2017-2022年某三甲医院血流感染病原菌临床特征及耐药趋势分析

目的 研究分析2017-2022年血培养分离细菌的临床分布情况及对主要抗菌药物的耐药性，为临床抗感染方案的选择和院内感染的防控提供指导。方法 收集2017年1月-2022年12月兰州大学第二医院阳性血培养分离菌株，采用全自动微生物质谱检测系统VITEK MS、全自动细菌鉴定及药敏分析系统VITEK2 Compact以及纸片扩散法进行菌株鉴定和抗菌药物敏感性实验，WHONET 5.6软件对菌株的临床科室分布及耐药情况进行统计分析。结果 检出非重复病原菌5 094株，其中革兰氏阴性菌2 632株（51.67%），主要有大肠埃希菌（20.95%）、表皮葡萄球菌（12.94%）、肺炎克雷伯菌（9.23%）、金黄色葡萄球菌（7.68%）等，分布科室主要有重症医学科（19.34%）、普外科（19.18%）、儿科（17.03%）等。大肠埃希菌对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率下降至0.60%，鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物的耐药性呈持续上升趋势，对美罗培南的耐药率由2017年的62.50%上升至2022年的81.00%，铜绿假单胞菌对头孢他啶近6年的平均耐药率为25.30%，金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率在90...     

MALDI⁃TOF MS在碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌流行病学分析中的应用

目的：用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（matrix?assisted laser desorption/ionization?time of flight mass spectrometry,MALDI?TOF MS）检测碳青霉烯耐药的肺炎克雷伯菌（carbapenem?resistant Klebsiella pneumoniae,CRKp）同源性,并与脉冲场凝胶电泳（pulsed?field gel electrophoresis,PFGE）和多位点序列分型（multilocus sequence typing,MLST）两种检测方法进行对比,探讨质谱在日常工作中的应用价值。方法：选取2017年10—12月从河南科技大学第一附属医院院患者分离的以及ICU环境采集的碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌10株,检测8种耐药基因：blaTEM、blaSHV、blaCTX?M、blaKPC、blaIMP、blaNDM、blaVIM、blaOXA。采用PFGE、MLST和MALDI?TOF MS 3种方法对这些菌株进行同源性分析。结果：PFGE证实10株CRKp均为同一克隆株的传播,ST型同属于ST11。MALDI?TOF MS经过对细菌进行聚类分析和主成分分析可以区分不同型别肺炎克雷伯菌,对同型肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumonia,Kp）的同源性检测在80%左右。结论：MALDI?TOF MS在肺炎克雷伯菌的同源性检测方面可以应用于院内爆发局部感染的监测,与PFGE和MLST两种方法检测结果一致,但需要尽快建立规范的判断标准。     

1680株医院感染细菌的分布特点及耐药性分析

目的探讨我院两年来医院感染致病菌的临床分布特点及耐药现状，为临床用药提供参考。方法用API鉴定系统及K—B纸片扩散法对2002—2003年我院检出的1680株医院感染细菌的分布特点及药敏结果进行统计学分析。结果在检出的医院感染细菌中占临床分离率前几位的菌种从高到低依次为：真菌、大肠埃希氏菌、铜绿色假单胞菌及金黄色葡萄球菌，且这几种细菌均高于全国网络资料；从药敏结果分析显示：医院感染菌对常用抗生素耐药情况严重，革兰氏阳性菌对青霉素、红霉素、氯苄青、复方新诺明、苯唑青的耐药率达75．2％-94．1％，革兰氏阴性菌对氨苄青霉素、复方新诺明、头孢唑林、庆大霉素的耐药率达65．1％-97．6％，与临床用药呈正相关。产ESBLa菌株呈逐年上升，对各种抗生素的耐药率也显著增高．使此类感染的治疗十分困难。结论院内细菌耐药情况不容乐观，应积极采取有效措施控制细菌耐药性的产生及蔓延。     

院内下呼吸道感染的细菌分布及药敏分析

为了解我院痰培养阳性的院内下呼吸道感染住院患者细菌分布及细菌药敏情况,为临床合理应用抗生素提供参考依据,对我院2004年1月-2007年7月收治的998例院内下呼吸道感染患者曾行痰检阳性病例的细菌分布、药敏结果进行回顾性分析.采用VITEK全自动微生物分析仪鉴定菌种并进行药敏试验,用Kitby-Bailer法进行药敏试验.结果 (1)998例痰培养阳性患者共检出30余种1468株细菌,其中革兰阴性细菌(GNB)占72.96%,革兰阳性细菌(GPB)占27.04%.检出率高的依次是肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、肠杆菌科、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌等.(2)药敏检测对GNB抗菌活性最强的是亚胺培南,除铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率22.5%,肺炎克雷伯菌、大肠埃希氏菌、鲍曼不动杆菌、阴沟肠杆菌对亚胺培南的耐药率均在10%以下;嗜麦芽假单胞菌对喹诺酮类耐药率均在30%以下.MRSA对万古霉素敏感率为100%,未发现万古霉素耐药或中介的菌株.本院内下呼吸道感染主要致病菌是GNB,不同的细菌对抗生素的敏感性不同,针对GNB抗菌活性最强的是亚胺培南;GPB抗菌活性最强是万古霉素.     

康复科医院感染病菌分析及耐药性分析

目的：了解我院2年来康复科致病菌株的分布及耐药情况。方法：获得纯培养后，经VITEK—AMS系统鉴定共分离出315株致病菌，药敏试验采用VITEK—AMS系统药敏卡。结果：革兰阴性杆菌占68．9％，真菌占18．7％，主要致病菌依次为绿脓假单胞菌23．5％，不动杆菌属10．2％，肺炎克雷伯菌9．5％，大肠埃希菌7．9％，金黄色葡萄球菌6．0％。药敏结果表明：细菌耐药现象严重，对亚胺培南总敏感率最高。结论：康复科细菌感染性疾病中仍以革兰阴性杆菌为主，真菌检出率增高，产ESBLs和耐甲氧西林菌株明显增多，今后应提示临床加强病原菌培养及药敏检测，以指导临床使用抗生素。     

呼吸道感染病原菌分布及药敏结果分析

目的 为了解医院感染病原菌的分布耐药率。以控制院内感染，并为临床合理用药提供依据。方法 对我院2003年住院患者的痰标本进行分离培养，鉴定细菌并进行药物敏感实验。结果 从2003年523例痰标本中检出致病菌408株，其中革兰氏阳性球菌115株，革兰氏阴性杆菌248株，酵母样真菌35株，革兰氏阳性杆菌10株。革兰氏阳性球菌对万古敏感率最高达到100％。革兰氏阴性杆菌对亚胺培南的敏感率为90．4％。结论 院内感染以葡萄球菌属，假单胞菌属。肠杆菌属为主要菌群。分别占28．9％、34．7％、27．6％。随着细菌产酶率及多重耐药率的增加，抗生素合理应用十分必要。     

基层医院病原微生物检测及多重耐药菌情况分析

目的了解简阳市人民医院临床标本送检情况,并对病原菌进行耐药分析,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法使用法国生物梅里埃VITEK2-Compact全自动细菌鉴定及药敏分析仪进行鉴定及药敏试验。结果全院共送病原微生物检测标本11 353份,检出病原微生物2263株,阳性率为19.93%。多重耐药菌539株,占检出菌株的23.82%。结论微生物实验室与医院感染监测部门适时对病原微生物耐药情况做出总结分析,对于指导临床合理使用抗菌药物非常重要。     

重症监护病房铜绿假单胞菌感染及耐药性分析

目的 对医院重症监护病房(ICU)铜绿假单胞菌感染及对抗生素耐药情况进行调查。方法 采用法国生物——梅里埃全自动微小物分析系统(VITEK32)及GN1 鉴定卡、GMS——506药敏卡完成细菌的鉴定及药敏实验。结果 共分离鉴定铜绿假单胞菌272株，其中呼吸道标本分离率居首位占90．8％；该菌对抗生素耐药率在79.4——100．0％之间，对GNS——506药敏卡提供的15种抗生素均耐药的多重耐药菌株有171株占62.9％。结论 铜绿假单胞菌已成为医院感染的主要致病菌，在抗生素治疗过程个极易变异而形成多重耐约，ICU病人机体免疫功能低下，是铜绿假单胞菌的易感人群及防治的重要对象；铜绿假单胞菌的耐药谱较广，临床应谨慎选择抗生素；ICU病房内外科病种分开，阻隔各种院内交叉感染的传播媒介，避免铜绿假单胞菌的交叉感染。     

儿童创面感染病原菌及β-内酰胺酶表型分析

目的 了解儿童创面感染病原菌构成及耐药情况,指导临床用药.方法 对2008年1月～2009年10月该院收治的156例疑为创面感染患儿,取创面或伤口拭子进行需氧培养,用VITEK2compact进行病原菌鉴定、药敏试验和抗菌药物耐药表型检测.结果 156份标本共检出病原菌111株,阳性率71.15％.其中革兰阳性球菌87株,革兰阴性杆菌24株,主要是金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、屎肠球菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌等.葡萄球菌中共检出MRS 23株,MRSA 6株,革兰阴性杆菌中检出产ESBLs菌7株.革兰阳性球菌对青霉素、氨苄西林、红霉素耐药率高.革兰阴性杆菌对对氨苄西林、头孢唑啉等耐药率高,对亚胺培南、哌啦西林/他唑巴坦、左氧氟沙星敏感.结论 儿童创面感染以金黄色葡萄球菌为主.加强微生物学检测,防止耐药菌株的产生.     

佛山市院内感染的监测及其致病菌的耐药性研究

目的了解及分析本院以及本市临床细菌及真菌院内感染的特点及耐药状况,为临床提供合理使用抗生素的建议及指引,以达到减少院内感染和控制耐药率上升的目的。方法采用VITEK—AMS全自动微生物分析仪与手工K—B法相结合的方法,对本院2006年1～12月临床各类送检标本进行分离培养并检测其对多种抗生素的耐药性;采用WHONET5软件,从送检科室、标本类别、分离菌种及其对抗生素的耐药性等方面进行统计和分析,得出一系列有建设性的研究数据。结果共检测标本13391例,阳性3758例,阳性检出率28．1％,院内感染以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌最常见;真菌亦有6．01％的检出率;院内感染主要以呼吸道、泌尿道及外科感染为主;所有检出的菌株对临床各种常用抗生素均呈不同程度的耐药性,且其多重耐药呈增加趋势。结论开展院内感染及其致病菌耐药性监测,对于合理用药、提高疗效、减缓细菌耐药率以及控制院内感染均有重要意义。     

一起弗劳地柠檬酸杆菌引起的食物中毒病原鉴定及耐药性分析

目的 对一起突发食物中毒事件进行病原检测及耐药性分析,为突发食物中毒事件的应急处置提供参考。方法 对采集的样本按照GB 4789等标准方法进行致病菌检测,分离株采用VITEK2和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行菌株鉴定,同时采用微量肉汤稀释法进行细菌药物敏感性试验,并对不同来源分离株进行脉冲场凝胶电泳（PFGE）分子分型,以BioNumerics软件分析菌株之间的相关性。结果 13份剩余食物和3份腹泻患者粪便经分离鉴定,有7份剩余食物样本的菌落总数、大肠菌群全部超标,有5份剩食物和2个病例的粪便中检出弗劳地柠檬酸杆菌,药敏试验结果显示,7株弗劳地柠檬酸杆菌对环丙沙星、四环素、氯霉素、庆大霉素、阿米卡星、头孢噻肟和美罗培南均敏感,但对氨苄西林完全耐药,无多重耐药现象;检出的7株弗劳地柠檬酸杆菌,经脉冲场凝胶电泳（PFGE）检测结果为：7株弗劳地柠檬酸杆菌的PFGE条带一致、同源性100%,显示为同一克隆。结论 本起食物中毒事件是由弗劳地柠檬酸杆菌导致的,通过飞行质谱方法可以快速、准确确定食物中毒的病原,利于感染性疾病的早期诊疗,建议加大相应的管理力度,提高食品安全意识,预防类似事件的发生。     

13652例泌尿系感染患者尿培养细菌分布及耐药性分析

目的监测与分析泌尿系感染患者常见的细菌分布及对抗菌药物的耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法鉴定采用VITEK 2系统,药物敏感试验采用VITEK 2系统和KB琼脂扩散法,应用WHONET5.6软件分析中段尿培养标本所分离的细菌的分布情况和药敏结果。结果分离菌株2 805株,其中革兰阳性菌618株(22.03%),以屎肠球菌最为常见;革兰阴性菌2 187株(77.97%),以大肠埃希菌最常见。细菌对各种抗菌药物耐药差异性较大,表现为不同程度耐药。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对超广谱β内酰胺酶(ESBL)的耐药率分别为63.9%和70.3%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为60.7%,而耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为82.7%。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对碳青酶烯类亚胺培南和美罗培南的耐药率均为0.0%,对喹诺酮类的耐药率为38.7%～70.5%,对第三代头孢菌素的耐药率为11.1%～55.4%,对呋喃妥因的耐药率为9.3%～37.7%,对阿米卡星耐药率为10.6%～12.3%;肠球菌属和葡萄球菌属对万古霉素、利奈唑烷和替考拉宁耐药率均为0%。     

双向电泳及质谱分析与蛋白组研究

蛋白组分析是对生物蛋白组的分析与检测，即对生物蛋白质的大范围研究。蛋白组分析首先要将混合蛋白质分离，分离的主要方法是蛋白双向电泳，蛋白双向电泳是一种高效且广泛应用于分析由细胞，组织或其他生物样本中提取的复杂蛋白混合物的方法。此方法根据蛋白互不关联的两个特性-等电点和分子量对蛋白进行分离。它分辨率高，稳定性好，是蛋白组分析的关键技术之一。已被分离的蛋白质由质谱分析对其进行鉴定，质谱测量主要有两种方式；基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱测量法和电子喷雾电离质谱测量法，此两种方法操作方式不同，但其所获得的信息互为补充。前者以多肽质量/电荷比为依据同数据库资料进行比较，进而对蛋白进行鉴定，此法通常被称为多肽质量指纹分析，后者由离子谱推得多肽的氨基酸序列，并依据这些氨基酸序列进行蛋白鉴定，此法较多肽质量指纹分析鉴定更准确，可靠，蛋白组分析可用于样本全蛋白检测，样本蛋白表达检测。蛋白相互作用检测和蛋白修饰检测等方面，具有广阔的前景。     

全自动微生物鉴定药敏分析仪对临床相关细菌的鉴定能力及应用价值

目的:探讨Vitek 2 Compact型全自动微生物鉴定药敏分析仪对病原菌的鉴定能力及临床价值。方法:选取某医院各科患者的呼吸道、泌尿生殖道、脓液、血液等样本中分离的病原菌126株和本院实验室保存的参考菌株60株以及4种质控菌株作为本次检测的菌株。采用法国生物梅里埃公司生产的Vitek 2 Compact型全自动微生物鉴定药敏分析仪及相应的鉴定卡进行鉴定,分析鉴定结果正确率、鉴定时间及药敏结果。结果:4种质控菌株中每种菌株各测试10次,共40次,鉴定重复率为100%。90株革兰阴性菌中,鉴定正确的菌株为87株,鉴定正确率为96.67%;96株革兰阳性菌中,鉴定正确的菌株为93株,鉴定正确率为96.88%。肠杆菌属、非发酵糖菌和链球菌属、微球菌属4种菌株均在9 h以内完成鉴定,其中肠杆菌属和微球菌属在6 h内完成了85%左右的鉴定。革兰阴性菌的药敏结果符合率为93.94%,革兰阳性菌的药敏结果符合率为93.40%,总符合率为93.66%。结论:Vitek 2 Compact型全自动微生物鉴定药敏分析仪对病原菌的鉴定正确率较高,能快速给出鉴定结果,对指导疾病诊断和抗菌药物的合理使用具有重要的临床价值。     

食品中沙门菌污染状况调查及VITEK微生物分析系统的应用效果评价

目的了解肇庆市食品中沙门菌的污染状况，建立食品中沙门菌的快速检验方法。方法采用国标法（GB／T4789．4）对样品进行沙门菌检测，并应用VITEK32全自动微生物分析系统对分离的可疑菌株进行鉴定。结果监测4类120份样品，共检出沙门菌9株，检出率为7．5％，其中生肉类沙门菌检出率为20．0％，蔬菜类沙门菌检出率为5．0％，熟肉制品及水产品中均未检出沙门菌，VITEK与常规法鉴定结果相一致。结论肇庆市生肉制品的沙门菌污染情况较严重，优势菌型为德尔卑沙门菌。VITEK全自动微生物分析系统可用于食品中沙门菌的快速检测。     

基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪快速鉴别青霉素耐药及敏感的肺炎链球菌的应用

目的 探讨基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪（matrix-assisted laser desorption/ ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）快速鉴别青霉素耐药及青霉素敏感的肺炎链球菌的可行性。方法 收集2017年1月到2019年12月广州市番禺区中心医院青霉素耐药的肺炎链球菌（PRSP）10株及青霉素敏感的肺炎链球菌（PSSP）30株。其中31株肺炎链球菌分离自呼吸道标本,占77.5%,18株肺炎链球菌分离自儿科,占45.0%。年龄分布,60岁以上15株,12岁以下18株。用MALDI-TOF MS进行菌株鉴定,用VITEK 2 Compact的药敏卡AST-GP68进行耐药性检测,用VITEK MS的Launch pad软件对MALDI-TOF MS鉴定的肺炎链球菌所产生的质谱峰图进行分析。结果 质谱峰m/z的3992、4419为肺炎链球菌的特征峰,质谱峰m/z的 3853、4218、4619是用于区分PRSP及PSSP最主要的特征峰,不同菌株质谱峰略有不同。164株肺炎链球菌青霉素的耐药率为8.5%,万古霉素﹑利奈唑胺﹑厄他培南的敏感率均为100.0%。90株PSSP及64株PRSP对15种抗生素的药敏结果显示,PSSP的阿莫西林及青霉素的敏感率分别为100.0%,而PRSP的阿莫西林及青霉素的敏感率为0。结论 MALDI-TOF MS可快速准确鉴别PRSP及PSSP,具有耗时短,灵敏度高,特异性好等特点。     

MALDI-TOF MS鉴定酵母菌应用评价

目的 评估MALDI-TOF MS鉴定酵母菌的能力.方法 分别用VITEK MS和API ID 32C系统同时鉴定387株临床分离酵母菌.以ITS测序结果作为比较标准.比较MALDI-TOF MS、API ID 32C 结果准确率.结果 VITEK MS鉴定酵母菌准确率为97.7%,API ID 32C 鉴定准确率为93.0%,差异有统计学意义(X2=9.439,P=0.002);MALDI-TOF与ITS测序相比,差异无统计学意义.结论 MALDI-TOF可对临床常见酵母菌快速、准确鉴定到种.     

新生儿神经管畸形的血清蛋白组学研究

目的 寻找神经管畸形新生儿血清中异常表达的蛋白质。 方法 通过二维凝胶电泳分离神经管畸形新生儿及正常新生儿血清,用PDQuest图像软件比较电泳图谱中的异常蛋白质点,用MALDI TOF/ TOF串联质谱仪分析蛋白质,所得的质谱图通过GPS软件在Mascot数据库中检索并鉴定蛋白质。结果 筛选出35个表达差异的蛋白质点,其中有8个蛋白质点表达上调,27个蛋白质点表达下调。选取四个蛋白质点进行鉴定,其中结合珠蛋白前体表达升高, HP protein, 血清载脂蛋白A-1前体及immunoglobulin heavy constant gamma 1三种蛋白表达均降低。 结论 神经管畸形可以导致血清中多种蛋白的的异常表达。     

三种外阴阴道假丝酵母菌病致病菌种鉴定方法比较

［摘要］目的　分析比较3种阴道假丝酵母菌病（VVC）致病菌种鉴定方法的优劣．方法　以科玛嘉假丝酵母菌显色培养基、安图显色培养基和VITEK 2系统分别进行致病假丝酵母菌菌种鉴定,最终鉴定结果以VITEK 2 系统为准．结果　共获得RVVC、VVC患者致病菌株243株,经VITEK2系统鉴定为白假丝酵母菌217株,非白假丝酵母菌26株．安图显色培养基鉴定白假丝酵母菌216株,非白假丝酵母菌13株．科玛嘉假丝酵母菌显色培养基鉴定白假丝酵母菌214株,非白假丝酵母菌16株．与VITEK2系统的鉴定符合率分别为94.7%和98.62%,2种显色培养基对白假丝酵母菌和非白假丝酵母菌的鉴定结果差异无统计学意义（P＞0.05）．结论　相对于科玛嘉假丝酵母菌显色培养基,安图显色培养基价格低,颜色辨别度高,操作更简单,更值得在临床假丝酵母菌鉴定中推广应用．     

下呼吸道感染革兰阴性杆菌的耐药现状分析

目的:了解下呼吸道感染主要病原菌的分布及其耐药性,指导临床合理使用抗生素。方法:617株革兰阴性杆菌采用法国生物-梅里埃VITEK全自动微生物分析系统和GNI鉴定卡进行菌种鉴定;采用KB法进行药敏试验,按照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)2007版操作和判断结果。结果:分离率居前位的革兰阴性杆菌依次为:铜绿假单胞菌(43%)、鲍曼不动杆菌(16%)、肺炎克雷伯菌(15%)、大肠埃希菌(8%)、嗜麦芽窄食单胞菌(8%)、肠杆菌属(4%)。以上菌株对常用抗菌药物产生了严重的耐药性。产超光谱B-内酰胺酶(ESBLs)细菌总检出率为54.1%;铜绿假单胞菌何鲍曼不动杆菌泛滥药菌株检出率分别为3.4%和6.1%。结论:下呼吸道感染革兰阴性菌多为多重耐药病原菌,应熟悉细菌耐药特点及耐药机制,根据病原学检查结果合理选用抗菌药物。