稀有人参皂苷的应用基础与开发利用研究进展

稀有人参皂苷是一类天然含量稀少、生物利用度较高、生物学活性较突出的次生皂苷,其获得途径通常是由人参属植物中直接提取的原型皂苷经生物学或化学方法转化得到,近来年还出现了利用代谢工程与合成生物学技术创建的微生物细胞工厂合成的途径。稀有人参皂苷因其在提高机体免疫功能、抗肿瘤等方面的显著生物活性而受到广泛关注。目前关于稀有人参皂苷综述多数集中在转化制备、工艺优化及药理活性等方面,而在产业化分析方面有所不足。该文结合国内外相关文献整理总结了目前常见稀有人参皂苷的结构类型、药理活性、获取来源以及转化途径,并概括了目前已有稀有人参皂苷制备过程中存在的问题,讨论了未来的研究与利用展望,以期为提升稀有人参皂苷的基础研究水平,并促进其产业化发展提供理论依据。     

湿法粉碎提取人参中有效成分的研究

目的:证明湿法粉碎提取法可用于人参中人参皂苷及人参多糖的提取。方法:以人参皂苷Rg1、Re、Rb1提出量、人参多糖及出膏率为指标,对湿法粉碎提取法与回流提取法及超声提取法提取结果进行比较。结果:湿法粉碎提取法可充分提取出人参中的人参皂苷Rg1、Re、Rb1和人参多糖,比超声提取法和回流提取法高。结论:湿法粉碎提取法操作简便,时间较超声提取法和回流提取法明显缩短,可用于人参中人参皂苷和人参多糖的提取。     

湿法粉碎提取人参中有效成分的研究

目的观察湿法粉碎提取人参中人参皂苷及人参多糖的提取率。方法采用对湿法粉碎提取法、回流提取法和超声提取法提取人参饮片中人参皂苷及人参多糖,并对提取结果进行比较。结果湿法粉碎提取法可充分提取出人参中的人参皂苷Re、Rg1、Rb1和人参多糖,与超声提取法和回流提取法相比具有效率高和消耗能源少的优点。结论湿法粉碎提取法操作简便,可用于人参中人参皂苷和人参多糖的提取。     

人参皂苷compound K转化菌株的筛选

目的:筛选具有人参皂苷转化能力的真菌菌株,用于生产稀有人参皂苷compound K.方法:通过液态发酵,以三七茎叶总皂苷为底物,采用TLC和HPLC-ELSD检测转化产物,从12株植物病原真菌中筛选能够转化产生人参皂苷compoundK的最佳菌株.结果:获得一株高效人参皂苷转化真菌,可以转化产生人参皂苷compound K,该菌株为镰刀属真菌串珠镰孢Fusarium moniliforme.结论:串珠镰孢对三七茎叶总皂苷具有较高的转化效率,有望用于生产制备compound K等低含量高活性的稀有人参皂苷.     

蜗牛酶转化人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷CompoundK的研究

目的:确定蜗牛酶转化人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷Compound K(CK)的主要因素,并优选出转化效率高、稳定、适合工业化生产的工艺条件。方法:采用蜗牛酶水解人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷CK,以转化率为指标,通过单因素考察p H值、温度、底物浓度、酶用量、反应时间对转化率的影响,并通过响应面法试验优化制备工艺;采用MS,1H-NMR,13C-NMR鉴定酶解产物。结果:酶解反应的最优条件为温度55℃、p H值5.5醋酸-醋酸钠缓冲液,底物浓度1.0mg/m L,酶与底物质量比1∶1,反应时间36h,在此条件下的转化率为86.91%;经核磁图谱证实产物为人参稀有皂苷CK。结论:蜗牛酶水解人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷CK反应条件温和,工艺简单可靠,适合工业化生产。     

利用生物转化法制备稀有人参皂苷的研究进展

近些年来,稀有人参皂苷的各种生物活性越来越受到人们的重视.但是由于其天然含量低,使其在药物开发方面受到了限制.而利用生物转化法对人参皂苷的糖链进行结构修饰,已成为获得稀有人参皂苷的重要途径.对产稀有人参皂苷的微生物转化和稀有人参皂苷制备相关的研究进行综述,为稀有人参皂苷的获得、开发与利用提供参考.     

天冬氨酸催化人参皂苷Re转化制备稀有人参皂苷的研究

目的 建立一种新的环境友好型的高效制备稀有人参皂苷Rg6、F4、Rk3和Rh4的方法,为制备稀有人参皂苷提供理论依据。方法 人参皂苷Re为原料,以天冬氨酸为催化剂,人参皂苷Re与天冬氨酸以10∶1混合,于120℃反应1 h,采用半制备型高效液相色谱分离产物中各稀有人参皂苷组分,通过HPLC和NMR进行定量分析和结构鉴定。结果 人参皂苷Re的转化率为100%,稀有人参皂苷Rg6、F4、Rk3和Rh4的得率分别是11.2%、13.1%、20.6%和24.3%,且4种化合物的质量分数均99%。结论 该方法操作简单,成本低廉,对环境无污染,对开发绿色环保型稀有人参皂苷新药及保健食品具有重要的应用价值。     

人参总皂苷提取工艺条件优化研究

目的为充分利用我省人参资源,研究提取人参总皂苷的最佳工艺条件。方法选用提取时间、提取次数、提取温度和加水倍数作为考察因素,采用优化的工艺流程从玉米须中提取总皂苷,通过正交表试验,人参总皂苷的提取工艺条件。结果人参总皂苷提取最佳条件为乙醇浓度70%,料液比为1：20,70℃回流提取3.0h。结论可以通过正交试验优化提取人参总皂苷的最佳工艺条件,为进一步开发利用人参提供依据。     

刺人参中皂苷提取方法的研究

目的为了充分利用东北药用植物资源,研究刺人参皂苷提取工艺的最佳条件。方法选取提取时间、提取次数、乙醇浓度和料液比作为考察因素,通过正交实验优化筛选提取刺人参中皂苷的工艺条件。结果刺人参皂苷的最佳提取条件是用8倍量的60%乙醇回流提取30min,提取3次。提取率为2.17%。结论可以通过正交实验法优化刺人参皂苷的提取工艺条件。     

水提取人参茎叶皂苷最佳工艺的研究

近年来,作为扩大药源的一个方面,对天然药物的提取方法已有很多人研究过,为了扩大贵细药材人参的药源,特以水为提取溶剂进行工艺优化.以人参茎叶为材料,以水为提取溶剂,以人参皂苷Rg1为对照品,利用大孔树脂进行富集纯化,采用传统显色方法香草醛一高氯酸比色法进行含量测定.通过正交实验进行工艺优化,综合评价加水量,煎煮时间,煎煮次数三因素时人参总皂苷获得率的影响,结果表明煎煮时间为主要影响因素,加水量、煎煮次教为次要因素,最佳工艺为B3C3A1,即煎煮时间为90min,加水量为12倍,煎煮4次.人参皂苷Rg1在30.00～100.00μg范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.9989.     

人参皂苷生物转化研究进展

人参皂苷是人参属植物药理活性的重要物质,尤以稀有人参皂苷及苷元的抗肿瘤,保护神经系统,保肝护肝等药理活性最为显著,因此,研究稀有人参皂苷获取的方法也日益增多。该文对人参属植物中人参皂苷的生物转化进行了简要的概述和展望。     

人参茎叶水提液中人参皂苷热稳定性研究及其有效期推算

目的:研究水煎煮提取过程中加热时间、温度对人参茎叶水提液中人参皂苷的影响及受热后人参皂苷含量的变化情况,并且推算人参茎叶水提液的有效期。方法:采用高效液相色谱法测定不同加热条件下人参茎叶水提液中人参皂苷Rg1,Re的含量(Agilent Extend-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-水(19∶81),洗脱程序:等度40 min,检测波长203nm,流速1.0 mL.min-1,柱温30℃,并以经典恒温法推算其有效期。结果:2种人参皂苷在不同温度下加热12 h,均会发生不同程度的降解反应,其中,100℃条件下降解速率最快,80℃次之,60℃相对较慢,分别降至约初始含量的20%、60%、80%,以lgK对1/T进行一元线性回归,得回归方程,人参皂苷Rg:lgK=-2 396.2/T+5.587 3,人参皂苷Re:lgK=-2 518.2/T+5.901 6,通过回归方程计算人参茎叶水提液中人参皂苷Rg1,Re的有效期分别为30.1和37.6 h。结论:人参茎叶水提液中人参皂苷Rg1,Re的含量,随加热时间延长而不断下降,温度越高,下降速率越快;人参茎叶水提液的有效期较短,故含人参茎叶水提液的制剂中间体应在其有效期内完成制剂。     

人参稀有抗肿瘤皂苷制备方法的研究

人参皂苷为人参、西洋参以及三七的主要活性成分,研究表明人参皂苷,尤其是稀有人参皂苷具有特殊的抗肿瘤活性。综述了人参稀有抗肿瘤皂苷的制备方法,包括酸水解、碱水解、Smith降解、加热水解以及酶水解的方法,为其制备大量的人参稀有抗肿瘤皂苷提供参考。     

多指标综合加权评分法优选人参醇提工艺

目的:通过多指标综合加权评分法优选人参醇提的最佳取工艺,确定最佳提取工艺参数。方法:采用正交试验法考察乙醇浓度、提取时间、提取次数、溶剂用量及其交互作用对人参醇提工艺的影响。应用紫外分光光度计(UV)法测定人参总皂苷和蒸发检测器-高效液相色谱法(HPLC-ELSD)测定人参皂苷Rg1、Re和Rb1的含量。并以人参总皂苷得率,人参皂苷Rg1、Re转移率,人参皂苷Rb1转移率,人参总皂苷得率和出膏率为指标,采用加权评分法进行综合评判。结果:确定最佳醇提工艺为70%乙醇6倍量,提取3次,每次2 h。结论:该法简单、易行、重复性好,适用于工业化生产。     

人参叶提取物的提取工艺及抗氧化活性评价研究

目的:优化中药人参叶中皂苷类成分的提取工艺,并且进行体内抗氧化活性评价试验。方法:以回流法提取作为提取方法,以人参皂苷含量作为评价指标,以分光光度法作为检测方法,通过正交试验,考察提取次数、提取时间和料液比。利用乙醇损伤氧化动物模型,以动物血浆中脂质氧化产物蛋白质羰基、超氧化物歧化酶活力和还原性谷胱甘肽含量为评价指标,评价人参叶提取物的体内抗氧化活性。结果:人参叶中皂苷类化合物的最佳提取工艺为提取3次,每次20 min,料液比为10∶1。动物模型评价结果表明人参叶连续灌胃30 d,高剂量组0.5 g·kg~(-1)人参叶可显著降低MDA、Prot含量,对GSH含量有一定增加作用。表明人参叶提取物具有一定的抗氧化活性。结论:应用优化的工艺可以实现提取人人参皂苷的效率的最大化,所获得的提取物具有一定的抗氧化活性。     

基于响应面法的人参新炮制品“黑参”提取工艺研究

目的:建立HPLC色谱法同时测定延边产黑参中稀有人参皂苷Rg3、Rg5、Rk1含量的方法,并采用响应面法优化提取工艺条件。方法:采用HPLC色谱法,以稀有人参皂苷Rg3、Rg5、Rk1总含量为指标,采用响应面法进行提取工艺优化。结果:超声提取法样品中3种人参皂苷总含量为3.54mg/g,最佳提取工艺条件为乙醇浓度为65%,料液比为1∶20,超声频率为80kHz,单次超声时间为48min。结论:本实验建立的延边产黑参中3种人参皂苷含量测定方法准确、简单、重复性好,可用于黑参药材中皂苷成分含量的测定。超声提取方法提取效率高,且简单稳定可行,此结果可为黑参地方标准样品制备方法修订提供理论依据。     

人参皂苷常规水提取法和新提取方法的比较研究

为寻找新的人参皂苷提取方法,提高人参皂苷的提取率和纯度,简化操作,本文以人参总皂苷、人参皂苷-Rb1、-Rb2-、R c、-Rd、-Re、-Rg1等9种主要单体皂苷收率为指标,利用大孔吸附树脂法除去杂质,高效液相色谱法进行含量测定,比较了超声碱水提取法和超声常规水提取法的优劣。结果表明碱水提取法在总皂苷和各单体皂苷收率上均比常规水提法有明显提高,经t检验证明二者之间有极显著的差异(P<0.001)。从总皂苷收率和各单体皂苷收率综合考虑,超声碱水提取法总皂苷收率高,纯度大,各主要单体皂苷含量高,操作简单方便,适合工业化生产。     

人参不同部位中人参皂苷成份的分析

目的：建立UV/HPLC 法测定人参不同部位中人参皂苷含量。方法：通过对市场上通行的UV法和HPLC 法测得含量进行近似折算比较,以及对根部提取物与茎叶提取物中各人参皂苷成分HPLC 出峰比例的分析,建立鉴别不同来源人参皂苷的方法。结果：人参根部提取物中,Re颐Rb1颐Rc颐Rd 皂苷比例近似为1:2.20:0.94:0.97;人参茎叶中,该比例近似为1:（0.05~0.07）:（0.10~0.16）:（0.32~0.37）;对比掺混后的人参根部和人参茎叶提取物,Re:Rb1:Rc:Rd 理论值在上述两比例之间。结论：该方法简易、稳定、可靠,可作为人参根部和茎叶提取物中人参皂苷的鉴别方法。     

红曲霉发酵转化人参皂苷Rg_3的研究

目的探索红曲霉对人参的固态发酵工艺,将人参中部分主要人参皂苷转化为生物活性更强的稀有人参皂苷Rg_3(Rg_3)。方法采用静止暗培养方法进行微生物发酵;香草醛-冰醋酸法测定发酵前后人参总皂苷含量;HPLC法测定发酵前后Rg_3含量。结果红曲霉发酵人参的最优工艺参数为发酵时间6 d、发酵温度32℃、发酵pH 7.0、基质含水量50%。发酵6 d时,发酵产物人参总皂苷质量分数增加40%,Rg_3质量分数为6.047 mg/g,是未发酵人参的2.3倍。最终根据单体皂苷含量随发酵时间的变化趋势,推断稀有皂苷Rg_3的转化路径为人参皂苷Rb_1或Rb_2→Rd→Rg_3。结论建立的红曲霉固态发酵工艺合理,为稀有皂苷Rg_3定向化生产奠定了基础,更为日后体外制备稀有人参皂苷提供了理论支持。     

不同人参炮制品中5种人参皂苷的含量研究

目的:比较3种人参炮制品中5种人参皂苷的含量差异,进而说明炮制的作用。方法:各样品均采用药典中的索氏提取法进行提取,色谱柱为DiamonsilTM C18(4.6mm×25mm,5μm),检测波长:203nm,流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(质量分数)梯度洗脱,流速:1mL/min;结果:各单体皂苷在测定范围内线性关系良好(R2>0.9982),加样回收率(n=6)在95.96%～98.87%之间,RSD值均小于1.83%(n=6),三种炮制品中的各皂苷含量不同。结论:所测样品间人参皂苷含量有所差异,炮制可使人参皂苷比例发生变化并可影响药性变化。