荭叶心通软胶囊中主要活性成分的大孔吸附树脂分离纯化工艺研究

目的:采用大孔吸附树脂法,探讨荭叶心通软胶囊中荭草、山楂叶活性成分的提取纯化工艺条件。方法:以荭草素、异荭草素和金丝桃苷为指标,对5种树脂进行了筛选,并对选定的D₁₀₁大孔树脂富集纯化荭草素、异荭草素及金丝桃苷的工艺条件进行考察。结果:D₁₀₁型树脂对荭草、山楂叶中荭草素、异荭草素及金丝桃苷的吸附性能良好,在所确定的工艺条件下,荭草素、异荭草素和金丝桃苷转移率均大于91%,总固体物较树脂处理前减少60%以上。结论:D₁₀₁大孔吸附树脂能有效富集纯化荭草、山楂叶中的活性成分。     

木豆叶HPLC指纹图谱建立及2种成分测定

目的建立木豆Cajanus cajan(L.)Millsp.叶HPLC指纹图谱,并测定荭草苷和木犀草素的含有量。方法木豆叶65%甲醇提取液的分析采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);以甲醇-1%醋酸为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长260 nm。结果 10批样品(S1~S10)HPLC指纹图谱中有21个共有峰,除S3(0.516)外,其相似度均大于0.950。荭草苷和木犀草素分别在0.089 5~3.960μg和0.015 5~0.408μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.43%(RSD=1.32%)和98.50%(RSD=0.82%),3个产地(广东、云南、海南)样品中2种成分含有量有明显差异。结论该方法简单准确,重复性好,可用于木豆叶的质量控制。     

响应面法优化凤尾草中木犀草素的酶法提取工艺

目的优化凤尾草中木犀草素的酶法提取工艺。方法在单因素试验基础上,通过响应面法考察酶解pH、酶解温度和酶解时间对木犀草素提取率的影响。结果最佳条件为酶解pH 5.6,酶解温度48.6℃,酶解时间1.76 h,木犀草素提取率2.75 mg/g。结论该方法合理可行,可用于酶法提取凤尾草中的木犀草素。     

Box-Benhnken响应面分析法优化金银花药材中绿原酸与木犀草苷的提取工艺

目的 Box-Benhnken响应面分析法优化金银花药材中绿原酸与木犀草苷的最佳提取工艺。方法采用HPLC法测定绿原酸与木犀草苷的量,以绿原酸与木犀草苷提取率的总评"归一值"为指标,通过Box-Behnken试验考察溶剂体积分数、液料比、提取时间对提取工艺的影响,对结果进行二项式回归模型拟合,优化提取工艺并进行预测分析。结果优化最佳提取工艺:乙醇体积分数为73.25%,料液比为1∶10.80,提取时间为30 min,提取次数2次,实际测得绿原酸与木犀草苷提取率分别为91.82%、32.16%,这与理论预测值(92.04%、32.32%)差异无显著性(P>0.05)。结论 Box-Benhnken响应面分析法能较好地拟合金银花药材中绿原酸与木犀草苷提取工艺,所预测值与试验值较好吻合,非线性拟合数学模型较接近客观事实,使得Box-Benhnken效应面对应的因素与指标的相互关系更加明确、客观、真实。     

淡竹叶中荭草苷的微波萃取-HPLC法测定

目的从淡竹叶中提取黄酮苷类成分,并测定荭草苷的量。方法采用微波萃取技术提取黄酮苷,在640W的功率下,用10倍量70%乙醇为溶剂微波萃取2min制备供试品溶液。并采用RP-HPLC法测定荭草苷。色谱条件:色谱柱为Diamonsi C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水-冰醋酸(40∶70∶1);柱温:25℃;检测波长:340nm。结果荭草苷在0.014～0.280mg/mL线性关系良好;荭草苷的平均回收率为96.18%,RSD为1.96%。浙江、福建产淡竹叶中黄酮苷成分的量比较高,而广西、重庆等地生长的淡竹叶中有效成分的量较低。结论采用微波萃取技术提取淡竹叶中的荭草苷,并采用HPLC法定量的方法简便、准确,结果稳定、重现性好,可作为淡竹叶及其制剂质量控制的方法。     

平衡透析法、超滤法结合液质联用技术比较测定注射用复方荭草中黄酮类成分的血浆蛋白结合率

目的:测定注射用复方荭草中黄酮类成分的人血浆蛋白结合率,为临床安全用药及血浆蛋白测试方法研究提供依据。方法:以超高效液相色谱-质谱联用为检测手段,采用平衡透析法、超滤法考察荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷等黄酮类成分与血浆蛋白的结合情况,并比较二者的差异。结果:注射用复方荭草在人血浆中质量浓度为5～100 mg.L-1时,荭草素、牡荆素、木犀草苷、槲皮苷等黄酮的结合率较强且无浓度依赖性,两种测定方法牡荆素和木犀草苷存在统计学差异(P<0.01)。结论:建立的平衡透析法、超滤法均能够满足血浆蛋白结合率测定的要求,两种方法所测定的部分指标存在差异。     

荭草抗肿瘤活性提取物质量标志物的初步研究

目的基于质量标志物(Q-marker)理论,分析具有抗肿瘤活性的荭草醋酸乙酯提取物的成分,研究其质量控制方法。方法首先使用UPLC-ESI-HRMS对该提取物进行成分鉴定;再使用HPLC进行成分的定量测定,同时建立其定量测定方法,并对鉴定出的化合物进行药理作用分析,初步预测Q-marker;最后采用人非小细胞肺癌A549细胞模型,研究荭草醋酸乙酯提取物及6种候选成分混合物对A549肿瘤细胞生长及迁移的影响。结果通过UPLC-ESI-HRMS结果指认出12个化合物,其中,HPLC未检出原儿茶酸、儿茶素、山柰素和芹菜素,异牡荆素和木犀草素质量分数低于0.01mg/g,不纳入Q-marker候选物之列。结合药理作用分析,最终选择了6种成分没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷作为其潜在Q-marker。各样品中均能检测出这6个成分,且6个成分总量超过10%。荭草醋酸乙酯提取物及等剂量6成分混合物均能显著抑制A549细胞的增殖与迁移,并诱导其凋亡,且两组之间效果无显著性差异。结论没食子酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素、木犀草苷和槲皮苷作为具有抗肿瘤活性的荭草醋酸乙酯提取物中的潜在Q-marker具有科学合理性;建立的荭草醋酸乙酯提取物的HPLC定量测定方法准确、稳定。     

HPLC法同时测定15个产地浮萍中4种黄酮类成分

目的建立HPLC法同时测定15个产地浮萍Spirodela polyrriza(L.)Schleid.中4种黄酮类成分(荭草苷、牡荆苷、木犀草素、芹菜素)的含有量。方法分析采用Waters XBridge C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量1.0 m L/min;柱温25℃;检测波长350 nm。结果荭草苷在0.228 0~5.700 0μg(R~2=0.999 7)、牡荆苷在0.086 4~5.400 0μg(R~2=0.999 8)、木犀草素在0.132 0~5.500 0μg(R~2=0.999 8)、芹菜素在0.026 4~6.600 0μg(R~2=0.999 9)范围内具有良好的线性关系,平均加样回收率为100.31%~104.58%,其含有量依次为荭草苷牡荆苷木犀草素芹菜素。结论不同产地浮萍中荭草苷和牡荆苷的含有量有明显差异,而木犀草素和芹菜素比较稳定。     

不同产地浮萍中5种黄酮成分量及抗氧化活性的化学模式识别研究

目的测定不同产地浮萍Spirodela polyrriza中5个黄酮类成分的量,并对其抗氧化活性进行评价。方法采用HPLC法,以乙腈-0.1%甲酸为流动相测定8个产地17批浮萍药材中荭草素、牡荆素、木犀草苷、大波斯菊苷、木犀草素的量;采用DPPH清除率法比较不同产地浮萍的抗氧化活性,并结合聚类分析和主成分分析等化学模式识别技术对浮萍质量进行评价。结果不同产地浮萍中5个黄酮类成分量存在一定差异,聚类分析和主成分分析均可将不同产地浮萍分为3类,且分类结果一致。其中陕西和山西产地的浮萍中荭草素、牡荆素、木犀草苷的量均较其他产地明显偏高;相关性分析表明,氧化清除率与黄酮类成分量呈显著正相关。结论陕西和山西产地的浮萍黄酮类成分量高,抗氧化能力较强。所建立的分析方法稳定可靠,可为浮萍药材的产地识别和质量控制提供参考。     

制备色谱分离竹叶黄酮中异荭草苷和荭草苷

目的建立制备型高效液相色谱(PHPLC)分离竹叶黄酮中异荭草苷和荭草苷的方法。方法竹叶黄酮经AB-8树脂吸附洗脱纯化后,采用PHPLC分离异荭草苷和荭草苷,制备色谱条件:流动相为甲醇-0.3%乙酸水溶液(32∶68),体积流量为5 mL/min,柱温为20℃,检测波长330 nm,进样体积为400μL,上样质量浓度为15.3 mg/mL。结果 HPLC检测表明,异荭草苷的质量分数>99%,荭草苷的质量分数>93%,加样回收率分别为(92.7±2.92)%和(85.1±3.45)%。单体结构通过核磁共振碳谱和氢谱鉴定,确定为异荭草苷和荭草苷。结论该法分离效果较好,低毒,回收率高,可用于竹叶黄酮中2种黄酮苷的分离制备。     

星点设计-效应面法优化荆芥穗黄酮类成分的提取工艺

目的: 优选荆芥穗黄酮类成分的提取工艺,为该药材的资源开发提供参考。方法: 选择乙醇体积分数、提取时间及乙醇用量为自变量,橙皮苷、木犀草素、芹菜素提取量的总评"归一值"为因变量,通过星点试验优选提取工艺,运用Design-Expert 8.0软件对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合,利用效应面法优选提取工艺并进行预测分析。采用 HPLC测定橙皮苷、木犀草素、芹菜素含量,流动相乙腈(A)-0.4%磷酸溶液(B)梯度洗脱(0~20 min,5%~20%A;20~50 min,20%~30%;50~60 min,30%~5%A),检测波长283 nm。结果: 最佳提取工艺为加15倍量73%乙醇回流提取2次,每次2 h;橙皮苷、木犀草素、芹菜素提取量分别为3.991,1.307,0.589 mg·g^-1,总评"归一值"0.925 3,与预测值的偏差-2.14%。结论: 优选的提取工艺简单易行、准确度高,适用于荆芥穗总黄酮的工业化生产。     

香椿叶总黄酮提取工艺研究

本文通过水煮、醇沉和有机溶剂萃取等试验建立了一条从香椿叶中提取纯化总黄酮的工艺路线。其中水提的最佳条件为：料液比1：25,微沸2h,提取2次;醇沉的乙醇体积分数为80％,沉淀12h;有机溶剂萃取选用水饱和正丁醇作为萃取剂,萃取2次,萃取率达到93．61％,香椿叶总黄酮纯度为72．3％。本文建立的香椿叶黄酮提取工艺为工业化开发利用香椿黄酮资源奠定了基础,并对其他黄酮资源的提取开发也提供了有益的借鉴和参考。     

丹参茎叶酚酮有效部位的提取纯化工艺研究

目的对丹参茎叶酚酮有效部位提取纯化工艺进行优选。方法采用超高效液相色谱仪检测,以丹参茎叶中酚酸类(丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B、迷迭香酸、紫草酸)及黄酮类成分(芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、紫云英苷)二者提取量、总提取量及浸膏得率为评价指标,通过单因素及正交试验考察提取方法、提取溶剂、料液比、提取时间及提取次数对丹参茎叶提取工艺的影响;采用大孔吸附树脂纯化丹参茎叶提取物并对纯化工艺参数进行考察,确定最佳纯化工艺。结果以50%乙醇8倍量回流提取3次,每次提取1.0 h为最佳提取工艺;以AB-8型大孔吸附树脂纯化,1.0 g/m L药液上样,上样量为每10克干树脂上样1.5 g干燥提取物,40%乙醇洗脱,洗脱用量3 BV为最佳纯化工艺,酚酸类及黄酮类成分总纯度可达到41.83%。结论优选的提取工艺稳定可行,适用于丹参茎叶酚酮有效部位的提取纯化,可为丹参茎叶的进一步开发提供参考。     

盘龙参中总黄酮提取工艺研究

目的：研究盘龙参中总黄酮的提取工艺。方法：采用紫外分光光度法从超声提取法、回流提取法、索氏提取法中选出最优提取方法,在此基础上进一步探讨乙醇浓度、时间、固液比,提取级数等因素对总黄酮含量的影响。结果：回流提取法所得总黄酮的含量较高,单因素试验设计得出优化实验条件为：乙醇浓度为75％,提取时间为3h,固液比为1：40（g／mL）,提取次数为1次。结论：该优选方法合理,可行。     

Extracting flavonoids from Smilax glabra by microwave-assisted method]

OBJECTIVE: To optimize the process of extracting flavonoids from Smilax glabra. METHODS: Flavonoids were extracted from Smilax glabra by microwave-assisted method, and the extracting time, microwave power, ethanol concentration, solid-solvent ratio and extracting temperature were optimized through single factor experiment and orthogonal test. RESULTS: The optimun process parameters of extracting flavonoids were as follows: the extracting time, microwave power, ethanol concentration, solid-liquid ratio and extracting temperature were 5 minutes, 600 W, 60%, 1:30 and 80 degrees C, respectively. CONCLUSION: The proposed method has been applied stably and reliably to the extraction of flavonoids from Smilax glabra which has the advantages of high recovery and short extraction time. The recovery, the yield and the content of falvonoids are 93.2%, 2.66% and 32.6%, respectively.     

正交实验法优选垫状卷柏总黄酮的提取工艺

目的探讨垫状卷柏中总黄酮的最佳提取工艺。方法采用正交实验法,以总黄酮含量为考察指标,优化垫状卷柏总黄酮的提取工艺。结果经过正交实验得出的最佳工艺条件为乙醇浓度95%,料液比1:12,提取时间为2 h,回流提取2次。结论根据验证实验结果,该方法工艺合理,稳定可行。     

枇杷叶总黄酮的微波-超声辅助协同提取工艺研究

目的对微波-超声辅助提取枇杷叶总黄酮的工艺条件及参数进行优化。方法在单因素试验的基础上,采用L9（34）正交设计,以枇杷叶总黄酮提取率为指标,试验料液比、提取温度、提取时间、乙醇浓度对提取率的影响。结果最佳提取工艺参数为：提取温度80℃、提取时间60min、乙醇浓度中=70％、料液比1：40。结论采用微波-超声辅助协同提取枇杷叶中总黄酮工艺简单可行,是提取枇杷叶中总黄酮的有效丁艺之一。用于提取枇杷叶中的总黄酮,结果满意,回收率为97．7％101．8％,RSD为2．1％。     

星点设计-效应面法优化纤维素酶法辅助提取鬼针草叶中总黄酮研究

目的:优化纤维素酶法辅助提取鬼针草叶中总黄酮工艺。方法:在单因素考察基础上选取酶用量、酶解pH值、酶解温度三个影响因素,采用星点设计-效应面法优化纤维素酶辅助提取过程中的影响因素及其交互作用对鬼针草叶中总黄酮提取率的影响,建立二项式拟合模型。结果:最佳提取工艺为酶用量1.14%,酶解温度41.9℃,酶解pH值4.35,该条件下总黄酮提取率为6.31%,与模型预测值相差仅为1.25%。结论:星点设计-效应面法适用于纤维素酶法辅助提取鬼针草叶中总黄酮提取工艺的优化,所建立的数学模型预测性良好。     

银叶树树叶中总黄酮提取工艺优化

目的:优化工艺条件,从红树林植物银叶树Heritiera littoralis Dryand.树叶中提取具有抗氧化、抗癌等活性的黄酮类化合物。方法:将微波浸提法和超声波浸提法进行比较,紫外可见分光光度法在510 nm处对提取液中黄酮含量进行测定,考察提取时间、提取功率、溶剂浓度、料液比四个单因素对黄酮提取率的影响。根据L9(34)正交试验对黄酮的提取条件进行优化。结果:确定溶剂提取黄酮的工艺参数为:采取微波法提取,处理时间为8 min,微波提取功率400 W,乙醇浓度70%,料液比(g∶mL)1∶30,该条件下黄酮提取率达6.15%。结论:利用银叶树提取黄酮具有开发利用价值,为红树林植物药用成分的进一步开发研究奠定基础。     

两头毛中总黄酮提取工艺

目的:用正交试验法优选两头毛中总黄酮的提取工艺。方法:以总黄酮提取量为评价指标。选择提取溶液量、提取时间、提取次数为考察因素,采用正交试验法确定两头毛中总黄酮的最佳提取工艺,采用分光光度法对干浸膏中总黄酮的含量进行测定,检测波长498 nm。结果:最佳提取工艺条件为用10倍量0.5%氢氧化钠溶液回流提取3次,每次3 h,芦丁在8.72～52.32 mg·L-1呈良好的线性关系。平均回收率101.98%,RSD 1.23%。结论:总黄酮正交提取工艺比较可行,含量测定方法简便、准确,可用于两头毛干浸膏中总黄酮的含量测定。