子宫内膜ER、PR检测技术在临床的应用

前几年国内大多采用亲和组化法和多克隆抗体的免疫组化方法测定组织中ER和PR,其结论一直存在争论.近几年也开始应单克隆抗体测定冰冻切片中的ER、PR,但应用常规的免疫组化法测定石蜡标本中ER和PR不能获得满意的结果.本研究设计不同实验条件下,在石蜡切片中ER、PR的免疫组化染色,旨在探索最佳的RE、PR免疫组化染色条件.     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的 探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段.方法 采用石蜡切片进行脱蜡,修复抗原直接免疫荧光染色,将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较.结果 石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100%,而石蜡切片具有组织结构保存好,免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点.结论 石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段.     

组织芯片的研制及效果

目的:探讨研制组织芯片的方法以及在免疫组化中的应用.方法:选取乳腺良性增生及乳腺导管癌组织共82例,常规切片,HE染色下确定穿刺部位,每例穿取1.0 mm组织柱1条制备82点阵组织芯片,常规HE染色和免疫组化染色.以P53为观察指标,比较组织芯片与常规石蜡切片免疫组化染色表达情况.结果:研制的82位点组织芯片,组织排列整齐,HE染色及免疫组化染色后组织形态可观察率达100.00%,与常规石蜡切片染色结果具有高度一致性.结论:组织芯片是一种简单、经济、易于推广的技术方法.     

鉴定乙型肝炎病毒的3种组织学染色方法的比较

目的:比较鉴定乙型肝炎(乙肝)的3种组织学染色方法的优缺点.方法:分别取乙肝患者肝组织、丙型肝炎(丙肝)患者肝组织、正常肝组织及丙肝病毒、乙肝病毒重叠感染患者肝组织,用10%(体积分数)中性缓冲福尔马林固定液固定,石蜡包埋,切片(4μm),分别进行乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的免疫组织化学染色、改良地衣红染色、维多利亚蓝染色.结果:3种染色在6例乙肝病毒感染肝组织中均呈强阳性,在3例丙肝病毒、乙肝病毒共同感染的肝组织中呈弱阳性,在3例丙肝病毒感染肝组织中呈阴性,在3例正常肝组织中呈阴性.免疫组织化学染色:阳性细胞呈灶状分布,胞浆中可见深褐色团块或颗粒.改良地衣红染色:阳性细胞呈灶状分布,胞浆中可见暗红色团块或颗粒.维多利亚蓝染色:阳性细胞呈灶状分布,胞浆中可见蓝色团块或颗粒.结论:3种方法各有优缺点,免疫组化方法敏感性高、特异性强,但成本高;特殊染色方法溶液配制复杂、繁琐,且敏感性、特异性不如免疫组化的方法,但成本低.     

石蜡包埋肾组织免疫荧光染色在病理诊断中的应用

目的探讨石蜡包埋肾组织做免疫荧光是对冰冻切片肾组织做免疫组化的一个补充手段。方法采用石蜡切片进行脱蜡，修复抗原直接免疫荧光染色，将染色结果与冰冻切片染色结果进行比较。结果石蜡包埋肾组织与冰冻切片染色的诊断符合率达100％，而石蜡切片具有组织结构保存好，免疫沉积物清晰、易于判断结果及免疫荧光淬灭时间长等优点。结论石蜡切片免疫荧光染色可做为冰冻切片免疫荧光染色的补充手段。     

淋巴组织免疫组织化学染色方法的探讨

目的:鉴于病理淋巴组织的切片常见组织较硬、细胞脆性大,免疫组织化学染色显色模糊,甚至出现假阴性现象,探讨淋巴组织制片与免疫组化染色的新方法与新思路。方法:采用B-5固定液、软化剂的处理进行石蜡切片、免疫组织化学染色方法进行染色。结果:制出背景清晰、定位准确、反差分明、效果较好的免疫组化染色淋巴组织切片。结论:经B-5固定液固定、软化剂处理过的淋巴组织免疫组化切片能为淋巴组织疾病诊断提供定位准确、阳性明显的抗原表达信息。     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclin E和p21WAF1蛋白表达观察的体会

目的:探讨使用组织芯片技术,观察细胞周期的调控因子cyclin E和p21WAF1在胃癌组织中的表达的方法.方法:以124例为观察研究对象,自制组织芯片,使用S-P法观察单克隆抗体cyclin E(MAB-0019)、p21WAF1(MAB-0235)在胃癌组织中的表达情况.对其中11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色.结果:制成组织芯片2块,各含63块组织芯片,所制切片质量较满意,制片组织块完好率为95.2 %～98.4 %.所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色,与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比,阳性率、阳性表达强度结果基本一致.结论:使用自制组织芯片进行cyclin E、p21WAF1免疫组化染色分析,效果良好,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景.     

鼻腔鼻窦型血管外皮细胞瘤临床病理研究并文献复习

目的:探讨鼻腔鼻窦型血管外皮细胞瘤(SNTHPC)的病理形态学特点、组织发生、诊断和鉴别诊断、治疗及预后.方法:结合文献复习,对1例SNTHPC患者的临床病理资料进行总结.手术摘除标本采用常规石蜡切片、HE染色,并根据HE染色结果对石蜡切片采用EnVision免疫组化二步法染色、网状纤维染色和Giemsa染色,以进一步和多种肿瘤进行鉴别诊断.结果:免疫组化染色见瘤细胞表达Actin(+),Vimentin (+),CD34弱(+),GFAP弱(+),Bcl-2弱(+),S100个别细胞(+),Ki-67约1% (+),CD99(-),CD117(-);网状纤维染色示网状纤维围绕于大多数瘤细胞周围.结论:免疫组化提示SNTHPC是真正的向血管周细胞性平滑肌方向分化的肿瘤.该肿瘤少见,大多数具有惰性的生物学行为,尚需结合免疫组化与多种肿瘤进行鉴别.     

一种简单而快捷的半薄切片脱树脂新方法

目前, 在HE染色、特殊染色或免疫组化染色研究方面多采用普通石蜡包埋的切片, 其切片厚度最薄达4 μm,若更薄的切片,切割有一定的难度.对于各种染色而言,越薄的切片,细胞与组织结构越清晰,染色效果越好.环氧树脂包埋的组织块(Epon)不仅用于透射电子显微镜超薄切片的制备,也可用于光镜半薄切片的制备[1].本研究摸索出一种简单而快捷的脱树脂的方法,现介绍如下.     

免疫组化染色质量控制在肝脏穿刺组织切片中的应用

目的:探讨肝脏穿刺组织HE染色切片及免疫组化染色切片的质量控制与标准化操作在提高病理诊断准确率中的意义。方法:按照质控标准化对298例肝脏穿刺组织行HE制片和免疫组化染色,盲法比较标准化前后病理诊断结果。结果:按照质控标准化制备的常规HE染色切片优良率为92.3%,免疫组化染色切片优良率为91.1%;明显高于未标准化制备的HE切片和免疫组化染色切片(78.9%,74.9%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。298例肝脏穿刺组织,标准化后做出明确诊断的有259例(86.9%),标准化前为219例(73.5%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:此实验流程提高了肝脏穿刺组织免疫组化染色的质量,诊断率提高,可作为肝脏穿刺组织制片的标准流程应用。     

乳腺癌ER、PR和CerbB-2免疫组化对照芯片制作及其应用

目的:应用组织芯片原理手工制作乳腺癌雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和原癌基因CerbB-2免疫组化对照芯片.方法:选取ER、PR、CerbB-2免疫组化表达水平为-、+、++和+++的乳腺癌标本和相应的组织蜡块,使用自制的组织芯片采样器和改良的简易组织芯片制作方法制成组织芯片蜡块,经过连续切片获得对照芯片,每张对照芯片包含4个组织芯点位,依次为阴性对照和3个等级表达阳性对照.将常规工作中测试片裱贴在对照芯片旁边,同时进行免疫组化EnVision染色.结果:乳腺癌ER、PR、CerbB-2免疫组化染色结果能明确地在对照芯片中找到参照,测试组织是否阳性有了明确的对照.结论:乳腺癌ER、PR、CerbB-2免疫组化染色中设立等级对照十分必要,手工自制对照芯片方法简单,实用性强.     

8-OHdG在不同级别胶质瘤中的表达及意义

目的:探讨8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)在不同级别胶质瘤中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法检测45例不同级别胶质瘤组织中8-OHdG的表达,并结合临床资料分析其与胶质瘤临床特征之间的关系。结果:DNA氧化性损伤标志物8-OHdG在高级别(Ⅲ~Ⅳ级)胶质瘤中的表达强于低级别(Ⅰ~Ⅱ级)胶质瘤,在不同性别、年龄的胶质瘤患者中8-OHdG的表达差异无统计学意义。结论:高级别胶质瘤组织中的DNA氧化性损伤较低级别严重,8-OHdG可作为胶质瘤病理级别的辅助性诊断指标。     

1,8-二桉油素用作病理组织石蜡切片透明剂的实验研究

目的:对1,8-二桉油素用作病理组织石蜡切片透明剂的可行性进行实验研究,并探索其使用方法.方法:用二甲苯作对照,用1,8-二桉油素做实验研究,采用较硬、中等硬度和较脆的三种常见临床病理组织为实验材料.采取常规的病理组织取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烤片及染色过程,研究1,8-二桉油素代替二甲苯作为透明剂的可行性.结果:1,8-二桉油素能使酒精脱水组织完全透明,1,8-二桉油素组透明时间略长于二甲苯透明组.1,8-二桉油素组透明组织切片及染色良好.结论:1,8-二桉油素可以取代二甲苯用于病理组织透明.     

石蜡包埋与切片染色对大鼠脊髓腰膨大体积的影响

目的:研究石蜡包埋和切片染色对大鼠脊髓腰膨大皱缩程度的影响.方法:4%多聚甲醛经心脏灌流固定后取大鼠脊髓腰膨大(L4～6),称重、测量长度并以比重法测定其密度.重量除以密度即可得到固定后体积.将腰膨大均分为6段,随机抽取其中一段用石蜡包埋.垂直于脊髓长轴方向切取厚度为14μm的连续切片.按等距随机原则每15张抽取一张切片,第一张切片在第1～15张中随机抽取.选中的切片HE染色,用VIS体视学设备测定切片而积(A)和染色后厚度(h).A乘以切片厚度(H=14μm)即可得到包埋后脊髓腰膨大的体积;A乘以h即可得到切片染色后腰膨大的体积.用包埋后和切片染色后腰膨大的体积除以其包埋前的体积,即为石蜡包埋和切片染色后组织的皱缩系数.结果:组织固定后体积为(96.80±13.85)mm2.石蜡包埋后体积为(60.19±19.15)秘密,切片染色后体积为(42.97±16.02)mm2.石蜡包埋后和切片染色后脊髓的皱缩系数分别为62.9%±20.5%和44.8%±16.6%.结论:石蜡包埋和切片染色后脊髓组织明显皱缩.形态学定量研究必需考虑到组织皱缩对结果的影响.     

8-羟基脱氧鸟苷在胃癌患者血清及组织中含量变化的研究

目的通过检测胃癌患者血清和胃癌组织中8-OHdG的水平,探究8-羟基脱氧鸟苷在胃癌的发生和发展中的作用.方法 选取2010年7月至2011年1月泰安市中心医院住院均经病理确诊的胃癌患者30例,慢性胃炎患者15例.正常对照20例,来自健康人群志愿者.用酶联免疫吸附法(ELISA)测定研究对象血清中的8-OHdG的水平,同时采用免疫组化SP法检测研究对象胃组织中8-OHdG水平,并分别对胃癌患者与正常对照组血清8-OHdG水平以及胃癌患者与慢性胃炎及正常对照组胃组织8-OHdG表达情况进行比较.结果 胃癌组织中8-OHdG的表达状况与胃癌组织的组织分化程度密切相关,在高中分化腺癌中,8-OHdG的表达情况明显低于低分化的腺癌(p<0.05).患者胃癌组织中8-OHdG的表达与胃癌患者的性别、年龄无明显相关(p>0.05).结论 8-OHdG的水平变化可能与胃癌的发生发展有关,提示血清8-OHdG可能为辅助胃癌诊断的重要血清学标志物.8-OHdG与胃癌组织的分化程度、临床分期、浸润胃壁的深度以及是否伴有淋巴结转移等状况密切有关,可作为病理活检中辅助标志物判断胃癌病变.     

淋巴组织免疫组织化学染色及质量控制

目的 建立淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法，达到临床病理检验质控要求。方法 详细介绍了淋巴组织的取材、固定、脱水、透明、石蜡包埋、切片、免疫组化和TUNEL染色方法及其质量控制环节。结果 用此法制备的免疫组化切片具有阳性结果呈颗粒状的棕黄色，定位准确，对比明显，背景浅，组织结构与细胞轮廓完整、清晰，适合显微照相以及染色结果稳定可靠，特异性强、敏感性高。结论 该方法可作为淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法应用。     

一种新型石蜡切片脱蜡抗原修复液在免疫组化中的应用

目的 将新型的石蜡切片脱蜡抗原修复液对免疫组化染色结果的影响.方法 用适量的20倍稀释的脱蜡抗原修复液对乳腺癌组织石蜡切片标本E R、P R、CerbB-2表达进行检测.结果 E R、P R、CerbB-2阳性定位准确.结论 使用新型的石蜡切片脱蜡抗原修复液替代传统的免疫组化操作,将组织切片脱蜡和抗原修复一次性完成.且操作简便,避免二甲苯对人体所造成的伤害,对染色结果能获得满意的效果.     

抗酸-免疫组化双重染色法在结核病研究中的应用

在同一石蜡切片(结核病尸检标本及实验动物标本)上作抗酸-免疫组化双重染色,包括抗酸-HRP-SPA法和抗酸-IGSS等两种双重染色法,获得满意结果.应用这种染色能清楚地看到BCG抗原与抗酸菌,以及两者与结核病变的关系,减少了分别对照两张切片产生的误差和单用一种染色法的漏诊.该法前后两种染色互不干扰,反差分明,效果好,易于观察.     

环保透明剂替代二甲苯在病理制片技术中的应用

目的:探讨环保透明剂替代二甲苯用作病理组织石蜡制片的可行性。方法:用二甲苯作对照,用环保透明剂做实验研究,采用4种常见临床病理组织为实验材料。按照常规的病理组织取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、贴片、烤片及染色过程制作病理组织石蜡片。结果:环保透明剂能使乙醇脱水组织完全透明,环保透明剂组透明时间与二甲苯组一致,脱蜡时间略长于二甲苯组。环保透明剂组组织切片及染色良好。结论:环保透明剂可以取代二甲苯用作病理组织石蜡制片,并符合实验室环保的要求。     

微波辐射在网状纤维染色中的应用

目前 ,微波辐射作为一种先进的形态学技术辅助工具 ,已广泛地应用于病理制片技术 ,如ＨＥ染色、特殊染色、组织化学染色以及免疫组化染色等 ,产生了良好的染色效果 ,明显缩短整个制片过程 ,进一步提高了病理技术质量和工作效率。本实验将微波辐射应用于网状纤维染色 ,并与常规室温下网状纤维染色进行对照 ,经反复探索得到较为满意的染色效果。1　材料与方法1.1　材料选取手术切除标本　淋巴结、肝、脾、胸腺等组织 ,4 %中性甲醛缓冲溶液固定 ,常规石蜡包埋 ,切片厚 4 μｍ。微波炉 :东芝ＥＲ 692型微波炉 ,输出功率 :65 0ｗ ,工作频率 :2 4 …