仙茅盐炙工艺的优化

目的优化盐炙仙茅的炮制工艺。方法采用正交试验结合UPLC法,以2种酚苷成分(仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷)含有量为评价指标,考察盐水比例、炒制时间、炒制温度对炮制工艺的影响。结果最佳炮制工艺为每100 kg仙茅饮片用2 kg食盐(食盐∶水=1∶15),闷润2 h,在110～120℃下炒制5 min,仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷含有量分别为0.10%、0.490 2%,综合评分99.21。结论该方法稳定可行,可用于盐炙仙茅。     

仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在Caco-2细胞模型中吸收的机制

目的研究仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在人结肠癌细胞Caco-2细胞模型中的吸收机制。方法利用Caco-2细胞模型研究仙茅苷(curculigoside)、苔黑酚葡萄糖苷(orcinol glucoside)的双向跨膜转运特征,通过高效液相色谱法测定二者的质量浓度,计算其表观渗透系数(P_(app)),考察时间、药物质量浓度对二者吸收和转运的影响。结果仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷在Caco-2细胞模型中,各自在细胞绒毛面Apical(AP)和基底面Basolateral(BL)的双向转运基本相同,随着药物浓度的增加转运速率在减小,随着转运时间的延长转运速率略有减小。结论仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷具有良好的肠吸收特性,在Caco-2细胞模型中的吸收为被动转运。     

仙茅化学成分的研究

目的研究仙茅Curculigo orchioides Gaertn.的化学成分。方法仙茅95%乙醇提取物的正丁醇部位采用硅胶、大孔树脂、Sephadex LH-20进行分离纯化,根据波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为anacardoside(1)、苔黑酚葡萄糖苷(2)、4-羟基-3-甲氧基苯基-1-丙烷-1,2-二醇(3)、苄基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、淫羊藿次苷F2(5)、丁香酸葡萄糖苷(6)、鹿梨苷(7)。结论化合物3~7为首次从仙茅属植物中分离得到。     

仙茅中酚苷类成分高效液相色谱法测定方法的建立

 目的 建立同时测定仙茅中多种酚苷类化合物的HPLC方法。方法 Angilent 1100 高效液相色谱仪,Zorbax SB C₁₈色谱柱;检测波长：230 nm;柱温：30 ℃;进样量 20 μL;流速1 mL·min^-1;流动相：乙腈(A)-0.1%醋酸水溶液(B),梯度洗脱程序为：0~25 min, 4%~6%A; 25~58 min,6%~17%A;58~85 min,17%~22%A。结果 8种酚苷成分5-羟甲基糠醛(1),2-羟基-5-(2-羟乙基)苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),苔黑酚龙胆二糖苷(3),苔黑酚葡萄糖苷(4),苔黑酚-1-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),2, 6-二甲氧基苯甲酸(6),仙茅苷(7)和仙茅素A(8) 的质量浓度和峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率符合含量测定要求。结论 该方法简便、灵敏、重复性好,适用于同时测定仙茅中多种酚苷类成分。
     

仙茅体内代谢过程与药物代谢酶CYP3A的相关性研究

目的:探讨仙茅体内代谢过程与药物代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)的相关性,为进一步研究机体CYP3A活性变化对仙茅性-效表达的影响奠定基础。方法:SD雄性大鼠随机分为2组,即正常组和利福平组。利福平组每天灌胃给予200mg/kg药物混悬液,正常组给予等体积蒸馏水,连续7d,第8天每组各取6只大鼠一次性灌胃仙茅水煎液(20g/kg)后,分别于20、50、90、180min时眼眶取血测仙茅入血成分苔黑酚葡萄糖苷血药浓度,其他大鼠断头处死,取肝、小肠、肾测定CYP3A活性。结果:利福平组大鼠肝微粒体CYP3A活性明显升高(P0.05),小肠、肾微粒体CYP3A活性有升高趋势;利福平组大鼠各时间点血药浓度均低于正常组,且在20、50、90时差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:利福平诱导后大鼠肝微粒体CYP3A活性升高,而苔黑酚葡萄糖苷血药浓度明显降低,说明仙茅体内代谢过程与药物代谢酶CYP3A相关。     

仙茅及其有效成分对不同状态L02细胞PXR-CYP3A的影响研究

目的: 明确仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷对正常、虚寒状态L02细胞中PXR-CYP3A的影响,为探讨仙茅在不同状态下药效表达差异的机制奠定基础. 方法: 分别用正常、虚寒大鼠血清培养L02细胞,诱导正常、虚寒2种状态细胞.仙茅水提液及其有效成分苔黑酚葡萄糖苷作用于不同状态细胞后,检测不同状态L02细胞PXR蛋白表达和CYP3A活性. 结果: MTT法结果显示,仙茅水提液和苔黑酚葡萄糖苷能使L02细胞活力明显增强;仙茅水提液能使正常组L02细胞PXR蛋白表达水平显著降低,苔黑酚葡萄糖苷能使正常组L02细胞CYP3A活性和PXR蛋白表达水平均显著降低;而仙茅水提液能使虚寒组L02细胞CYP3A活性和PXR蛋白表达升高,苔黑酚葡萄糖苷能使虚寒组L02细胞CYP3A活性水平显著降低,使虚寒组细胞PXR蛋白表达水平升高. 结论: 仙茅作用于虚寒状态L02细胞,能激活PXR诱导CYP3A活性,但对正常L02细胞的PXR及其介导的CYP3A活性没影响或作用相反.     

酒仙茅炮制工艺的正交试验优选

目的优选酒炙仙茅的炮制工艺。方法以仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、水溶性浸出物的含量为综合评价指标,选择黄酒比例、炒制温度、炒制时间为考察因素,采用L9(34)正交试验优选酒炙仙茅的炮制工艺。结果酒炙仙茅的最佳炮制工艺为每100kg仙茅加10kg黄酒,于100~110℃炒制10min。结论优化的酒炙仙茅工艺合理可行。     

仙茅不同炮制品对巨噬细胞免疫活性的影响

目的比较仙茅不同炮制品对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7免疫活性的影响。方法仙茅不同炮制品水提液作用于体外培养的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,以细胞活力检测试剂盒(CCK-8)测定其细胞增殖率,中性红试验法测定其中性红吞噬率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测其培养上清中活性氧簇(ROS)、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的分泌水平。结果仙茅不同炮制品均能提高RAW264.7细胞的增殖及吞噬活性,促进其分泌NO、TNF-α并且拮抗ROS的释放,以苔黑酚葡萄糖苷、盐仙茅效果较为显著。结论盐仙茅能有效提高RAW264.7细胞的免疫活性,苔黑酚葡萄糖苷可能是仙茅中增强RAW264.7细胞免疫活性的有效物质。     

基于临床用药实际的不同状态下仙茅多次给药后血药浓度变化

目的: 观察仙茅作用于正常、虚寒两种不同状态大鼠后,其入血成分苔黑酚葡萄糖苷的血药浓度变化差异,探讨仙茅在正常与虚寒状态下体内药代与生物学效应的相关性。 方法: SD雄性大鼠随机分为两组,即正常组和虚寒组。连续14 d肌注氢化可的松粉针剂20 mg·kg^-1·d^-1塑造虚寒大鼠模型。模型成功后,正常/虚寒大鼠连续7 d给予仙茅水提液30 g·kg^-1,最后1次给药后,分别于多点动物交叉眼眶取血,采用高效液相法检测苔黑酚葡萄糖苷血药浓度,并计算药物代谢参数。 结果: 虚寒组大鼠在给药后20 min,其血药浓度高于正常组大鼠,直到120 min达最大血药浓度,其高水平状态一直维持到300 min;且虚寒组大鼠达峰时间(T_max)、血药浓度-时间曲线下面积(AUC)明显升高(P<0.05)。 结论: 虚寒组大鼠体内苔黑酚葡萄糖苷浓度始终处于高水平状态,可能为其生物学效应的更好发挥提供了物质基础。     

仙茅酒炙工艺的优化

目的优化仙茅酒炙工艺。方法以仙茅苷、苔黑酚葡萄糖苷、水溶性浸出物含有量的综合评分为评价指标,炒制时间、炒制温度、加酒量为影响因素,采用星点设计-效应面法优化酒炙工艺。结果最佳条件为加酒量19%,炒制时间9 min,炒制温度109~119℃,综合评分91.90。结论该方法稳定可行,可用于优化仙茅酒炙工艺。     

液质联用研究骨碎补提取物给予大鼠后柚皮苷及其代谢物柚皮素的药动学行为

目的：建立超高效液相色谱一串联质谱法（UPLC—MS／MS）研究柚皮苷及其代谢物柚皮素在大鼠体内的药动学行为。方法：骨碎补药材中加入50％乙醇加热回流1h，提取物用50％PEG400制成混悬液灌胃给予大鼠。血浆样品处理采用液液萃取法，以乙酸乙酯为提取试剂，对乙酰氨基酚为内标。色谱条件采用ACQurrYUPLCTMBEHC18色谱柱，流动相为乙腈-0．4％冰醋酸（80：20，v／v），流速为0．25mL．min-1，柱温为25℃；质谱条件采用ESI源，负离子检测方式，多反应监测（MRM）。用于定量分析的离子反应分别为m／z578．4→270．7（柚皮苷）、m／z270．7→150．7（柚皮素）和m／z149．9→106．6（内标）。结果：柚皮苷和柚皮素的Gmax分别为（2．56±0．77）×103ng·mL-1和222±45ng·mL-1，Tmax分别为0．67±0．20h和8．0±1．3h，AUC0-t分别为（3．23±0．54）×103ng·mL-1．h和（1．57±0．37）×103ng·mL-1h，AU0-分别为（3．29±0．54）×103ng·mE-1．h和（1．79±0．43）×103ng·mL-1h，柚皮苷的咖为4．1±0．8h，且在其药时曲线8h处出现另一微小的峰。结论：所建立的UPLC—MS／MS方法符合生物样品分析要求，药动学研究结果为骨碎补的临床应用提供了参考。     

大鼠灌胃白花蛇舌草有效部位提取物血浆中代谢产物的液质分析

目的:分析大鼠灌胃白花蛇舌草有效部位提取物后血浆中对香豆酸、反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯及其代谢产物.方法:取健康雄性SD大鼠按0.4 g·kg-1的剂量经口给予白花蛇舌草有效部位提取物,1.0 h后采集眼眶静脉血液制备血浆,采用HPLC-Q-TOF-MS进行分析.结果:在大鼠血浆中只检测到1个代谢产物,并利用对照品鉴定了其结构为对香豆酸.结论:白花蛇舌草有效部位提取物中主要成分反式6-O-对香豆酰鸡屎藤苷甲酯在大鼠体内的代谢产物为对香豆酸,本实验为研究白花蛇舌草化学成分及药效作用提供了理论依据.     

Evaluation of estrogenic activity of alcoholic extract of rhizomes of Curculigo orchioides

The rhizomes of Curculigo orchioides Gaertn. (Amaryllidacea) is an important Ayurvedic as well as Unani drug. It is present in several drug formulations used in the treatment of menorrhagia and other gynecological problems. In this study, we conducted a comparative study of estrogenic activity of alcoholic extract of Curculigo orchioides with diethylstilbestrol in bilaterally ovariectomized young albino rats. Bilaterally ovariectomized albino rats were divided into five groups (n=9) receiving different treatments, consisting of vehicle (0.6% w/v sodium carboxy methyl cellulose), ethanolic extract of rhizomes of Curculigo orchioides at three different doses (viz., 300, 600, 1200 mg/kg body weight) and standard drug diethylstilbestrol (DES) at a dose of 2 mg/kg body weight. All these were administered orally daily for 7 days. Estrogenic activity was assessed by taking percentage vaginal cornification, uterine wet weight, uterine glycogen content and uterine histology as parameters of assessment. Alcoholic extract of Curculigo orchioides showed a significant increase in percentage vaginal cornification, uterine wet weight (P<0.001), uterine glycogen content (P<0.001) and a proliferative changes in uterine endometrium compared to the control.     

宝儿康散大鼠ig给药后血浆暴露成分分析

目的分析大鼠ig宝儿康散后在血浆中的暴露成分,为其作用机制及药动学研究奠定基础。方法采用超高效液相色谱-高分辨飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF/MS),分离给药后吸收入血成分。根据化合物的保留时间,相对分子质量及二级质谱特征碎片,结合文献报道,分析鉴定大鼠血浆中宝儿康散化学成分。结果大鼠ig宝儿康散1 h后,在血浆中分离鉴定了23个化合物,其中有5个化合物通过与对照品比对保留时间与质谱数据,确定了化学结构,分别为牡荆素、甘草素、橙皮素、甘草次酸、熊果酸。结论本方法可以快速分析宝儿康散大鼠ig给药后血浆暴露成分,对进一步探究其作用机制及其药动学奠定了基础。     

大鼠灌胃“五虎汤”后尿中挥发性成分的分析

目的:研究中药复方“五虎汤”大鼠灌胃后尿中的挥发性成分。方法:采用气质联用的方法对大鼠给药前后的尿液进行分析。结果:在给药大鼠的尿液中检测到18个与空白尿液相区别的成分,鉴定了14个,其中的7个成分在复方中也同时检测到。结论:检测到的区别成分可能来源于中药五虎汤,其中的一些成分与中药五虎汤的药效相关。     

开心散乙醇提取物中远志皂苷的入血成分及体内代谢产物分析

目的:鉴定开心散60%乙醇提取物(KXS-60%E)及其血中移行成分中的远志皂苷类成分,分析大鼠体内远志皂苷类成分的代谢产物。方法:应用UPLC-TOF-MS技术,分析TOF-MS/MS给出的二级离子信息,结合液质联用工作站Mass Lynx v4.1分析软件及现有的文献数据库,鉴定KXS-60%E中远志皂苷类成分、灌服KXS-60%E后血清中的远志皂苷类成分及其代谢产物。结果:鉴定了KXS-60%E中14个远志皂苷类成分,主要为三萜型皂苷;鉴定了大鼠口服KXS-60%E后血中的5个原型皂苷类成分及4个代谢产物。结论:远志皂苷类成分及4个代谢产物可能是KXS-60%E潜在的活性成分及直接药效物质基础,这将有助于阐明开心散防治阿尔兹海默症的有效成分及作用机制。     

中药复方苏冰口崩片中肉桂酸在大鼠体内的HPLC测定及药动学研究

目的：建立大鼠血浆中肉桂酸浓度的HPLC方法。方法：血浆样品经醋酸酸化,用氯仿提取药物。色谱柱Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),检测波长278 nm,柱温为室温,流动相为甲醇-乙腈-水-冰醋酸(25∶20∶55∶0.3),流速1.0 mL·min^-1,以卡马西平为内标,按内标法定量。结果：肉桂酸在4.0～400 ng·mL^-1线性关系良好(r=0.999 9),平均提取回收率为86.4%,方法回收率为100.3%。低、中、高3种浓度日内及日间RSD均小于6.0%。结论：所建立的RP-HPLC方法灵敏、专一、准确、精密,本方法为苏冰口崩片中肉桂酸的血药浓度监测及药动学研究提供了方法学基础。     

当归芍药散含药血浆UPLC-UV指纹图谱研究

目的建立当归芍药散含药血浆指纹图谱并分析给药后血中移行成分。方法大鼠ig给予当归芍药散提取液,制备11组含药血浆,采用超高效液相色谱-紫外(UPLC-UV)法构建11组当归芍药散含药血浆的指纹图谱,运用指纹图谱参数共有峰、相似度进行分析。超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q/TOF-MS)法分析大鼠ig当归芍药散后血中移行成分。结果建立了当归芍药散含药血浆指纹图谱,通过对含药血浆、空白血浆图谱进行比对,指定了15个共有峰,相似度在0.933以上。初步鉴定了当归芍药散入血的15个成分,其中原型成分10个和代谢产物5个。结论当归芍药散含药血浆指纹图谱研究为进一步血中移行成分的研究提供了基础。     

Immunostimulatory effect of methanol extract of Curculigo orchioides on immunosuppressed mice

The methanol extract of rhizomes of Curculigo orchioides Gaertn. (Amaryllidaceae) holds potential as a protective agent against cytotoxic drugs. The extract when studied on humoral and cell mediated immunity in normal, as well as cyclophosphamide-induced immunosuppressed mice produced an increase in humoral antibody (HA) titre, delayed type hypersensitivity (DTH) and levels of WBC in a dose dependent manner.     

Hypoglycemic effect of Equisetum myriochaetum aerial parts on streptozotocin diabetic rats

The hypoglycemic effect of water as well as butanolic extracts prepared from aerial parts of Equisetum myriochaetum (Equisetaceae) was examined in streptozotocin induced diabetic rats. A single oral administration of the water extract (WE) at doses of 7 and 13 mg/kg and of the butanol extract (BE) at doses of 8 and 16 mg/kg significantly (P<0.001) lowered the plasma glucose levels in diabetic rats after three hours of the administration. As a reference drug glibenclamide was used and showed, at a dose of 3 mg/kg, similar hypoglycemic effect like the tested extracts. Three kaempferol glucosides and one caffeoyl glucoside were isolated from the drug and were shown to be the main constituents in both extracts.