集30例患者外周血标本,通过探索队列和验证队列,分析KRAS等基因突变与患者的临床病理特征、疗效及预后的关系。收集多个Ⅲ期临床试验中KRAS突变与结直肠癌患者术后无病生存期的数据,应用Stata MP.17软件进行Meta分析,评估KRAS突变对结直肠癌患者术后无病生存期的影响。结果30例临床病例中,共有12例发现RAS突变情况,其中KRAS突变10例,是突变频率最高的基因,探索队列分析显示RAS、TP53、SMAD4基因共突变患者无病生存期较短。按关键词共检索文献513篇,最终纳入6项临床试验(PETACC-3、CALGB、N0147、QUASAR2、NSABP-8、NSABP-C07),共9152例患者,其中KRAS突变患者3090(33.8%)例,野生型患者6062(66.2%)例。Meta分析结果显示,KRAS突变患者的无病生存期较野生型患者差(合并效应值HR=1.33,95%CI: 1.11~1.59,P<0.01),提示KRAS突变患者预后可能不良。亚组分析显示,未使用靶向药物治疗组KRAS突变组和KRAS野生型组预后无显著差异［I2=0%,P=0.899;DFS合并效应值HR(95%CI)为1.09(0.96~1.24),P=0.172］,而使用靶向药物治疗组KRAS突变组较KRAS突变组预后差［I2=23.6%,P=0.270;DFS合并效应值HR(95%CI)为1.58(1.35~1.83),P<0.001］,表明是否使用靶向药物治疗可能是部分异质性的来源。结论KRAS突变与较短的无病生存期相关,通过ctDNA检测结直肠癌患者KRAS等基因的突变状态,可用于判断结直肠癌患者的预后并指导治疗。     

外泌体检测KRAS突变在结直肠癌中的研究进展

虽然内镜能早期诊断结直肠癌,但因其存在有创、侵入等局限性,世界范围内仍有大部分患者确诊时已经是晚期甚至伴有转移。西妥昔单抗等抗表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体丰富了转移性结直肠癌的治疗,然而其治疗效果与KRAS基因是否突变相关,因此使用前检测KRAS基因是否突变十分有必要。对外泌体的大量研究使得我们思考能否通过外泌体检测来确定患者是否存在KRAS突变。本文重点对依靠外泌体检测KRAS突变指导结直肠癌患者使用EGFR单抗治疗的潜在可能性进行综述。     

结直肠癌KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变状态分析

目的检测结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变状态,分析突变与临床特征的关系。方法收集结直肠癌手术切除或穿刺活检标本177例,提取DNA经探针扩增阻滞突变系统聚合酶链反应扩增后,检测KRAS、BRAF及PIK3CA基因的突变状态,分析结直肠癌组织中3个基因间突变的内在关系,并分析KRAS突变与临床特征的关系。结果 KRAS基因突变率为37.9%,以Gly12Val突变最多,占总突变率的32.8%;BRAF基因突变率为4.0%;PIK3CA突变率为14.1%,以E542K突变最多,占总突变率的36.0%。BRAF基因突变者共7例,全部为KRAS和PIK3CA野生型的患者;PIK3CA基因突变者共25例,其中19例(76.0%)与KRAS存在共同突变。结论结直肠癌患者KRAS基因突变率较高,KRAS基因突变与淋巴结转移和肿瘤进展相关。联合检测KRAS、BRAF及PIK3CA基因对指导临床制定个体化治疗有重要意义。     

结直肠癌KRAS、BRAF及PIK3 CA基因突变的检测及内在关系

目的：检测结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变情况,并分析其内在关系。方法：收集内蒙古巴彦淖尔市医院普外一科2011年3月至2011年8月结直肠癌手术切除标本41例,提取DNA经PCR扩增后,检测KRAS、BRAF和PIK3CA基因的突变情况,分析结直肠癌组织KRAS、BRAF及PIK3CA基因突变间的内在关系。结果：（1）15例患者的KRAS基因发生突变,突变率36．6％,5例患者的BRAF基因发生突变,突变率12．2％,7例患者的PIK3CA基因发生突变,突变率17．1％。（2）BRAF基因突变者共5例,全部为KRAS野生型的患者;PIK3CA基因突变者共7例,其中3例（42．9％）为KRAS野生型的患者,4例（57．1％）为KRAS突变型的患者;BRAF与PIK3CA基因不存在共突变。结论：（1）结直肠癌患者KRAS基因突变率较高,有必要进行常规检测。（2）KRAS野生型患者中部分患者的BRAF基因突变可能是促进结直肠癌发生发展的原因之一。 PIK3CA与KRAS基因的共突变可能促进了结直肠癌发生发展。     

结直肠癌KRAS基因突变检测及临床意义

目的探讨结直肠癌患者KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系。方法采用突变荧光定量PCR检测80例经手术证实的结直肠癌患者石蜡包埋肿瘤组织中KRAS基因第12、13密码子突变。结果80例结直肠癌患者中有26例(32.5%)患者存在KRAS基因突变;第12密码子突变19例,突变检出率为23.75%,共检出6种突变类型,其中以Gly12Asp突变率(15%)最高;第13密码子检出1种突变类型(Gly13Asp)7例,突变检出率为8.75%。经统计学分析,KRAS基因突变与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期无明显相关性。结论结直肠癌中KRAS基因突变的发生率较高,其突变率与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期无相关性。     

KRAS、NRAS及BRAF基因突变与结直肠癌肝转移的关系

  目的  探讨KRAS、NRAS和BRAF基因突变与结直肠癌肝转移的关系。  方法  收集川北医学院附属医院2019年1月至2021年10月结直肠癌组织标本246例,基于ARMS法和荧光PCR技术进行KRAS、NRAS和BRAF基因突变检测,收集患者临床资料并分析KRAS、NRAS和BRAF基因突变与肝转移的关系。  结果  在246例结直肠癌患者中,KRAS、NRAS和BRAF突变率分别为45.93%（113/246）、6.10%（15/246）和4.87%（12/246）。NRAS基因突变与同时性结直肠癌肝转移相关,在NRAS突变组结直肠癌确诊时出现肝转移的频率较高（P = 0.005）,但随着病程时间延长,1 a内发生肝转移的频率在NRAS突变组和野生组无统计学意义（P = 0.155）,多因素Logistic回归分析显示NRAS突变是同时性结直肠癌肝转移的独立危险因素（OR = 9.974,P = 0.008）。KRAS和BRAF突变与肝转移无明显相关性（P > 0.05）。  结论  NRAS基因突变的结直肠癌患者早期较易出现肝转移,对其进行检测不仅在靶向治疗中具有重要的指导作用,在早期肝转移评估中也具有重要的临床指导价值。     

荧光PCR法检测结直肠癌组织及外周血KRAS基因突变率

目的研究结直肠癌组织及外周血KRAS基因突变情况,探讨两者的关系。方法采用突变扩增阻滞系统结合熔解曲线分析,以基因测序为金标准,配对检测2015年2月至2018年10月于浙江省肿瘤医院就诊的357例结直肠癌患者的癌组织及外周血的KRAS基因突变情况。结果肿瘤组织PCR检测结果与基因测序结果总符合率为94.68%;外周血PCR检测结果与基因测序结果总符合率为75.07%;肿瘤组织与外周血PCR检测结果总符合率为74.79%;肿瘤组织及外周血PCR检测各位点突变比例与组织基因测序结果基本一致。结论该突变扩增阻滞系统较好地反映了结直肠癌患者组织及外周血KRAS基因突变情况。肿瘤组织及外周血检测的基因突变一致性较高。在无法取得满意的组织标本时,外周血KRAS检测可为结直肠癌的临床诊疗提供帮助。     

结直肠癌组织和静脉血中KRAS基因突变分析及临床意义

目的：研究结直肠癌组织与静脉血中KRAS基因突变情况,探讨其对临床治疗及预后的意义。方法整群收集2013年1月-2014年12月经病理科诊断手术的129例原发结直肠癌组织标本和肘静脉血5 mL及60例癌旁正常组织对照。用PCR-DNA直接测序法检测KRAS突变情况。结果①癌组织KRAS突变率为39.53%(51/129),静脉血KRAS突变率为32.56%(42/129﹚。静脉血KRAS基因突变率比癌组织的低6.97%,差异有统计学意义(P<0.05)。癌旁正常组织无基因突变。②KRAS基因有7种突变类型,12密码子为主要突变占78.43%(40/51)。③癌组织与静脉血野生型与突变型整体的一致率为89.92%(116/129),一致性较高(K=0.783)。结论结直肠癌组织KRAS基因突变与静脉血高度一致,在肿瘤组织无法获取的情况下能代替其作为检测靶点。     

Ⅳ期结直肠癌轻微症状患者原发灶切除和KRAS基因突变对其预后的影响

目的：探讨Ⅳ期结直肠癌轻微症状行原发灶切除患者KRAS基因突变情况,阐明其对预后的影响。方法：收集46例Ⅳ期结直肠癌轻微症状患者的临床资料,所有患者均行原发灶切除,留取手术切除的肿瘤组织标本,采用直接测序法检测患者KRAS基因突变情况,并进行为期5年的随访,分析Ⅳ期结直肠癌患者原发灶切除和KRAS基因突变对预后的影响,对可能影响预后的临床病理因素进行生存分析。结果：46例患者中,KRAS基因突变20例,突变率为43.4%,其中12密码子突变发生频率最高（95.7%）。KRAS基因突变与肿瘤原发部位和肿瘤的多发转移有密切关联（P<0.05）。Kaplan-Meier生存曲线及单变量分析,原发灶切除术后KRAS基因野生型患者中位生存时间为58.4个月,KRAS基因突变型患者中位生存时间为42.2个月,组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。右半结肠癌患者中位生存时间为34.2个月,左半结肠癌患者中位生存时间为58.3个月,组间比较差异有统计学意义（P<0.05）。癌细胞的肝、肺和多发转移与结直肠癌患者术后预后不良有关（P<0.05）。Ⅳ期结直肠癌轻微症状患者术后中位生存时间为39.6个月。结论：Ⅳ期结直肠癌轻微症状患者原发灶切除术后,左半结肠癌患者及右半结肠癌患者生存时间均有延长趋势,右半结肠癌患者预后较左半结肠癌患者差。结直肠癌患者KRAS基因突变与肿瘤原发部位和肿瘤的多发转移有关联,转移部位影响手术预后。     

结直肠癌组织中Syndecan-1与EGFR表达及KRAS突变的关系

目的探讨结直肠癌患者中多配体蛋白聚糖-1（Syndecan-1)与表皮生长因子受体（EGFR）表达及鼠类肉瘤病毒癌基因（KRAS）突变的关系。方法选择原发性结直肠癌标本160例，结肠部肿瘤112例，直肠部肿瘤48例；病理类型为腺癌156例，其它病理类型4例。利用免疫组化法检测组织标本中Syndecan-1和EGFR的表达情况，运用直接测序法检测组织标本中KRAS基因外显子2第12、第13位密码子的突变状态。采用Spearman相关分析Syndecan-1的表达与EGFR表达及KRAS基因突变的关系。结果肿瘤标本中Syndecan-1表达阳性41例，主要位于细胞膜20例，主要位于细胞浆16例，细胞膜与细胞浆同时表达5例。EGFR在结直肠癌中的阳性表达率69.4%，所有结直肠癌患者中发生KRAS突变率为37.5%。Syndecan-1的表达在肿瘤区域淋巴结有无转移、有无远处转移中差异均无统计学意义（均P＞0.05）。Syndecan-1的表达与EGFR表达呈显著相关（r=1.488，P＜0.01），而与KRAS状态无相关性（r=9.278，P＞0.05）。结论Syndecan-1的表达可能对结直肠癌患者的进展及预后判断有一定价值。     

新疆维吾尔族、汉族结直肠癌患者中KRAS及BRAF基因突变差异及其与预后的关系研究

目的探讨新疆维吾尔族(维族)、汉族结直肠癌伴肝转移患者中KRAS基因及BRAF基因突变差异及其与临床病理特征和预后的关系。方法选择新疆医科大学第一附属医院2005年1月-2010年12月收治的100例新疆维、汉族结直肠癌伴肝转移患者,应用PCR及Pyrosequencing测序法检测分析KRAS基因及BRAF基因突变情况,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果维、汉族结直肠癌伴肝转移患者的KRAS与BRAF基因突变率分别为28%(28/100)与5%(5/100)。50例汉族患者中KRAS基因突变18例,BRAF基因突变2例;50例维吾尔族患者中KRAS基因突变10例,BRAF基因突变3例。原发肿瘤组织学分级、区域淋巴结转移、脉管瘤栓、肝外侵犯或转移、KRAS和BRAF为结直肠癌的预后影响因素(P<0.05);多因素分析显示,脉管瘤栓(P=0.035)、KRAS基因(P=0.001)为结直肠癌的独立的预后因素。结论在新疆维、汉族结直肠癌伴肝转移患者中,脉管瘤栓及KRAS基因具有主要的预后价值。积极检测KRAS基因,可望延长患者生存期。     

I期结直肠癌转移基因突变特征及临床特征分析

目的 借助现有的数据库挖掘，借鉴和浓缩数据采集的要点， 进一步明确I期结直肠癌的突变特征，以期指导临床治疗及判断预后。方法 对纪念斯隆-凯特琳癌症中心（MSKCC）数据通过R语言的maftools工具，进一步分析初始I期患者有转移和无转移组突变特征及临床特征。 结果 针对MSKCC突变数据，在I期患者中APC、TP53、KRAS基因突变比例相对于整体数据而言偏低。APC基因突变约占比65%（整体76%），TP53基因突变约占比68%（整体73%），KRAS约占比28%（整体44%），BRAF突变在结直肠癌整体数据中占比12%。I期发生转移的患者APC和TP53突变的比例均高于未发生转移的患者。I期发生转移的患者APC突变占比70%，未发生转移者突变占比59%；I期发生转移的患者TP53突变占比78%,未发生转移者突变占比53%，I期发生转移者TP53突变占比高于APC突变。I期结肠癌患者女性较男性更容易发生转移，I期发生转移者且均为MSS型。结论 本研究借MSKCC数据进行挖掘，发掘了I期结直肠癌转移的一些基因突变特征，I期病人患者中发生转移的APC和TP53突变的比例均高于未发生转移的患者，进一步指导临床治疗及判断预后，并为开展早期肿瘤转移的临床及基础研究，提供了理论依据。     

结直肠癌患者脉管癌栓与预后的相关性分析

目的 探讨结直肠癌患者脉管癌栓和临床病理特征及肿瘤组织中KRAS基因突变情况的关系及其对结直肠癌预后的意义.方法 回顾性分析2011-2014年182例结直肠癌患者术后的临床病理资料并随访.结果 结直肠癌脉管癌栓阳性的患者共45例,其与淋巴结转移、病理分化程度、肝转移、神经浸润及术前CEA、CA199水平有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿块大小、浸润深度和病理类型无相关性.脉管癌栓阳性患者的3年生存率为51.1%,显著低于阴性患者61.3%(P<0.05).脉管癌栓阳性合并KRAS基因突变患者与脉管癌栓阳性患者的3年生存率差异无统计学意义(P>0.05).结论 结直肠癌脉管癌栓降低患者3年生存率影响患者预后,合并KRAS基因突变生存率与其相近.     

KRAS基因13号密码子突变与结直肠癌患者预后相关性的Meta分析

目的探讨KRAS基因13号密码子突变与结直肠癌（CRC）患者预后的相关性。方法检索PubMed、WebofScience、CochraneLibrary、万方、中国知网等数据库从建库至2015年公开发表的关于KRAS基因13号密码子突变与CRC预后相关的文献,对13号密码子突变以及是否经抗表皮生长因子受体（EGFR）治疗对CRC患者总生存期（OS）的影响进行Meta分析,间接比较13号密码子突变与12号密码子突变对OS的影响。结果共纳入10篇文献4431例患者。13号密码子突变的CRC患者OS较短（HR=1.54,95%CI：1.16~2.04,P＜0.05）,其中未经过抗EGFR治疗患者OS较短（HR=1.76,95%CI：1.24~2.50,P＜0.05）;而经过抗EGFR治疗患者与野生型患者OS比较,差异无统计学意义（HR=1.56,95%CI：0.97~2.51,P＞0.05）。13号密码子突变与12号密码子突变对CRC患者OS的影响比较,差异无统计学意义（HR=0.86,95%CI：0.65~1.14,P＞0.05）。结论KRAS基因13号密码子突变的CRC患者OS较短,经抗EGFR治疗后与野生型患者OS相似。13号密码子突变型与12号密码子突变型患者在OS上差异不明显。     

西妥昔单抗可能有助于治疗KR4S基因密码子13突变的肿瘤

基于观察性证据,最近的指南建议存在KRAS基因突变的转移性结直肠肿瘤患者不使用抗表皮生长因子受体单克隆抗体（西妥昔单抗和帕尼单抗）治疗。然而,一项基于多个研究的汇合分析结果显示西妥昔单抗对KRAS基因密码子13突变的癌症患者疗效好于其他KRAS基因突变。     

中医药辅助治疗结直肠癌研究进展

结直肠癌的发病率和病死率日益增高,手术是公认唯一有效的治疗手段,但有其局限性。中医药在结直肠癌的辅助治疗中具有独特优势,尤其在配合手术治疗结直肠癌、联合放化疗及缓解晚期患者病痛方面能够显著改善患者生存质量,延长患者生存期。     

修订Bethseda标准筛选遗传性非息肉病性结直肠癌患者的队列研究

目的研究修订Bethseda标准筛选遗传性非息肉病性结直肠癌（HNPCC）的价值及在结直肠癌中的构成比。方法对2004年8月至2005年12月进行手术治疗的连续110例患者建立队列、多重荧光聚合酶链反应方法检测肿瘤的微卫星不稳定（MSI）状态,对于MSI结直肠癌患者检测hMSH2、hMLH1和hMSH6基因种系突变。结果110例患者中共检出MSI结直肠癌患者23例（20．9％）。在23例MSI结直肠癌患者中,共发现病理性突变7个（30．4％）,占所有结直肠癌6．4％;其中hMSH6基因种系突变3个,hMSH2基因突变3个,hMLH1基因突变1个。结论以修订Bethesda标准,MSI结直肠癌检出率为20．9％,HNPCC检出率6．4％;在中国人错配修复基因种系突变中hMSH2和hMSH6错义突变比较多见。     

结直肠癌的流行病学及研究现状

结直肠癌在世界各地区的发生率总体来说仍在上升,但差别较大。欧洲、美洲和大洋洲的发生率为23-41/10万,显著高于其它地区。结直肠癌居全部恶性肿瘤死亡原因的第3位。尽管如此,美国结直肠癌的发生率和病死率在不断下降,病死率降低更为显著。在亚洲,结直肠癌的发生率和病死率均在上升,但两者之间的距离也在拉大,结直肠癌发生率与病死率之间的差距拉大证实了流行病学研究和预防措施干预的效果,只是由于结直肠癌发生率的明显增高,才使得结直肠癌病死率上升。我国结直肠癌的发生率上升趋势非常明显。城市人口的发生率显著高于乡村人口,在大城市,结直肠癌已经跃升到恶性肿瘤发病原因的第3位。结直肠癌的治疗模式已从单纯的手术切除转变为由以手术治疗为主到放疗、化疗和靶向治疗等为辅助治疗的多学科综合治疗模式。     

艾恒联合氟尿嘧啶／亚叶酸钙治疗22例晚期结直肠癌的疗效观察

结直肠癌是许多国家比较常见的恶性肿瘤，我国结直肠癌患者的病死率有上升的趋势。根治性手术切除是结直肠癌的主要治疗方法，但在实际的临床工作中病人就诊时往往已经失去最佳的手术时机，对于晚期结直肠癌的患者化疗是治疗的主要手段之一。我院2001年始应用艾恒联合氟尿嘧啶／亚叶酸钙治疗晚期结直肠癌22例，取得了