黄草乌及其炮制品的毒性和镇痛作用研究

目的:比较黄草乌和其炮制品的毒性效应/镇痛效应。方法:采用HPLC法测定黄草乌和其炮制品滇乌碱、8-去乙酰滇乌碱的含量;采用Bliss法分别测定黄草乌及其炮制品对小鼠半数致死量(LD_(50))或测定其最大给药剂量;小鼠连续7 d灌胃黄草乌及其炮制品,末次给药1 h后观察小鼠Ⅱ导联心电图变化(心率失常发生率、心率变化);通过热板法和醋酸扭体法观察黄草乌及其炮制品镇痛作用。结果:黄草乌中滇乌碱的含量为264.19μg/g,制黄草乌中8-去乙酰滇乌碱的含量为574.25μg/g;黄草乌的LD_(50)为生药2.09 g/kg,黄草乌炮制品的最大给药量为生药18.0 g/kg。在生药1.0 g/kg相同剂量下灌胃给药,黄草乌组小鼠的心律失常发生率为100%,制黄草乌组小鼠的心律失常发生率为26.7%。与空白对照组比较,黄草乌组及制黄草乌组小鼠心律失常发生率都具有显著性差异(P0.01或P0.05),黄草乌组及制黄草乌组小鼠的平均心率也具有显著性差异(P0.05或P0.01)。黄草乌及其炮制品均具有镇痛作用(P0.05或P0.01),且两者镇痛作用无显著差异。结论:黄草乌毒性较大,炮制后的黄草乌毒性明显降低,炮制后的黄草乌镇痛效果并未降低,炮制对黄草乌具有减毒存效作用。     

黄草乌炮制前后生物碱含量及心脏毒性差异研究

目的考察黄草乌炮制前后两种生物碱含量变化及其对心脏的毒性影响。方法采用UPLC法测定黄草乌炮制前后滇乌碱、8-去乙酰滇乌碱的含量;采用Bliss法测定黄草乌生品的大鼠半数致死量(LD50);连续ig给药14d,观察麻醉大鼠II导联心电图变化,检测血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的水平,观察心肌病理组织形态学变化等。结果黄草乌炮制前后滇乌碱的含量分别为263.96μg/g、未检出,8-去乙酰滇乌碱的含量分别为未检出、568.47μg/g;生品LD50为生药4.2 g/kg,炮制品最大给药量为生药18.0 g/kg;连续ig给药14 d,生品组麻醉大鼠先后出现室性早搏、室性二联律和室颤等,炮制品组前期出现心动过缓,60 min恢复正常;与对照组比较,生品组血清LDH和CK水平均显著升高(P0.05),炮制品组只有LDH水平显著升高(P0.05);生品组心肌纤维之间间隙明显扩大,炎细胞浸润明显;炮制品组心肌纤维排列较整齐,间质中可见个别炎细胞浸润。结论在所给的剂量下,黄草乌生品对心脏毒性较强,炮制后毒性明显降低。     

不同炮制工艺对附片毒性及功效的影响

目的:评价不同炮制工艺的附片在功效以及毒性方面的异同。方法:选用黑顺片、炒附片、蒸附片3个附子炮制品种,采用急性毒性评价其毒性作用的差异;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法、小鼠冰醋酸扭体致痛法和角叉菜胶致小鼠尾部血栓试验,比较附子不同炮制品的抗炎、镇痛、抗血栓的作用。结果:测得小鼠口服,炒附片的最大耐受量为170g原生药/kg、蒸附片的最大耐受量为268g原生药/kg、黑顺片LD_(50)为138.13g原生药/kg;药效学研究结果显示炒附片40g原生药/kg、蒸附片10g原生药/kg和40g原生药/kg可显著抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀;炒附片10g原生药/kg和蒸附片40g原生药/kg可显著抑制角叉菜胶致小鼠尾部血栓形成数量以及尾部血栓黑尾长度,但三种附子炮制品均对醋酸致小鼠扭体反应无明显影响。结论:三种不同炮制工艺可显著影响附子的急性毒性作用和药效学作用,其中炒附片、蒸附片的减毒、存性作用最好,值得广泛推广。     

附子总碱及其模拟炮制品对大鼠离体心脏的毒性作用

目的:研究附子总碱及其模拟炮制品对大鼠离体心脏的毒性作用,探讨其作用机制。方法:建立SD大鼠的Langendorff离体心脏灌注模型。用附子总碱及其模拟炮制品的不同炮制时间点(0,20,40,60,80,120 min)炮制品以及不同累积给药剂量(0,50,100,150,300μg)对灌注模型进行干预,以左心室收缩压(left ventricular systolic pressure,LVSP),左心室舒张末期压(left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP),左心室舒张压(left ventricular developed pressure,LVDP),左心室内压最大上升速率(+dp/dt),左心室内压最大下降速率(-dp/dt)等血流动力学参数以及心率(heart rate,HR)为指标,观察附子总碱及其模拟炮制品对大鼠离体心脏的影响。结果:与给药前平衡比较,模拟炮制80 min组累积给药100μg时显示心脏毒性,炮制100,120 min组累积给药300μg时才出现毒性(P0.05)。附子总碱及其模拟炮制品都能增加心率,都能使LVSP,LVDP,±dp/dt明显降低,并且与累积给药量呈正相关趋势,同时使LVEDP上升。结论:附子总碱及其模拟炮制品对大鼠离体心脏均呈现出毒性作用,随炮制时间的延长,毒性下降。     

制黄草乌中滇乌碱及其转化产物8-去乙酰基滇乌头碱药效和毒性的初步研究

目的对比研究滇乌碱及其转化产物8-去乙酰基滇乌头碱的镇痛抗炎作用及急性毒性。方法采用热板致小鼠疼痛模型和醋酸致小鼠扭体模型观察二者的镇痛作用,采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型观察其抗炎作用;采用Bliss法测定其半数致死量。结果滇乌碱和8-去乙酰基滇乌头碱对热致痛有镇痛作用趋势,但差异均无统计学意义;对醋酸引起的疼痛均有明显的镇痛作用,滇乌碱高、低剂量均能显著降低小鼠扭体次数和延长小鼠疼痛潜伏期,8-去乙酰基滇乌头碱仅在高剂量时作用较显著;二者对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的抑制作用与溶媒组比较差异不明显,抗炎作用不确切。滇乌碱的毒性是其转化产物8-去乙酰基滇乌头碱的近20倍。结论制黄草乌中滇乌碱及其转化产物8-去乙酰基滇乌头碱应为外周镇痛作用药物,其中8-去乙酰基滇乌头碱的毒性较小,且对醋酸引起的小鼠疼痛作用显著,安全性高。     

高乌头炮制前后高乌甲素含量测定及小鼠急性毒性实验

目的比较高乌头生品及炮制品的高乌甲素含有量及急性毒性大小,为探讨高乌头炮制机理提供依据。方法采用测定半数致死量的方法对高乌头生品及炮制品的急性毒性进行研究。采用高效液相色谱法,测定高乌头生品及炮制品中高乌甲素的含有量。结果高乌头生品的LD_(50)为1.424 g/kg;高乌头炮制品的LD_(50)为2.625 g/kg。生品的毒性大于炮制品,高乌甲素的质量分数分别为1.170%、0.562%,炮制后含有量降低了一半。结论高乌头炮制后毒性显著降低,表明用甘草汁炮制能够降低高乌头的毒性,且毒性与高乌甲素密切相关,进一步证实高乌甲素就是高乌头的毒性成分之一。     

产业化生产中草乌不同炮制品的“减毒-存效”研究

研究产业化生产中草乌不同炮制品的毒性和药效的相关性,确定"减毒-存效"的最佳炮制方法。采用HPLC测定草乌及其不同炮制品中6种乌头碱类生物碱的含量;采用Bliss法分别测定草乌及其不同炮制品对小鼠半数致死量(LD50)或最大给药剂量;以二甲苯致耳肿胀法和醋酸扭体法试验考察不同炮制品的抗炎、镇痛作用。结果显示:①草乌生品中3种双酯型生物碱总量为0.358 8%;药典水煮法炮制品中3种双酯型生物碱总量为0.002 2%,3种单酯型生物碱总量为0.036 2%;常压蒸制法炮制品中3种双酯型生物碱总量为0.006 0%,3种单酯型生物碱总量为0.056 7%;②生草乌的LD50为5.4 g·kg^-1,药典水煮法和常压蒸制法炮制品的最大给药剂量为133.34 g·kg^-1;病理观察显示,与正常组比较,2种炮制品对于小鼠的心、肝、肾均有一定的损伤;③药典水煮法和常压蒸制法炮制品均具有抗炎、镇痛作用(P<0.01或P<0.05),其抗炎镇痛作用强弱为:常压蒸制法>药典水煮法。上述结果提示:生草乌毒性较大,采用常压蒸制法炮制后毒性明显降低,同时又保留了良好的的抗炎和镇痛作用;与药典水煮法相比,常压蒸制法具有工艺可操作性强、饮片质量稳定、抗炎镇痛作用更强等优势,适用于产业化生产。     

基于黄独素B含量分析的甘草、当归炮制黄药子减毒工艺研究

目的 基于黄独素B(DB)含量差异优选黄药子炮制减毒工艺。方法 以炮制过程中常见的主药与辅料(主药：黄药子;辅料：甘草、当归)配比、炮制温度、炮制时间为考察因素,分别制备黄药子各炮制品。以乙腈：水为25∶75为流动相,柱温30℃,建立黄药子的高效液相色谱方法,进行等度洗脱,测定黄药子中主要毒性成分DB的含量。结果 (1)与黄药子生品比较：甘草药汁制黄药子各炮制品中DB含量均有所下降,其中以A₃B₁C₃组中DB含量下降的最多,为0.781 mg/g,逆转率为31.9%;(2)当归药汁制黄药子各炮制品中DB含量均有所下降,其中以A₃B₂C₁组中DB含量下降的最多,为0.811 mg/g,逆转率为29.3%。结论 甘草药汁制黄药子的最佳炮制减毒工艺为A₃B₁C₃组,即“黄药子∶甘草以100∶20的情况下,120℃炮制20 min”;当归药汁制黄药子的最佳炮制减毒工艺为A₃B<...     

草乌与生半夏、法半夏配伍UPLC/Q-TOF-MS离子流图,OPLS-DA/PCS及差异化合物对比研究

目的:分析草乌与生半夏、法半夏配伍反与不反及其化学成分。方法:Bliss法对法半夏和草乌合煎液、生半夏和草乌合煎液及草乌提取液的LD_(50)进行计算;采用UPLC-Q-TOF-MS对两合煎液成分进行分析,经OPLS-DA和PCA对两合煎液内中毒性成分间差异行统计分析。结果:法半夏和草乌提取液对于小鼠Dm是16.96g/kg,Dn是8.50g/kg;生半夏和草乌提取液对于小鼠Dm是13.97g/kg,Dn是1.85g/kg;草乌提取液对于小鼠Dm是14.98g/kg,Dn是2.30g/kg;法半夏和草乌合煎液LD_(50)为12.20g/kg,其置信区间是11.36～13.10g/kg;生半夏和草乌合煎液LD_(50)为4.39g/kg,其置信区间是3.69～5.28g/kg;草乌煎液LD_(50)为7.97g/kg,其置信区间是6.97至9.09g/kg。和单独使用草乌相比,法半夏配伍草乌的LD_(50)变大,生半夏配伍草乌的LD_(50)变小;2组间有13个化学成分存在差异,生半夏和草乌合煎液内,峰13(去氧乌头碱)、峰9(北草乌碱)、峰12(10-脱乙酰乌头碱)、峰11(次乌头碱)和峰10(新乌头碱)是双酯型生物碱;峰8(苯甲酰次乌头原碱)、峰6(苯甲酰新乌头原碱)、峰4(10-OH-苯甲酰新乌头原碱)是单酯型生物碱显著增大;峰3(阿克塔林)及峰1(醇胺型生物碱中乌头胺)增加不显著,峰2(尼奥林)显著降低,另2个未知成分增加不显著。结论:相比单用草乌,法半夏和草乌配伍后其毒性下降,生半夏和草乌配伍后其毒性升高;草乌和法半夏或者生半夏配伍后其毒性升高或者降低与酯型生物碱含量有联系。     

国外中药炮制研究

关于国外中药炮制的研究,国内曾有过简要介绍,北川勋等也在日本进行了专题报告.本文仅就国外中药炮制的研究近况简述如下. 一、附子附子炮制的目的主要是减毒.Hiroshi Hikino等研究了附子及其炮制品对于不同方法给药(p.o、s.c、i.p、iv)的小鼠的LD_(50),结果表明:生附子经120℃湿热处理40分钟后,急性毒性降至原来的1/5～1/360;另对于DDI系小鼠和Wistar大鼠,生附子与其3～60倍剂量的炮制品的亚急性毒性和亚慢性毒性实验指标无明显差异,但生附子0.08g/kg/天的     

雪上一枝蒿炮制方法的探讨

雪上一枝蒿为剧毒药。本文对不同产地(包括家种)和不同炮制方法的雪上一支蒿总碱含量作了实验比较,其重点是将生药与五种炮制品测定的LD_(50)和镇痛作用作了比较。实验结果表明:不同产地和不同炮制方法的雪上一支蒿总碱含量均不相同。经筛选出的四个炮制品,不仅毒性大大降低,而且保持了疗效。其中尤以水煎品方法简便,质量较优。     

制黄草乌化学成分研究

目的:对制黄草乌的化学成分进行研究。方法:采用硅胶、氧化铝和反相C18柱色谱及重结晶等方法进行分离纯化,通过质谱、核磁共振技术和理化性质进行结构鉴定。结果:从制黄草乌的甲醇提取物中分离得到10个化合物,分别鉴定为:滇乌碱(1)、8-去乙酰基滇乌头碱(2)、geniculatine C(3)、黄草乌碱乙(4)、黄草乌碱丙(5)、黄草乌碱丁(6)、talatisamine(7)、β-谷甾醇(8)、β-胡萝卜苷(9)、β-谷甾醇乙酸酯(10)。结论:化合物1~10均为首次从制黄草乌中分离得到。     

附子乌头草乌及其炮制品的毒效比较

目的:从毒效角度出发,比较附子、乌头、草乌不同炮制品及提取物的毒性,为研究和应用这些生药提供相关实验依据。方法:以小鼠为主要研究对象,观察急性死亡率,心电影响阈剂量来观察毒性,以镇痛及其抗室颤来观察其药效。结果:从急性毒性看,白附片和黑顺片毒性较小,其最大给药剂量均为20.52 g.kg-1。盐附子毒性较大,LD50为11.301 g.kg-1。结合相关活性综合考察,临床安全指数由大到小依次为:黑顺片>白附片>盐附子。草乌毒性较大(LD50 292.38 mg.kg-1),经炮制后毒性明显减小,约降低70.32倍。结论:附子、乌头炮制后起到了减毒存效的作用,而草乌炮制后则表现为毒效同时降低。     

生地提取物对小鼠不同给药途径的急性毒性研究

目的 观察生地以低聚糖为主的提取物RGOS的急性毒性. 方法 测定生地RGOS对小鼠灌胃、超声雾化吸入及尾静脉注射3种给药途径的最大给药量或LD_(50),观察给药后的毒性反应及死亡情况,连续14 d. 结果 生地RGOS对小鼠灌胃的最大给药量为49.6 g/kg(119.04 g生药/kg);对小鼠超声雾化吸入的最大给药量为28.8 g/kg(65.38 g生药/kg);对小鼠尾静脉注射的LD_(50)为7.88 g/kg(17.89g生药/kg),其95%平均可信限L_(95)为(7.88±0.61) g/kg.静脉注射后小鼠体质量增长明显低于对照组,于第7天左右基本恢复. 结论 生地RGOS对小鼠灌胃、超声雾化吸入无明显毒性反应;静脉注射有一定的急性毒性,对小鼠体质量增长有一定的抑制作用.     

不同炮制方法对雷公藤的急性毒性和抗炎作用的影响

目的通过比较雷公藤生品及不同炮制品的半数致死量(LD50)和抗炎作用,观察不同炮制方法对雷公藤的急性毒性及药效的影响。方法采用改良寇氏法测定雷公藤生品及不同炮制品的LD50。筛选出毒性较低的3种炮制品,采用二甲苯致小鼠耳肿胀实验、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀实验和大鼠棉球肉芽肿实验,观察并比较雷公藤生品及不同炮制品的抗炎作用。结果雷公藤生品LD50为111.45 g/kg,酒炙品LD50为112.32 g/kg,清炒品LD50为113.64 g/kg,醋炙品LD50为121.29 g/kg,蒸制品LD50为121.83 g/kg,甘草炮制品LD50为127.92 g/kg,莱菔子炮制品LD50为155.37 g/kg。通过LD50的测定结果筛选出毒性较低的雷公藤蒸制品、甘草炮制品、莱菔子炮制品进行抗炎实验,结果显示这3种炮制品对二甲苯所致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀及大鼠棉球肉芽肿的生成均有明显抑制作用(P0.01或P0.05),其中莱菔子炮制品的抗炎作用优于雷公藤生品。结论雷公藤经过不同方法炮制后,具有减毒保效作用,其中尤以雷公藤莱菔子炮制品的毒性降低最为明显,且抗炎作用最佳。     

基于模拟炮制研究滇乌碱砂炒转化途径及其前后毒效变化

目的 研究滇乌碱在砂炒过程中的结构转化途径，比较滇乌碱与转化产物的急性毒性和转化产物的抗心律失常活性。方法 采用HPLC法筛选出滇乌碱发生结构转化的温度和时间参数，通过柱色谱法和核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）、质谱（mass spectrometry,MS）技术，分离鉴定出滇乌碱的砂炒转化产物；采用急性毒性实验比较原型成分和转化产物的毒性强弱；采用乌头碱建立大鼠心律失常模型，明确转化产物的抗心律失常作用。结果 通过比较不同炮制温度、时间样品的HPLC色谱图，筛选出滇乌碱在140～180℃，加热5～30 min时发生结构转化；分离、鉴定出滇乌碱的砂炒产物pyroyunaconitine；急性毒性实验结果表明，滇乌碱的半数致死量（lethal dose 50%,LD50）为0.353 mg/kg,pyroyunaconitine的LD50为62.563 mg/kg，炮制后毒性明显降低。抗心律失常实验结果显示，随着炮制产物pyroyunaconitine剂量的增大，大鼠的室性早搏（ventricular premature beat,VPB）潜伏期延...     

甘草制吴茱萸炮制研究

目的:通过正交设计建立甘草制吴茱萸的炮制工艺,并进行质量标准研究、毒理研究和药效学研究。方法:以吴茱萸胺、吴茱萸次碱为指标进行炮制工艺的优化,以RP-HPLC测定吴茱萸胺和吴茱萸次碱的含量,并进行吴茱萸生品和甘草制品小鼠的急性毒性实验和药效学试验。结果:甘草制吴茱萸的炮制工艺,甘草汁用量以6倍于药材的甘草溶液进行闷润,以低于230℃炒制至干。毒性及药效研究:吴茱萸生品和甘草制品以40(g饮片).(kg体重)^-1,b.w给小鼠一次性灌胃给药后观察7 d,各给药组的动物均未见明显异常;给小鼠灌胃给予0.6 g生药.kg^-1(临床等效剂量)的吴茱萸饮片产品(生品、甘草制品)后,均可明显升高小鼠热板痛阈值;明显减少由冰醋酸诱导的小鼠腹膜刺激性扭体反应次数,对小鼠扭体反应次数,对小鼠扭体反应的潜伏期也有一定延长作用。结论:生品吴茱萸和甘草制吴茱萸的毒性较低,甘草制吴茱萸具有镇痛作用。     

HPLC测定云南不同产地野生与栽培黄草乌中3种双酯型二萜生物碱成分含量

目的采用HPLC测定云南不同产地的野生与栽培黄草乌中滇乌碱、黄草乌碱甲及黄草乌碱丙的含量。方法采用Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为乙腈、B为40 mmol/L乙酸铵缓冲液(用氨水调pH值至9.00),两相梯度洗脱(0~35 min,35%→55%A;35~40 min,55%A),流速1.0 mL/min,柱温30℃,波长260nm。结果7个产地野生与栽培黄草乌中滇乌碱含量为510.29~1837.44μg/g,新平产野生黄草乌最高,建水栽培者最低;黄草乌碱甲含量为583.92~4105.45μg/g,个旧栽培黄草乌(黄皮)最高,建水栽培者最低;黄草乌碱丙含量为79.93~2281.68μg/g,嵩明产野生黄草乌最高,建水栽培者最低。3种双酯型二萜生物碱总含量为1240.32~5732.09μg/g。HPLC对比图显示,黄草乌栽培品与野生品成分存在较大差异。结论黄草乌野生品与栽培品存在明显成分差异,3种双酯型生物碱含量差异很大,不同产地的栽培品之间也有明显差异。     

不同炮制方法对大戟脂毒性的影响

目的:研究不同炮制方法对大戟脂毒性的影响。方法:将大戟脂用3种不同的方法进行炮制,生品和炮制品进行小鼠口服急性毒性试验,以LD50为毒性指标,判断毒性的大小。结果:大戟脂生品、烤制品、炒制品、灰埋制品的LD50分别为2.898g/kg、4.963g/kg、3.752g/kg、4.579g/kg。结论:3种不同的炮制方法均可显著降低大戟脂的毒性,以烤制法效果最佳。     

蒙药草乌炮制的研究

对诃子炮制的草乌进行对比实验,结果剧毒性生物碱含量相近,用提取液给药进行动物实验,毒性相似,而直接口服给药测定LD_(50)则诃子制草乌毒性明显降低。