广防己提取物致大鼠慢性肾间质纤维化的机制研究

目的：探讨广防己提取物（RAFE）所致的大鼠慢性肾间质纤维化的作用机制。 方法：用广防己提取物（200 mg·kg^-1·d^-1）和马兜铃酸（AA,10.0 mg·kg^-1·d^-1）给予大鼠间断灌胃22周,造成大鼠慢性间质纤维化模型,通过免疫组化方法观察肾小管上皮细胞转分化标志性蛋白角蛋白(CK)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)以及致纤维化因子-转化生长因子（TGF-β₁）在大鼠肾小管间质的表达。 结果：经图像分析, RAFE和AA组肾小管上皮细胞CK较对照组表达减弱,而α-SMA在肾小管上皮细胞及肾间质细胞呈弱阳性表达、Vimentin表达较对照组明显增多；同时RAFE和AA组大鼠肾小管TGF-β₁表达较对照组明显增多,各项指标统计学均有显著性差异。 结论：RAFE参与了肾小管上皮细胞转分化,促进了大鼠慢性肾小管上皮纤维化的发生,其中TGF-β₁对肾小管上皮细胞转分化起到重要作用。RAFE所致大鼠慢性肾小管上皮细胞转分化机制与AA作用相似。     

广防己致大鼠慢性肾小管-间质损伤的实验研究Ⅱ

目的:接前报继续观察广防己提取物诱导大鼠慢性肾损害作用,进一步了解不同剂量的广防己提取物(RAFE)可否引起慢性肾小管-间质损伤。方法:分别用广防己醇提取物25.0,120.0,200.0 mg.kg^-1.d^-1和马兜铃总酸10.0 mg.kg^-1.d^-1给大鼠间断(连续2周,停药1周)灌胃给药22周后,停药4周;分别于给药第17,22,26周留取血、尿和肾组织标本,检测相关肾功能指标;并取肾脏进行形态组织学观察,于给药第17,22,26周对肾组织进行Masson染色,并与马兜铃总酸进行比较。结果:RAFE作用肾组织形态学病变:小、中、大剂量和总酸组主要表现为肾小管功能损害———慢性间质纤维化,这些病理表现与马兜铃总酸所致肾损害极为相似。结论:RAFE小、中、大剂量灌胃给药13周以上可致大鼠慢性肾小管-间质纤维化,其肾功能和肾组织形态表现上与马兜铃总酸所致肾损伤相似,结果提示马兜铃酸是RAFE主要毒性成分。     

决明子蛋白质和蒽醌苷对高脂血症大鼠血脂的影响

目的 :考察决明子蛋白质和蒽醌苷对高脂血症大鼠血脂的影响。方法 :采用灌胃脂肪乳剂建立大鼠的高脂血症模型。用酶比色法测定决明子蛋白质和蒽醌苷的不同剂量、以及两者小剂量合用后 ,对高脂血症大鼠的血清总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白 (LDL-C)和高密度脂蛋白 (HDL-C)的影响。结果 :决明子蛋白质大剂量 (1mg·kg^-1·d^-1)、蒽醌苷大剂量 (20mg·kg^-1·d^-1)以及两者的小剂量 (蛋白质 0.25mg·kg^-1·d^-1,蒽醌苷 5mg·kg^-1·d^-1)合用 ,均可使高脂血症大鼠的TC ,TG和LDL C显著降低 (P<0.05 ,P<0.01)。结论 :试验结果表明 ,决明子蛋白质、蒽醌苷皆可降低高脂血症大鼠的TC ,TG和LDL-C。     

原钒酸钠对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响

 目的 观察原钒酸钠(sodium orthovanadate)对2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响。方法 用高脂饲料灌胃正常大鼠10 d,引起肥胖,再用四氧嘧啶(120mg·kg^-1)腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型。筛选空腹血糖值大于16.7 mmol·L^-1的大鼠,随机分成5组:原钒酸钠大剂量组(9 mg·kg^-1·d^-1)、原钒酸钠中剂量组(3 mg·kg^-1·d^-1)、原钒酸钠小剂量组(1 mg·kg^-1·d^-1)、糖尿病模型组、苯乙双胍组(75 mg·kg^-1·d^-1)。连续用药7d,用快速血糖仪测空腹血糖值。用胰岛素放免试剂盒测血清胰岛素值。用骨骼肌GLUT4原位杂交试剂盒检测骨骼肌GLUT4 mRNA的表达。结果①2型糖尿病大鼠经原钒酸钠灌胃给药后,空腹血糖值与模型组相比有明显的降低(P<0.05);②用药组大鼠血清胰岛素值与模型组相比无显著差异;③用药组大鼠的骨骼肌GLUT4 mRNA表达量与模型组相比均有明显增多。结论 原钒酸钠对2型糖尿病大鼠有明显的降糖作用,对血清胰岛素的分泌无明显影响,对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA的表达有促进作用。     

蜜环菌多糖对环磷酰胺损伤小鼠骨髓细胞的保护作用

目的:观察蜜环菌多糖对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞损伤的保护作用。方法:纯系昆明小鼠 50 只,随机分为5组,正常对照组;阳性对照组(rhG-CSF 20μg·kg^-1·d^-1);环磷酰胺(150 mg·kg^-1·d^-1)损伤组;蜜环菌多糖(25 0 mg·kg^-1·d^-1)低剂量保护组;蜜环菌多糖(50.0 mg·kg^-1·d^-1)高剂量保护组。阳性对照组sc rhG CSF 6 d,ip环磷酰胺3 d。保护组 ip蜜环菌多糖8 d,ip环磷酰胺3 d。记数外周血WBC,RBC,PLT和骨髓细胞悬液WBC,BM NC,骨髓象分析。结果: 保护组、阳性对照组外周血中的WBC,RBC,PLT,骨髓细胞悬液中WBC,BMNC明显高于损伤组,P<0.01;保护组中骨髓早幼粒、分叶核细胞数,高剂量组比低剂量组明显增多。结论: 蜜环菌多糖对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞损伤有较好的保护作用。     

桔梗与氯丙嗪伍用对大鼠脑纹状体多巴胺的影响

目的：研究桔梗与氯丙嗪联合应用对大鼠脑纹状体单胺类神经递质多巴胺的影响，探讨中西药配伍应用后可能发生的药物相互作用与机制。方法：大鼠随机分成4组：生理盐水组、桔梗(生药15.2 g·kg^-1·d^-1)单独给药组、氯丙嗪(20 mg·kg^-1·d^-1)单独给药组、氯丙嗪与桔梗(20 mg·kg^-1·d^-1+15.2 g·kg^-1·d^-1)合并给药组，每组6只，给药10 d后，利用微透析法在大鼠脑纹状体取样，HPLC仪检测透析液中多巴胺水平。结果：药后140 min(取样点80 min)时，氯丙嗪＋桔梗组中多巴胺水平(1.52±0.34) μg·L^-1显著高于氯丙嗪组(1.25±0.22) μg·L^-1(P<0.05)和生理盐水组(1.06±0.24) μg·L^-1(P<0.01)。结论：桔梗与氯丙嗪合用后大鼠脑内多巴胺水平升高，治疗时同时给予桔梗，可以减少氯丙嗪的用量，达到保持疗效，降低其不良反应。     

大黄总蒽醌对大鼠远端结肠AQP2表达的调节效应

目的：探讨大黄总蒽醌对大鼠远端结肠水通道蛋白2(aquaporin2，AQP2)表达的调节作用。方法：32只SD大鼠随机分为正常组，大黄总蒽醌低、中、高剂量组(0.14,2.5, 4.5 g·kg^-1·d^-1，灌胃)，正常组给予生理盐水灌胃。大鼠 5 d后麻醉处死，取全段结肠内粪便，干燥后检测粪便含水量；留取远端结肠，运用免疫组织化学、Western blot及RT-PCR检测远端结肠AQP2表达的变化。结果：低剂量组大鼠没有出现泻下现象，其远端结肠AQP2表达无显著差异；中剂量组(2.5 g·kg^-1·d^-1)大鼠出现软便及稀便，高剂量组(4.5 g·kg^-1·d^-1)大鼠出现稀便和水样便，粪便含水量显著性增加，其远端结肠AQP2表达亦显著降低(P＜0.01)。结论：大黄总蒽醌能抑制大鼠远端结肠AQP2的转录与翻译、增加粪便的含水量，这可能是其泻下效应产生的机制之一。     

儿童环孢素给药剂量的年龄差异

 目的了解儿童患者环孢素(CsA)血药浓度个体差异的发生规律,为儿童合理用药服务。方法采集2002.7～2006.8间在浙江大学医学院附属儿童医院进行环孢素血药浓度监测的样本,筛选出74例供分析用,其中男35例,女39例,年龄2月～15.8岁;研究各个年龄段儿童平均给药剂量的差异。结果各个年龄段儿童的平均给药剂量具有显著差异(P=0.000)。以2.1～3岁患儿平均给药剂量最大(12.85mg·kg^-1·d^-1),其次为3.1～6岁(7.26mg·kg^-1·d^-1),1.1～2岁(6.98mg·kg^-1·d^-1),6.1～8(5.69mg·kg^-1·d^-1),8.1～12岁(5.44mg·kg^-1·d^-1),12.1～16岁(5.36mg·kg^-1·d^-1),0～1岁(5.04mg·kg^-1·d^-1)。结论在临床上考虑不同年龄儿童的个体发育特征,对于增加首剂量给药的有效性非常重要。     

龙胆泻肝汤对大鼠肾毒性的观察

目的:观察配伍不同剂量关木通的龙胆泻肝汤给药不同时间的大鼠肾功能和组织形态学变化。方法:用配伍不同剂量关木通的龙胆泻肝汤水煎剂按原药材每天13,14.5,17.5 g.kg^-1剂量(其中含关木通分别为1.5,3,6 g.kg^-1)给大鼠灌胃,连续12周,分别于给药第4,8,12周测定大鼠肾功能指标,观察肾脏组织形态学改变。结果:龙胆泻肝汤中配伍小剂量关木通(1.5 g.kg^-1)连续用药12周,未见肾功能明显损伤;配伍中剂量关木通(3 g.kg^-1)连续用药12周,肾近曲小管上皮细胞出现轻微损害;大剂量的关木通(6 g.kg^-1)连续用药4周即出现明显的肾损伤,且随着给药时间的延长,损伤程度逐渐加重;病理观察到肾损伤的部位主要是皮髓交界处的近曲肾小管。结论:龙胆泻肝汤的肾毒性与其关木通配伍用量和服药时间相关。龙胆泻肝汤中配伍小量关木通在较短时间内具有相对安全性,而大剂量使用关木通可引起肾损害。     

白芥子提取物抑制前列腺增生的实验研究[Ⅱ]

目的:研究白芥子提取物抑制前列腺增生的活性成分和作用机理。方法:采用丙酸睾酮诱导的去势小鼠前列腺增生;组胺诱导的小鼠皮肤毛细血管通透性增加;滤纸片埋藏诱发的大鼠皮下肉芽肿为动物模型。从白芥子提取物中分离得到的白芥子苷和白芥子β-谷甾醇为药效研究对象。结果:白芥子苷(16.0,8.0mg·kg^-1·d^-1)和β-谷甾醇(16.0,8.0 mg·kg^-1·d^-1)均能明显降低由丙酸睾酮诱发的去势小鼠前列腺增生,降低小鼠血清酸性磷酸酶活力(P<0.01或P<0.05);白芥子苷(16.0 mg·kg^-1·d^-1)能明显降低滤纸片埋藏引起的大鼠肉芽肿增殖(P<0.05);β-谷甾醇(8.0,16.0 mg·kg^-1·d^-1)能明显降低组胺诱发的小鼠毛细血管通透性增加(P<0.05)。结论:白芥子苷、β-谷甾醇具有抗雄激素和抗炎活性。     

肾衰合剂对急性肾衰竭大鼠的保护作用及其调节细胞因子分泌的实验研究

目的:观察中药复方肾衰合剂对急性肾功能衰竭(ARF)大鼠的防治作用,揭示该方药的作用机制。方法:除正常对照组外,3组均予肌注甘油制备动物模型。分正常组、模型组、西药维拉帕米组、中药肾衰合剂(22.5 g.kg^{-1)4组灌胃,观察造模24 h大鼠肾脏超微结构、血一氧化碳(NO),内皮素(ET),肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化。结果:肾衰合剂及维拉帕米均能显著改善ARF大鼠的肾功能,一定程度上保护初发期急性肾小管坏死(ATN)时肾小管上皮细胞等超微结构;同时肾衰合剂可显著降低ET、升高NO的含量,减少TNF-α的产生,其作用部分优于维拉帕米。结论:肾衰合剂通过调节血管活性因子及炎症因子的释放达到改善肾功能、减轻肾组织病变、防治ATN的作用。}     

参芪复方抗自发性糖尿病GK大鼠早期动脉粥样硬化的作用机制

目的：探讨参芪复方抗2型糖尿病（T2DM）早期动脉粥样硬化（AS）的作用机制。方法：4月龄SPF级GK大鼠按血糖水平随机分为模型对照组（5 mL·kg^-1·d^-1无菌水）、雷米普利（阳性对照，1 mg·kg^-1·d^-1）、参芪复方低、高剂量组（0.72，2.88 g·kg^-1·d^-1）组；另设正常对照组（5 mL·kg^-1·d^-1无菌水）。4组GK大鼠在自由进食高脂饲料同时，腹腔注射（10 mg·kg^-1·d^-1）L-N-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）诱导早期AS；正常对照组予普通饲料，腹腔注射生理盐水。造模同时，各组动物每天灌胃给予相应受试物32 d。实验结束时，腹主动脉采血，冰上取主动脉。酶免法检测血清单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1）含量，实时定量RT-PCR法检测主动脉MCP-1及过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPARγ）基因mRNA表达。结果：参芪复方低、高剂量组大鼠的血清MCP-1水平、高剂量组主动脉MCP-1 mRNA表达较模型组显著降低（P＜0.05），参芪复方低、高剂量组主动脉PPARγ mRNA表达较模型组明显增加（P＜0.05或P＜0.01）。结论: 抑制主动脉MCP-1 mRNA及蛋白表达，上调主动脉PPARγ表达可能是参芪复方抗DM 性AS的部分作用机制。     

单味关木通和龙胆泻肝汤肾毒性的比较研究

目的：观察单味关木通、配伍关木通的龙胆泻肝汤给药后,大鼠肾功能、肾组织形态学及肾脏白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)水平变化。方法：大鼠随机分为单味关木通组、龙胆泻肝汤组、正常对照组3组,其中前两组分别按6,17.5 g·kg^-1(其中含关木通6 g·kg^-1)给以相应方药水提液灌胃,正常组给予等量饮用水,连续8周。测定大鼠血、尿生化指标及肾脏组织匀浆中IL-1β,IL-6水平,观察肾脏组织形态学改变。结果：2种水提液连续给大鼠灌胃8周,均可见明显的肾功能改变,肾脏组织匀浆中IL-1β,IL-6水平比正常组均明显升高,组织切片显示以炎症细胞浸润为主的肾小管间质病变；龙胆泻肝汤组的肾脏损伤较单味关木通组轻。结论：实验剂量的关木通与配伍关木通的龙胆泻肝汤均可引起肾功能损伤,肾脏损伤以炎症细胞浸润为主的肾小管间质病变和伴有高水平的IL-1β与IL-6为特征。推测关木通及其龙胆泻肝汤引起的肾毒性涉及免疫诱导的炎性损伤机制；复方龙胆泻肝汤肾毒性较低,可能与其减轻单味关木通引起的免疫诱导的炎性反应有关。     

甘草酸和泼尼松对慢性马兜铃酸肾病大鼠肾脏组织病理及超微病理改变的影响

目的 通过建立大鼠慢性马兜铃酸肾病（AAN）动物模型,观察甘草酸、泼尼松对慢性AAN肾损害的干预作用。方法 雄性Wistar大鼠98只,SPF级,随机分为4组：正常对照组20只,模型组、甘草酸组、泼尼松组每组26只;实验组按马兜铃酸（AA）20mg／（kg·d）关木通浸膏灌胃,正常对照组灌胃等体积饮用水;2h后按分组灌胃给药：甘草酸25nag／（kg·d）,泼尼松3．15mg／（kg·d）;正常对照组、模型组灌胃饮用水。各组每周测量体重,于第4、8、12周测定相关肾功能指标;取肾组织进行形态学检查。结果 随着喂饲时间延长,正常对照组大鼠体重稳定性增长,而马兜铃酸给药各组体重增长缓慢。马兜铃酸用药后各组血肌酐／体重水平明显增高,甘草酸组、泼尼松组血肌酐／体重水平显著降低。肾脏组织形态学改变：甘草酸、泼尼松治疗组形态结构损害程度较模型组（纤维化程度约30％）轻微,纤维化程度约15％～20％。电镜结果：马兜铃酸可引起肾小管上皮细胞损伤、变性、坏死,线粒体等细胞器损伤明显,有细胞核变异。甘草酸、泼尼松组以小管损伤为主,线粒体等细胞器正常,细胞核变异少见,间质胶原纤维较少。结论 甘草酸、泼尼松对大鼠慢性马兜铃酸肾损害有一定的保护作用,能降低血肌酐,改善肾功能,在一定程度上减轻马兜铃酸造成的肾组织形态学改变,并减少肾间质纤维化程度。     

冬虫夏草防治氨基糖甙肾毒性损伤的实验研究

为阐明冬虫夏草（简称虫草）对氨基糖甙肾毒性损伤的防治作用，我们进行了一系列的实验研究，结果表明：在庆大霉素急性肾损伤模型中，接受虫草治疗的大鼠尿ＮＡＧ酶、血肌酐水平低于对照组，肾小球滤过和保钠功能优于对照组。离体肾灌注（ＩＰＫ）研究证明，虫草可提高ＩＰＫ代谢率，增加肾小球滤过，保护肾小管正常运转。此外虫草还可减轻体外培养的肾小管细胞对庆大霉素损伤的易感性。虫草作用的机理可能包括：（１）拮抗氨基糖甙     

牛脾提取肽类对大鼠Masugi肾炎的治疗作用

目的:观察牛脾脏肽类对大鼠Masugi肾炎的治疗作用.方法:将预先制备的兔抗鼠肾毒血清注射入正常大鼠体内,诱导产生Masugi肾炎.在该模型上,牛脾提取肽KZ-36按50μg/kg/d的剂量经腹腔注射给药2周,观察各疗效指标,并设模型对照及氢化可的松阳性对照.结果:KZ-36给药后第1周大鼠24 h尿蛋白排出量明显减少,第2周为5.0 ±4.1 mg,显著低于模型组相应值17.2±14.5 mg(P＜0.01).KZ-36也明显降低血清肌酐水平,减轻肾脏组织的病理损害.结论:牛脾提取肽对大鼠Masugi肾炎有显著疗效,值得进一步研究.     

泽泻肾毒性研究

目的:探讨泽泻水煎剂对肾脏的可能毒性作用。方法:雄性SD大鼠随机分成A组(正常鼠)、B组(正常鼠 泽泻水煎剂20g/kg·d灌胃2月)、C组(正常鼠 泽泻水煎剂50g/kg·d灌胃1周)、D组(1/2肾切除鼠)、E组(1/2肾切除鼠 泽泻水煎剂20g/kg·d灌胃2月)、F组(1/2肾切除鼠 泽泻水煎剂50g/kg·d灌胃1周)。分别在灌胃1周和2月后留取尿、血、肾组织标本,作24h尿量、尿液常规、血肌酐和病理检查。结果:(1)实验一周和二月后,D、E、F组肾重/体重比值均较A、B、C组显著增加;(2)实验一周和二月后,各组之间尿常规检查无明显差异,但实验二月后E组24h尿量较A、D组显著增多;(3)实验一周和二月后,各组之间血肌酐检查无明显差异;(4)F组一周后和E组二月后肾组织光镜下可见肾间质炎性细胞浸润及肾小管内管型,而A、B、C、D组无明显改变。结论:泽泻水煎剂对正常大鼠肾脏并无明显毒性作用,但可致1/2肾切除大鼠残肾间质炎症细胞浸润和小管损害。     

大黄素对大鼠肝移植后肝细胞凋亡的影响

目的:探讨大黄素对大鼠肝移植后肝细胞凋亡的影响。方法:建立LEW→BN大鼠肝移植动物模型,随机分为A,B,C,D4组,每组6只动物,术后每天分别腹腔注射生理盐水0.5mL.d^-1、环孢素A(CsA)10.0mg.kg^-1.d^-1、大黄素50.0mg.kg^-1.d^-1、大黄素50.0mg.kg^-1.d^-1+CsA10.0mg.kg^-1.d^-1,连续用药8d,停药7d后处死动物取肝脏组织观察排斥活动指数(RAI)和肝细胞凋亡指数(AI)。结果:A,B,C,D组RAI分别是(7.67±0.98),(5.17±0.40),(5.83±0.75),(3.83±0.75),AI分别是(35.83±2.32),(15.83±1.33),(16.50±2.35),(11.50±1.05)。B,C,D组的RAI,AI较A组均明显降低(P<0.01),而D组较B,C组也均有明显降低(P<0.05),B,C组间差别均无意义。结论:大黄素能有效减少大鼠移植肝术后肝细胞凋亡,抑制排斥反应,且和CsA有协调作用。