火棉胶切片免疫组化粘片剂白乳胶的应用

目的 :寻找一种适合于火棉胶切片免疫组化染色程序的廉价的粘片剂。方法 :选用市售白乳胶、明胶作为粘片剂 ,观察火棉胶切片经过免疫组化染色程序处理后的脱片及染色情况。结果 :以白乳胶、明胶作为粘片剂的脱片率分别是 6 .7%、10 0 %。结论 :白乳胶可作为一种廉价的粘片剂用于火棉胶切片免疫组化染色     

明胶硫酸铬钾在脑组织冰冻切片中的防脱片作用

[目的]选择优良的防脱片剂,解决冰冻切片易脱片问题。[方法]用明胶硫酸铬钾、APES及试剂公司处理的玻片分别粘贴脑组织冰冻切片,经免疫组化染色,统计脱片及完整贴片率。[结果]明胶硫酸铬钾完整贴片率为97.5%,APES完整贴片率达85%;试剂公司处理的切片完整贴片率仅为70%。[结论]明胶硫酸铬钾对脑组织黏合作用强,价格低廉,操作简单,特别适用于大批量的使用。     

介绍一种防止石腊切片做免疫组化染色脱片的方法

石腊切片做免疫组化染色时,载玻片虽经清洗液清洗、95％酒精浸泡,但在染色过程中、尤其是ABC法染色步骤繁多,容易脱片。在染色过程中有时在消化前就脱片,至使染色无法进行。如切片加粘合剂可使背景颜色加深,染色质量不够理想。我们对切片和烤片进行分析,认为自     

厚树脂切片的防脱片方法比较

目的对厚树脂切片的3种防脱片方法进行比较,探讨哪种防脱片方法更科学实用。方法取甲基丙烯酸树脂包埋的脑组织,切片机40μm厚连续切片,将切片贴在经L-多聚赖氨酸、明胶硫酸铬钾、APES处理过的载玻片上,经过甲苯胺蓝染色后,对防脱片效果进行比较。结果经明胶硫酸铬钾、L-多聚赖氨酸和APES处理的载玻片脱片率分别为3%、10%和13%,明胶硫酸铬钾组防脱片效果明显优于L-多聚赖氨酸组和APES组(u=2.008、2.010,P<0.01)。结论经明胶硫酸铬钾处理防脱片效果好,且更经济,非常适用于厚树脂切片的实验。     

环氧树脂包埋半薄切片脱树脂新方法

用环氧树脂包埋的半薄切片作ＨＥ染色,特殊染色或免疫组化染色,必须预先脱树脂。传统的脱树脂方法所需虹达２４ｈ,且易掉片。作者介绍一种新的脱树脂方法,该法只需５ｍｉｎ即可将增薄切片上的树脂完全脱净,可避免掉片且染色效果佳,图像清楚。     

防止神经组织染色脱片的1种方法

神经组织取材困难 ,在科研中一般只研究某一神经节、神经核或某一区的变化 ,这就限制了切片的数量。若有限的切片在染色过程中脱掉 ,实在让人痛惜。组化染色的时间长 ,这又为脱片创造了条件 ,我们经过探索 ,找到了一种简易可行的方法 ,现介绍如下。1　切片用粘片剂处理粘片剂有ＡＰＥＳ或多聚赖氨酸 (武汉博士德生物工程有限公司 ) ,我们用的是ＡＰＥＳ。操作方法 :将干净载玻片浸泡在 1∶5 0丙酮稀释的ＡＰＥＳ中 30秒 ,取出后略干燥一会 (视室温而定 ,一般 1～ 5分钟 ) ;纯丙酮涮洗 2～ 3次 ,捞出后于无尘处干燥待用。2　展片要充分神经组…     

半薄切片制作技术的几点改进

环氧树脂半薄切片在形态学研究中应用较多,是介于超微结构观察和常规光镜观察之间的制样手段,也是电镜超薄切片定位的必要手段。由于其厚度比石蜡切片薄,清晰度、分辨率均优于石蜡切片,已广泛应用于光电镜定位、对照观察,甚至可代替石蜡切片。但在半薄切片制作技术中还存在一些尚待改进的问题。如切片染色,以往常用的方法有甲苯胺蓝法、H.E法等,前者一般采用水溶液,通常不易着色;后者步骤较复杂,耗时较长,且难以着色。我们对甲苯胺蓝法(单色染色)及Sata变法(多色染色)做了一些改进,得到了较为满意的效果。困扰半薄切片的另一问题是脱片,常致制样失败。以往大多采用甘油蛋白作贴片剂,效果不甚理想。也曾采用涂布树脂包埋剂防止脱片,但操作较麻烦。我们从免疫细胞化学中受到启示,改用明胶-硫酸铬钾液作为半薄切片粘贴剂。方法简便易行,效果也好,在大量的半薄切片染色中,极少发现脱片。……     

防止免疫组化染色中组织脱片的方法与体会

防止免疫组化染色中组织脱片的方法与体会彭敦发（病理解剖学教研室）免疫组化技术是近年来兴起的一项较新技术。在病理诊断、鉴别诊断中起重要作用。然在免疫组化染色过程中常遇到组织脱片问题，致使染色失败。笔者在近年的免疫组化实践中摸索出一点使组织切片不易脱落的...     

谈解决病理染色中脱片问题的几点经验与体会

在切片染色过程中最主要的就是脱片问题，严重时脱片率高达60％，曾进行过多方面的分析，有人认为水质过硬，矿物质含量过高碱性大等原因，经采取玻片涂蛋白甘油等办法，脱片率有所下降，但还是不能从根本上解决闻题，同时还出现了切片背景有污染的现象，尤其是遇到特殊染色，免疫组化等费时的染色时，脱片问题就更为突出．     

微波高压抗原修复在ER、PR免疫组化染色中的应用

目的选择能显示最佳的ER、PR染色效果高温抗原修复法。方法分别采用微波抗原修复和微波高压抗原修复两种抗原修复法对100例乳腺癌切片抗原修复，比较二者对ER、PR免疫组化检测效果的影响。结果经微波高压抗原修复，乳腺癌ER、PR染色阳性者分别为54％、49％，显著高于经微波抗原修复的染色效果42％、39％，且不易脱片。结论乳腺癌：ER、PR免疫组化染色采用微波高压抗原修复后，染色阳性率明显优于经微波抗原修复者，值得推广应用。     

眼球切片火棉胶石蜡双重包埋制作法

用火棉胶制作眼球切片,有包埋时间长,切片厚,不易制成连续片,染色不均匀等缺点。笔者采用火棉胶和石蜡双重包埋法制作切片经多次试验较为理想,可以克服上述缺点。     

Van-clear环保透明剂代替二甲苯制作蜡块对免疫组化结果的影响

目的：评估Van-clear环保透明剂代替二甲苯制作石蜡切片对免疫组化结果的影响。方法：用Van-clear环保透明剂代替二甲苯制备蜡块10000个、苏木精-伊红染色10000片和免疫组化染色2265片。结果：用Van-clear环保剂制作的蜡块,组织浸蜡充分,各种组织软硬适中,易于切片;制作的苏木精．伊红片,组织结构清楚,染色清晰,对比及透明度好;免疫组化染色切片,阳性定位准确,强度、对比度与常规制片一致;存档半年后蜡块切片,免疫组化染色结果与半年前结果一致。结论：用Van-clear环保透明剂代替二甲苯对病理常规制片的质量和免疫组化阳性结果无明显影响。Van-elear作为环保产品,有推广使用的价值。     

HE染色切片褪色后免疫组化染色方法研究

目的探讨HE染色切片褪色后免疫组织化学染色方法。方法HE染片放人二甲苯中浸泡,清除盖玻片和树胶;梯度酒精水化,蒸馏水洗涤;置入0．25％高锰酸钾5rain,蒸馏水洗,40．5％草酸溶液漂白,蒸馏水洗,自然晾干;滴PLLS1滴于组织片上,摇匀,将切片在60℃烘箱中烘60min烘干;PBS洗5rain×3次;组织需要进行水浴抗原热修复;与对照片按标准S-P方法进行免疫组化染色。结果所有对照片与试验片均为阳性,无一例脱片。结论此方法可用于HE片褪色做免疫组化染色,具有实用价值。     

内耳石蜡切片HE整块染色的改良制作

有关内耳组织切片制作方法组织学技术书上有些介绍 ,多采用火棉胶、石蜡或火棉胶石蜡双重包埋ＨＥ片染制作 ,还有采用常规石蜡包埋 ,ＨＥ块染制作 ,但效果都不够理想 ,切片容易破损 ,裱片时展不开 ,且制作时间较长等。本室通过多次实验 ,在传统块染的基础上采取了一些改良 :采用Ｂｏｕｉｎ氏固定液内固定后 ,再用一种固定兼脱钙液继续外固定和脱钙 ,同时真空抽气 ,ＨＥ整块在 3 7℃下进行深染色 ,严格控制石蜡包埋温度 ,延长组织浸蜡时间 ,用 0 .5 %的冰醋酸 (ＨＡＣ)水溶液展片 ,取得较好效果。现报告如下 :1　材料与方法1)　材料 :一般采…     

几种骨片不同制作方法的比较

骨为坚硬的结缔组织,其中含有大量的钙盐。骨片的制作方法有多种,诸如磨片、石蜡切片、火棉胶包埋切片以及冰冻切片等。染色方法也很多,如 ＨＥ染色、大力紫染色、硫堇一苦味酸染色等。 过去我们制作骨片,一般都是采用磨片。磨片的特点是结构清晰,利于观察;但其缺点也较多,一是费时费力,二是标本较厚、干燥较慢,且在使用时极易压碎。火棉胶包埋的骨切片步骤繁琐,应用试剂多,工作人员接触毒物机会也较多,对人体健康有害。石蜡骨切片经脱钙后,骨组织要经梯度酒精脱水,组织往往容易变脆变硬,切片比较困难。块染的石蜡骨切片虽然…     

树脂包埋组织HE染色

本文报告了半薄切片HE染色在动脉内皮细胞研究中的应用。切片制做及染色方法:家兔主动脉原位灌流固定后取材,常规树脂包埋。用玻璃刀(不粘水槽)切取1μm厚半薄切片。在明胶涂层玻片上滴一小滴蒸馏水,将切片够至蒸馏水滴上,     

对火棉胶切片尼氏染色方法的体会

尼氏(NiSSL)染色法是应用碱性染料显示神经元胞体的一种常规方法,广泛应用于脑内核团的定位、核团内神经元的类型、分布和计量学分析。尼氏染色多采用冰冻或石蜡切片,但上述切片法由于组织收缩较剧、难以制作大块组织切片、以及切片易破损、切片厚度不匀等缺点。而火棉胶包埋可改善上述不足,得到质量较高的切片,其缺点是不易制作连续切片。我们在人类脑干核团的计量学研究中,在以往染色程序的基础上,制作了脑干连续火棉胶切片,并对染色程序进行了相应的改变,得到了较理想的染色效果,现将我们的方法介绍如下,以供参考。(一)连续切片的制作:我们采用两人切片法,     

骨及钙化组织脱钙法的比较

目的：探讨骨及钙化组织的脱钙方法。方法采用三种不同方法处理相同的骨及钙化组织,甲组先将骨及钙化组织切成薄片,用甲酸氯化铝脱钙固定液彻底脱钙,流水冲洗,碳酸铝饱和溶液中和酸;乙组先用甲酸氯化铝脱钙固定液处理大块骨及钙化组织至彻底脱钙,再将骨及钙化组织切成薄片,碳酸铝饱和溶液中和酸;丙组按传统方法脱钙。三组组织脱钙后均常规制作HE切片,并行CD68和TTF-1免疫组化检测,比较三种方法的脱钙时间、HE染色和免疫组化检测结果。结果甲组脱钙时间短、切片完整、组织结构清晰、染色对比鲜明、长期保存不易褪色、免疫组化阳性信号正常,各项结果均优于乙组和丙组。结论甲酸氯化铝脱钙固定液处理骨及钙化组织,脱钙时间短,切片质量、染色质量、免疫组化质量好,切片长期保存不易褪色,值得推广。     

铬矾明胶在脑组织制片中的粘合剂作用

目的 选择良好的组织粘合剂，解决冷冻脑组织切片易脱片问题。方法 用铬矾明胶，APES，多聚赖氨酸及乳白胶四种粘合剂分别标贴冷冻脑组织切片各300张，经常规制片处理，计数脱片数与脱片率。结果 铬矾明胶脱片率仅为1%，而乳白胶为8.67%，APES为6.67%。多聚赖氨酸为5.67%。结论 铬矾明胶对脑组织粘合作用强，防脱片效果好，操作简便，经济实用，值得推广。     

内耳病理研究方法改进——“改良硬铺片法”

耳蜗铺片是研究内耳病理方法上的一大进展,它比火棉胶切片省时、简便,基本上能解决耳蜗螺旋器病变的定位和定量问题。过去,耳蜗铺片标本的制作曾采用骨性耳蜗不经脱钙处理的“硬铺片法”。但近年来则多采用骨性耳蜗经过脱钙处理并用(钅我)酸溶液固定染色的“软铺片法”。1978年国内有人报道了全耳蜗铺片技术。我院耳鼻咽喉科在学习上述方法并取得一定经验的基础上,改用了“摘帽法”或“改良硬铺片术”,即应用10％福尔马林溶液固定耳蜗,不经脱钙,直接去除蜗壳,并用苏木