柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导内质网应激神经元轴突生长的影响

目的:探讨柴胡疏肝散含药血清对衣霉素(TM)诱导的NG108-15细胞轴突生长的影响。方法:实验采用衣霉素对NG108-15神经细胞进行孵育,诱导其形成内质网应激(ERS)细胞模型,分别用正常兔血清、安理申含药兔血清、高、中、低剂量柴胡疏肝散含药血清进行干预,观察各组细胞轴突生长情况。结果:加入柴胡疏肝散含药血清高、中、低剂量孵育干预后,细胞的突起阳性率和平均突起长度明显优于模型组(P0.01);高剂量组柴胡疏肝散含药血清与低剂量组相比较(P0.05),与西药安理申组含药血清两者之间无明显差异(P0.05)。结论:柴胡疏肝散含药血清可促进衣霉素诱导NG108-15细胞内质网应激模型神经元突起的生长。     

疏肝益肾方对人乳腺癌TAM耐药细胞株MCF-7 TAM-R的作用及其机制的研究

目的:研究疏肝益肾方对他莫昔芬耐药乳腺癌细胞MCF-7 TAM-R的作用,并探讨其可能的机制。方法:采用中药血清药理学方法制备大鼠含疏肝益肾方高中低剂量血清、TAM阳性对照血清、空白阴性对照血清,体外培养MCF-7 TAM-R细胞。CCK8法观察各组含药血清对MCF-7 TAM-R细胞株的抑制率,基因芯片检测MCF-7 TAM-R耐药细胞株可能的作用机制。结果:CCK8实验结果显示疏肝益肾方高中低剂量均可不同程度抑制MCF-7 TAM-R细胞株的增殖,且中药高剂量组在48小时抑制作用最强(P0.05)。基因芯片结果显示高剂量疏肝益肾方可以下调MCF-7 TAM-R耐药细胞株MAPK通路、VEGF通路等通路的表达。结论:1疏肝益肾方对TAM耐药乳腺癌细胞MCF-7 TAM-R的增殖有抑制作用。2疏肝益肾方逆转MCF-7 TAM-R细胞他莫昔芬耐药的机制涉及多条通路,可能与抑制MAPK通路、VEGF通路等通路有关。     

柴胡疏肝散对衣霉素诱导内质网应激模型细胞活性的影响

目的:探讨柴胡疏肝散含药血清对衣霉素诱导的内质网应激(ERS)细胞模型NG108-15细胞活性的影响。方法:采用衣霉素(TM)孵育NG108-15细胞,诱导ERS细胞模型,并将诱导后的细胞分成五组,模型组、安理申西药组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组,分别采用正常空白血清、安理申含药血清、高、中、低剂量柴胡疏肝散含药血清进行干预,同时设置正常空白血清孵育的未经TM诱导的正常组。观察各组细胞的活性。结果:柴胡疏肝散高、中、低剂量组,细胞的活性明显高于模型组细胞的活性(P0.05);西药安理申组和柴胡疏肝散高剂量组细胞的活性均明显高于其他各组(P0.05),且两者之间无明显差异(P0.05)。结论:柴胡疏肝散含药血清对正常NG108-15神经细胞没有明显毒副作用,但其可明显提高衣霉素诱导的内质网应激NG108-15细胞的生存率,其机制可能与柴胡疏肝散缓解衣霉素诱导的细胞内质网应激有关。     

黄芪含药血清对人乳腺癌MCF-7细胞的实验研究

目的:研究不同浓度黄芪含药血清对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞增殖和细胞周期的作用以及Bcl-2蛋白表达的影响,初步探讨黄芪的植物雌激素效应情况.方法:采取MTT法观察不同含药血清组对人乳腺癌MCF-7细胞在不同时间段(24h,48h,72h)的增殖活性,检测细胞周期及细胞凋亡率,检测细胞凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达.结果:黄芪含药血清可以抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并且呈现不同剂量的梯度性;不同浓度黄芪含药血清均不能诱导细胞的凋亡;但黄芪高剂量组可以明显的增加G0/G1期比例;黄芪含药血清可以上调Bcl-2蛋白的表达.结论:黄芪含药血清可以抑制MCF-7细胞的增殖;高剂量组可以使MCF-7固定在G0/G1期;可部分上调Bcl-2蛋白的表达,抑制细胞凋亡.     

西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7细胞增殖的影响

研究西黄丸含药血清对人乳腺癌细胞MDA-MB-435和MCF-7细胞增殖以及Bcl-2,Bax,TP53 mRNA及蛋白表达的影响,以期探讨西黄丸抗乳腺癌的作用特点和机制。大鼠灌胃给药制备西黄丸含药血清,实验设置大鼠空白血清组(Control)和西黄丸含药血清组(XH),以含药血清干预人乳腺癌细胞株MDA-MB-435和MCF-7,MTT法检测细胞增殖,RT-PCR法检测Bcl-2,Bax,TP53 mRNA的表达,免疫荧光法检测Bax蛋白的表达。结果显示,西黄丸大鼠含药血清可抑制MDA-MB-435细胞增殖(P0.05),西黄丸大鼠含药血清可以提高MDA-MB-435细胞中TP53和Bax mRNA以及Bax蛋白的表达(P0.05),降低Bcl-2/Bax的比值(P0.05)。同时西黄丸含药血清可以上调MCF-7细胞中Bax mRNA,并降低Bcl-2/Bax的比值(P0.05),而西黄丸含药血清干预MCF-7细胞后TP53 mRNA和Bax蛋白表达无显著性差异。结果表明,西黄丸含药血清可诱导雌激素受体阴性乳腺癌细胞凋亡,机制有可能是通过上调TP53 mRNA表达,从而诱导凋亡蛋白Bax表达,促进Bax向线粒体转移,最终发挥诱导细胞凋亡作用。     

下瘀血汤对肝癌细胞生物活性及Nanog信号通路表达的影响

目的:研究下瘀血汤对肝癌细胞的作用以及对Nanog信号通路的影响。方法:将HepG2细胞分为空白血清组、低剂量含药血清组、中剂量含药血清组;高剂量含药血清组,通过MTT、流式细胞仪、Transwell测肝癌细胞增殖、凋亡及侵袭情况,实时PCR、蛋白质印迹法测Nanog mRNA、Bcl-2、胱天蛋白酶-3水平。结果:空白血清组肝癌细胞的OD值及侵袭数量高于中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),肝癌细胞凋亡率低于低剂量、中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),高剂量含药血清组肝癌细胞OD值及侵袭数量最少、凋亡最高;空白血清组肝癌细胞中Nanog mRNA及Bcl-2蛋白表达高于低剂量、中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),胱天蛋白酶-3的蛋白表达水平低于低剂量、中剂量、高剂量含药血清组(P<0.05),与低剂量、中剂量剂量含药血清组比较,高剂量含药血清组肝癌细胞中Nanog mRNA及Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),胱天蛋白酶-3蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:下瘀血汤通可抑制肝癌细胞的活性及其侵袭力、促进癌细胞的凋亡,其作用机制可能调控与Nanog信号通路,从而促进胱天蛋白酶-3的表达、抑制Bcl-2水平有关。     

大蒜素逆转人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的研究

[目的]探索大蒜素对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的逆转作用及调控机制。[方法]以对数生长期人乳腺癌耐顺铂MCF-7/DDP细胞为受试细胞,设空白对照组(DMSO)、大蒜素(20μg/mL)单药组、顺铂(6μg/mL)单药组、联合组(大蒜素20μg/mL+顺铂6μg/mL)。药物干预48 h后,噻唑蓝(MTT)染色法检测MCF-7/DDP细胞增殖抑制率,应用Annexin V-FITC染色、碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡和分析细胞周期分布,Western blot法检测细胞凋亡相关调控蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)]和细胞周期相关调控蛋白[特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1),周期蛋白依赖激酶2、4、6(CDK2、CDK4、CDK6)]的表达。[结果]与顺铂单药组比较,联合组MCF-7/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率升高,G0/G1期MCF-7/DDP细胞比例升高,Bax表达量升高而Bcl-2表达量降低、Bax/bcl-2值升高,Cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达量降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组比较,大蒜素单药组MCF-7/DDP细胞G0/G1期比例升高,Bax表达量升高且Bcl-2表达量降低、Bax/bcl-2值升高,Cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达量降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。[结论]大蒜素具有逆转人乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药性的药理学作用,可能与调节细胞凋亡、周期相关蛋白表达进而诱导MCF-7/DDP细胞凋亡、阻滞其细胞周期进程有关。     

扶正消瘤方对人乳腺癌MCF-7干细胞体外增殖及凋亡的影响

目的:观察扶正消瘤方含药血清对人乳腺癌MCF-7干细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用体外悬浮培养乳腺癌MCF-7干细胞作为研究对象,中药灌胃方法制备大鼠含药血清;实验设计为空白对照组,无药血清模型组、中药等效量组、中药1倍量组、中药2倍量组共5组;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,荧光免疫细胞化学法检测细胞凋亡情况。结果:中药含药血清等效剂量组、中药1倍剂量组和中药2倍剂量组对人乳腺癌MCF-7干细胞的抑制率均明显高于空白对照组和无药血清组(P0.05);与空白对照组及无药血清组比较,扶正消瘤方含药血清组人乳腺癌MCF-7干细胞凋亡明显增多。结论:扶正消瘤方能明显抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,诱导其细胞凋亡。     

三黄煎剂抑制Aurora激酶A增强乳腺癌MCF-7细胞对他莫昔芬治疗敏感性的研究

目的探讨三黄煎剂对他莫昔芬作用于MCF-7细胞药效的影响及相关机制。方法采用CCK-8法检测三黄煎剂对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,q-PCR法、Western Blot法检测三黄煎剂对MCF-7细胞Aurora A、p53的mRNA及蛋白表达水平的影响。siRNA沉默MCF-7细胞中Aurora A,并用CCK-8法检测对三黄煎剂作用于MCF-7细胞增殖抑制的影响。CCK-8法、Annexin V-FITC/PI法检测三黄煎剂联合他莫昔芬对MCF-7细胞增殖抑制率、凋亡率的影响。Western Blot法检测三黄煎剂联合他莫昔芬对MCF-7细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果三黄煎剂对MCF-7细胞增殖抑制率呈浓度梯度依赖增长(P0.05),给药48 h疗效好于24h(P0.05),与给药72h无统计学差异(P0.05)。三黄煎剂能够调节MCF-7细胞Aurora A、p53蛋白及mRNA的表达。siRNA沉默Aurora A将三黄煎剂对MCF-7细胞增殖抑制率下调了50.0%(49.2%~24.8%)。三黄煎剂与他莫昔芬联用能够增加他莫昔芬对MCF-7细胞的增殖抑制率及凋亡率,调节凋亡相关蛋白c-PARP,c-Caspase 3,Bcl-2/Bax水平。结论三黄煎剂能够抑制MCF-7细胞增殖并增加MCF-7细胞对内分泌治疗药物他莫昔芬的敏感性,这可能与三黄煎剂对Aurora激酶A的抑制有关。     

温下方含药血清诱导A549/DDP细胞凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响

目的:研究温下方含药血清诱导人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP凋亡及对Bcl-2,Bax,p53蛋白表达的影响。方法:制备温下方含药血清,高效液相色谱法(HPLC)定性检测含药血清中人参皂苷Rb1、大黄素和乌头碱。A549/DDP细胞分为DDP干预组,含药血清+DDP干预组,正常血清+DDP干预组。孵育24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测Bcl-2,Bax及p53蛋白表达。结果:HPLC结果显示含药血清中含有人参皂苷Rb1、大黄素及乌头碱。含药血清作用后,与DDP干预组比较,含药血清+DDP干预组细胞凋亡率增高至(21.82±3.27)%(P<0.05);细胞内Bcl-2蛋白表达降低至2.81±0.02(P<0.05);Bax蛋白表达增高至2.90±0.08(P<0.05);p53蛋白表达增高至3.58±0.09(P<0.05)。结论:温下方含药血清明显诱导A549/DDP细胞凋亡,显著降低Bcl-2蛋白表达,提高Bax,p53蛋白表达,可能从诱导耐药细胞凋亡角度逆转耐药。     

柴胡疏肝散加减对乳腺增生患者局部症状及血清性激素水平的影响

目的:探讨柴胡疏肝散加减对乳腺增生患者局部症状及血清性激素水平的影响。方法:选取82例乳腺增生患者,按随机数字表法分为观察组和对照组各41例。对照组采用常规西药治疗,观察组在对照组基础上采用柴胡疏肝散加减治疗。观察治疗前后两组临床症状、血清性激素水平以及乳腺超声指标的变化情况,并统计两组临床总有效率及停药3个月后临床复发率和治疗期间不良反应发生情况。结果:观察组总有效率为95.12%,显著高于对照组的总有效率78.04%(P<0.05); 两组治疗后乳腺疼痛、乳腺肿块、乳头溢液及全身伴随症状积分,乳腺腺体厚度和乳腺导管最粗管径,血清雌二醇、催乳素水平均明显降低(P<0.05),且观察组各临床症状积分、乳腺超声指标及性激素指标中雌二醇和催乳素水平均明显低于对照组(P<0.05); 两组治疗后性激素指标中的孕酮水平均明显升高(P<0.05),且观察组孕酮水平明显高于对照组(P<0.05)。停药3个月后,观察组复发率为6.67%,明显低于对照组复发率36.36%(P<0.05); 观察组的不良反应发生率为9.76%,明显低于对照组的不良反应发生率34.15%(P<0.05)。结论:柴胡疏肝散加减能够调节患者内分泌激素紊乱状态,缩小肿块,改善局部症状,减少临床复发,安全性高,疗效确切。     

柴胡疏肝散治疗缺血性中风后抑郁症30例

目的观察柴胡疏肝散治疗缺血性中风后抑郁症的临床效果。方法 60例随机分为观察组30例和对照组30例,治疗组给予柴胡疏肝散加味口服,对照组给予氟西汀口服。结果总有效率观察组为93.33%,对照组为73.33%,两组比较差异有统计学意义(P0.05);两组治疗后HAMD和MBI评分均较治疗前显著改善,且柴胡疏肝散组两项评分改善程度显著优于对照组(P0.05)。结论柴胡疏肝散治疗缺血性中风后抑郁症可缓解抑郁症状,促进日常生活活动能力提高。     

柴胡疏肝散加味治疗卒中后抑郁的临床观察与机制分析

目的:观察柴胡疏肝散加味治疗卒中后抑郁(PSD)的临床疗效,并探讨其机制。方法:将94例PSD患者随机分组,治疗组予柴胡疏肝散加味,对照组予氟西汀,治疗4周后评价疗效、HAMD评分和测定血清单胺类神经递质水平,以TESS量表评定不良反应。结果:两组间疗效无显著性差异(P>0.05)。两组治疗后HAMD评分均较治疗前明显改善(P<0.01),组间无显著性差异。两组治疗后血清单胺类神经递质水平均较治疗前明显升高(P<0.05或P<0.01),组间无显著性差异。不良反应方面,治疗组较对照组明显减少(P<0.05或P<0.01)。结论:柴胡疏肝散加味治疗卒中后抑郁疗效确切,不良反应少,其作用机制可能与其升高患者血清单胺类神经递质水平有关。     

阳和汤血清增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞 抑制作用机制的研究

目的:研究小鼠阳和汤血清增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用的机制。方法:用1.08 g.mL-1阳和汤按小鼠体重20 mL.kg-1连续ig 7 d,末次给药1 h采血,分离得含阳和汤1 g.mL-1的血清(YHDS)。用SMY培养细胞24 h,5-溴脱氧尿核苷(BrdU)掺入法检测细胞增殖,软琼脂克隆形成法检测细胞分化,Western blotting检测Bax/Bcl-2表达,原位末端标记检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位。结果:小鼠阳和汤血清能促进阿霉素引起的MCF-7细胞生长抑制(抑制率为61.25%±1.66%,P<0.05),上调MCF-7细胞Bax/Bcl-2表达比率,增加细胞凋亡。小鼠阳和汤血清对MCF-7细胞有诱导分化作用(与对照组比较克隆数减少了68.4%,P<0.05)。结论:阳和汤血清有增强阿霉素对MCF-7肿瘤细胞抑制作用,其机制与易化肿瘤细胞凋亡和诱导肿瘤细胞分化有关。     

灵芝孢子油对MCF-7细胞凋亡及迁移的影响

目的：观察灵芝孢子油对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：CCK-8法检测灵芝孢子油对MCF-7增殖的影响;伤口愈合实验观察灵芝孢子油对MCF-7细胞迁移的作用;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT—PCR法检测抗凋亡基因Bcl-2、促凋亡基因Bax及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达水平。结果：不同浓度的灵芝孢子油对MCF-7的增殖和迁移均有一定程度的抑制作用,且呈时间、剂量依赖性;灵芝孢子油能显著诱导MCF-7细胞凋亡;RT—PCR结果显示,灵芝孢子油能上调Bax同时下调Bcl-2和VEGF的mRNA表达水平。结论：灵芝孢子油能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移,并促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调VEGF和Bcl-2／Bax的比值有关。     

胃脘痛患者行柴胡疏肝散与四君子汤治疗的效果观察

目的研究分析胃脘痛患者行柴胡疏肝散与四君子汤治疗的效果。方法 2014年7月—2016年7月期间,选择本院接收的胃脘痛患者78例作为研究对象,将78例患者随机分为两组,观察组39例和对照组39例,对照组患者应用奥美拉唑胶囊、阿莫西林胶囊、胶体果胶铋胶囊进行治疗,在对照组治疗的基础上,观察组患者应用柴胡疏肝散与四君子汤进行治疗,评价观察组与对照组的治疗效果,并进行比较分析,评价指标包括治疗有效率、中医症候积分以及复发率。结果观察组患者治疗有效率比对照组高,两组数据差异显著,有统计学意义(P0.05);两组患者治疗前中医症候积分无显著差异,无统计学意义(P0.05);观察组患者治疗后中医症候积分低于对照组,有统计学意义(P0.05);观察组患者胃脘痛复发率与对照组比存在较大差异,有统计学意义(P0.05)。结论胃脘痛患者行柴胡疏肝散与四君子汤治疗的效果较好,能有效改善患者的临床症状,具有较高的临床应用价值。     

白花丹素对乳腺癌细胞凋亡和自噬的影响

目的 观察白花丹素对乳腺癌细胞凋亡及自噬的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用不同浓度白花丹素作用于乳腺癌MCF-7和BT549细胞,CCK-8法检测细胞存活率,DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位(MMP),流式细胞术检测细胞凋亡情况,免疫荧光检测细胞内LC3B蛋白...     

柴胡疏肝散合四君子汤治疗胃脘痛35例

目的：观察柴胡疏肝散和四君子汤治疗胃脘痛的临床疗效。方法：将70例胃脘痛患者按照自愿的原则分为治疗组和对照组,治疗组予以柴胡疏肝散合四君子汤为基本方加减治疗胃脘痛,对照组予以口服多潘立酮片、维U颠茄铝胶囊Ⅱ、西咪替丁片等药物治疗。1个月为1个疗程,观察临床症状及体征改善情况。结果：治疗组总有效率88．6％,对照组总有效率62．9％（P〈0．05）,治疗组临床疗效优于对照组。结论：柴胡疏肝散和四君子汤加减对胃脘痛有较好疗效。