六君子汤提取物对食管癌Eca109细胞的增殖抑制作用

目的:研究六君子汤乙酸乙酯提取物对食管癌Eca109细胞增殖的影响。方法:以104个/孔的细胞密度接种96孔板中,培养24 h后,各组分别加入不同浓度六君子汤提取物的培养液100μL,质量浓度为10,20,40,60,80,100 mg·L-1,另设空白孔,每组设8个复孔,采用MTT比色法检测六君子汤提取物对食管癌Eca109细胞株生长抑制作用,采用流式细胞仪检测药物作用后细胞凋亡情况,激光共聚焦显微镜观察药物作用后细胞形态变化。结果:在10~100 mg·L-1内,不同浓度六君子汤提取物能有效抑制Eca109细胞增殖(P<0.05)。21.06,49.65,67.47 mg·L-1的六君子汤提取物作用Eca109细胞48 h,细胞凋亡率明显增加,与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.05);并且在激光共聚焦显微镜下观察到凋亡小体,与空白组相比,早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量明显增多。结论:六君子汤提取物能显著抑制食管癌Eca109细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制有待进一步研究。     

通莲Ⅰ号方及其拆方对食管癌Eca109细胞增殖及细胞周期的影响

目的:研究通莲Ⅰ号方及其拆方在不同浓度下对食管癌Eca109细胞形态和生长周期的调节作用;探讨该方抑制食管癌细胞增殖的机制.方法:将Eca109细胞以l x106个／皿密度接种于Φ100 mm培养皿中,以10％小牛血清DMEM培养液培养,37℃,5％饱和湿度的CO2培养箱孵育,细胞贴壁24 h,分别加入浓度为25～3 200 mg·L-1倍比梯度的通莲Ⅰ号方(T)、清热解毒拆方(Q)、活血行气拆方(H)、滋阴养血拆方(Z)等4方提取液,孵育48 h后,MTT比色法检测细胞增殖变化、光镜观察细胞形态、流式细胞技术(FCM)测定细胞周期.结果:T,Q,H的1C50值分别为386,771,729 mg·L-1;与空白对照组(C)相比,T,Q,H3方显著影响Eca109细胞周期变化:G1期细胞所占比率分别为69.43％,60.84％,61.90％.同时,T,Q,H组细胞的S期与C组比较,均有显著性差异(P＜0.05),T方作用最强.而Z方对细胞的抑制作用较弱,与C组无显著性差异.结论:通莲Ⅰ号方通过抑质细胞进入S增殖期从而干预食管癌Eca109细胞生长,各拆方具有协同作用,全方作用最优.     

通莲I号方及其拆方对食管癌Eca109细胞增殖及细胞周期的影响

目的: 研究通莲I号方及其拆方在不同浓度下对食管癌Eca109细胞形态和生长周期的调节作用;探讨该方抑制食管癌细胞增殖的机制。 方法: 将Eca109细胞以1×10⁶个/皿密度接种于Φ100 mm培养皿中,以10％小牛血清DMEM培养液培养,37 ℃,5%饱和湿度的CO₂培养箱孵育,细胞贴壁24 h,分别加入浓度为25~3 200 mg·L^-1倍比梯度的通莲I号方(T)、清热解毒拆方(Q)、活血行气拆方(H)、滋阴养血拆方(Z)等4方提取液,孵育48 h后,MTT比色法检测细胞增殖变化、光镜观察细胞形态、流式细胞技术(FCM)测定细胞周期。 结果: T,Q,H的IC₅₀值分别为386,771,729 mg·L^-1;与空白对照组(C)相比,T,Q,H 3方显著影响Eca109细胞周期变化:G1期细胞所占比率分别为69.43%,60.84%,61.90%。同时,T,Q,H组细胞的S期与C组比较,均有显著性差异(P<0.05),T方作用最强。而Z方对细胞的抑制作用较弱,与C组无显著性差异。 结论: 通莲I号方通过抑制细胞进入S增殖期从而干预食管癌Eca109细胞生长,各拆方具有协同作用,全方作用最优。     

漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2增殖、生长周期和细胞凋亡的影响

目的 观察漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制.方法 采用 MTT比色法研究漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布.结果 MTT实验结果表明较高浓度的漆树黄酮对人肝癌细胞株HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,200 μmol·L-1 的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2细胞72 h后,对细胞生长的抑制率最高可达53.78%,同对照组相比(P<0.01);流式细胞术实验结果表明,不同浓度的漆树黄酮作用于人肝癌细胞株HepG2 12 h后,可使G1期肿瘤细胞增多,引起G1期阻滞,作用时间为24 h、48 h时,则可引起S期阻滞;同时,不同浓度的漆树黄酮在不同的时间点都可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰.结论 漆树黄酮具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,其机制可能与引起细胞周期阻滞和诱导凋亡有关.     

灵芝孢子粉对HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响

目的:观察灵芝孢子粉对人肝癌细胞株HepG2细胞生长增殖和生长周期的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用MTT比色法研究灵芝孢子粉对HepG2细胞生长抑制作用;通过流式细胞仪检测DNA含量,分析细胞周期的分布。结果:MTT实验结果表明高剂量的灵芝孢子粉对HepG2细胞具有直接的抑制作用,并呈剂量和时间依赖性,2500μg/m l的灵芝孢子粉作用于HepG2细胞72h后,对细胞生长的抑制率最高可达51.4%;流式细胞术实验结果表明,灵芝孢子粉浓度为3mg/m l时,可使肿瘤细胞生长G2期减小,浓度为6 mg/m l时,可使HepG2细胞出现明显的凋亡峰。结论:灵芝孢子粉具有直接抑制肿瘤细胞生长的作用,并可作用于细胞周期的G2期,高剂量的灵芝孢子粉还可使肿瘤细胞发生凋亡。     

斑蝥酸钠诱导人食管癌Eca109细胞凋亡实验研究

目的观察斑蝥酸钠体外对人食管癌Eca109细胞凋亡的影响。方法应用MTT法,流式细胞仪检测,分析斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞的生长和凋亡的影响。结果斑蝥酸钠作用24h可使人食管癌Eca109细胞生长明显抑制(P<0.01),并出现典型的凋亡峰。结论斑蝥酸钠对人食管癌Eca109细胞生长有抑制作用,可诱导食管癌细胞凋亡。     

木犀草苷对人食管鳞状癌Eca109细胞生长的抑制作用及其机制

目的 研究木犀草苷对人食管鳞状癌Eca109细胞生长的抑制作用及其机制.方法 Eca109细胞经不同浓度木犀草苷处理后,MTT法检测Eca109细胞增殖;倒置显微镜观察Eca109细胞形态的变化;流式细胞术检测Eca109细胞周期变化及细胞凋亡情况;RT-PCR检测Eca109细胞cyclin D1、survivin和c-myc基因表达.结果 MTT实验表明,木犀草苷80、120、160、200、240 μmol/L对Eca109细胞均有抑制作用,且与浓度相关.木犀草苷可引起Eca109细胞形态改变、体积缩小,并与周围细胞脱离,浓度为240 μmol/L时使细胞呈出芽状,有的细胞伸出多个伪足样突起;浓度为160、240 μmol/L时,可将细胞阻滞于G2/M期,诱导细胞凋亡;浓度为240 μmol/L并处理Eca109细胞48h后,使Eca109细胞cyclinD1、survivin和c-myc基因表达低于对照组(P＜0.05).结论 木犀草苷对食管鳞状癌Eca109细胞的生长有显著抑制作用,其通过改变细胞周期、诱导细胞凋亡及抑制相关基因的表达发挥抗肿瘤作用.     

健脾化瘀方对胃癌细胞SGC-7901凋亡和周期的影响

目的:观察健脾化瘀方体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法:①采用MTT法观察不同浓度健脾化瘀方体外对人胃癌细胞株SGC-7901增殖的抑制作用;②用Annexin V/PI荧光双染法检测健脾化瘀方诱导肿瘤细胞进入凋亡的影响;③用流式细胞仪检测健脾化瘀方对SGC-7901细胞周期的阻滞效应。结果:①健脾化瘀方能抑制人胃癌细胞SGC-7901增殖,随着药物浓度的增大以及作用时间的延长,其对细胞的抑制率也明显增强,呈现剂量及时间依赖性。②当2mg/ml和4mg/ml健脾化瘀方作用于人胃癌SGC-7901细胞48h可显著诱导细胞凋亡的产生。③细胞周期方面,健脾化瘀方作用于人胃癌细胞SGC-7901后G2/M期比例与阴性对照组相较显著上升,G0/G1期稍有上升,而S期比例下降,表明细胞被阻滞于G2/M期。结论:健脾化瘀方可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的增殖作用并能够诱导该细胞凋亡,改变细胞周期。     

刺果紫玉盘素J的体内外抗肿瘤作用

目的观察刺果紫玉盘素J(calamistrin J,Cal-J)的体内外抗肿瘤活性及其选择性。方法MTT法观察不同质量浓度的Cal-J对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞、人肝癌HepG2细胞、人宫颈癌HeLa细胞、人结肠癌Lovo细胞、肉瘤S180细胞5种肿瘤细胞系和正常人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖的影响,Hoechst33258染色后在荧光显微镜下观察Lovo细胞凋亡的形态变化。在S180荷瘤小鼠进行整体抑瘤实验,计算Cal-J的抑瘤率。结果Cal-J对NCI-H460、HepG2、HeLa、HELF、S180、Lovo等6种细胞的增殖均有不同程度的抑制作用,其IC50依次为>100、(91±4)、(60.5±2.4)、(39.3±1.7)、(38±4)、(25±4)μg/mL。其中对Lovo细胞株抑制作用最强,且呈剂量、时间双重依赖性。Cal-J作用48h后,荧光显微镜下可见Lovo细胞核固缩,染色质凝聚等典型凋亡形态学特征。Cal-J对荷瘤小鼠S180移植瘤的生长有明显的抑制作用,Cal-J高、中、低(90、30、10mg/kg)剂量组的抑瘤率分别为51%、30%、17%,作用呈剂量依赖性。结论Cal-J对体外培养的多种人类肿瘤细胞和人胚肺成纤维细胞具有不同程度的细胞毒性作用,其中对人结肠癌Lovo细胞作用最强,并具有诱导细胞凋亡的作用。Cal-J还可抑制荷瘤小鼠S180移植瘤的生长。     

益气健脾解毒方对胃癌细胞的抑制作用及其机制研究

目的:探讨益气健脾解毒方对胃癌细胞的抑制作用及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT法观察不同浓度的益气健脾解毒方溶液体外作用于胃癌细胞株不同时间后对其增殖的抑制作用;运用流式碘化丙啶(Annexin-V/PI)双染色法研究不同浓度益气健脾解毒方对人胃癌细胞株凋亡的诱导作用;利用流式细胞仪检测益气健脾解毒方对人胃癌细胞株的周期阻滞效应;采用免疫印迹(Western blot)法观察B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteinyl aspartate-specific proproteases-3,Caspase-3)蛋白的变化情况。结果:益气化瘀解毒方对人胃癌细胞株MGC-803细胞有较好的抑制增殖作用(P0.05),并呈一定的浓度依赖性;益气健脾解毒方在作用于人胃癌细胞24小时后,细胞早期凋亡率随着给药浓度的增加呈上升趋势,呈浓度依赖关系;表明益气健脾解毒方可阻滞MGC-803细胞于S期,并呈浓度依赖性;Bcl-2、Caspase-3在4、2、1 mg/mL组的蛋白表达下调;而Bax、Cleaved-caspase-3在4、2、1 mg/mL组表达上调。结论:益气健脾解毒方能抑制人胃癌细胞株的增殖并诱导其凋亡,杀伤肿瘤细胞,可能是通过启动caspase的级联反应及下调Bcl-2,上调Bax来实现。     

中医药治疗轻中度艾滋病痴呆综合征临床研究

目的：观察中医药治疗轻中度艾滋病痴呆综合征的疗效。方法：30例艾滋病痴呆综合征患者随机平均分为治疗组和对照组。治疗组根据中医辨证给予中药治疗,对照组口服银杏叶片治疗,观察两组简易智能评分量表（MMSE）评分、日常生活活动能力（ADL）评分的改善情况。结果：治疗后MMSE评分治疗组为（25．36±5．13）分,对照组为（11．47±5．01）分,两组比较,差异有显著统计学意义（P〈0．01）;ADL评分治疗组为（51．63±13．31）分,对照组为（34．20±11．43）分,两组比较,差异有显著统计学意义（P〈0．01）。结论：中医药治疗轻中度艾滋病痴呆综合征疗效较好。     

金保方辨治血精症经验

血精症是男科临床最常见的症状之一,中医药在辨治血精症上有其独特优势,金保方提出凉血止血、滋阴降火是治血精之标,清热化湿是治血精之变,补肾固冲是治血精之本,同时根据标本缓急灵活运用理血、清源、固本三法,收效甚好。预防调护方面,强调定期排精的重要性。     

三种方剂水煎液对大鼠实验性返流性胃炎保护作用的研究

大鼠胃空肠吻合9周后,形成实验性返流性胃炎。饮用香砂六君子汤、小柴胡汤及大黄甘草汤均能显著抑制胃粘膜水肿、充血及瘀血等病变,减轻炎细胞浸润及腺体增生性改变,香砂六君子汤还能明显减少肠上皮化生的发生例数。三者均未能降低胃内胆酸含量。     

基于关联规则的肺肠合病医案用药规律探索

通过对肺肠合病的不同病位的用药规律进行探讨,运用关联规则算法对古代文献中肺肠合病的医案进行数据挖掘。发现病位在脾胃的医案总数较多,揭示肺与大肠相表里的表现并不局限于两者之间生理病理信息的共享反馈,更多反应在人体内其他脏腑生理病理信息的反馈上存在着同步性。在遣方用药方面,以苇茎汤以及六君子汤的加减应用最为多见,提示湿热病机及脾胃病变在肺肠合病中起到关键的影响作用。     

二陈汤合血府逐瘀汤加减治疗脂肪肝的临床观察

目的观察二陈汤合血府逐瘀汤加减治疗肝郁脾虚、痰瘀互阻型脂肪肝的临床疗效.方法将140例脂肪肝患者随机分为2组.治疗组80例予二陈汤合血府逐瘀汤加减治疗,对照组60例口服潘特生0.2g,每日3次,维生素C片0.1g,每日3次,维生素E胶丸100mg,每日1次.2组均2个月为1个疗程,1个疗程后统计疗效.结果治疗组总有效率为78.75%,对照组为43.33%,2组比较有显著性差异（P＜0.05）.结论二陈汤血府逐瘀汤加减对肝郁脾虚、痰瘀互阻型脂肪肝有明显的治疗作用.     

浅谈《伤寒论》承气汤证的病机演变

根据张仲景《伤寒论》阳明病原文,从热证、实证病机角度分析调胃承气汤、小承气汤、大承气汤证之病机演变,以期为运用三承气汤治疗阳明腑实之证提供参考。     

茵陈蒿汤分煎、合煎对利胆及腹腔巨噬细胞吞噬功能影响的比较研究

大鼠经十二指肠分别给予茵陈蒿汤分煎、合煎药液，观察药后０．５、１、２、３、４ｈ的胆汁排出量，实验结果表明，茵陈蒿汤分煎、合煎的１４．８５ｇ／ｋｇ剂量组能明显增加大鼠胆汁排出量。以茵陈蒿汤分煎、合煎药液对泼尼松造型的小鼠分别灌胃７ｄ，能显著提高其腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数。在两种药效学指标上，茵陈蒿汤分煎、合煎无显著性差异     

茵陈蒿汤分煎、合煎对利胆及腹腔巨噬细胞吞噬功能影响的比较研究

大鼠经十二指肠分别给予茵陈蒿汤分煎、合煎药液、观察药后０．５、１、２、３、４ｈ的胆汁排出量，实验结果表明，茵陈蒿汤分煎、合煎的１４．８５ｇ／ｋｇ剂量组能明显增加大鼠胆汁排出量。以茵陈蒿汤分煎、合煎药液对泼尼松造型的小鼠分别灌胃７ｄ，能显著春腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数，在两种药效学指标上，茵陈蒿汤分煎、合煎无显著性差异。     

桃核承气汤合抵当汤加味治疗结核性腹膜炎疗效观察

目的：探讨桃核承气汤合抵当汤加味治疗结核性腹膜炎的治疗效果。方法：将近五年来的诊治病例根据病人意愿随机分为治疗组和对照组，以一个月为一个观察疗程。结果：治疗组在改善临床症状，缩短病程，消除腹水，减少并发症方面明显优于对照组，有显著性差异（P〈0．05）。结论：桃核承气汤合抵当汤加味治疗结核性腹膜炎能很快改善一临床症状，加快腹水吸收，减少并发症，缩短病程，效果显著。     

大柴胡汤合大承气汤加减治疗急性胆囊炎36例疗效观察

目的：探讨大柴胡汤合大承气汤加减治疗急性胆囊炎的临床疗效。方法：将72例急性胆囊炎患者随机分为对照组及观察组各36例,对照组给予抗生素治疗,观察组在对照组基础上给予大柴胡汤合大承气汤加减治疗,对比两组疗效及不良反应发生率。结果：观察组总有效率97.22%优于对照组的77.78%,差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组症状消失时间短于对照组,差异有显著性统计学意义（P〈0.01）;两组均未发现明显不良反应。结论：大柴胡汤合大承气汤加减治疗急性胆囊炎可明显缩短病程,提高临床疗效,无明显毒副作用,值得临床进一步研究推广。