消瘢丸含药血清对胶质瘤C6细胞增殖抑制的实验研究

目的：观察消瘕丸含药血清对胶质瘤C6细胞的增殖抑制作用。方法：运用血清药理学方法，选择不同浓度的消瘢丸含药血清与胶质瘤C6细胞共同孵育，于不同时间观察细胞的生长状况；台盼蓝染色计数细胞数绘制生长曲线；用MTT法观察消瘢丸含药血清对胶质瘤C6细胞的增殖抑制作用。结果：消瘢丸含药血清对胶质瘤C6细胞增殖具有一定的抑制作用。且这种作用呈时间、剂量依赖性，随着剂量的增加和时间的延长，抑制率增高。结论：消瘢丸具有抑制胶质瘤C6细胞增殖的作用，为临床抗胶质瘤治疗提供实验依据。     

消癥丸含药血清对胶质瘤C6细胞增殖与凋亡的影响

[目的]观察消癥丸含药血清对胶质瘤C6细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其对Bcl-2表达的影响。[方法]运用血清药理学方法,选择不同浓度的消癥丸含药血清与胶质瘤C6细胞共同孵育,用MTT法计算增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组织化学法检测C6细胞中的Bcl-2的表达情况。[结果]MTT法结果显示大、中剂量组消癥丸含药血清可显著抑制胶质瘤C6细胞的增殖,且呈现含药血清浓度-时间依赖性的特点。流式细胞仪检测可见各组消癥丸含药血清作用下C6细胞凋亡率呈含药血清浓度依赖性特点,大、中剂量组凋亡率较高。免疫组化学检测Bcl-2表达显示消癥丸能显著降低其表达。[结论]消癥丸可通过抑制胶质瘤细胞的增殖,降低Bcl-2表达,从而诱导肿瘤细胞凋亡,发挥其临床抗肿瘤,抑制脑瘤的作用。     

消瘕丸含药血清对胶质瘤C6细胞增殖与凋亡的影响

[目的]观察消瘕丸含药血清对胶质瘤C6细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其对Bcl-2表迭的影响。[方法]运用血清药理学方法，选择不同浓度的消癓丸含药血清与胶质瘤C6细胞共同孵育，用MTT法计算增殖抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率；免疫组织化学法检测C6细胞中的Bcl-2的表达情况。[结果]MTT法结果显示大、中剂量组消癓丸含药血清可显著抑制胶质瘤C6细胞的增殖，且呈现含药血清浓度-时间依赖性的特点。流式细胞仪检测可见各组消癓丸含药血清作用下C6细胞凋亡率呈含药血清浓度依赖性特点，大、中剂量组凋亡率较高。免疫组化学检测Bcl-2表达显示消癓丸能显著降低其表达。[结论]消癓丸可通过抑制胶质瘤细胞的增殖，降低Bcl-2表达，从而诱导肿瘤细胞凋亡，发挥其临床抗肿瘤，抑制脑瘤的作用。     

含消癥丸大鼠血清对体外培养人子宫肌瘤细胞增殖、凋亡作用的研究

目的 研究消癥丸抑制人子宫平滑肌瘤(以下简称子宫肌瘤)细胞增殖的作用。方法 用5％、10％、20％ 三种浓度的消癥丸含药血清分别作用于原代培养的子宫肌瘤细胞,用倒置相差显微镜、MTT比色法观察和检测子 宫肌瘤细胞形态变化及增殖情况。结果 含药血清组肌瘤细胞的形态出现明显退行性改变;MTT 法显示:含药血 清组细胞抑制率明显高于完全培养液组和空白血清组(P<0．05),且20％含药血清组细胞抑制率明显高于其他两组 含药血清组(P<0．0 5);在5％-20％浓度范围内,消癥丸含药血清浓度越高细胞抑制率越高。结论 含消癥丸大鼠 血清能抑制人子宫肌瘤细胞的增殖;在5％-20％浓度范围内人子宫肌瘤细胞抑制率存在浓度依赖性。     

温阳通窍中药复方含药血清对C6脑胶质瘤细胞增殖影响的实验研究

[目的]观察温阳通窍中药复方含药血清对C6脑胶质瘤细胞增殖的影响。[方法]采用MTT法测定样品对体外培养的肿瘤细胞生长的抑制作用,并在药物代谢不同时间(2 h,4 h,6 h)检测不同剂量的温阳通窍中药复方对C6脑胶质瘤细胞的抑制作用,同时进行空白组对照比较。[结果]温阳通窍中药复方对C6细胞的IC50值约为30.29μg/m L,细胞毒效果欠佳。10%血清浓度下,药物代谢2、4、6 h后,高、低剂量组对C6脑胶质瘤细胞的抑制率分别为30.22%、21.6%、28.3%和32.87%、9.86%、47.98%。[结论]温阳通窍中药复方对C6脑胶质瘤细胞的增殖具有一定抑制作用,但其抑瘤作用不存在时间与剂量依赖关系,这一结果或许与药物在体内代谢、次生活性产物的出现相关。     

非E_2干预状态下益气消癥法方药对EA.hy926细胞增殖 迁移 凋亡的影响

目的:探讨益气消癥法方药含药血清干预EA.hy926细胞增殖,抑制子宫肌瘤血管新生的作用机理。方法:观察益气消癥法方药含药血清对体外培养的EA.hy926细胞增殖、迁移、凋亡的影响。实验分为5组:空白血清组;RU486组;中药高剂量组;中药中剂量组;中药低剂量组。采用MTT法检测EA.hy926细胞的增殖情况,细胞划痕法检测细胞迁移率,流式细胞术法检测细胞的凋亡率。结果:益气消癥法方药可抑制EA.hy926细胞增殖、迁移、凋亡。结论:益气消癥法方药可抑制EA.hy926的细胞的增殖,诱导其迁移、凋亡,进而控制肌瘤血管新生,减少肌瘤血液供应,最终达到缩消子宫肌瘤、改善临床症状的作用。     

蔡氏扶正消癥汤含药血清抑制胃癌细胞转移的机制研究

目的：观察蔡氏扶正消癥汤含药血清对胃癌细胞转移的影响。方法：四甲基偶氮唑蓝（MTT）还原法检测蔡氏扶正消癥汤含药血清对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响;用免疫组化S-P法检测对肿瘤血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达的影响。结果：①蔡氏扶正消癥汤含药血清在实验药物浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下,72h内药物作用时间越长,抑制作用越明显;②VEGF平均吸光度随蔡氏扶正消癥汤含药血清浓度增加而降低,说明蔡氏扶正消癥汤含药血清能抑制VEGF的表达。结论：蔡氏扶正消癥汤含药血清能够抑制胃癌细胞转移,其作用机制可能与抑制血管生成有关。     

扶正消症方（含药血清）对胃癌细胞体外生长的抑制作用

目的：探讨中药复方扶正消症方对胃癌细胞SGC-7901体外生长、增殖的影响。方法：通过血清药理学方法。选择不同浓度的含药血清与胃癌细胞共同培育12、24、36、48h后，应用倒置相差显位镜观察细胞生长状况，采用台盼蓝排染法测定细胞生长曲线，MTT法测定细胞增殖的抑制率。结果：扶正消症方含药血清可明显抑制胃癌细胞SGC-7901的生长，这种作用呈时间，剂量依赖性，随含药血清浓度的增加细胞生长抑制率增高。结论：中药复方扶正消症方通过血清药理学方法可抑制胃癌细胞SGC-7901的生长、增殖，具有进一步研究的价值。     

蔡氏扶正消癥汤对胃癌细胞增殖的抑制作用研究

目的:观察蔡氏扶正消癥汤对胃癌细胞增殖的影响.方法:(1)采用倒置显微镜观察蔡氏扶正消癥汤对胃癌细胞形态的影响;(2)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)还原法检测蔡氏扶正消癥汤对胃癌细胞生长的影响.结果:蔡氏扶正消癥汤生药能抑制胃癌细胞的增殖.在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下,72h内药物作用时间越长,抑制作用越明显.结论:蔡氏扶正消癥汤能够抑制胃癌细胞的增殖.     

四君子汤含药血清抑癌作用的实验研究

目的:观察四君子汤含药血清体外抑制肿瘤细胞增殖的作用.方法:以人胃癌细胞系SGC-7901和人肝癌细胞系SMMC-7721为病理模型,采用血清生物化学方法,酶标仪MTT比色法和倒置显微镜观察四君子汤不同剂量、不同浓度含药血清对人胃癌细胞系SGC-7901、肝癌细胞系SMMC-7721的增殖抑制状况,并计算各组细胞生长抑制率.结果:加药组细胞变小、变圆、脱落、悬浮情况较对照组明显,且以20%高剂量血清组最为明显.四君子汤含药血清对这两种细胞增殖均有明显的抑制作用,呈剂量、浓度依赖性.结论:四君子汤含药血清能明显抑制胃癌和肝癌细胞生长.     

健骨二仙丸提取物对大鼠体外培养成骨细胞增殖作用的研究

目的:探讨健骨二仙丸提取物对大鼠体外培养成骨细胞的作用效果及对成骨细胞增殖的作用机理。方法:采用新生大鼠颅骨进行成骨细胞分离,并在含10%的胎牛血清DMEM中进行体外培养,分别加入高、低剂量的健骨二仙丸提取物并与高、低剂量Premarin组、阴性组、Tamoxifen对照组、Tamoxifen阻断对照组进行对照,用MTT法进行成骨细胞增殖和活性检测。结果:在培养24h后,健骨二仙丸提取物对培养成骨细胞增殖有明显的促进作用,培养到48h促进作用更为明显,表现出一定的时间相关性,且其作用不能被Tamoxifen阻断或完全阻断。结论:健骨二仙丸提取物可促进成骨细胞增殖,且其对骨代谢的影响不通过或者主要不是通过雌激素样作用生效。     

寿胎丸含药血清对人早孕滋养层细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响

  目的：探讨寿胎丸含药血清对人早孕滋养层细胞增殖、侵袭、迁移能力的调节作用。  方法：体外分离培养人早孕滋养层细胞,采用高、中、低剂量寿胎丸含药血清进行干预,以空白血清、地屈孕酮含药血清为对照。采用噻唑蓝(MTT)比色法、流式细胞术(FCM)及Transwell 侵袭移动实验测定滋养层细胞的增殖活性、周期分布及侵袭迁移能力。  结果：与空白组比较,滋养层细胞经寿胎丸含药血清干预后,细胞的增殖活性、侵袭迁移能力明显增强,S期细胞比例增高,G2/M期细胞比例降低(P<0.05)。与寿胎丸低剂量组比较,寿胎丸中、高剂量组滋养层细胞的增殖活性、侵袭迁移能力明显增强,细胞周期分布变化更加明显(P<0.05)。  结论：寿胎丸含药血清可促进人早孕滋养层细胞的增殖活性及侵袭迁移能力,减少细胞凋亡。     

内异消癥汤含药血清对子宫内膜异位症在位和异位内膜间质细胞增殖及分泌Ang-2的影响

目的:观察内异消癥汤含药血清对子宫内膜异位症在位和异位内膜间质细胞增殖及分泌Ang-2的影响。方法:对在位和异位内膜间质细胞进行体外分离原代培养,免疫细胞化学法鉴定。制备大鼠含药血清,分为内异消癥汤组、米非司酮组、空白血清组,用MTT法检测含药血清对间质细胞的生长抑制率,并用Elisa法检测对间质细胞分泌的Ang-2水平。结果:体外原代细胞培养方法可培养出纯度较高的间质细胞,与空白血清组相比内异消癥汤含药血清可以抑制间质细胞的增殖(P0.01),同时可以显著减少Ang-2的分泌水平(P0.01)。结论:内异消癥汤含药血清可以抑制间质细胞的增殖,显著减少Ang-2的分泌水平。     

大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株的影响

目的:实验通过大黄虫丸含药血清干预体外人肺腺癌PAa细胞株研究其抗肿瘤机制,进而探讨活血化瘀法在肿瘤治疗中的疗效和价值。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的大黄虫丸含药血清与人肺腺癌PAa细胞株共同孵育,于不同时间观察,并与空白血清作对照。研究大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株的细胞毒作用、生长抑制作用及对细胞周期的影响。结果:5%～20%各组含药血清OD值与相同作用时间10%牛血清、相同浓度的正常鼠血清OD值比较有明显差异(P<0.05～0.01),并随着血药浓度的提高OD值逐渐减低;药血清对人肺腺癌PAa细胞株增殖有明显抑制作用,并随药血清浓度提高、作用时间延长抑制作用增强;其诱导凋亡作用随药血清浓度的增加及作用时间的延长而增强。结论:大黄虫丸含药血清对体外人肺腺癌PAa细胞株有明显抑制作用,为大黄虫丸抗肿瘤提供了科学依据。     

健骨二仙丸提取物对大鼠体外培养成骨细胞PKC和Bag-1的影响

目的:探讨健骨二仙丸提取物对大鼠体外培养成骨细胞的作用机理。方法:采用新生大鼠颅骨进行成骨细胞分离,并在含10%的胎牛血清DMEM中进行体外培养,分别加入高、低剂量的健骨二仙丸提取物并与高、低剂量Premarin组、阴性组、Tamoxifen对照组、Tamoxifen阻断对照组进行对照,用Western免疫印迹检测蛋白激酶C、抗凋亡蛋白Bag-1表达。结果:健骨二仙丸提取物能明显提高体外成骨细胞PKC的表达量和抗凋亡蛋白Bag-1的表达量。结论:健骨二仙丸提取物可促进成骨细胞增殖并明显提高PKC和抗凋亡蛋白Bag-1的表达量是其防治骨质疏松的机理之一。     

蔡氏扶正消癥汤对胃癌细胞体外生长及细胞黏附分子的影响

目的:探讨蔡氏扶正消癥汤对人胃癌细胞SGC-7901体外生长及细胞黏附分子的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(3-[4,5-dimethylthiazol-2-y1]-2,5dipheny1tetrazolium bromide,MTT)还原法检测蔡氏扶正消癥汤对SGC-7901细胞增殖的影响;流式细胞仪检测细胞膜表面E-Cadherin,CD44,CD44V6和CD54的表达。结果:蔡氏扶正消癥生药能抑制SGC-7901的增殖。在实验浓度范围内,随着剂量的增加,抑制作用更加明显;同一剂量下,72h内药物作用时间越长,抑制作用越明显。蔡氏扶正消癥汤作用48h后,SGC-7901细胞膜表面的E-Cadherin表达增高,CD44、CD44V6和CD54表达减少。结论:蔡氏扶正消癥汤能够抑制人胃癌细胞SGC-7901的体外增殖,同时能增加E-Cadherin的表达,减少其CD44,CD44V6和CD54的表达,阻止其对邻近正常组织的浸润及远处转移,从而发挥抗癌作用。     

西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移的影响

目的:研究西黄丸含药血清对三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移以及对环氧化酶2(COX-2)转录的影响,以期探讨西黄丸对三阴性乳腺癌细胞的作用。方法:大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组和西黄丸含药血清组,以含药血清干预三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,细胞划痕实验检测细胞迁移,RT-PCR法检测COX-2、TNF-αmRNA表达。结果:西黄丸含药血清可以抑制MDA-MB-231细胞增殖,可以促进MDA-MB-231细胞凋亡,并且西黄丸含药血清可以降低MDA-MB-231细胞划痕愈合率,可以降低在炎性环境下MDA-MB-231细胞中COX-2 mRNA表达(P<0.05)。结论:西黄丸含药血清可以有效地抑制MDA-MB-231细胞增殖,促进其细胞凋亡,可能抑制细胞迁移,并且可以减少炎性因子的转录。     

不同炮制品入药的青娥丸含药血清对人成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的:研究以不同炮制品入药的青娥丸含药血清对人成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。观察盐炙品及生品青娥丸含药血清对人成骨细胞功能的影响,探讨青娥丸对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品配伍入药的必要性。方法:以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,制备以补骨脂和杜仲生品及盐炙品配伍入药的青娥丸,给予大鼠生品及盐炙品青娥丸水提液ig(10mL·kg-1),给药持续7d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白组、空白血清组、青娥丸含药血清组、盐青娥丸含药血清组。采用MTT法检测各组含药血清对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清对人成骨细胞分化的作用;采用细胞钙茜素红染色方法对给予含药血清处理的人成骨细胞进行染色,观察对人成骨细胞矿化的影响。结果:与同浓度空白血清比较,青娥丸的生品和盐炙品的含药血清均有促进成骨细胞增殖的作用(P<0.05),且含药血清浓度相同时,青娥丸盐炙品含药血清促进成骨细胞增殖的作用优于生品含药血清(P<0.05);青娥丸生品及盐炙品含药血清具有促进成骨细胞分化的作用(P<0.05),且盐炙品的作用要优于生品(P<0.01);空白血清对成骨细胞的矿化无显著的作用,而青娥丸生品及盐炙品含药血清具有促进成骨细胞矿化结节形成的作用,且盐炙品的作用要优于生品。结论:青娥丸能提高成骨细胞增殖、分化及矿化活性,其对于骨质疏松症的治疗作用与其能显著提高成骨细胞功能有关,且盐炙品入药的青娥丸效果较好。     

痰瘀同治对大鼠胸主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的观察痰瘀同治代表药物丹蒌片药物血清对血小板衍生因子BB型（PDGF—BB）诱导下体外培养的血管平滑肌（VSMC）增殖的影响,并探讨其可能的机制。方法SD大鼠喂饲丹蒌片药物溶液收集药物血清。组织块贴壁法培养SD大鼠原代胸主动脉平滑肌细胞,取第3代细胞进行免疫荧光法鉴定,取4～7代细胞进行实验。MTT比色法观察正常血清培养及丹蒌片药物血清（低、中、高浓度）对PDGF—BB（25μg／L）所致的VSMC增殖的影响。结果MTT法显示与对照组相比,药物血清组对PDGF—BB诱导的VSMC增殖呈剂量依赖性抑制,高浓度与低浓度比较有明显差异（P＜0．05）。结论丹蒌片可有效抑制PDGF—BB诱导的VSMC增殖,提示其控制AS的过程可能与抑制平滑肌增殖并向内皮下迁移有关。     

六神丸诱导HL-60细胞凋亡的实验研究

目的:从细胞凋亡角度探讨六神丸治疗白血病的机理,为临床应用提供依据。方法:分别制备六神丸乙醇提取剂和六神丸含药血清,用MTT法检测六神丸对HL-60细胞增殖的抑制作用,吉姆萨染色观察细胞凋亡的形态学变化,原位末端标记(POD)法检测细胞凋亡现象。结果:六神丸乙醇提取剂对HL-60细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈现浓度依赖关系;中剂量组所得六神丸含药血清对HL-60细胞增殖的抑制作用优于低剂量组和高剂量组。吉姆萨染色显示六神丸乙醇提取剂和六神丸含药血清处理过的HL-60细胞均出现典型的凋亡形态。原位末端标记表明,六神丸乙醇提取剂诱导HL-60细胞凋亡在一定范围内呈现时间-浓度依赖关系;六神丸含药血清诱导HL-60细胞凋亡作用优于As_2O_3血清组和空白血清组(P<0.01)。结论:六神丸体外诱导HL-60细胞凋亡可能是六神丸治疗白血病的作用机制之一。