寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织Tf表达的影响

目的 探讨寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织转铁蛋白(Transferrin,Tf)表达的影响.方法 CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为四组,分别为模型组、寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组和寿胎丸低剂量组,从妊娠第1天开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用免疫组化与蛋白印迹方法检测各组蜕膜组织Tf的表达.结果 模型组与正常组相比,蜕膜Tf表达明显降低,差异有显著统计学意义(P＜0.01);寿胎丸高剂量组与模型组相比,蜕膜Tf表达升高,差异有显著统计学意义(P＜0.01);寿胎丸中、低剂量组与模型组相比,蜕膜Tf表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 寿胎丸通过上调复发性流产小鼠蜕膜组织Tf的表达,从而实现维持妊娠,这可能是其安胎的作用机制之一.     

寿胎丸对RSA模型小鼠子宫蜕膜Annexin A_2及TTR表达影响的研究

目的:分析寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响。方法:建立复发性流产模型。CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为4组,分别为模型组、寿胎丸高剂量组、寿胎丸中剂量组和寿胎丸低剂量组,从妊娠第1 d开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用蛋白印迹和免疫组化方法检测差异蛋白质Annexin A2及TTR的蛋白表达。结果:小鼠模型组与正常组相比,蜕膜Annexin A2表达明显降低,TTR表达明显下降,差异有显著统计学意义(P<0.01);寿胎丸高、中、低剂量组与模型组相比,蜕膜Annexin A2表达均升高,寿胎丸高剂量组蜕膜TTR表达升高,差异有显著统计学意义(P<0.01)。结论:寿胎丸通过上调Annexin A2、TTR蛋白的表达,从而实现维持妊娠,降低胚胎丢失率,这可能是其安胎的作用机制之一。     

基于JAK1/STAT3通路的寿胎丸对复发性流产小鼠细胞自噬的影响

目的 观察寿胎丸对复发性流产（RSA）小鼠的妊娠保护作用，基于JAK1/STAT3通路及细胞自噬探讨其作用机制。方法 分别构建正常妊娠小鼠模型及RSA小鼠模型，将小鼠分为空白组、模型组、地屈孕酮组和寿胎丸组，分别予相应药物干预，连续12 d。观察小鼠妊娠情况，计算胚胎丢失率及子宫脏器系数；HE染色观察小鼠蜕膜及胎盘组织病理改变；ELISA检测血清孕酮、β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）含量；Western blot检测蜕膜组织Janus激酶1(JAK1)、p-JAK1、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、p-STAT3、ATG5、Beclin1、LC3蛋白表达；实时荧光定量PCR检测蜕膜组织JAK1、STAT3、ATG5、Beclin1 mRNA表达。结果 与空白组比较，模型组小鼠胚胎丢失率显著升高（P<0.01），子宫脏器系数显著降低（P<0.01）；蜕膜及胎盘组织形态受损，血清孕酮、β-HCG含量显著减少（P<0.01）；蜕膜组织p-JAK1、p-STAT3、ATG5、 Beclin1蛋白表达及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著降低（P<0.01, P&l...     

寿胎丸对反复自然流产模型小鼠子宫蜕膜蛋白表达的影响

目的从分子水平探讨寿胎丸安胎的作用机制。方法 CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为模型组和寿胎丸高、中、低剂量组,从妊娠第1日开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用免疫组化方法检测差异蛋白质热休克蛋白27、α-烯醇化酶、转铁蛋白、膜联蛋白 A2蛋白表达。结果与正常组比较,模型组子宫蜕膜热休克蛋白27、α-烯醇化酶表达明显升高,转铁蛋白、膜联蛋白A2表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,寿胎丸高、中、低剂量组蜕膜热休克蛋白27、α-烯醇化酶表达均降低,膜联蛋白A2表达均升高,寿胎丸高剂量组子宫蜕膜转铁蛋白表达升高,差异有统计学意义(P＜0.01);寿胎丸中、低剂量组蜕膜转铁蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05)。结论寿胎丸通过上述蛋白的表达,从而实现维持妊娠,降低胚胎丢失率,这可能是其安胎的作用机制之一。     

滋肾育胎丸对RSA小鼠蜕膜组织VEGF/PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达的影响

目的:探讨滋肾育胎丸对RSA小鼠蜕膜组织VEGF/PI3K/Akt信号通路中相关蛋白表达的影响。方法:取正常妊娠模型CBA×BALB/c小鼠8只作为正常组,RSA模型成功的CBA/J×DBA/2小鼠24只,按妊娠顺序随机分为模型组和黄体酮胶囊对照组和滋肾育胎丸组,每组动物数均为8只。其中正常妊娠组、模型对照组分别予以蒸馏水灌胃,黄体酮胶囊组和滋肾育胎丸组分别给予相应药物灌胃,连续15天,末次给药24h后,颈椎脱臼处死孕鼠,观察子宫和各组小鼠胚胎丢失率;取其子宫蜕膜组织,HE染色观察子宫蜕膜组织变化,蛋白免疫印迹技术(Western Blotting)检测蜕膜组织VEGF、MVD、PI3K、AKT、p-AKT和HIF-1α蛋白的表达。结果:与模型组RSA小鼠相比,黄体酮胶囊组(156mg/kg)和滋肾育胎丸组(11.7g/kg)的胚胎丢失率显著降低,子宫蜕膜组织病变明显减轻;蜕膜组织的VEGF、MVD、PI3K、AKT、p-AKT和HIF-1α蛋白的表达显著升高,而ES蛋白则显著降低。结论:滋肾育胎丸改善RSA小鼠胚胎丢失率和蜕膜血管新生与调控VEGF/PI3K/Akt通路蛋白表达有关。     

寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响

目的:分析寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜蛋白质组的影响,从分子水平探讨寿胎丸安胎的作用机制.方法:50只雌性CBA/J小鼠分别与20只雄性DBA/2和5只雄性BALB/C小鼠按2∶1合笼交配,建立复发性流产模型40只与正常妊娠模型10只.将复发性流产CBA/J×DBA/2孕鼠按妊娠先后顺序随机分为模型组(10只)、寿胎丸低剂量组(10只,3g·kg·d-1)、寿胎丸中剂量组(10只,6g·kg·d-1)和寿胎丸高剂量组(10只,12g·kg·d-1),从妊娠第1天开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,计算各组胚胎丢失率.采用双向电泳结合质谱技术分离和鉴定各组小鼠蜕膜差异表达的蛋白质,并利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能进行分析.结果:寿胎丸高、中剂量组胚胎丢失率较模型组均明显降低(p＜0.01),寿胎丸低剂量组胚胎丢失率有所降低,但与模型组相比差异无统计学意义;建立了模型组、正常组、寿胎丸高、中、低剂量组小鼠蜕膜组织的2-DE图谱,通过比较各组双向凝胶电泳图谱的差异,发现并鉴定了30个可能与复发性流产及寿胎丸干预相关的蛋白质,这些蛋白质的功能涉及绒毛外滋养细胞的侵袭、蜕膜组织血管的重建及蜕膜细胞的凋亡等.结论:寿胎丸能够降低复发性流产小鼠胚胎丢失率,具有显著的安胎作用;复发性流产是由多种蛋白质参与的复杂过程,寿胎丸可调节复发性流产小鼠蜕膜组织多种蛋白质的表达,该复方具有多靶点的作用特点.     

寿胎丸对复发性流产大鼠蜕膜细胞AQP 5、8的影响

目的探讨寿胎丸对复发性流产大鼠蜕膜细胞水通道蛋白(AQP)5、8 mRNA及蛋白表达的影响。方法取肾虚型自然流产大鼠胚胎着床部位的蜕膜组织进行原代培养,分别用寿胎丸含药血清,雌激素(E2),孕激素(P),E2+雌激素受体拮抗剂(ICI82),P+孕激素受体拮抗剂(ZXH951),寿胎丸含药血清+ICI182、或ZXH951、或ICI182+ZXH951进行干预,另设正常孕鼠血清为空白对照组,作用72h后,通过RT-PCR及Western blot方法,检测蜕膜细胞中AQP5、8 mRNA及蛋白表达的影响。结果寿胎丸及E2、P均较对照组显著提高AQP5、8mRNA及蛋白的表达(P0.05),加入ICI82或/和ZXH951后,AQP5、8 mRNA及蛋白的表达均呈下降趋势,部分有显著差异;三者对AQP5、8mRNA的调节,孕酮≈雌激素寿胎丸;三者对AQP5、8蛋白的调节,孕酮雌激素≥寿胎丸。结论蜕膜细胞中AQP5、8表达不足,可能是引起自然流产的原因之一;寿胎丸及E2、P均能显著上调蜕膜细胞中AQP5、8的表达,说明三者均能促进母胎界面的液体交换,增加母体对胎儿液体及水溶性营养物质的供应,这可能是三者起到安胎作用的机理之一;补肾安胎经典方寿胎丸对水通道蛋白的调节,说明"肾主水"与"肾主生殖"之间存在相关性,"肾主水"对"肾主生殖"有促进作用。     

减味寿胎丸对复发性自然流产(RSA)小鼠蜕膜中树突状细胞(DCs)表达干预研究

目的:研究减味寿胎丸对复发性自然流产(RSA)小鼠蜕膜中树突状细胞(DCs)表达干预。方法:建立成熟、完善的RSA小鼠蜕膜的DCs体外培养体系。检测正常妊娠和RSA小鼠蜕膜中CD83+、CD1a的表达,以及CCLl7和CCL22的表达,探讨DCs在母胎免疫耐受机制中的可能作用以及与URSA的关系。探讨寿胎丸对RSA小鼠对蜕膜DCs表达的影响,从而探讨中药对DCs影响母胎免疫耐受的干预机制。结果:RSA小鼠的蜕膜中CD83+、CD1a;CCLl7和CCL22表达与正常妊娠组比较,差异有统计学意义(P0.05);RSA小鼠的血清HCG和P值与正常妊娠组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:减味寿胎丸可以通过提升小鼠血清HCG、P值;降低CD83+的表达,提高CDla+的表达;增加母胎界面CCLl7、CCL22表达,从而起到多途径防治RSA的目的。     

寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织α-烯醇化酶表达的影响

目的通过观察寿胎丸对复发性流产小鼠蜕膜组织α-烯醇化酶表达的影响,探讨其安胎的作用机制。方法 CBA/J×BALB/C建立正常妊娠模型,CBA/J×DBA/2建立复发性流产模型,将复发性流产模型CBA/J×DBA/2孕鼠按怀孕先后顺序随机分为模型组及寿胎丸高、中、低剂量组,从妊娠第1日开始灌胃给药,至孕14 d处死小鼠,采用免疫组化与蛋白印迹方法检测各组蜕膜组织α-烯醇化酶的表达。结果小鼠模型组与正常组比较,α-烯醇化酶表达明显升高,差异有统计学意义(P0.01);与模型组比较,寿胎丸高、中、低剂量组α-烯醇化酶表达均降低,差异有统计学意义(P0.01);寿胎丸高剂量组α-烯醇化酶表达与中、低剂量组之间差异无统计学意义(P0.05)。结论寿胎丸通过下调复发性流产小鼠蜕膜组织α-烯醇化酶的表达,从而实现维持妊娠,这可能是其安胎的作用机制之一。     

寿胎丸对小鼠自然流产模型蜕膜组织SOCS3蛋白表达影响

目的:探讨寿胎丸对反复自然流产模型小鼠蜕膜组SOCS3蛋白表达的影响.方法:设立正常妊娠与自然流产模型.并将自然流产模型小鼠随机分为4组,分别为模型组、寿胎丸低剂量组、寿胎丸中剂量组、寿胎丸高剂量组,应用免疫组化法检测孕14 d各组蜕膜组织SOCS3蛋白的表达.结果:SOCS3在各组均有表达,模型组的SOCS3的表达明显低于正常组(P＜0.05),寿胎丸低、中、高剂量的SOCS3表达高于模型组(P＜0.05),但与正常妊娠组无明显差异(P＞0.05).结论:寿胎丸可能通过提高自然流产小鼠模型SOCS3蛋白表达水平,调控Th1向Th2分化,以达到治疗反复自然流产的目的.