脾虚大鼠壁细胞Ca2+/CaM-PKⅡ活性的变化及黄芪的作用

目的 :观察大黄及利血平两种脾虚模型大鼠壁细胞Ca2 /CaM PKⅡ的活性变化及黄芪注射液对其的作用。方法 :用Lewin胃袋法、Percoll密度梯度离心分离与纯化壁细胞 ,根据Ca2 /CaM PKⅡ活性与激活底物磷酸化量成线性关系 ,而底物磷酸化可通过掺入标记的磷酸盐反映 ,从而测定Ca2 /CaM PKⅡ活性 (pmol/min)。 结果 :大黄、利血平脾虚大鼠胃壁细胞内Ca2 /CaM PKⅡ活性 (pmol/min)均明显下降 ,黄芪注射液对其有明显上调作用。 结论 :脾虚证在壁细胞胃泌素受体后信号传导通路上病理表现为低下的状态 ,这一通路活性可能为健脾益气中药发挥药理作用的重要靶点之一。     

脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体研究及黄芪作用观察

目的 :观察脾虚大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合位点数的变化以及中药黄芪注射液对其的调控作用。方法 :脾虚模型采用利血平方法 ,治疗组给予黄芪注射液 ;大鼠胃黏膜壁细胞分离与纯化采用Lewin胃袋法及Percoll密度梯度纯化 ;壁细胞胃泌素受体结合位点数 (sites cell)的检测采用放射配基结合方法。结果 :利血平脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数为 2 71 2± 91 8,明显低于正常组 (6 19 1± 30 4 5 ,P <0 0 5 )。中药黄芪注射液对其有显著上调作用 (5 45 2± 2 0 5 3,P<0 0 1)。结论 :利血平脾虚大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合位点数下降 ,中药黄芪注射液对其有明显上调作用 ,胃泌素受体与脾虚证关系密切。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞CaM及Ca2+/CaM-PK Ⅱ活性的影响

目的：观察大黄脾虚模型大鼠壁细胞内CaM及Ca^2＋／CaM-PKⅡ活性的变化以及补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的作用。方法：EDTA-Pronase酶消化法及Percoll密度梯度离心分离和纯化大鼠胃壁细胞，根据的CaM的环核苷酸磷酸二酯酶检测法（PDE酶法）检测大鼠壁细胞内CaM活性；根据CaCa^＋／CaM—PKⅡ活性与激活底物磷酸化量成线性关系，测定其活性。结果：大黄脾虚模型大鼠壁细胞内CaM及Ca^2＋／CaM-PKⅡ活性均明显升高，补脾方药对其均有明显下调作用。结论：脾虚大鼠壁细胞处于高应激状态，党参、白术、补中益气汤等补脾方药可因对细胞内受体后信号传导物质的影响而调节细胞功能。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞CaM及Ca~(2+)/CaM-PK II活性的影响

目的:观察大黄脾虚模型大鼠壁细胞内CaM及CaCa2 /CaM-PK II活性的变化以及补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的作用。方法:EDTA-Pronase酶消化法及Perco ll密度梯度离心分离和纯化大鼠胃壁细胞,根据的CaM的环核苷酸磷酸二酯酶检测法(PDE酶法)检测大鼠壁细胞内CaM活性;根据CaCa2 /CaM-PK II活性与激活底物磷酸化量成线性关系,测定其活性。结果:大黄脾虚模型大鼠壁细胞内CaM及CaCa2 /CaM-PKII活性均明显升高,补脾方药对其均有明显下调作用。结论:脾虚大鼠壁细胞处于高应激状态,党参、白术、补中益气汤等补脾方药可因对细胞内受体后信号传导物质的影响而调节细胞功能。     

脾虚大鼠胃壁细胞胞浆游离钙离子浓度及黄芪对其调节作用的研究

目的：检测脾虚模型大鼠胃壁细胞胞内[Ca^2 ]i及黄芪对[Ca^2 ]i的调节作用。方法：SD大鼠用大鼠造成脾虚模型,并用黄芪注射液治疗4日,用Fura-2/AM荧光分光光度法检测壁细胞静息状态下和胃泌素刺激下[Ca^2 ]i。结果：脾虚模型大鼠壁细胞静息状态下[Ca^2 ]i明显低于正常大鼠,胃泌素刺激后[Ca^2 ]i升高幅度亦明显低于正常组;脾虚黄芪治疗组大鼠静息状态下[Ca^2 ]i有一定升高,胃泌素刺激下黄芪治疗组壁细胞[C^2 ]i升高幅度明显高于模型组并与正常组比较无明显差异。结论：脾虚大鼠胃壁细胞静息状态下和胃泌素刺激下[C^2 ]i明显低于正常大鼠,说明脾虚证时壁细胞功能处于一种低代谢状态,推测胞内钙库容量可能降低,而且壁细胞表面胃泌素受体数下调或／和功能下降,不能正常介导胞外信号。黄芪能够使低下的胞内代谢水平有一定程度恢复,胞内钙库容量有一定增大,并能使胃泌素受体数上调和／或功能加强,这可能是黄芪健脾益气作用的一个细胞水平的新机制。     

胃泌素受体在脾虚大鼠的异常表达与中药调控作用研究

目的：观察脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体的变化规律与益气健脾中药黄芪的调控作用。方法：应用受体结合法检测胃泌素受体结合位点数。结果：大黄和利血平脾虚模型大鼠胃粘膜胃泌素受体结合位点数均有明显减少。黄芪在纠正脾虚证的部分病理证候的同时,对脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体结合位点数有显著上调作用,而对血清胃泌素水平却有一定降低作用趋势。高浓度黄芪注射液在体外可显著促进胃泌素受体结合。结论：胃泌素受体参与了脾虚证的病理过程,黄芪健脾药理可能不是直接作用于胃泌素受体的内源性配基的结合部位,而有可能是一种类似酶别构效应机制的Ⅱ型受体激动剂。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞超微结构的影响

目的:观察补脾方药对脾虚模型大鼠胃壁细胞超微结构的影响。方法:脾虚模型采用大黄泻下方法、酶法(Pronase-EDTA)消化分离及离心纯化大鼠胃壁细胞,透射电镜观察壁细胞的超微结构变化。结果:正常组大鼠壁细胞可见胞质内大量的线粒体和散在的囊泡结构;脾虚组大鼠胃壁细胞电镜下可见明显扩张的分泌小管,小管内可见增长密集的微绒毛,囊泡状结构少见,未见线粒体结构异常。党参、白术、补中益气汤治疗组大鼠壁细胞呈现分泌恢复状态:分泌小管塌陷,其膜被吸收和内胞饮,表面的微绒毛密集、盘绕、重叠,形成几层膜结构而被吞入胞浆。在分泌小管相邻的胞浆内出现高电子密度的图像,为马蹄形、椭圆形或圆形的多层膜结构。结论:大黄脾虚模型大鼠胃壁细胞超微结构呈应激状态,可能致其自身对攻击因子敏感性增高,进而导致胃黏膜的易损性增强。补脾方药对其超微结构的异常改变有恢复作用。     

胃泌素受体在脾虚大鼠的异常表达与中药调控作用研究

应用受体结合法检测胃泌素受体结合位点数,观察了脾大鼠胃粘膜胃泌素受体的变化规律与益气健脾中药黄芪的调控作用。结果显示大黄和利血平脾虚模型大鼠胃粘膜胃泌素受体结合点数均有明显减少。黄芪在纠正脾虚证的部分病理证候的同时,对脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体结合点数有显著上调作用。而对血清胃泌素水平却有一定降低作用趋势。高浓度黄芪注射液在体外可显著促进胃泌素受体结合。推测胃泌素受体参与了脾虚证的病理过程,黄芪健脾药理可能不是直接作用于胃泌素受体的内源性配基的结合部位,而有可能是一种类似酶别构效应机制的Ⅱ型受体激动剂。     

脾虚大鼠壁细胞酸分泌机制的实验研究

目的：观察脾虚模型大鼠酸分泌的异常及补中益气汤对其的调节作用，探讨脾虚状态的酸分泌机制。方法：采用大黄脾虚模型，透射电镜观察离体壁细胞形态、双波长荧光分光光度计测定胃泌素刺激后壁细胞内[Ca^2 ]i变化及整体胃灌流实验。结果：电镜观察脾虚大鼠壁细胞分泌小管扩张，处于分泌状态；经胃泌素刺激后脾虚大鼠壁细胞内[Ca^2 ]i增高幅度明显高于正常组；胃灌流实验表明脾虚大鼠基础胃酸量显著低于正常组，而经组胺刺激后酸分泌增高幅度明显高于正常组，补中益气汤对其有调节作用。结论：脾虚大鼠存在酸分泌敏感性相对增高，胃黏膜易损性增强的反应。健脾益气方补中益气汤对其有一定的调节作用。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞内三磷酸肌醇(IP3)含量的影响

目的:观察脾虚大鼠模型壁细胞内IP3含量的变化及补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的影响。方法:大鼠壁细胞采用EDTA-Pronase酶消化法,采用竞争蛋白结合法测定大鼠壁细胞内IP3含量。结果:大黄脾虚模型大鼠壁细胞内IP3含量显著低于正常组,经党参、白术、补中益气汤治疗后,IP3含量有不同程度的升高,尤以党参组明显。结论:脾虚证可能与壁细胞内IP含量生成量减少相关,补脾方药对其有一定的调节作用。     

黄芪对脾虚模型大鼠肠道粘膜经由SGLT1/GLUT2的葡萄糖吸收的影响

摘要 目的：探讨黄芪对脾虚证模型大鼠小肠粘膜葡萄糖吸收的影响，并研究其可能通过调控SGLT1/GLUT2的作用机制。方法：采用注射利血平方法建立脾虚症模型大鼠，用在体灌流技术观察黄芪对大鼠小肠粘膜的葡萄糖吸收影响并收集小肠粘膜，检测钠依赖葡萄糖转运蛋白（SGLT1）和2型葡萄糖转运蛋白（GLUT2）转运蛋白和mRNA的表达变化。结果：与正常组对比，模型组大鼠体重及尿D-木糖排泄率明显降低（P<0.01），同时葡萄糖吸收量、SGLT1和GLUT2的蛋白及mRNA表达均下降（P<0.01），与模型组相比，通过黄芪水煎液的干预治疗，各指标有得到明显的改善。结论：黄芪能够改善利血平致气虚的模型大鼠小肠对葡萄糖吸收的功能。     

补中益气汤含药血清等对大鼠胃臂细胞胃泌素受体结合作用的影响

目的：观察补中益气汤含药血清等8种制剂体外给药对大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合作用的影响。方法：放射配基受体结合法。结果：补中益气汤含药血清、参麦注射液、黄芪多糖能抑制大鼠胃壁细胞胃泌素受体^125I-胃泌素的特异性结合。结论：补中益气汤含药血清等对大鼠胃壁细胞胃泌素受体的结合作用有一定影响，补中益气汤调节胃泌素受体复健脾虚证的机理可能在于与胃泌素受体竞争性结合。     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内[Ca2+]i作用的观察

目的:观察脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体及受体后信号细胞内钙离子的变化,并观察补脾方药党参、白术、补中益气汤对其的影响。方法:大鼠壁细胞采用EDTA-Pronase酶法消化而来。胃泌素受体检测采用放射配基结合实验,壁细胞内[Ca2 ]i变化测定采用双波长荧光法。结果:大黄脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数有显著降低,经补脾方药治疗后有所恢复;同时脾虚模型壁细胞内静息钙离子浓度明显低于正常组,经胃泌素刺激后壁细胞内[Ca2 ]i有所升高,且脾虚模型升高幅度明显高于正常组,经治疗后此状态有所恢复,但无统计学意义。结论:脾虚证可能与胃泌素受体低表达相关,且壁细胞内钙离子处于低代谢状态,但对于胃泌素刺激的反应性增强,进而可能导致酸分泌敏感性相对增高,胃黏膜易损性增强。补脾方药对其有一定的调节作用。     

补中益气汤、党参、白术含药血清对脾虚大鼠壁细胞胞内Ca~(2+)/CaM活性的影响

目的检测脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2+/CaM活性并探讨补脾方药血清对其的作用。方法大鼠壁细胞的分离与纯化采用我室建立的常规方法,Ca2+/CaM活性检测采用环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)法。结果脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2+/CaM活性明显高于正常大鼠;补脾方药血清作用后脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2+/CaM活性均有不同程度的下降。结论壁细胞胞内Ca2+/CaM活性的增高可能是脾虚大鼠的深层次病理机制之一;补脾方药血清可不同程度逆转和恢复脾虚大鼠这一微观病理趋势。     

补中益气汤、党参、白术含药血清对脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2+/CaM活性的影响

目的:检测脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2 /CaM活性并探讨补脾方药血清对其的作用.方法:大鼠壁细胞的分离与纯化采用我室建立的常规方法,Ca2 /CaM活性检测采用环核苷酸磷酸二酯酶(PDE)法.结果:脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2 /CaM活性明显高于正常大鼠;补脾方药血清作用后脾虚大鼠壁细胞胞内Ca2 /CaM活性均有不同程度的下降.结论:壁细胞胞内Ca2 /CaM活性的增高可能是脾虚大鼠的深层次病理机制之一;补脾方药血清可不同程度逆转和恢复脾虚大鼠这一微观病理趋势.     

补脾方药对脾虚大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内钙离子浓度的影响

目的：观察补脾方药对脾虚模型大鼠壁细胞胃泌素受体及细胞内钙离子浓度的影响。方法：采用EDTA—Pronase酶法消化大鼠壁细胞，放射配基结合实验检测胃泌素受体，双波长荧光法测定壁细胞内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）变化。结果：模型组大鼠壁细胞胃泌素受体结合位点数显著降低（P〈0．05），经补脾方药治疗后有所升高；同时模型组大鼠壁细胞内静息[Ca^2＋]i明显低于正常对照组（P〈0．01），经胃泌素刺激后壁细胞内[Ca^2＋]i有所升高，且模型组与党参组升高幅度明显高于正常对照组（P〈0．05），经治疗后此状态有所恢复，但差异无显著性。结论：脾虚证可能与胃泌素受体低表达相关，且壁细胞内钙离子处于低代谢状态，但对于胃泌素刺激的反应性增强，进而可能导致酸分泌敏感性相对增高，胃黏膜易损性增强，而补脾方药对其有一定的调节作用。     

脾虚大鼠壁细胞酸分泌机制的实验研究

目的:观察脾虚模型大鼠酸分泌的异常及补中益气汤对其的调节作用,探讨脾虚状态的酸分泌机制.方法:采用大黄脾虚模型,透射电镜观察离体壁细胞形态、双波长荧光分光光度计测定胃泌素刺激后壁细胞内[Ca2 ]i变化及整体胃灌流实验.结果:电镜观察脾虚大鼠壁细胞分泌小管扩张,处于分泌状态;经胃泌素刺激后脾虚大鼠壁细胞内[Ca2 ]i增高幅度明显高于正常组;胃灌流实验表明脾虚大鼠基础胃酸量显著低于正常组,而经组胺刺激后酸分泌增高幅度明显高于正常组,补中益气汤对其有调节作用.结论:脾虚大鼠存在酸分泌敏感性相对增高,胃黏膜易损性增强的反应.健脾益气方补中益气汤对其有一定的调节作用.     

黄芪建中汤和补中益气汤对脾虚模型小鼠免疫调节作用的实验研究

采用小鼠大黄脾虚模型，用核素掺入法测定ＩＬ－２活性、核素标记靶细胞测定ＮＫ活性、微量细胞病变法测定ＩＦＮ－γ水平。结果：脾虚小鼠的免疫指标明显低于正常组；补中益气汤和黄芪建中汤均能使之提高至正常水平，而对正常小鼠免疫指标无明显影响     

"脾虚"大鼠胃壁细胞胃泌素受体变化及补中益气汤的作用

目的：研究“脾虚”和经补中益气汤治疗后的大鼠胃壁细胞胃泌素受体的变化。方法：放射配基受体结合分析法。结果：虽然“脾虚”大鼠胃壁细胞胃泌素受体的结合位点数低于正常大鼠，但其亲和力高于正常大鼠。经补中益气汤治疗后对其具有复健作用。结论：胃泌素受体的结合位点数显减少，可能导致脾虚大鼠胃黏膜的防御性下降；而亲和力显增高可能是黏膜对攻击因子的敏感性增强的机制之一。补中益气汤通过调节胃泌素受体对脾虚具有复健作用。     

补中益气汤含药血清等对大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合作用的影响

目的 :观察补中益气汤含药血清等 8种制剂体外给药对大鼠胃壁细胞胃泌素受体结合作用的影响。方法 :放射配基受体结合法。结果 :补中益气汤含药血清、参麦注射液、黄芪多糖能抑制大鼠胃壁细胞胃泌素受体与12 5I 胃泌素的特异性结合。结论 :补中益气汤含药血清等对大鼠胃壁细胞胃泌素受体的结合作用有一定影响 ,补中益气汤调节胃泌素受体复健脾虚证的机理可能在于与胃泌素受体竞争性结合。