COMPARISON OF FOUR METHODS TO GENERATE IMMUNOREACTIVE FRAGMENTS OF A MURINE MONOCLONAL ANTIBODY OC859 AGAINST HUMAN OVARIAN EPITHELIAL CANCER ANTIGEN

In the present study,four different proteases (pepsin,papain,bromelain and ficin) were screened with a murine monoclonal antibody OC859,in order to verify whether different digestion procedures could improve yield and stability of the F(ab‘)2 or Fab fragments.The yields of F(ab‘)2 or Fab fragments from digestion with pepsin,papain,bromelain and ficin were respectively 20.3 /-2.0%,50.5% /-5.0%,74.4 /-2.7% and 82.8 /-10.2% of the theoretical maximum.Immunoreactivity in a noncompetitive solid-phase radioimmunoassay (SPRIA) of the fragments generated by the four proteases were respectively 10 /-5%,36 /-5%,60 /-6% and 75 /-6% of the intact OC859 IgG.These results suggested that the fragmentation of OC859 with ficin gave a higher yield of superior immunoreactive fragments.     

ICE样蛋白酶与细胞凋亡

<正>细胞凋亡在维持多细胞有机体的正常发育、平衡机体内环境、抗御病毒入侵、预防细胞癌变等多方面都具有重要作用,ICE(IL-1βconverting enzyme)样蛋白酶因其与细胞凋亡的调控密切相关而越来越受到人们的广泛关注。本文仅就哺乳类ICE样蛋白酶与细胞凋亡的关系进行简要综述。     

基质金属蛋白酶抑制剂的研究

基质金属蛋白酶家族（MMPs）是细胞外基质（ECM）降解过程中的重要酶类，与多种病理过程尤其是细胞的侵袭和转移有重大关联。基于MMPs的种类、结构和作用方式，已经发现了多种抑制剂，均处于临床前或临床研究阶段。MMPs抑制剂正被开发为一种新型的抗血管生成剂，已成为研究的焦点。     

基因工程枯草杆菌生产中性蛋白酶的研究

使用一株基因工程枯草杆菌ＤＢ４０３（ｐＷＬ２６７）生产中性蛋白酶，其宿主ＤＢ４０３失去了野生菌株９９％的胞外蛋白酶生产能力，质粒ｐＷＬ２６７则带有野生菌株中性蛋白酶的全部结构基因。在分批培养中，中性蛋白酶的活性为２６２ｍｇ／ｍｉｎ·Ｌ左右，通过培养基改进达到３．２８６ｇ／ｍｉｎ·Ｌ。连续培养表明，中性蛋白酶的比生产速率在比生长速率为０．２ｈ￣（－１）时最大。在控制补加葡萄糖和其它培养基成分的补料分批培养中，中性蛋白酶活性达１７．６７０ｇ／ｍｍ·Ｌ。     

中性蛋白酶对壳聚糖的降解

用粘度测定法和还原糖测定法,研究了中性蛋白酶非专一性降解壳聚过程中温度,ｐＨ值,反应时间,酶浓度,底物浓度,金属离子及壳聚糖的脱乙酰度对中性蛋白酶降解壳聚糖反应速度的影响,确定了以壳聚糖为底物的中性蛋白酶的一些催化特性：最适温度为５０℃;最适ｐＨ值为６．０;米氏常数Ｋｍ值为１．１×１０＾－２ｇ／ｍＬ;一定浓度的Ｃｕ６２＋,Ｂａ＾２＋,Ｍｎ＾２＋抑制该酶的活性;     

大豆蛋白酶抑制剂活性的测定

在测定胰蛋白酶活性和胰凝乳蛋白酶活性的基础上建立了蛋白酶抑制剂活性测定的方法。并用此方法测定了３种蛋白酶抑制剂的活性，即ＣＭ－ＢＢＩ、粗ＢＢＩ和豆浆晶粗ＢＢＩ，其活性（每ｍｇ抑制剂蛋白抑制酶的μｇ数）分别为１６６０９、１４４１和２２０．６。为了衡量该法的可靠性，我们还测定了Ｓｉｇｍａ厂出产的胰蛋白酶抑制剂的活性，所得结果与该厂测定的结果一致。故可利用该法选择抗癌食物。     

去整合素-基质金属蛋白酶在肿瘤细胞中的作用研究进展

去整合素-金属蛋白酶(ADAM)家族是许多细胞外基质(ECM)的成分。根据其结构的不同分为膜锚定型和分泌型,这些分子在各种生物活动(如细胞黏附、细胞融合、细胞迁移、膜蛋白脱落和蛋白水解)中发挥作用。一些ADAMs成员在恶性肿瘤的病理过程中发挥作用。ADAMs的活性受基因表达、胞质和周围细胞的调控,酶原和抑制因子也参与调控。尽管现在还不清楚具体的作用机制,但是它们中大多数具有调控生长因子活性,整合、诱导细胞增殖和侵袭的作用。     

非小细胞肺癌MMP-s和TIMP-s的表达与转移及预后分析

目的检测138例非小细胞肺癌(NSCLC)组织中MMPs及其抑制剂TIMPs蛋白及mRNA水平的表达,探讨其与NSCLC生物学因素的关系。方法运用SP免疫组化技术检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-3在138例NSCLC中的表达。RT-PCR检测14例NSCLC中MMP-9、TIMP-3的mRNA表达。结果NSCLC中MMPs和TIMPs的阳性表达率均显著高于正常肺组织及增生及不典型增生上皮,MMPs和TIMPs阳性表达率与TNM分期、淋巴结的转移有关,但与NSCLC分化程度、分类、肿瘤的大小无关;MMP-9、TIMP3的mRNA的表达与淋巴结转移相关;MMP-2的表达与NSCLC患者生存时间呈负相关,而TIMP3表达与生存时间呈正相关。结论MMPs和TIMPs与肺癌的浸润、转移有关,是NSCLC转移、TNM分期、预后的重要指标。