抗氧化能力检测方法评估及微型化

 目的评估现有抗氧化能力检测方法,建立微型化抗氧化能力检测方法,加速抗氧化物质的筛选。方法在考察血浆铁还原能力(FRAP)、二苯基苦基苯肼(DPPH)方法学的基础上,建立微型FRAP、DPPH法,并通过微型FRAP、DPPH法对内源性抗氧化剂(维生素C、维生素E、谷胱苷肽、α-硫辛酸、β-胡萝卜素)和外源性抗氧化剂(白藜芦醇)进行抗氧化能力检测,以考察其灵敏度和专属性。结果微型FRAP、DPPH法具有良好的线性、精密度、回收率。与传统FRAP、DPPH方法相比,不仅简便、快速、样品用量大大减少,而且对水溶性维生素E类似物(Trolox)、白藜芦醇、茶多酚的检测结果非常相近,对维生素E、维生素C和白藜芦醇都有很好的灵敏度和专属性。结论①微型抗氧化能力检测方法可以加速评价物质的抗氧化能力;②微型抗氧化能力检测与传统紫外法相比,在评价质量上没有明显区别;③微型抗氧化能力检测方法对内源性和外源性抗氧化物质均显示很好的灵敏度和专属性。     

DPPH法研究新疆阿魏的抗氧化活性

目的:采用紫外-DPPH法测定新疆阿魏的总抗氧化活性,并结合薄层生物自显影法(Bio-TLC-DPPH)鉴别其抗氧化活性成分。方法:以紫外-可见分光光度法测定DPPH溶液及10批新疆阿魏供试品溶液与DPPH溶液反应后的吸光度,计算清除率及EC50;依据2010版《中国药典》及文献中阿魏的提取方法,探索合适展开系统,喷以DPPH溶液显色后检视新疆阿魏抗氧化活性成分。结果:新疆阿魏甲醇提取液对DPPH自由基的EC50为5mg/mL;乙酸乙酯提取液以正己烷-石油醚(19:1)展开得到新疆阿魏特征抗氧化活性成分。结论:采用DPPH法可对新疆阿魏抗氧化活性物质进行鉴别。     

桑叶抗氧化活性与芦丁量效关系分析

目的探讨桑叶抗氧化活性与芦丁的量效关系。方法以正交试验优选出桑叶芦丁最佳提取工艺,优化DPPH、ABTS自由基清除活性和铁离子还原能力法中最大吸收波长、显色时间和样品用量等反应条件,并测定7批桑叶抗氧化活性。采用SPSS软件对桑叶抗氧化活性和芦丁含有量进行相关性分析。结果最佳提取工艺为乙醇体积分数90%,料液比1∶20,提取时间90 min,提取次数3次,DPPH、ABTS自由基溶液和FRAP工作液检测波长分别为516、751、594 nm,测定时间分别为120、25、70 min。桑叶抗氧化能力和芦丁含有量相关性极显著(P<0.01)。结论芦丁含有量可用来评价桑叶抗氧化能力。     

酢浆草提取物体外抗氧化活性研究

目的:探讨酢浆草提取物体外抗氧化活性。方法:采用DPPH法、FRAP法分别测定酢浆草水提取物清除DPPH自由基和总的抗氧化能力。结果:在实验的测定浓度范围之内,随着提取物浓度的增加,其对DPPH自由基的清除能力逐渐增强。2mg/mL酢浆草水提物对DPPH自由基的清除率达到67.144%。FRAP法测得20mg/mL酢浆草水提取液的总抗氧化能力为1.09mM。结论:酢浆草对DPPH自由基的清除效果良好,FRAP法测得酢浆草有一定的抗氧化能力,有进一步开发利用的价值。     

DPPH·体外清除实验研究萝芙木水溶性生物碱抗氧化活性

目的 研究萝芙木水溶性生物碱(WSAR)的抗氧化活性.方法 根据DPPH·体系吸光值的变化研究催吐萝芙木水溶性生物碱清除自由基的能力,DPPH·反应体系为2.5 ml 6.5×10~(-5)mol·L~(-1)DPPH·+0.5 ml样品溶液,反应时间30 min.考察了不同浓度WSAR和特丁基对苯二酚(TBHQ)与DPPH·自由基清除率的关系.结果 DPPH·自由基的清除能力IC_(50)(WSAR)=2.627×10~(-4) g/ml,IC_(50)(TBHQ)=1.267×10~(-5) g/ml.结论 萝芙木水溶性生物碱具有抗氧化活性,可以开发为天然抗氧化剂.     

尖叶长柄山蚂蝗抗氧化活性研究

目的:研究尖叶长柄山蚂蝗的体外抗氧化作用。方法:运用二苯代苦味肼基自由基(DPPH)、2,2'-连氨-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐(ABTS)和铁离子还原/抗氧化力测定法(FRAP)3种分光光度法对尖叶长柄山蚂蝗醇提物进行体外抗氧化活性测试。结果:尖叶长柄山蚂蝗的乙醇提取物在一定浓度下具有抗氧化活性,但其DPPH法和ABTS法的IC50值均大于阳性对照物PG、BHA、BHT,其FRAP法的Trolox当量值小于阳性对照物PG、BHA、BHT。结论:尖叶长柄山蚂蝗的乙醇提取物具有抗氧化活性,但其抗氧化能力低于阳性对照物PG、BHA、BHT。     

天山假狼毒提取物体外抗氧化活性的研究

从植物中探寻能够清除自由基的天然抗氧化剂是目前天然产物化学研究热点之一,本文研究了新疆天山假狼毒的抗氧化活性成分。本研究通过DPPH自由基清除法、FRAP还原法这两种体外抗氧化活性测定法,以Vc作为阳性对照,对天山假狼毒提取物的抗氧化活性进行分析评价。实验结果表明,天山假狼毒乙酸乙酯部位清除DPPH自由基的能力(IC50=5.63±0.29μg/m L)和还原Fe3+的能力TEAC(Trolox-Equivalent Antioxidant Capacity)=0.40±0.03mmol/g最强。天山假狼毒所有提取物均有清除DPPH自由基和一定的还原Fe3+的能力,但均弱于阳性对照Vc。     

超声辅助提取筋骨草多糖及抗氧化性研究

目的研究超声辅助提取筋骨草多糖的最佳工艺及其清除自由基的能力。方法通过单因素实验和正交试验,研究料液比,超声时间,提取次数,提取温度对筋骨草中多糖提取率的影响,优选出超声辅助提取筋骨草多糖的最佳工艺;采用DPPH法、ABTS法和FRAP三种测定法对筋骨草多糖抗氧化活性进行综合评价。结果超声辅助提取筋骨草多糖的最佳工艺:料液比为1∶30 g/ml,80℃超声提取3次,每次30 min,筋骨草多糖提取率为3.55%。筋骨草多糖对DPPH自由基(IC50=46.96μg/ml,最大清除率为84.44%)、ABTS自由基(IC50=49.56μg/ml,最大清除率为93.21%)的清除能力较好,对Fe~(3+)的还原能力(AEAC=3708μmol/g)也比较强。结论筋骨草多糖含量丰富,优选出的工艺提取率高,稳定、可行。筋骨草多糖具有较强的抗氧化活性,是一种较好的天然抗氧化剂。     

雪灵芝醇提物不同极性萃取部分的体外抗氧化活性

目的:通过体外抗氧化和还原活性评价实验,研究藏药雪灵芝乙醇提取物不同极性溶剂萃取部分的抗氧化作用。方法:用体积分数95%的乙醇回流提取雪灵芝粉末,浓缩的乙醇浸膏依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各部分分别配制成适当浓度的溶液,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法,2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸-6)二铵盐(ABTS)自由基法和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)法分别测定各部分的自由基清除能力和铁离子还原力。结果:雪灵芝醇提物的4个萃取部分均具有一定的体外抗氧化作用,其中乙酸乙酯与正丁醇部分清除DPPH·,ABTS+·及还原Fe3+的能力均比二氯甲烷与石油醚部分强。结论:雪灵芝提取物清除能力与提取物样品浓度在一定范围内具有良好的量效关系,其中极性较大的乙酸乙酯部分和正丁醇部分的抗氧化活性及还原能力相对较强。     

刺五加根有效组分的抗氧化活性分析

目的:研究刺五加根有效组分在不同质量浓度下的体外抗氧化活性,筛选最佳有效组分,为刺五加根的研究和开发提供参考。方法:采用紫外分光光度法测定各组分中总黄酮和总皂苷含量,检测波长分别为510,550 nm。利用超氧阴离子自由基(O-2·)清除法,羟基自由基(·OH)清除法,1,1-二苯基-2-苦基肼基(DPPH)自由基清除法和亚铁还原能力实验(FRAP)法测定刺五加根不同有效组分的抗氧化活性。结果:不同有效组分的刺五加根在一定质量浓度范围内均有一定的抗氧化活性,且随着质量浓度的增加抗氧化能力越强。在O-2·清除法模型中,质量浓度为20 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位清除率(91.61±2.59)%。在·OH清除法模型中,质量浓度为1.0 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位清除率(90.29±2.06)%。在DPPH自由基清除法模型中,质量浓度为0.7 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位清除率清除率达(84.45±0.14)%。在FRAP法中,质量浓度为1.0 g·L~(-1)时,30%乙醇洗脱部位的FRAP值3 474±36.84。结论:刺五加根各有效组分均有一定的抗氧化活性,30%乙醇洗脱部位的抗氧化能力最强,可开发成天然的植物抗氧化剂。