肝癌细胞中C60含量的荧光分析法测定

目的:建立肝癌细胞中C60含量测定的荧光分析法。方法:采用荧光分光光度法,以220nm为激发波长,在371nm发射波长处测定肝癌细胞中C60的荧光强度。肝癌细胞经破碎、离心处理后进行测定,以减小蛋白质和酶的干扰。结果:该方法检测肝癌细胞中C60含量的标准曲线为I=2.2403C+44.188(r=0.9958,P<0.05),检测范围在1.28～46.08mg/L,检测限为0.275mg/L,平均回收率为86.5%,RSD为10.8%。结论:该方法简便、准确、快速,可用于肝癌细胞中C60的定量分析。     

一种用于细胞成像检测Al(Ⅲ)的高选择性开关型烟酰肼类荧光探针

目的:基于烟酰肼席夫碱配体,开发一种灵敏度高、选择性强的新型铝离子荧光探针。方法:通过2-羟基-1-萘甲醛和烟酰肼的缩合反应,合成一个酰腙衍生物2-羟基-1-萘甲醛烟酰腙(HL),并通过红外和核磁氢谱验证其结构。HL可通过荧光光谱检测样品中的铝离子及通过生物成像检测细胞中的铝离子。结果:HL结合铝离子后形成2:1的化合物,其荧光会发生显著的提高,并具有良好的选择性。基于密度泛函理论,通过计算验证其识别机制为激发态分子内质子转移（ESIPT）和分子内电荷转移(ICT)。HL在低浓度下和铝离子具有很好的线性关系,检测限为2.3 nmol/L。结论:基于具有良好的铝离子检测能力,此烟酰肼席夫碱配体可作为荧光探针应用于医学检验领域。     

一种测定亮氨酸脑啡肽(L-EK)药物的新型荧光衍生化方法

 目的 建立一种新型的氧化还原柱前衍生化荧光检测高效液相色谱法测定亮氨酸脑啡肽(leu-enkephalin,L-EK)药物。方法 将肽类药物L-EK与0.012 mol/L高碘酸钠、0.01 mol/L儿茶酚、0.3 mol/L硼酸按体积比2∶2∶1∶1混合,于120 ℃反应10 min后,用反相柱分离,以0.25 mol/L硼酸盐缓冲液(pH 7.6)和甲醇为流动相,采用梯度洗脱,荧光检测器检测。同时与高效液相色谱紫外法、邻苯二甲醛(O-phthalaldehyde,OPA)柱前衍生荧光检测高效液相色谱法比较,测定体外及血样中L-EK的含量。结果 氧化还原柱前衍生化荧光检测高效液相色谱法检测含L-EK血样,线性范围 0.5~50.0 mg/L,线性良好(r=0.999 8),血浆中检测限为0.1 mg/L,且较另外两种方法不受内源性物质的干扰。结论 新型的氧化还原柱前衍生化荧光检测高效液相色谱法专属性好,灵敏度高,尤其适合生物样品中L-EK药物的测定。     

高效液相色谱法测定不同产地虾仁中的甲醛残留

目的:采用高效液相色谱法建立不同产地虾仁中甲醛残留含量的测定方法,为评价虾仁的质量提供依据。方法:以2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)为衍生试剂,在冰乙酸-乙酸钠缓冲溶液(p H=5)中反应,使甲醛转化为相应稳定的甲醛-2,4-二硝基苯腙,利用二极管阵列检测器进行测定。结果:甲醛峰面积与浓度在2μg/mL~20μg/mL范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.999 2;回收率为71.12%~73.50%,方法检出限为5 mg/kg;相对标准偏差RSD小于5.7%。结论:该方法的精密度、稳定性和重复性均良好,可用于虾仁中甲醛的限量检查。     

荧光定量PCR同步检测人类疱疹病毒6,7,8型方法的建立

目的:建立同步检测人类疱疹病毒6,7,8型(HHV-6,-7,-8)的多重荧光定量PCR方法。方法:分别针对HHV-6,-7,-8的U67、U36、ORF65基因设计3对引物和3种Taq Man-LNA探针,构建三重荧光定量PCR反应体系,用于同步扩增HHV-6,-7,-8。分别应用HHV-6,-7,-8质粒建立对应标准曲线,并对多重荧光定量PCR方法进行线性范围、灵敏度、特异性、重复性和扩增效率等方法学评价。以DNA测序法为参考方法,检测45例疑似HHV感染者外周血单个有核细胞(PBMC)中的HHV-6,-7,-8,对多重荧光定量PCR方法进行临床特异性和敏感性评估。结果:多重荧光定量PCR方法检测HHV-6,-7,-8的线性范围均在10⁶-106-10⁽¹¹⁾Copies/L,相关系数均>0.99,灵敏度为8×10(11)Copies/L,相关系数均>0.99,灵敏度为8×10⁵Copies/L,最低检测限为5×105Copies/L,最低检测限为5×10⁵Copies/L,无非特异性扩增,线性范围内HHV-6,-7,-8的批间、批内变异系数(CV)均<5.5%;与单重荧光定量PCR相比,检测HHV-6,-7,-8质粒含量的相关性分别为0.980,0.987,0.965。以DNA测序方法为金标准,多重荧光定量PCR检测HHV-6,-7,-8的特异性均为100%,灵敏度分别是93.1%、80%、100%。结论:多重荧光定量PCR能够对HHV-6,-7,-8进行同步、快速和准确的定量检测,将在输血安全筛查方面有着广泛的应用前景。     

头孢哌酮钠/舒巴坦钠与5种常用输液的配伍稳定性考察

目的:考察头孢哌酮钠/舒巴坦钠与5种常用输液配伍的稳定性.方法:利用双波长分光光度法测定头孢哌酮钠/舒巴坦钠联合制剂中头孢哌酮钠和舒巴坦钠的含量,并对与5种常用输液配伍的稳定性进行初步考察.结果:头孢哌酮钠在2～20 mg/L范围内浓度与吸收度呈良好的线性关系,检测限为0.56mg/L,平均回收率为99.77%,RSD为1.06%(n=9).舒巴坦钠在2～20 mg/L范围内浓度与吸收度呈良好的线性关系,检测限为0.56 m/L,平均回收率为99.86%,RSD为1.09%(n=9].结论:临床上注射用头孢哌酮钠/舒巴坦钠在配制3 h内含量会有所下降,但变化不大,可与5种常用输液配伍使用,该实验可以为临床配伍提供一些参考.     

流动注射分析法测定饮用水中硫酸盐

本文建立了在线沉淀流动注射分析法测量饮用水中硫酸盐的方法。沉淀稳定剂：氯化钠-盐酸-甘油-乙醇和氯化钡。载液：蒸馏水。对沉淀体系中影响显色的诸因素进行了实验研究。方法检测限为10mg/L,线性范围10～1000mg/L,r=0.9993。对65.6mg/L自来水样品进行11次平行测量,测得相对标准偏差为3.3%。回收率97.2%。检测速度70次/小时。结果方法准确、可靠,具有实用价值。     

顺序注射分析法测定自来水中硫酸盐

本文建立了在线沉淀顺序注射分析法测量了自来水中硫酸盐的方法。沉淀稳定剂：氯化钠-盐酸-甘油-乙醇和氯化钡。载液：蒸馏水。对沉淀体系中影响显色的诸因素进行了实验研究。方法检测限为10mg/L,线性范围10～1000mg/L,r=0.9993。对65.6mg/L自来水样品进行11次平行测量,测得相对标准偏差为3.3%。回收率97.2%。检测速度70次/小时。结果：方法准确、可靠,具有实用价值。     

毛细管电泳法测定酒石酸美托洛尔片的含量

目的:建立毛细管电泳法测定酒石酸美托洛尔片中美托洛尔含量的方法.方法:采用熔融石英毛细管柱(45 cm×75 μm ,有效长度37 cm),运行缓冲液为40 mmol/L Tris-H3PO4缓冲液(pH4.61),压力进样3.448 kPa×5 s,工作电压25 kV,柱温25 ℃,检测波长273 nm.结果:本法标准曲线回归方程为Y=13.099X+0.005 78(r=0.999 5,P<0.05),检测范围0.050～0.250 g/L,美托洛尔的最低检测限为0.025 mg/L,最低定量限为0.008 g/L.精密度、回收率均符合标准.3批酒石酸美托洛尔片样品美托洛尔相对含量分别为99.55%,99.45%,99.76%.结论:本方法简便,准确,快速,重复性好,可用于酒石酸美托洛尔片中美托洛尔的含量测定.     

连续流动分析法对不同产地不同原料的酒精中氰化物的测定

本文使用异烟酸-1,3二甲基巴比妥酸显色体系在连续流动分析仪上检测不同产地不同原料的酒精中氰化物;显色反应为:在微酸性条件下,酒精中的氰离子与氯胺T作用生成氯化氰,氯化氰与异烟酸反应,经水解生成戊烯二醛类化合物,再与1,3--甲基巴比妥酸反应生成蓝色化合物;检测波长:600nm;线性方程Y=4.35E-5X-0.013,相关系数:0.999 8,线性范围0-2.5 mg/L;检测限:0.029mg/L;定量限:0.097mg/L,方法准确、快速、重复性好;样品测试结果:样品所含氰化物(按HCN计)＜2.4mg/L.     

高灵敏性表面增强拉曼散射传感器的构建及其用于人体尿液中痕量甲醛的快速检测

目的：构建响应快速、灵敏度高的表面增强拉曼散射(surface-enhanced Raman scattering,SERS)传感器,实现对人体尿液中痕量甲醛的快速检测。方法：以对-氨基苯硫酚(p-ATP)为探针分子,通过表面自组装技术在银纳米粒子表面修饰具有SERS信号响应的单分子层,滴加甲醛后,甲醛通过醛基与p-ATP发生特异性缩合反应,p-ATP原有拉曼信号强度猝灭,进而实现对甲醛的间接检测。结果：甲醛在1.0×10-8~1.0×10-7 mol/L范围内呈现良好的线性,相关系数为0.991 7,检测限为6.5×10-9 mol/L,回收率为97.5%~106.0%。结论：本方法可用于人体尿液中痕量甲醛的检测,具有耗时少、简便和灵敏度高等优点。     

在市售馒头中检出甲醛次硫酸氢钠

目的检测送检馒头中甲醛次硫酸氢钠含量;方法样品经水汽蒸馏后,用乙酰丙酮法及GB/T5009.34-2003方法分别测定样品中甲醛和二氧化硫含量,计算样品中甲醛次硫酸氢钠的含量;结果与结论两种方法受外界环境的影响小,适于实验室检测食品中吊白块的含量。     

顺序注射分析法测量血清钙

本文采用双路注射泵推动载液和显色剂,使用双六通阀吸取载液和显色剂,完成采样。研究了邻甲酚酞络合酮-8-羟基喹啉的行为,对影响显色的诸因素进行了实验和探讨。方法检测限为10mg/L(以血清样品计),线性范围10～500mg/L(以血清样品计)。对98.34mg/L血清样品进行9次平行测量,测得相对标准偏差为1.207%。回收率105.3%。方法准确、结果可靠,与常规方法比较节省试剂10倍以上,具有实用价值。建立了新的试样与试剂注入的血清钙顺序注射分析方法。     

市售米粉甲醛含量的检测与分析

目的:通过对长沙市市售米粉中甲醛含量的测定,了解其污染状况,为政府加强食品卫生监督管理工作提供依据,为城镇居民健康饮食提出合理建议。方法:在长沙市5区随机抽取样品共106份,应用乙酰丙酮显色法测定其甲醛含量。结果:106份样品中61份阳性,总检出率为57.55%,阳性样品中甲醛含量范围为0.011mg～2.859mg/kg。结论:本次检测的市售米粉样品中添加甲醛的现象相当普遍,建议有关部门在研究其对策的同时应加强宣传力度和食品卫生监督及市场管理,以保护广大市民的身体健康。     

流动注射化学发光法检测食品中SO2含量的研究

目的:建立一种食品中SO2的化学发光快速检测法?方法:利用SO2定量的与酸性高锰酸钾反应,从而减弱高锰酸钾-间苯二酚的化学发光,其减弱值与被检物浓度有关?结果:在最优化条件下,SO2浓度在0.04~40.00 mg/L范围内与发光强度减弱值呈较好的线性关系?方法的检测限为0.03 mg/L (S/N=3)?结论:该方法可用于食品中SO2分析?     

固相萃取-液相色谱串联质谱仪法测定酱、腌制品中谷氨酸钠的含量及居民膳食暴露风险评估

目的建立液-质联用法(HPLC-MS)检测酱、腌制品中谷氨酸钠含量及居民膳食暴露风险评估的方法。方法以纯水做为提取液,初始流动相作为复溶液,选用MAX小柱净化,对含量高的样品可直接稀释上机测定。选择用ACQUITY UPLC BEH-Hilic(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)柱子检测峰保留最好,选择优化后的色谱、质谱条件,以LC-MS/MS测定。结果该法溶液浓度范围在0.5～5.0 mg/L线性关系良好,检出限为15 mg/kg,定量限为50 mg/kg,稳定性试验相对标准偏差(RSD)为1.03%,符合试验要求;精密度试验相对标准偏差范围1.12%～6.86%,回收率范围85.6%～95.0%。对含量高的样品可直接稀释上机测定,与过净化柱检测结果差异有统计学意义(t=-2.153,P0.05);酱、腌制品中普遍含有谷氨酸钠,总检出率为86.0%,平均含量为5.28×10~3 mg/kg,五类酱、腌制品中谷氨酸钠的平均含量差异无统计学意义(t=1.176,P0.05),居民摄入谷氨酸钠的平均值均低于上限(1.89×10~3 mg)。结论该方法操作简单、分析速度快、精密度好、准确度高、重现性好,是理想的测定酱、腌制品中谷氨酸钠的方法;居民酱、腌制品中谷氨酸钠的日暴露量均处在可接受安全水平范围内。     

异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为及其测定

目的 研究异鼠李素在碳糊电极上的伏安行为,建立异鼠李素含量测定的新方法. 方法 采用循环伏安法检测异鼠李素在电极上的电化学行为,以差示脉冲伏安测定其含量. 结果 异鼠李素发生单电子、单质子的氧化还原反应,该反应为有吸附特征的可逆过程.在pH 4.0磷酸缓冲液中,氧化峰电流与异鼠李素浓度在2.0×10-7～3.0×10-6 mol/L呈良好的线性关系,检测限为2.5×10-8 mol/L. 结论 碳糊电极可有效消除样品中其他组分对异鼠李素测定的干扰,可用于实际样品的测定.     

测量血清钙的流动注射分析法

目的 建立流动注射分析测量血清钙的新方法.方法 采用流动注射技术,研究甲基麝香草酚蓝、8-羟基喹啉、聚乙烯吡咯烷酮、盐酸、无水亚硫酸钠、单乙醇胺的作用,对影响显色的因素进行实验和探讨,建立流动注射分析测量血清钙新方法.结果 检测限为2mg/L(以血清样品计),线性范围(2～500)mg/L(以血清样品计),对80.1 mg/L血清样品进行11次平行测量.测得相对标准偏差为2.3%,回收率92.5%-106.8%.结论 方法准确、可靠,具有实用价值.     

对动物组织样品中砷的检测方法研究

目的：考察不同的样品预处理方法对测定动物组织样品中砷含量的影响,并建立定性定量检测动物组织样品中砷含量的分析方法。方法：分别通过消化法与灰化法处理动物组织的样品,借助二乙基二硫代氨基甲酸银分光光度法[Ag（DDC）法]进行砷含量的检测,并且比较其检测结果;采用铜片法对砷进行快速定性检验。结果：Ag（DDC）法所得吸光度对应砷含量的标准曲线在0.00-4.8 mg/L范围内线性良好,相关系数r为0.998 9;砷的检出限为40.6μg/L。两种预处理方法对检测样品的结果影响无明显差异（P〉0.05）。对于不同的动物组织,胃中的砷检出量最大,占给药量的50%;动物组织样品中采用铜片法的检出限约7.5 mg/L。结论：Ag（DDC）法和铜片法分别适用于动物组织样品中砷元素的定量和定性检测;消化法或灰化法均可适用于动物组织样品的预处理;在对大鼠胃、肝、肠、肾等组织样品进行砷含量检测中,胃是最佳检测部位。     

HPLC-ELSD法测定氨基酸原料药中5种糖类杂质

建立一种高效液相色谱-蒸发光散射检测（HPLC-ELSD）测定氨基酸原料药中5种糖类杂质的分析方法。利用离子交换树脂分离富集氨基酸样品中的残留糖类杂质,并采用Lichropher NH₂色谱柱（4.6 mm × 250 mm,5 μm）进行分离,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,漂移管温度为40 ℃;增益值为8;载气为氮气（压力为350 kPa）。经验证,果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖检测限为20.8 ~ 75.0 mg/kg,定量限为96.2 ~ 238.8 mg/kg,5种糖在线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,加样回收率在84.9% ~ 107.8%之间。该方法操作简便、灵敏度高、精密度好、准确可靠,可用于氨基酸原料药的残糖杂质分析。