发酵虫草菌粉多糖成分的理化性质及其对ConA抑制L-O_2细胞增殖活性的影响

目的:将发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖进行分离纯化,并观察纯化产物对ConA抑制人正常肝细胞(L-O_2细胞株)增殖活性的拮抗作用。方法:发酵虫草菌粉(Cs-4)通过水提醇沉、复溶、透析、浓缩、冷冻干燥得粗多糖,采用DEAE-纤维素离子交换、sephadex-G-100柱色谱分离纯化粗多糖,MTT法检测细胞增殖活性。结果:发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖经分离纯化得到均一成分,命名为CSMP-60-B-I。高效凝胶渗透色谱法测得其相对峰高分子量为32 336 Da。毛细管电泳测得单糖组成为木糖-阿拉伯糖-葡萄糖-半乳糖-甘露糖(0.09∶0.20∶1.00∶3.70∶3.58)。高浓度ConA能抑制L-O_2细胞增殖,而加入CSMP-60-B-I后,这种抑制作用大大减弱。结论:发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖的分离纯化产物CSMP-60-B-I对ConA抑制L-O_2细胞增殖活性有拮抗作用,提示其可能有保肝作用。     

发酵虫草菌粉多糖及脂质体制剂对小鼠S_(180)肉瘤的影响

目的研究发酵虫草菌粉多糖及脂质体制剂对小鼠S180肉瘤的抑制作用及初步机制。方法实验分为正常组、模型组、氟尿嘧啶组、空白脂质体组、发酵虫草菌粉多糖脂质体组(多糖脂质体组)、发酵虫草菌粉多糖低剂量组(多糖低剂量组)和发酵虫草菌粉多糖高剂量组(多糖高剂量组) 7组,移植接种复制小鼠S180肉瘤实体模型,分别连续给药14d,观察小鼠肿瘤生长情况,绘制小鼠肿瘤生长曲线,计算抑瘤率及脾脏指数、胸腺指数,ELISA法检测血清中TNF-α、IFN-γ水平,HE染色观察肿瘤组织病理形态学变化。结果发酵虫草菌粉多糖及多糖脂质体可明显抑制S180肉瘤的生长,多糖低剂量组、多糖脂质体组的肿瘤体积明显小,多糖脂质体组,多糖低、高剂量组的抑瘤率分别为39. 16%、28. 55%、37. 85%。含多糖各剂量组的小鼠胸腺指数升高;多糖低剂量组的脾脏指数也明显升高。与模型组比较,多糖及多糖脂质体均可提高S180肉瘤小鼠血清TNF-α、IFN-γ水平。病理学检查表明多糖及多糖脂质体组的肿瘤组织切片可见片状坏死区域。结论发酵虫草菌粉多糖及多糖脂质体可抑制S180肉瘤的生长,其机制可能与提高机体免疫功能有关。     

戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响

 目的 研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响。方法 采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖。它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β。结论 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂。     

艾叶多糖对小鼠免疫细胞分泌细胞因子及其活性的影响

目的 为了探索艾叶多糖对体外培养脾细胞以及巨噬细胞分泌细胞因子或细胞因子活性的影响.方法 常规提取艾叶多糖,体外与培养的小鼠脾细胞以及腹腔巨噬细胞共孵育,通过对L929靶细胞的杀伤力以及胸腺细胞增殖法分别测定脾细胞培养上清液中细胞因子TNF和IL-2的活性,ELISA法检测巨噬细胞培养上清液中细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量.结果 一定浓度的艾叶多糖能明显提高小鼠脾细胞分泌的TNF和IL-2的活性(P＜0.01),对小鼠巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α无影响(P＞0.05).结论 艾叶多糖调节免疫功能的部分药理作用与其提高脾细胞的TNF和IL-2细胞因子活性有关.     

金水宝胶囊中发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱研究

目的建立金水宝胶囊发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱。方法沸水回流提取金水宝胶囊中的发酵虫草菌粉多糖,经酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后采用HPLC法分析,色谱条件为Phenomenex OOG-4252-EO C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱,体积流量1 m L/min,进样量20μL,检测波长250 nm,柱温30℃。结果对组成发酵虫草菌粉多糖的11种单糖成分进行鉴别,并建立了发酵虫草菌粉多糖指纹图谱。通过指纹图谱分析10批金水宝胶囊中各单糖成分,相似度均大于0.999,无显著性差异。结论建立的发酵虫草菌粉多糖指纹图谱操作简单,专属性强,重复性好,能够客观评价金水宝胶囊的质量。     

知母各化学拆分组分的抗炎及免疫调节活性

目的:研究知母及其各化学拆分组分的抗炎免疫活性及其物质基础的对应关系。方法:C57小鼠除正常对照组外均采用2,4二硝基氟苯诱发超敏反应模型,观察小鼠免疫器官指数、耳肿胀度、耳组织IL-4及IFN-γ含量,体外实验观察刀豆蛋白(Con A)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖力、脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症因子分泌量。结果:知母煎液组、皂苷组及多糖组小鼠耳肿胀度及免疫器官指数显著降低(P0.05),免疫细胞增殖能力显著降低(P0.01),小鼠巨噬细胞炎症因子NO、TNF-α分泌显著减少(P0.05)。结论:知母具有显著的抗炎及免疫调节活性,其物质基础为皂苷组分和多糖组分。     

天然虫草和人工虫草体外免疫活性的初步评价

目的:考察天然虫草和人工虫草体外免疫活性的差异,为虫草质量的生物评价与控制提供参考.方法:采用MTT比色法,考察天然虫草和人工虫草对刀豆蛋白A(ConA)诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响,并对实验结果进行聚类分析.结果:虫草在0.36～11.52 mg/mL范围内对小鼠脾淋巴细胞无毒性,高浓度(＞0.72 mg/mL)时对淋巴细胞的增殖作用明显(P＜0.05);免疫活性为:天然虫草＞人工虫草,青海虫草＞西藏虫草.结论:体外免疫活性评价方法可以初步区分天然虫草和人工虫草.     

冬虫夏草的免疫药理作用

冬虫夏草(简称虫草,Cordyceps Sincusis Sacc)是传统的强壮滋补中药,因具有良好的扶正固本和免疫(?)节作用而广泛应用于临床、近年来以现代手段对其进行多方面的研究,证实有重要药用价值。有关虫草免疫药理活性的研究也已开展。由于天然资源稀缺,采用人工发酵培养法生产的虫草菌丝体(简称虫草菌)在化学组成与药理活性等方面与之相似,能代替天然产品药用。本文综述了近年来对天然虫草及虫草菌丝体免疫药理活性研究的进展。一、对免疫器官的影响虫草、虫草菌浸剂可明显增加小鼠脾重,并拮抗强的松龙与环磷酰胺引起的脾重减轻。其机制可能是通过促进脾脏 DNA 的生物合成,增加核酸与蛋     

人工培养冬虫夏草菌粉对细胞免疫的抑制作用

本研究就人工培养冬虫夏草菌粉对小鼠细胞的免疫抑制作用进行了体内外观察。虫草菌粉0.6～5mg/ml 均能显著抑制小鼠外周血白细胞吞噬功能、脾淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞培养以及 LPS 诱导的巨噬细胞 IL-1生成(P<0.05～0.01)。其抑制强度与虫草菌粉剂量成正比例。5mg/ml 虫草菌粉可完全抑制上述细胞免疫反应,而该剂量药物与脾细胞共育5天也不影响细胞的存活率。给同种异体皮肤移植小鼠每日口服虫草菌粉4g/kg,使皮片存活时间(12.7±2.2天)较对照组(8.3±0.7天)显著延长(P<0.01),近似于环抱霉素 A(每日5mg/kg 口服)抑制皮片排异的效果(13±2.9天,P>0.7)。     

虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对化学性肝损伤的辅助保护作用

目的:观察虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对急性肝损伤小鼠谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝细胞变性及坏死程度的影响。方法:采用CCl_4诱导小鼠急性化学性肝损伤模型,将动物随机分成5组,分别是空白对照组,模型对照组,虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物低、中、高剂量组(3个剂量组分别为1.11、3.33、10.00 g/kg BW),检测血清ALT、AST值,并取肝脏作病理切片,观察肝脏的病理损伤情况。结果:虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物高剂量组能明显降低CCl_4急性肝损伤小鼠血清ALT值,减轻肝细胞坏死程度。结论:虫草被孢菌粉(至灵菌丝)多糖提取物对化学性肝损伤有辅助保护功能。