肾母细胞瘤1基因表达及其对急性髓系白血病患者预后的预测价值

分析急性髓系白血病（AML）患者肾母细胞瘤1（WT1）基因表达水平的差异,探讨WT1表达及其在核仁磷酸蛋白1（NPM1）或Fms样酪氨酸激酶3内部串联重复（FLT3-ITD）不同突变状态下与AML患者疗效和生存的相关性,评估其对于患者预后的预测价值。 以167例初发AML患者（除外M3亚型）为研究对象,根据初诊时WT1表达水平分为WT1高表达组和WT1低表达组,回顾性分析两组的临床及实验室检查资料,采用Kaplan-Meier法进行患者生存分析以明确WT1表达水平在预后评估中的价值,特别是在NPM1或FLT3-ITD不同突变状态AML患者中的预后评估价值。 WT1高表达组126例患者中治疗有效83例（65.9%）,低表达组41例患者中治疗有效39例（95.1%）,差异有统计学意义（P＜0.01）。WT1高表达组2年总存活率低于WT1低表达组（46.1%和75.2%,P＜0.05）,2年无病存活率也低于WT1低表达组（43.5%和68.5%,P＜0.05）。诱导化疗前后WT1表达量下降≥1 log患者总反应率和2年总存活率优于下降＜1 log患者（均P＜0.05）,但两者2年无病存活率差异无统计学意义（P＞0.05）。NPM1野生型患者中,WT1高表达组总反应率、2年总存活率较WT1低表达组低（均P＜0.05）;FLT3-ITD野生型患者中,WT1高表达组总反应率、2年总存活率和2年无病存活率均较WT1低表达组低（均P＜0.05）;而NPM1或FLT3-ITD突变患者中,不同WT1表达水平组疗效及生存分析结果差异无统计学意义（均P＞0.05）。 初发AML患者中WT1基因过表达提示预后不良;诱导治疗后WT1表达量下降≥1 log的患者预后优于下降＜1 log的患者;初诊WT1基因表达水平可以作为NPM1或FLT3-ITD野生型AML患者的预后判断指标。      

气质、父母教养方式与幼儿心理韧性的关系

考察3～5岁幼儿心理韧性的发展特点并探讨气质、父母教养方式与幼儿心理韧性之间的关系,检验父母教养方式的中介作用。 选取杭州市570名幼儿为被试对象,由幼儿教师完成Devereux幼儿心理韧性量表评定,由幼儿父母完成气质问卷和教养方式问卷的评定。采用AMOS 17.0对幼儿气质、父母教养方式与心理韧性之间的关系进行结构方程模型检验,并采用非参数百分位Bootstrap方法对模型的中介效应进行检验。 共回收有效问卷432份,回收率为75.79%。5岁幼儿心理韧性的主动性和自我调节两个维度高于3岁和4岁幼儿（均P＜0.01）,依恋/关系维度高于4岁幼儿（P＜0.01）;女生的主动性和自我调节维度高于男生（P＜0.05或P＜0.01）。气质的负性情绪维度与心理韧性三个维度均呈负相关(均P＜0.05),而努力控制维度和权威型教养方式则与心理韧性三个维度均呈正相关（均P＜0.05）。负性情绪和努力控制均部分通过权威型教养方式预测幼儿心理韧性（中介效应分别为 -0.0143和0.0363）。 3～5岁幼儿心理韧性存在年龄、性别差异,且父母教养方式在气质与心理韧性之间起中介作用。      

宫内感染对新生大鼠早期生长及神经行为发育的影响

探讨宫内感染对新生大鼠出生后早期生长发育和神经行为发育的影响。 通过将大肠埃希菌注入孕15 d的SD大鼠的子宫颈内建立宫内感染大鼠模型,并观察宫内感染对孕鼠分娩的影响。HE染色法观察新生大鼠脑白质组织病理学变化;免疫组织化学染色和蛋白质印迹法检测新生大鼠脑白质组织胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）、2′,3′-环核苷酸磷酸二酯酶（CNPase）、神经丝（NF）表达。随机监测新生大鼠早期生长发育和神经行为功能。 孕鼠宫内感染后,子宫和胎盘组织白细胞计数升高,提示建模成功,但宫内感染对分娩无显著影响。新生大鼠7日龄时脑白质部位结构稀疏呈筛网状改变,GFAP表达增加（P＜0.01）,而CNPase和NF表达减少（P＜0.05或P＜0.01）。与对照组新生大鼠比较,感染组新生大鼠出生体质量轻、体质量增长缓慢（P＜0.05或P＜0.01）;耳廓分离、睁眼、平面翻正、负趋地性、听觉惊恐和游泳试验等完成日龄延长（P＜0.05或P＜0.01）。 宫内感染可导致新生大鼠脑白质损伤,并引起新生大鼠早期生长发育及神经行为发育延迟。      

先天性膈疝患儿死亡危险因素分析

分析先天性膈疝（CDH）患儿术后死亡的危险因素。 纳入2012年6月至2018年9月山东大学齐鲁儿童医院收治的CDH患儿共126例，描述性分析合并畸形情况。接受手术治疗的120例CDH患儿分为存活组（100例）和死亡组（20例），采用单因素分析及多因素Logistic回归分析的方法分析患儿死亡的危险因素，并对多因素Logistic回归分析有统计学意义的计量资料进行ROC曲线分析。 126例患儿中，合并先天缺陷55例（43.7%），其中多发畸形20例（15.9%）。单因素和多因素Logistic回归分析结果显示，延期手术为保护性因素 （P＜0.05）；胎膜早破、术后肺不张、术后上机时间长及术后氧合指数高为危险因素（均P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示，当临界值为5.74时，术后氧合指数预测患儿死亡的敏感度为81.0%，特异度为75.0%，曲线下面积为0.841（P＜0.01）。 CDH患儿常并发畸形，胎膜早破、术后肺不张、术后上机时间、术后氧合指数大于5.74是CDH患儿术后死亡的高危因素，通过延期手术获得术前稳定的内环境，可以有效降低CDH患儿术后死亡率。      

瞬时受体电位M8型离子通道选择性滤器的三维结构计算建模

构建瞬时受体电位M8型（TRPM8）离子通道选择性滤器结构域的三维结构模型。 在Rosetta计算结构生物学工具包中,使用基于运动回路闭合算法的从头计算,对TRPM8离子通道选择性滤器结构域进行多轮计算建模。 经过9轮计算得到了能量最低且结构收敛的TRPM8通道选择性滤器结构域的三维结构模型,发现D918位点的侧链并不指向离子流过的孔区中心,而Q914、D920和T923位点的侧链指向孔区中心;糖基化位点N934位于孔区外侧,其侧链指向胞外水环境。 构建了TRPM8通道选择性滤器结构域的三维结构模型,为理解该通道的离子选择性及相关机制提供了较为可靠的结构信息。      

人源瞬时受体电位M2型通道Nudix水解酶9同源结构域的提取和纯化

摸索人源瞬时受体电位M2型通道（TRPM2）羧基端Nudix水解酶9（NUDT9）同源结构域（NUDT9-H）的蛋白提取和纯化方法。 异丙基硫代半乳糖苷诱导表达的Rosetta（DE3）大肠埃希菌菌株经超声破碎和离心后，将收集到的上清液与GST磁珠结合并用还原型谷胱甘肽洗脱以抽提GST-NUDT9-H融合蛋白，浓缩离心后再经分子排阻色谱层析纯化，最后经凝血酶酶切并与GST磁珠结合即得NUDT9-H蛋白。 含有0.5%的十二烷基-β-D-麦芽糖苷（DDM）裂解溶液体系和0.025%的DDM分子排阻层析色谱溶液体系能够提高GST-NUDT9-H融合蛋白的稳定性，再按每2 mg融合蛋白加入1 U凝血酶切割24 h，即获得高纯度NUDT9-H蛋白。 NUDT9-H蛋白稳定性较差，提取和纯化体系中需添加DDM以稳定其构象从而提高目的蛋白的产量和纯度。      

缺血再灌注处理对乳鼠心肌细胞钠电流的影响

目的研究缺血再灌注(I/R)处理对乳鼠心肌细胞钠电流的影响。方法实验分为两组:对照组为体外培养乳鼠心室肌细胞;I/R组为相同的细胞,缺血3 h,再灌注1 h,采用膜片钳全细胞模式记录仪分别记录并比较对照组和I/R组的钠电流。结果和对照组相比,I/R组在每一指令电压上都增大钠电流;在测试电压为-20 mV的条件下,钠电流峰值电流密度从(-159.74±63.80)pA/pF增至(-397.25±82.99)pA/pF(n=7,P(0.05);通道稳态激活V1/2分别为(-58.77±3.83)mV和(-51.51±5.34)mV(n=5,P(0.05);稳态失活V1/2分别为(-58.77±3.83)mV和(-51.51±5.34)mV(n=5,P(0.05);通道失活后恢复τ分别为(8.57±1.50)ms和(6.30±0.57)ms(n=5,P(0.05)。结论 I/R处理可以增大钠电流的峰值电流,并使电压电流曲线下移;减慢通道的时间依赖性激活,促进通道的电压依赖性失活,失活后恢复变快。钠通道的这些改变可能是引起心肌细胞缺血再灌注损伤的重要原因。     

异丙酚对大鼠海马神经元低电压激活钙电流的抑制作用

目的：观察异丙酚对大鼠海马锥体神经元低电压激活钙电流［low-voltage-activated calcium currents, I _Ca(LVA) ］的影响。方法：培养Wistar大鼠海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术测定I _Ca(LVA) 。加用不同浓度（3、10、30、100、300 μmol/L）异丙酚后,计算I _Ca(LVA)抑制率,建立异丙酚的浓度-效应曲线,选择20 μmol/L异丙酚作I_Ca(LVA)的激活及失活曲线。结果：3 μmol/L的异丙酚对I _Ca(LVA)的电流幅度无影响;10、30、100、300 μmol/L的异丙酚对I _Ca(LVA)的电流幅度抑制率分别为(12.6±4.1)%、(29.2±5.7)%、(36.6±5.3)%、(31.6±2.6)%。拟合后的浓度-效应曲线的IC₅₀为16.8 μmol/L,Hill系数为0.15。激活曲线的半数最大激活膜电位（V _1/2）由(-10±1) mV 移动到(-11±2) mV;K分别为12±1和8±1;失活曲线的V _1/2分别为(-25±1) mV和(-25±5) mV,K分别为15±1和16±3。20 μmol/L异丙酚均未使I _Ca(LVA)的激活曲线及稳态失活曲线发生明显移动。结论：异丙酚对I _Ca(LVA)通道有抑制作用,异丙酚对中枢神经系统的麻醉作用可能与I _Ca(LVA)抑制有关。     

氯胺酮对大鼠海马神经元瞬间外向钾电流的抑制作用

目的：观察氯胺酮对大鼠海马锥体神经元瞬间外向钾电流（I_A）的影响。方法：酶消化法急性分离Wistar大鼠海马锥体神经元,采用全细胞膜片钳技术测定I_A。加用不同浓度（10、30、100、300和1 000 μmol/L）氯胺酮后,计算I_A抑制率,建立氯胺酮的浓度-效应曲线,选择30 μmol/L氯胺酮作I_A稳态激活（及失活）曲线。结果：10 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度无影响;30、100、300和1 000 μmol/L的氯胺酮对I_A的电流幅度抑制率分别为（11±2）%、（22±3）%、（45±5）%和(53±5)%。IC₅₀为（130±24）μmol/L, Hill系数为1.19±0.56。30 μmol/L氯胺酮使激活曲线的半数最大激活膜电位（V _{1/ 2}）从（-8.70±0.13） mV 移动到 （-11.2±2.10） mV (n=8, P<0.05), K从（15.0±4.6） mV移动到（17.6±5.7）mV (n=8, P>0.05);失活曲线的V _1/2从（-75.53±7.98） mV移动到（-91.94±11.85） mV（n=8, P < 0.05）,K从（10.5±2.2） mV移动到（8.0±1.2） mV（n=8, P>0.05）。30 μmol/L氯胺酮使I_A的激活和失活曲线均向超极化方向明显移动。 结论： 临床浓度的氯胺酮能够同时加速I_A的激活和失活过程,但加速I_A失活的能力大于其加速I_A激活的能力。氯胺酮对中枢神经系统的作用可能与I_A抑制有关。     

尼可刹米对新生大鼠海马神经元钠通道的影响

目的:观察尼可刹米对新生大鼠海马神经元电压依赖性钠通道的影响.方法:制备大鼠海马脑组织切片,灌流含5 mg/L尼可刹米的人工脑脊液,应用全细胞膜片钳技术记录给药前、给药后10 min脑组织切片海马神经元电压依赖性钠电流,绘制给药前后钠通道的钠电流一测试电压(I-V)曲线、稳态激活曲线和稳态失活曲线.结果:尼可刹米在脑电位-50-+20 mV范围内增大钠电流.尼可刹米使钠通道稳态激活曲线中钠通道半数激活电压由(-34.6±3.07)mV变为(-37.63±3.37)mV(t=3.38,P=0.02),曲线向超极化方向变化;尼可刹米使钠通道的稳态失活曲线中钠通道半数失活电压由(-43.36±3.06)mV变为(-33.24±2.05)mV(t=6.13,P=0.002),曲线向去极化方向变化.结论:增加电压依赖性钠电流可能是尼可刹米兴奋中枢神经元的作用机制之一.     

HIF-1α、VEGF及AMH在多囊卵巢综合征中的表达及其临床意义

  目的  研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和抗苗勒管激素(AMH)在多囊卵巢综合征(PCOS)中的表达水平,探讨其临床意义。  方法  选择2018年6月—2020年6月湖州市中心医院收治的130例PCOS患者为观察组,同期100例健康女性为对照组,采用免疫化学发光法检测卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、泌乳素(PRL)、睾酮(T)、孕酮(P)和雌二醇(E2)水平,酶联免疫吸附法检测血清HIF-1α、VEGF和AMH水平,分析HIF-1α、VEGF和AMH的相关性及对PCOS的预测价值。  结果  观察组患者的FSH[(5.81±0.92)mU/mL]、LH[(10.54±0.72)mU/mL]、PRL[(398.55±80.47)ng/mL]、T[(7.76±2.27)nmol/L]、P[(5.29±0.92)nmol/L]、E2[(118.63±42.78)pmol/L]显著高于对照组(t值为3.179、12.150、4.284、11.223、43.724、3.955,均P＜0.05)。观察组患者HIF-1α[(163.12±25.17)pg/L]、VEGF[(257.03±30.45)pg/L]和AMH[(7.29±1.02)pg/L]显著高于对照组(t值为42.592、31.612、47.194,均P < 0.05)。HIF-1α与VEGF、AMH水平均呈正相关(r=0.811、0.848、0.762,均P < 0.05)。血清HIF-1α、VEGF及AMH曲线下面积分别为0.764、0.731、0.742,95%CI分别为0.681~0.852、0.634~0.819、0.649~0.827。  结论  PCOS患者HIF-1α、VEGF及AMH水平显著升高,对PCOS具有较高的预测价值,可作为临床诊断的指标。      

Sodium current kinetics of transitional myocytes in Koch triangle of rabbit hearts

Background Few studies have explored the inward sodium current （INa） kinetics of transitional cardiomyocytes. This study aimed to explore the kinetics of transitional cardiomyocytes types α and β. Methods The whole-cell patch clamp technique was used to study the rapid INa of isolated transitional cardiomyocytes in the Koch triangle of rabbit hearts. Results Maximal amplitude and density of INa in type a and type β was （-1627±288） pA （α）, （-35.17±6.56） pA/pF （β） and （-3845±467） pA （α）, （-65.64±10.23） pA/pF （β） （P 〈0.05）. Steady state activation curves of INa, fitted to a Boltzmann distribution for both types, were sigmoid in shape. Half activation voltage and slope factors did not significantly differ between types at （-43.46±0.85） mV （α）, （-41.39±0.47） mV （β） or （9.04±0.66） mV （α）, （11.08±0.89） mV （β）. Steady state inactivation curves of INa, fitted to a Boltzmann distribution in both types were inverse ＂S＂ shape. Half inactivation voltage and slope factors were （-109.9±0.62） mV （α）, （-107.5±0.49） mV （β） and （11.78±0.36） mV （α）, （11.57±0.27） mV （β）, （P〉0.05）, but time constants of inactivation were significantly different at （1.10±0.19） mV （α） and （2.37±0.33） ms （β）, （P 〈0.05）. Time constants of recovery from inactivation of INa for both types were （122.16±27.43） mV （α） and （103.84±2.8.97） ms （β） （P 〈0.05）.
Conclusions Transitional cardiomyocytes in rabbit hearts show a heterogeneous, voltage gated and time dependent fast inward sodium current. Types α and β show the features of INa similar to those in slow- and fast-response myocytes, with probably better automaticity and conductivity, respectively.     

自制异物抓捕器与传统异物抓捕器在模拟人血管内异物抓取的试验对比

  目的   比较自制异物抓捕器与传统异物抓捕器抓取模拟人血管内异物的效果。   方法   模拟全身麻醉状态下，通过血管内导引导管将废弃导丝、废弃导管、废弃支架、废弃弹簧圈作为异物留置于模拟人血管内，做成不同异物存留于不同血管部位的异物存留模型。用自制异物抓捕器与传统异物抓捕器对模拟人血管内的异物进行抓取，记录为自制抓捕器组和传统抓捕器组。每组分别进行80次异物抓取操作，比较两组抓取异物的1次取出异物成功率，3次内取出异物成功率，取出异物总体成功率，取出每例异物平均操作时间。   结果   自制抓捕器组较传统抓捕器组有更高的一次取出异物成功率、3次内取出异物成功率和取出异物总体成功率，（96.25% VS 87.50%）（χ2 = 4.103，P = 0.043），差异有统计学意义（P < 0.05），自制抓捕器组较传统抓捕器组有更短的平均操作时间（7.42±1.68）min VS （13.21±5.25）min，（ t = 9.192，P = 0.000）。   结论   在模拟人血管内操作，自制异物抓捕器较传统异物抓捕器能更有效地抓取模拟人血管内异物，成功率更高，操作时间更短。      

老年髋部骨折伴认知障碍患者家庭照顾者负担及其影响因素

  目的   研究老年髋部骨折伴认知障碍患者家庭照顾者负担情况及其相关因素。   方法   运用便利抽样的方法，采用Zarit照顾者负担量表对四川省成都市某三级甲等综合医院骨科治疗的老年髋部骨折伴认知障碍患者的家庭照顾者进行分析。   结果   老年髋部骨折伴认知障碍患者家庭照顾者的负担得分为（39.65±13.89）分，多元逐步回归分析结果表明照顾负担主要影响因素为照顾者是否患慢性病及患者的Barthel指数（R2 = 0.539，F = 20.206，P < 0.001）。   结论   59.9%以上的老年髋部骨折伴认知障碍患者家庭照顾者负担水平超过中度水平，照顾者自身慢性病情况及其所照顾患者的Barthel指数（BI）是影响照顾者负担水平的影响因素。因此，医护人员在护理工作中不应只关注于老年髋部骨折伴认知障碍患者，也应同时了解照顾者的负担水平和影响因素，采取个性化的护理措施，以降低他们的负担，最终持续提升家庭照顾水平以及患者生活质量。