淫羊藿苷联合冰片对脑缺血-再灌注损伤模型大鼠抗氧化活性、炎症反应和血脑屏障通透性影响

目的:探索淫羊藿苷配伍冰片对大鼠脑缺血-再灌注损伤抗氧化活性、炎症反应和血脑屏障通透性作用及其机制。方法:SD大鼠50只,随机分成假手术组、模型对照组、淫羊藿苷组、冰片组和淫羊藿苷配伍冰片组,每组10只,采用颈总动脉夹闭法制备脑缺血-再灌注损伤模型。缺血0.5h后,再灌注24h分别检测缺血脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)的活性和伊文思蓝(EB)的含量。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:淫羊藿苷组、冰片组和淫羊藿苷配伍冰片组大鼠脑组织SOD活性分别为(259.15±1.129)U/mg,(270.96±1.875)U/mg,(301.14±0.248)U/mg;MPO值分别为(0.741±0.229)U/g,(0.692±0.115)U/g,(0.457±0.046)U/g;EB含量分别为(6.375±0.842)μg/g,(5.419±0.160)μg/g,(4.278±0.175)μg/g,与模型对照组比较,淫羊藿苷组、冰片组和淫羊藿苷配伍冰片组差异均有统计学意义,其中以淫羊藿苷配伍冰片组作用最明显(P0.01)。淫羊藿苷组、冰片组和淫羊藿苷配伍冰片组大鼠脑组织TNF-α含量分别为(0.516±0.134)U/g,(0.712±0.039)U/g,(0.325±0.092)U/g,与模型对照组比较,淫羊藿苷组、冰片组和淫羊藿苷配伍冰片组差异均有统计学意义,其中以淫羊藿苷配伍冰片组作用最明显(P0.01)。结论:淫羊藿苷配伍冰片对脑缺血-再灌注损伤模型大鼠的脑组织具有神经保护作用。     

淫羊藿苷对哮喘大鼠醌氧化还原酶1及谷胱甘肽还原酶表达及氧化应激的影响

目的探讨淫羊藿苷对哮喘大鼠醌氧化还原酶1(NQO1)及谷胱甘肽还原酶(GR)表达及氧化应激的影响。方法选取40只健康雌性Wistar大鼠,随机将其分为正常组、模型组、布地奈德组及淫羊藿苷组,每组10只。除正常组外,其余组大鼠采用卵蛋白溶液造成慢性大鼠哮喘模型。实验期间正常组及模型组每天灌胃生理盐水,淫羊藿苷组每天灌胃淫羊藿苷120 mL/kg,布地奈德组致敏2周后在卵蛋白溶液雾化吸入后给予布地奈德吸入。于末次激发后24 h内处死各组(正常组同期处死)大鼠并取出右肺组织,以ELISA方法检测各组氧化因子活性氧(ROS)表达水平,采用RT-PCR法检测各组GR mRNA表达水平,采用Westernblot方法检测各组NQO1蛋白表达水平。结果模型组大鼠肺组织中ROS表达水平明显高于正常组(P<0.05),GR mRNA及NQO1蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0.05)。淫羊藿苷组及布地奈德组大鼠肺组织中ROS表达水平均明显低于模型组(P均<0.05),GR mRNA及NQO1蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0.05),淫羊藿苷组与布地奈德组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论淫羊藿苷可上调哮喘大鼠GR mRNA及NQO1蛋白的表达,减轻哮喘大鼠氧化应激反应。     

淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达及皮质醇的影响

目的观察淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3、皮质醇及肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达的影响。方法选用60只雄性SD大鼠,随机分为正常组,模型组[生理盐水4.0ml/(kg·d)灌胃],淫羊藿苷高剂量组[120mg/(kg·d)灌胃],淫羊藿苷中剂量组[60mg/(kg·d)灌胃],淫羊藿苷低剂量组[30mg/(kg·d)灌胃],维生素D组[30mg/(kg·d)灌胃]。造模1月后,药物干预2月,酶联免疫法(ELISA法)检测血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3、皮质醇;Real-Time PCR法检测肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达。结果与正常组比较,模型组血清25(OH)D_3、1,25(OH)D3含量下降(P0.05),皮质醇含量下降(P0.05);淫羊藿苷干预后血清25(OH)D_3、1,25(OH)D3、皮质醇含量均上升(P0.05)。Real-Time PCR显示,模型组肾上腺皮质CYP17A1mRNA表达量下调(P0.05),淫羊藿苷干预后表达量均上调(P0.05)。结论淫羊藿苷可能改善维生素D缺乏大鼠皮质醇的分泌。     

淫羊藿苷调控急性淋巴细胞白血病PI3K/Akt信号传导通路的实验研究

目的观察淫羊藿苷对近交系DBA小鼠急性淋巴细胞白血病磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号传导通路的影响并分析其机制。方法近交系DBA/2小鼠60只,采用皮下注射急性淋巴细胞白血病细胞系L1210细胞以建立L1210白血病模型,然后随机均分为模型对照组、阳性对照组和淫羊藿苷2.5 mL/kg组、淫羊藿苷5 mL/kg组和淫羊藿苷10 mL/kg组(n=12只),1周后淫羊藿苷2.5 mL/kg组、5 mL/kg组和10 mL/kg组灌胃给予对应剂量的淫羊藿苷,模型对照组灌胃给予等体积0.9%氯化钠注射液对照,阳性对照组灌PI3K/Akt抑制剂LY294002对照。治疗3周后采用人工法计数尾静脉血细胞分类及血象;取小鼠肝、脾组织,采用Westem blot检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及磷酸化蛋白激酶(p-Akt)蛋白表达,实时定量PCR(RT-PCR)检测组织同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)m RNA和Akt m RNA的表达。结果与模型对照组比较,淫羊藿苷2.5 mL/kg组、5 mL/kg组和10 mL/kg组尾静脉血细胞淋巴细胞、白细胞和L1210细胞总数均明显降低,而中性粒细胞升高(P0.05);小鼠肝、脾组织Bcl-2、p-Akt蛋白和Akt m RNA蛋白表达水平显著降低,PTEN蛋白和PTEN m RNA则高表达(P0.05);且上述指标中,淫羊藿苷5 mL/kg组与2.5 mL/kg组比较(P0.05);淫羊藿苷10 mL/kg与5 mL/kg组和2.5 mL/kg组比较,差异有统计学意义(P0.05)。至治疗结束时淫羊藿苷2.5 mL/kg组、5 mL/kg组和10 mL/kg组小鼠存活数、体质量、肝脾和皮下瘤重与模型对照组比较(P0.05),差异有统计学意义。结论淫羊藿苷可能通过阻断PI3K/Akt信号传导通路而实现抑制L1210细胞增殖效应,且这种作用呈剂量依赖性。     

基于miR-223-3p研究淫羊藿苷治疗大鼠颅脑外伤后神经损伤的作用机制

目的基于miR-223-3p探讨淫羊藿苷治疗大鼠颅脑外伤神经损伤的作用机制。方法随机选取70只大鼠,建立局部脑挫裂伤模型,将建模成功的60只大鼠随机分为模型组、淫羊藿苷(30mg/kg)组、淫羊藿苷(30mg/kg)+阴性对照组和淫羊藿苷(30mg/kg)+miR-223-3pantagomir组,每组15只,另取15只大鼠作为对照组。给予相应药物进行干预,末次干预2 h后,对各组大鼠进行改良神经功能缺损评分(modified neurological severity scores,m NSS);测定各组大鼠脑组织含水量;采用ELISA法检测各组大鼠脑组织白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)和IL-1β水平;采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠脑组织病理变化;采用TUNEL染色法观察各组大鼠脑组织神经元凋亡情况;采用q RT-PCR法检测各组大鼠脑组织miR-223-3p和核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-bindingoligomerizationdomain-likereceptor protein 3,NLRP3)m RNA表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠脑组织NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达情况;采用双荧光素酶报告基因系统检测miR-223-3p对NLRP3的靶向性。结果与模型组比较,淫羊藿苷组大鼠m NSS显著降低(P0.05),脑组织含水量显著降低(P0.05),脑组织IL-18和IL-1β水平显著降低(P0.05);脑组织损伤面积和红细胞数减少;神经元细胞凋亡指数显著降低(P0.05);脑组织miR-223-3p mRNA表达水平升高,NLRP3 mRNA表达水平显著降低(P0.05);脑组织NLRP3、Caspase-1和Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P0.05)。与淫羊藿苷组比较,淫羊藿苷+miR-223-3pantagomir可显著逆转上述指标(P0.05)。双荧光素酶报告结果显示,miR-223-3p可靶向调控NLRP3。结论淫羊藿苷对大鼠颅脑外伤神经损伤具有改善作用,其作用机制可能与调控miR-223-3p从而靶向抑制NLRP3表达、抑制炎性反应、减少神经元细胞凋亡有关。     

淫羊藿苷对卵巢切除大鼠胸主动脉内皮舒血管功能的影响

目的 研究淫羊藿苷对卵巢切除大鼠胸主动脉内皮舒血管功能的影响.方法 将40只雌性Sprague-Dawley大鼠分为4组:对照假手术组(con)、卵巢切除组(ovx)、高剂量淫羊藿苷干预组(hica)、低剂量淫羊藿苷干预组(lica).10周后检测不同浓度乙酰胆碱、硝普钠对各组大鼠胸主动脉的舒张效应并检测各组大鼠血脂水平.结果 卵巢切除后给予高剂量及低剂量的淫羊藿苷均能显著降低大鼠血清中总胆固醇水平.补充不同剂量淫羊藿苷均能改善乙酰胆碱对大鼠胸主动脉环的舒张效应.结论 淫羊藿苷可改善更年期大鼠模型胸主动脉内皮舒血管功能.     

淫羊藿苷抑制大鼠静脉血栓形成及对血液流变学的影响

目的:研究淫羊藿苷对大鼠静脉血栓形成的影响,并探究其作用机制。方法:建立大鼠静脉血栓模型和血瘀模型,将实验大鼠分为淫羊藿苷低、中、高剂量组,分别测定血栓质量、凝血时间、优球蛋白溶解时间(ELT)和血液流变学等参数指标。结果:静脉血栓模型大鼠,淫羊藿苷低、中、高剂量(5、10、20 mg/kg)能明显降低静脉血栓质量、全血黏度、红细胞压积和红细胞聚集指数(P0.05或P0.01),抑制腺苷二磷酸(ADP)诱导的大鼠血小板聚集(P0.05);中、高剂量淫羊藿苷能明显缩短ELT,延长凝血活酶时间、凝血酶原时间和凝血酶时间(P0.05或P0.01)。血瘀模型大鼠,淫羊藿苷高剂量组的全血黏度、血浆黏度、红细胞压积和血沉均明显低于模型组(P0.05或P0.01),淫羊藿苷中剂量组的低切全血黏度、中切全血黏度、血浆黏度和血沉明显低于模型组(P0.05或P0.01),而淫羊藿苷低剂量虽有改善,但除血浆黏度及血沉外,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:在一定剂量下,淫羊藿苷能够抑制大鼠静脉血栓的形成,具有改善血液流变学性质、增加纤溶活性及抑制血小板聚集的作用。     

基于RhoA/ROCK通路探讨淫羊藿苷对肾病综合征大鼠的保护机制

目的:研究淫羊藿苷对肾病综合征(NS)大鼠肾素同源蛋白A(RhoA)/Rho相关激酶(ROCK)通路的影响和保护机制。方法:实验对象为54只清洁级雄性SD大鼠,随机均分为正常组,模型组,RhoA抑制剂组(Rhosin,40 mg·kg^-1·d^-1)和淫羊藿苷低、中、高剂量组(30,60,120 mg·kg^-1·d^-1)。模型组大鼠尾静脉注射6.5 mg·kg^-1盐酸阿霉素给,诱导大鼠NS发生。造模后腹膜给药,正常组和模型组给予生理盐水2.5 mL·d^-1,抑制剂组和各剂量组分别给对应剂量的Rhosin和淫羊藿苷进行干预。试剂盒检测各组大鼠尿总蛋白(Alb),尿肌酐(Cre)水平,计算尿总蛋白/肌酐值(A/C);透射电镜(TEM)鉴定肾脏超微病理;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA水平和蛋白表达。结果:TEM结果显示,正常组基底膜完整,足突规整;模型组基底膜损坏严重,足突出现消失、融合严重;淫羊藿苷低剂量组基底膜损伤减轻,足突的数量和密度改善、融合明显;淫羊藿苷中剂量组和抑制剂组,基底膜增厚情况减轻,足突轻度融合;淫羊藿苷高剂量组基底膜结构较完整,足细胞较长、排列较紧密。与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白量、尿液中Cre,A/C,肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,抑制剂组和淫羊藿苷低、中、高剂量组24 h尿蛋白量,A/C和肾组织中RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,抑制剂组和淫羊藿苷高剂量组尿液中Cre明显降低(P<0.05)。与抑制剂组比较,淫羊藿苷高剂量组24 h尿蛋白量、尿液中Cre和肾组织RhoA蛋白水平明显降低(P<0.05);淫羊藿苷低剂量组24 h尿蛋白量、尿液中Cre,A/C和肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,淫羊藿苷中剂量组肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA水平明显升高(P<0.05)。与淫羊藿苷低剂量组比较,淫羊藿苷中、高剂量组尿液中Alb,A/C和肾组织RhoA,ROCK1,ROCK2 mRNA和蛋白水平,淫羊藿苷高剂量组尿液中Cre明显降低(P<0.05)。与淫羊藿苷中剂量组比较,淫羊藿苷高剂量组24 h尿蛋白量、尿液中Cre和肾组织RhoA,ROCK1 mRNA和蛋白水平,肾组织ROCK2 mRNA明显降低(P<0.05)。结论:在NS大鼠治疗过程中,淫羊藿苷可能通过影响RhoA/ROCK通路,实现肾小球内皮和足细胞保护作用。     

淫羊藿苷对去卵巢大鼠骨质疏松症的保护机制研究

目的:探讨淫羊藿苷在去卵巢大鼠骨质疏松症中的保护作用及机制。方法:将55只大鼠(均为雌性,6个月龄)随机分为5组(对照组、模型对照组、西药组、淫羊藿小剂量组及大剂量组),每组均为11只。手术取出大鼠双侧卵巢以建立骨质疏松大鼠模型,14天后开始给药,西药组大鼠给予尼尔雌醇(1mg·kg~(-1))灌胃,小剂量及大剂量组分别给予淫羊藿苷(50mg·kg~(-1)、100mg·kg~(-1))灌胃,1次/天。给药84天后,进行下腹主动脉取血并处死。观察大鼠骨组织形态学、骨密度(BMD)、细胞凋亡蛋白的变化。结果:与对照组比较,模型对照组大鼠的BMD水平明显降低(P0.01);西药组、小剂量组、大剂量组分别与模型对照组比较,BMD水平明显升高(P0.01)。与对照组比较,模型对照组大鼠的血清钙水平明显降低,血清磷水平明显升高(P0.05);与模型对照组比较,给予淫羊藿苷治疗的小剂量组及大剂量组大鼠血清钙水平明显升高,血清磷水平明显降低(P0.05);与对照组比较,模型对照组大鼠的骨组织中Caspase蛋白、Bax蛋白表达水平明显上调,而Bcl-2蛋白水平明显下调,P均0.05;与模型对照组比较,西药组、小、大剂量组大鼠骨组织中的Caspase蛋白、Bax蛋白表达明显下降,而Bcl-2蛋白水平明显升高,P均0.05。结论:淫羊藿苷在去卵巢大鼠骨质疏松症治疗中有保护作用,且其保护机制可能和细胞凋亡蛋白受到抑制有关。     

淫羊藿苷对衰老大鼠肾上腺皮质CYP24A1、CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因mRNA表达影响

目的探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾上腺皮质CYP24A1、CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因mRNA表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:正常组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。Elisa法观察大鼠血清25(OH)D3水平,高效液相检测大鼠血清DHEA、睾酮水平,Real-TimeQPCR法观察大鼠肾上腺皮质CYP24A1、CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因mRNA表达。结果 Elisa结果显示模型组大鼠血清25(OH)D3水平相对于正常组降低(P0.05),淫羊藿苷不同剂量组以及维生素D组相对于模型组升高(P0.05)。高效液相显示模型组的血清DHEA、睾酮水平均相对正常组降低(P0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清DHEA、睾酮水平相对衰老模型组上升(P0.05)。Real-TimeQPCR结果显示相比正常组,模型组大鼠肾上腺皮质CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1表达下降(P0.05),CYP24A1表达上升(P0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾上腺皮质CYP27B1、CYP19A1、CYP17A1基因相对模型组表达上升(P0.05),CYP24A1则相对下降(P0.05)。结论衰老大鼠体内肾上腺皮质性激素相关基因表达水平下调同时衰老大鼠肾上腺皮质维生素D活化与作用降低,淫羊藿苷可以提高衰老大鼠肾上腺皮质维生素D活化与作用水平同时增加衰老大鼠肾上腺皮质性激素相关基因表达与生成。     

Influence of total flavonoids of epimedium on the oxidative stress and the expression of peroxisome proliferators activated receptor gamma in hyperlipemia rats

目的 探讨淫羊藿总黄酮对高脂血症大鼠体内过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)表达水平和氧化应激水平的影响.方法 将健康SD雄性大鼠35只随机分为普通饲料组9只和高脂饮食组26只.高脂饮食组给予高脂饲料喂养12周后复制高脂血症大鼠模型.造模成功后随机分为模型对照组8只、淫羊藿大剂量组(200 mg/d)9只及淫羊藿小剂量组(100 mg/d)9只,干预4周后观察各组大鼠血脂水平,检测各组大鼠的超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清丙二醛(MDA)水平及PPARγ的表达水平.结果 模型对照组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平均明显高于普通饲料组(P＜0.01).淫羊藿总黄酮大、小剂量组TG、TC水平均明显低于模型对照组(P＜0.05,P＜0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组对TG、TC水平的改善较淫羊藿总黄酮小剂量组更为明显(P＜0.05).淫羊藿总黄酮大、小剂量组对高密度脂蛋白胆固醇( HDL - C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的影响无统计学意义(P＞0.05).模型对照组大鼠干预后SOD活性较普通饲料组降低(P＜0.01),MDA水平升高(P＜0.01).淫羊藿总黄酮大、小剂量组SOD活性均较模型对照组升高(P＜0.01),MDA水平降低(P＜0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组较淫羊藿总黄酮小剂量组更能明显增加SOD活性(P＜0.01)和降低MDA水平(P＜0.01).模型对照组大鼠干预后PPARγ表达水平较普通饲料组明显降低(P＜0.05).淫羊藿总黄酮大、小剂量组大鼠PPARγ表达水平均较模型对照组明显升高(P＜0.01),且淫羊藿总黄酮大剂量组升高明显(P＜0.01).结论 淫羊藿总黄酮能够提高高脂血症大鼠血清SOD水平,降低MDA水平,改善氧化应激,对内皮有保护作用,其机制可能是上调体内PPARγ的表达水平.     

淫羊藿苷对血管性痴呆大鼠海马组织BDNF mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察淫羊藿苷对血管性痴呆大鼠海马组织脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA及蛋白表达的影响。方法:80只SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、维生素D[0.025μg/(kg·d)]阳性对照组及淫羊藿苷低[200 mg/(kg·d)]、中[400 mg/(kg·d)]、高[800 mg/(kg·d)]剂量组。造模成功后药物干预8 w,HE染色观察脑组织的病理学改变;ELISA法检测血清BDNF水平;采用TUNEL法观察大鼠脑组织海马区神经元细胞凋亡;RT-PCR检测海马组织BDNF mRNA表达水平;Western blot法检测海马组织BDNF蛋白表达水平。结果:假手术组大鼠海马组织细胞结构与形态均正常,细胞排列整齐,形态完整;模型组大鼠海马出现弥散性损伤,海马组织细胞排列紊乱,形态不完整,细胞数目较少,结构不正常,细胞核固缩;各给药组与模型组比较有所改善,大鼠神经元损伤较模型组减轻,神经细胞变性坏死减轻,排列较整齐。与假手术组比较,模型组大鼠血清BDNF水平降低,海马神经元凋亡率显著升高,海马组织中BDNF mRNA及蛋白表达显著降低(P0.05或P0.01);与模型组比较,淫羊藿苷高剂量组上述指标均显著改善(P0.05或P0.01)。结论:淫羊藿苷能改善血管性痴呆大鼠海马组织BDNF的表达,这可能是淫羊藿苷治疗血管性痴呆的机制。     

淫羊藿总黄酮在骨质疏松大鼠体内的药动学行为

目的研究淫羊藿Epimedii Folium总黄酮在骨质疏松大鼠体内的药动学行为。方法 12只大鼠分为模型组和假手术组,双侧卵巢摘除法复制骨质疏松大鼠模型。灌胃总黄酮(500 mg/kg)后,HPLC-DAD法测定13个时间点(0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24、48 h)总黄酮原型苷(朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷)及其代谢产物(箭藿苷A、箭藿苷B、2″-O-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅰ、淫羊藿苷元)的血药浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数。结果总黄酮原型苷及其代谢产物在2组大鼠体内的药-时曲线均呈双峰。与假手术组相比,模型组的整合AUC和Cmax均显著降低(P0.01),t1/2显著延长(P0.01)。结论在大鼠骨质疏松状态下,淫羊藿总黄酮的体内吸收和代谢显著变慢,从而影响其药效发挥。     

淫羊藿苷对D-半乳糖诱导的脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响

目的:观察淫羊藿苷对脑衰老模型小鼠p53/p21信号通路的影响,并探讨淫羊藿苷抗衰老的可能机制。方法:将实验小鼠随机分为空白组、模型组、淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组,除空白组外,其他各组通过D-半乳糖诱导建立脑衰老模型。淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组灌胃淫羊藿苷药液,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水。用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习记忆能力;用ELISA检测各组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST、MDA的表达。用Real time-PCR和免疫组化检测各组小鼠海马中p53和p21的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间都明显增加(P0.01),而小鼠穿越平台次数和目标象限时间则明显较少(P0.01)。与模型组相比,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠上平台潜伏期、游泳总路程和第1次抵原平台时间均有所较少(P0.01,P0.05),而小鼠越平台次数和目标象限时间有所增加(P0.01,P0.05)。与空白组比较,模型组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST明显降低(P0.01),而MDA明显升高(P0.01);与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠血清中T-AOC、GSH-PX、GSH-ST均有不同程度升高(P0.01,P0.05),而MDA则有所降低(P0.01)。与空白组比较,模型组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平升高(P0.01)。与模型组比较,淫羊藿苷低剂量组和淫羊藿苷高剂量组小鼠海马中p53、p21 mRNA和蛋白表达水平降低(P0.01,P0.05)。结论:淫羊藿苷具有延缓衰老作用,其机制可能与其抑制衰老信号通路p53/p21有关。     

淫羊藿苷对阿尔茨海默病炎症模型大鼠神经细胞的保护作用

目的:用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)炎症模型大鼠,观察淫羊藿苷(Icariin ICA)对该模型大鼠学习记忆及超微结构的影响。方法:经八臂迷宫训练成功的45只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、淫羊藿苷30mg/kg组、淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组10mg/kg组,采用侧脑室注射LPS(10μl)制作实验性AD炎症模型,并八臂迷宫测验并记录其数据。迷宫测验完成后断头取脑海马组织。应用电镜观察大鼠海马组织CA1区神经细胞超微结构变化,用SPSS统计学软件进行统计学分析。结果:⑴侧脑室注射LPS(10μl)后对大鼠一般情况观察出现了行为异常。⑵八臂迷宫测试系统分析结果:制模后与对照组相比,其它各组大鼠总记忆错误(TE)、参考记忆错误(RME)、工作记忆错误(WME)明显增多,用淫羊藿苷治疗后与模型组比较,淫羊藿苷120mg/kg组和双氯芬酸组10mg/kg组大鼠的TE、RME、WME均明显减少,淫羊藿苷30mg/kg组错误选择次数无统计学意义。超微结构观察示:对照组、海马组织线粒体比较规则,淫羊藿苷120mg/kg组、双氯芬酸组线粒体轻度受损,模型组海马神经细胞核固缩,核周隙扩张,甚至核膜结构不清,核形态极不规则。结论:侧脑室注射LPS(10μl)能成功复制AD炎症动物模型;淫羊藿苷120mg/kg组显著改善AD模型大鼠的学习记忆能力,淫羊藿苷对炎症模型大鼠海马超微结构有保护作用。     

淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠肾上腺皮质维生素D轴及VDR蛋白表达的影响

目的:观察淫羊藿苷对维生素D缺乏大鼠肾上腺皮质维生素D轴的影响。方法:选用60只雄性SD大鼠,随机分为:正常组;模型组(生理盐水4.0 mL·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);淫羊藿苷高剂量组(120 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);淫羊藿苷中剂量组(60 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);淫羊藿苷低剂量组(30 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃);维生素D组(30ng·kg~(-1)·d~(-1)灌胃)。造模1月后,药物干预2月,酶联免疫法(ELISA法)检测血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3。免疫组化检测VDR蛋白表达。Real-Time PCR法检测肾上腺皮质维生素D受体(VDR)、25-羟维生素D_3-24-羟基化酶(CYP24A1)、25-羟维生素D1α-羟化酶(CYP27B1)mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3含量下降(P0.05);淫羊藿苷干预后血清25(OH)D_3、1,25(OH)D_3含量均上升(P0.05)。免疫组化显示,与正常组比较,模型组VDR蛋白表达下降(P0.05);经淫羊藿苷干预后,表达上升(P0.05)。Real-Time PCR显示,经淫羊藿苷干预后,表达量上调(P0.05),除VDRmRNA外,CYP24A1mRNA与CYP27B1mRNA变化趋势均与维生素D组表现一致。模型组基因表达均高于正常组(P0.05),Real-Time PCR检测结果与免疫组化检测的蛋白表达不完全一致。结论:淫羊藿苷可能调节维生素D轴促进VDR蛋白表达改善维生素D缺乏。     

淫羊藿苷对骨髓增生异常综合征模型大鼠骨髓细胞凋亡的影响

目的探讨单味中药提取物淫羊藿苷对骨髓增生异常综合征(MDS)模型大鼠骨髓细胞凋亡的影响。方法通过复制骨髓增生异常综合征(MDS)大鼠模型,用淫羊藿苷溶液灌胃。实验结束后,检测大鼠外周血象、骨髓象,骨髓细胞总凋亡率。结果淫羊藿苷组外周血白细胞计数、血红蛋白含量、红细胞计数灵敏、血小板计数高于模型生理盐水组,且有显著差异(P<0.01);各模型组大鼠外周血和骨髓均能见到不同程度的病态造血,骨髓细胞凋亡指数显著升高,与空白对照组相比有极显著差异;淫羊藿苷组骨髓细胞凋亡指数比模型生理盐水组低,两组间有极显著性差异(P<0.001)。结论淫羊藿苷有升高MDS模型大鼠外周血象、改善骨髓病态造血、降低骨髓细胞凋亡率的作用。     

右归丸对激素抵抗型肾病综合征大鼠模型及SD蛋白的影响

目的观察右归丸对激素抵抗型肾病综合征(steroid-resistant nephrotic syndrome,SRNS)大鼠24 h尿蛋白定量、肾脏功能及足细胞裂孔隔膜(SD)相关蛋白的影响。方法 60只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(50只)。造模组大鼠采用一次性尾静脉注射阿霉素(6 mg/kg),正常组大鼠尾静脉一次性注射等剂量的生理盐水,造模成功2周后,采用随机数字表法分为模型组、激素组、激素联合中药高、中、低组。正常组、模型组等体积生理盐水、激素组泼尼松片混悬液、激素联合中药组右归丸与泼尼松混悬液,连续灌胃干预6周。治疗期间观察大鼠的一般情况,检测各组大鼠24 h尿蛋白定量;给药结束后,应用生化分析仪检测大鼠血生化指标,采集肾组织,采用免疫组织化学检测大鼠肾小球中Nephrin、Podocin变化和分布情况。结果与空白组比较,其它各组尿蛋白、总胆固醇、三酰甘油、肌酐与尿素氮明显增加升高(P 0. 05);血白蛋白含量降低明显(P 0. 05);与模型组相比,各治疗组尿蛋白、血脂、肾功指数下降明显(P 0. 05);血白蛋白含量升高(P 0. 05)。与正常组相比,其它各组Nephrin、Podocin表达量有所减少(P 0. 05);与模型组相比,各治疗组除激素组外其它各组Nephrin、Podocin表达量均有上调(P 0. 05);与正常组比较,Nephrin、Podocin沿肾小球毛细血管袢呈片状、不连续型颗粒布散;与模型组比较,各治疗组Nephrin、Podocin蛋白分布无统计学意义(P 0. 05)。结论右归丸对激素有增敏作用,可明显减少24 h尿蛋白量,降血脂、提高血清蛋白,保护肾功能,有效恢复足细胞SD相关蛋白的表达量,进而延缓SRNS的进展。     

淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响

目的目的:探讨淫羊藿苷对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达的影响。方法将雄性SD大鼠随机分为6组:对照组,衰老模型组,淫羊藿苷低、中、高剂量组,维生素D组。Elisa法观察大鼠血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平,Real-Time QPCR法观察大鼠肾脏VDR、CYP24A1、CYP27B1基因mRNA表达。结果Elisa结果显示模型组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平均相对对照组降低(P0.05),维生素D组与部分淫羊藿苷不同剂量组的血清25(OH)D_3与1,25(OH)_2D_3水平相对衰老模型组上升(P0.05)。Real-Time QPCR结果显示相比对照组,模型组大鼠肾脏CYP27B1与VDR表达下降(P0.05),CYP24A1表达上升(P0.05);相比模型组,维生素D组与淫羊藿苷不同剂量组的大鼠肾脏CYP27B1与VDR基因相对模型组表达上升(P0.05),CYP24A1则相对下降(P0.05)。结论淫羊藿苷可以干预衰老大鼠维生素D活化表达水平,提示淫羊藿苷抗衰老作用可能与维生素D轴有关。     

淫羊藿苷对精索静脉曲张模型大鼠附睾氧化应激水平的影响

目的探讨淫羊藿苷对精索静脉曲张模型大鼠附睾氧化应激水平的影响。方法将40只青春期雄性SD大鼠随机分为对照组、实验性精索静脉曲张(EV)组、淫羊藿苷(ICA)组。EV模型的建立采用左肾静脉部分结扎法。ICA组给予淫羊蕾苷治疗。HE染色观察各组大鼠附睾显微结构变化;比色法测定附睾组织内超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及丙二醛(MDA)含量。结果与对照组比较,EV组大鼠附睾SOD活力和GSH-Px活力显著下降(P均0.05),MDA含量显著升高(P0.05);与EV组比较,ICA组大鼠附睾组织SOD活力和GSH-Px活力显著升高(P均0.05),MDA含量降低(P0.05)。EV组附睾显微结构明显异常,ICA组附睾上皮显微结构损害明显减轻。结论淫羊藿苷可拮抗精索静脉曲张所致的氧化应激损伤。