血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠骨髓源内皮祖细胞衰老及p53、SIRT1蛋白表达的影响

目的观察血府逐瘀汤对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导大鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)衰老及对p53、SIRT1蛋白表达的影响,探讨其抗衰老的作用机制。方法体外培养EPCs,加入100 nmol/L AngⅡ诱导细胞衰老,建立EPCs衰老模型,随机分为正常组、模型组、miR-34a抑制剂组、血府逐瘀汤5%药物血清组、血府逐瘀汤10%药物血清组、血府逐瘀汤15%药物血清组。β-半乳糖苷酶染色法检测内皮祖细胞衰老,Western blot检测EPCs中p53蛋白、SIRT1蛋白的表达。结果与正常组比较,模型组EPCs衰老数量明显增多(P0.01),p53蛋白表达量明显升高(P0.01),SIRT1蛋白表达量明显降低(P0.01);与模型组比较,miR-34a抑制剂组和5%、10%、15%药物血清组EPCs衰老数量显著减少(P0.01),miR-34a抑制剂组和10%、15%药物血清组p53蛋白表达显著降低(P0.05,P0.01),miR-34a抑制剂组和10%、15%药物血清组SIRT1蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01);与miR-34a抑制剂组比较,5%、10%、15%药物血清组EPCs衰老数量显著增多(P0.05,P0.01),p53蛋白表达明显升高(P0.05,P0.01),SIRT1蛋白表达明显下降(P0.01);与5%药物血清组比较,10%、15%药物血清组EPCs衰老数量明显减少(P0.01),p53蛋白表达显著降低(P0.01),SIRT1蛋白表达显著升高(P0.01);与10%药物血清组比较,15%药物血清组EPCs衰老数量明显减少(P0.01),p53蛋白表达差异不明显,SIRT1蛋白表达明显升高(P0.01)。结论血府逐瘀汤能延缓EPCs的衰老,可明显降低衰老EPCs中p53蛋白的表达,显著增加衰老EPCs中SIRT1蛋白的表达,其中以15%药物血清组效果最佳。     

补肾活血中药配合艾灸对多囊卵巢综合症患者性激素水平的影响

目的:观察补肾活血中药配合艾灸治疗多囊卵巢综合症的疗效及对患者性激素水平的影响。方法:将86例多囊卵巢综合症患者随机分为两组。对照组42例采用去氧孕烯炔雌醇片治疗,治疗组在对照组基础上予归肾丸合桃红四物汤配合艾灸治疗。观察比较血清黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、雌激素(E2)、睾酮(T)、月经情况、Lehmann痤疮分级、Ferriman-Gallwey多毛评分。结果:两组患者治疗后黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、总睾酮(T)水平均降低,差异有统计学意义(P0.05);两组患者治疗后血清雌二醇(E2)均升高,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后比较,治疗组患者黄体生成素(LH)、促卵泡生成素(FSH)、总睾酮(T)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05),且治疗组患者血清雌二醇(E2)高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后两组患者Lehmann痤疮分级均好转,差异有统计学意义(P0.05),治疗后治疗组患者Lehmann痤疮分级程度低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后Ferriman-Gallwey评分均降低,差异有统计学意义(P0.05);治疗后比较,治疗组Ferriman-Gallwey评分低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。两组疗效比较,治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾活血中药配合艾灸治疗多囊卵巢综合症改善患者性激素水平,有较好疗效。     

自拟更年汤对肾阳虚型围绝经期模型大鼠卵巢细胞凋亡相关因子的影响

目的探讨自拟更年汤对肾阳虚型围绝经期模型大鼠卵巢组织形态学及卵巢颗粒细胞凋亡因子bax、bax mRNA、bcl-2、bcl-2 mRNA的影响。方法选用自然老化的围绝经期雌性SD大鼠,臀部肌肉左右交替肌注氢化可的松构建肾阳虚型围绝经期大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为更年汤组、教材方组、利维爱组、生理盐水组;另选择4月龄SD雌性大鼠20只作为青年组,18月龄SD雌性大鼠20只作为老年组。青年组、老年组、生理盐水组均给予生理盐水灌胃,各给药组给予相应药物灌胃,灌胃15 d后处死大鼠,分离摘取双侧卵巢,运用病理切片观察卵巢组织大体形态,运用免疫组化及原位杂交法检测卵巢颗粒细胞凋亡因子bax、bax mRNA、bcl-2、bcl-2 mRNA表达情况。结果各给药组卵泡发育良好情况优于老年组和生理盐水组(P均0.05),卵泡闭锁、卵泡扩张情况轻于老年组和生理盐水组(P均0.05);自拟更年汤组与利维爱组卵泡发育良好情况优于教材方组(P均0.05),自拟更年汤组与利维爱组比较差异无统计学意义(P0.05);自拟更年汤组卵泡闭锁、卵泡扩张情况轻于教材方组和利维爱组(P均0.05),教材方组与利维爱组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。各给药组bax、bax mRNA阳性表达明显低于老年组和生理盐水组(P均0.05),bcl-2与bcl-2 mRNA阳性表达明显高于老年组和生理盐水组(P均0.05);自拟更年汤组与利维爱组bax、bax mRNA阳性表达明显低于教材方组(P均0.05),bcl-2与bcl-2 mRNA阳性表达明显高于教材方组(P均0.05),自拟更年汤组bax、bax mRNA、bcl-2、bcl-2 mRNA阳性表达与利维爱组比较差异无统计学意义(P均0.05)。结论自拟更年汤能促进卵泡发育,抑制卵泡闭锁和扩张,能上调卵巢颗粒细胞抑制凋亡因子bcl-2、bcl-2 mRNA的阳性表达,抑制促凋亡因子bax、bax mRNA的阳性表达。     

体外适宜温热刺激对络脉相关血管内皮细胞延缓衰老物质P53、SIRT1含量影响的机制研究

目的研究体外适宜温热刺激对络脉相关血管内皮细胞中P53、SIRT1基因和蛋白表达的影响,探讨体外适宜温热刺激的延缓衰老的作用机制。方法将第二代人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)分为正常组(37℃)和适宜温热刺激组(40℃),正常组不作何处理,适宜温热刺激组置于40℃培养箱刺激30min,每天2次,各组于第1天、2天、3天刺激结束4～6h后用MTT比色法检测HUVECs生长活力,第3天刺激结束6h后用QPCR和Western blot技术检测P53、SIRT1基因和蛋白表达。结果两组HUVECs生长活力逐渐增强,与第1天和第2天比差异均有统计学意义(P0.001);每天适宜温热刺激组细胞生长活力较正常组增强,差异均有统计学意义(P0.01,P0.001)。第3天,与正常组比,适宜温热刺激组HUVECs内P53的基因和蛋白表达均降低(P0.01),SIRT1的基因和蛋白表达均升高(P0.05,P0.01)。结论体外适宜温热刺激能调控络脉相关血管内皮细胞延缓衰老物质P53、SIRT1的表达,为研究体外适宜温热刺激络脉发挥"延缓衰老"生物学效应提供了实验依据。     

六味地黄丸拮抗雷公藤对雌鼠生殖系统影响的实验研究

目的:观察补肾中药拮抗雷公藤对雌鼠生殖系统影响的作用。方法:选出具正常性动周期的雌性大鼠45只,随机分为3组:治疗组(雷公藤多苷与六味地黄丸联合应用)、对照组(雷公藤多苷组)、空白组,均喂养30天后解剖。结果:治疗组与对照组比较性动周期延长,雌、孕激素水平增高,雌性生殖器官重量增加,bax、p53和fas表达上调不明显,与空白组比较无明显差异(P>0.05)。卵泡数量增多,卵泡成长过程活跃,成熟卵泡多,体积大,颗粒细胞层次多,卵泡液含量多;黄体数量多,发育良好,卵母细胞透明带(ZP)未见明显改变。结论:六味地黄丸可拮抗雷公藤致雌鼠生殖系统的毒副作用。     

天门冬对氟中毒大鼠机体氧化应激的影响

目的研究不同剂量天门冬对燃煤型氟中毒大鼠血清氧化应激的影响。方法选用贵州医科大学动物实验中心提供60只(90~100)g大鼠模拟氟疫区动物模型,分为5个不同组。染氟90天股动脉取血处死大鼠,分离血清,检测血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)。结果各模型组大鼠血清GSH-Px、T-AOC、SOD低于对照组,均有统计学意义(P0.05)。染氟组血清GSH-Px、T-AOC、SOD明显低于各组,且均有统计学意义(P0.05)。各天门冬组比较,随剂量增高,GSH-Px高剂量与低剂量和中剂量比较,有统计学意义(P0.05);T-AOC、SOD逐渐增高,且均有统计学意义(P0.05)。各模型组大鼠血清MDA高于对照组,染氟组血清MDA明显高于各组,各天门冬组比较,随剂量增加,血清MDA逐渐降低,均有统计学意义(P0.05)。结论通过不同剂量天门冬灌胃治疗,大鼠抗氧化能力得到提升,降低机体的氧化应激产物,且高剂量效果更佳。     

基于microRNA-34a/SIRT1/p53通路探讨三七皂苷R_1对血管内皮细胞衰老的影响

该研究旨在探讨三七皂苷R_1能否通过调控miRNA-34a/SIRT1/p53通路发挥延缓H_2O_2诱导的血管内皮细胞衰老的作用。以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为研究对象,建立H_2O_2诱导的衰老模型,以白藜芦醇作为阳性对照药,实验分为青年组、H_2O_2模型组、三七皂苷R1组、白藜芦醇组。药物组提前加入三七皂苷R1(30μmo L·L~(-1))或白藜芦醇(10μmo L·L~(-1))干预24 h,然后用H_2O_2(100μmo L·L~(-1))造模4 h,最后换成完全培养基培养24 h。采用衰老特异性β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法鉴定细胞衰老程度,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,WST-1法检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活力,QRT-PCR检测miRNA-34a,SIRT1和p53的核酸表达,Western-blot技术检测SIRT1,p53和衰老相关蛋白p21,p16的蛋白表达。结果发现,与模型组相比,三七皂苷R1组和白藜芦醇组可有效减低衰老内皮细胞的β-半乳糖苷酶染色阳性率,增强细胞增殖能力和SOD活力,减少G0/G1期细胞比例,增加S期细胞比例,抑制了miRNA-34a和p53的核酸表达,促进了SIRT1的核酸表达,此外抑制了p53,p21和p16的蛋白表达,促进了SIRT1的蛋白表达,差异均有统计意义(P0.05)。该研究表明,H_2O_2诱导的衰老的内皮细胞可以作为衰老研究的模型,三七皂苷R1延缓血管内皮细胞衰老的效果明显,其机制可能是通过调控miRNA-34a/SIRT1/p53通路延缓了血管内皮细胞衰老的进程。     

滋阴补阳序贯治疗联合促排卵对PCOS不孕症患者子宫内膜HOXA10的调控

目的研究滋阴补阳序贯治疗对多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症患者的子宫内膜容受性影响的临床疗效及对其子宫内膜组织同源框基因(HOXA10)的调控。方法选取前来江苏省中医院生殖医学科就诊的PCOS不孕症患者共80例,按照随机数字表法分为治疗组和对照组。对照组给予克罗米芬(clomiphene,CC)+人绝经期促性腺激素(human menopausal gonadotropin,HMG)+人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)治疗,治疗组给予CC+HMG+HCG+滋阴补阳序贯治疗。疗程均为3个周期,观察2组患者以下指标:测量子宫内膜增生中晚期及分泌中期子宫内膜厚度(Em);检测黄体中期子宫内膜螺旋动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI);检测黄体中期患者血清中雌二醇(E2)、孕酮(P)的水平;检测黄体中期2组患者子宫内膜组织中的HOXA10 mRNA表达情况;比较2组的临床妊娠率、流产率。结果治疗组与对照组比较,治疗组卵泡中晚期及黄体中期Em均增加,卵泡中晚期Em 2组比较有统计学差异(P0.05),黄体中期Em 2组比较无统计学意义(P0.05);治疗组与对照组比较,治疗组E2及P数值均升高,有统计学意义(P0.05);与对照组比较,治疗组PI和RI均降低,有统计学意义(P0.05);治疗组HOXA10 mRNA表达升高,有统计学意义(P0.01);与对照组比较,治疗组妊娠率升高,有统计学差异(P0.05),流产率降低,无统计学意义(P0.05)。结论滋阴补阳序贯治疗可提高PCOS患者的妊娠率,降低其流产率,其机制可能与增加PCOS患者的HOXA10 mRNA的表达,降低PCOS患者的子宫螺旋动脉PI、RI,健全黄体功能治疗有关,从而改善子宫内膜容受性,值得在临床上进一步推广运用。     

基于沉默信息调节因子1/p53信号通路探讨艾灸“足三里”延缓衰老的作用机制

目的:观察艾灸“足三里”对亚急性衰老模型大鼠沉默信息调节因子1(SIRT1)/p53信号通路的影响，探讨SIRT1/p53通路在艾灸“足三里”延缓大鼠主动脉衰老中的作用机制。方法:SD大鼠分为空白组、模型组、预防组及治疗组，每组20只。以D-半乳糖溶液腹腔注射复制亚急性衰老模型。预防组每天上午造模后以艾炷灸“足三里”,每次灸3壮，每日1次，连续造模及治疗42 d。治疗组造模成功后次日开始“足三里”艾炷灸，每次灸3壮，每日1次，共治疗28 d。观察各组大鼠一般状况，ELISA法检测大鼠血清SIRT1、p53、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量，HE染色法观察主动脉组织的衰老情况，荧光定量PCR法及Western blot法检测主动脉组织SIRT1、p53 mRNA及蛋白表达。结果:与空白组比较，模型组大鼠出现衰老症状，预防组一般状况与空白组接近，治疗组略好于模型组。与空白组比较，模型组大鼠血清p53含量升高(P<0.05),SIRT1、VEGF、eNOS含量降低(P<0.05);与模型组比较，预防组及治疗组大鼠血清p53含量降低(P<0.0...     

中西医结合治疗肾虚血瘀型多囊卵巢综合征临床观察

目的:观察中西医结合治疗多囊卵巢综合征的临床疗效。方法:60例多囊卵巢综合征患者,随机分为治疗组和对照组,每组30例,对照组口服达英-35治疗;治疗组在对照组治疗基础上加用补肾化瘀方治疗。结果:总有效率观察组86.6%,对照组70.0%,2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。2组治疗后卵巢体积及卵泡数目均变小或少,与本组治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗后观察组后卵巢体积及卵泡数目均小于对照组,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。2组治疗后黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)值均有改善,与本组治疗前比较,差异有统计学意义(P0.05);治疗后观察组LH、LH/FSH、T值改善明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:中西医结合治疗多囊卵巢综合征临床疗效好,并可改善患者临床症状。