狂犬病毒CTN-1株在Vero细胞上的适应传代

以我国狂犬病固定毒人二倍体细胞适应株 (CTN - 1)作Vero细胞适应传代研究。显示CTN - 1株能较好适应Vero细胞 ,经 5代培养病毒滴度可达 7 5logLD5 0 /ml,且在 5～ 2 0代以内均稳定在 7 0logLD5 0 /ml左右 ,符合WHO对生产用毒种滴度要求     

三叶青提取物诱导肺癌A549株细胞凋亡的研究

目的探讨三叶青提取物对肺癌细胞A549的作用,初步探讨其机制。方法采用体外细胞培养技术,采用流式细胞仪检测A549细胞株的细胞周期分布相和细胞凋亡率。结果流式细胞仪检测结果显示:加三叶青提取物10-1g/L、10-2g/L处理后的细胞凋亡比例明显高于对照组。结论三叶青提取物对A549细胞具有诱导凋亡的作用。     

鹅脱氧胆酸衍生物HS-1200对肝肿瘤细胞株凋亡及增殖的影响

目的探讨鹅脱氧胆酸衍生物HS-1200诱导肝肿瘤细胞株凋亡及抑制增殖的作用及机制。方法分别用40、60及80p-M的HS-1200作用于肝肿瘤细胞株BEL7402，于作用后12、24及36h采用MTT检测细胞活性，流式细胞术、DNA梯状条带、荧光显微镜检测细胞凋亡，Western—blot法检测bcl-2、bax、细胞色素C及caspase-3的表达。结果HS-1200可有效地抑制BEL7402生长，其作用随药物浓度提高和作用时间延长而增强，呈一定的剂量、时间依赖性；FCM结果表明，随作用浓度和作用时间延长，凋亡率显著增加，有显著性差异（P〈0．05）；Ho-echst33258染色结果显示细胞呈凋亡形态学改变，凝胶电泳显示典型的凋亡梯形条带，Westernblot结果显示为HS-1200可提升bax、细胞色素C及caspase-3的表达，降低bcl-2的蛋白表达水平。结论HS-1200对BEL7402有显著的抑制增殖及诱导凋亡的作用，其机理可能为提升bax、细胞色素C及caspase-3的表达，降低bcl-2的表达；HS-1200可能是一种有效的治疗肝癌的化疗药物。     

狂犬病毒适应鸡胚细胞及其生物学性状的研究

初步成功地培植出一株适应原代鸡胚细胞,具有与国内目前生产地鼠肾细胞疫苗的aG株固定毒相仿的免疫原性的组织培养疫苗株—武汉(Wuhan)34株。此株在小鼠和豚鼠血清中和抗体反应方面,以及防御狂犬病感染方面均能与aG株比较。     

荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型的建立

目的通过细胞移植法建立模拟人的膀胱原位癌荷瘤裸鼠模型，为临床膀胱癌的防治提供新的思路。方法将人膀胱移行细胞癌株T24原位移植到裸鼠膀胱内后定期用磁共振成像（MRI）检测，并进行解剖，组织病理学和免疫细胞学检查。结果裸鼠膀胱内的癌发生率为94．0％（47／50），组织病理学检查：Ⅰ级23例，Ⅱ级15例，Ⅲ级9例，免疫细胞学证实该模型具有人膀胱移行细胞癌株T24的特性。结论模拟人的荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型符合临床上膀胱肿瘤向膀胱内生长的过程，具有很强的实用性。     

新型冠状病毒VSV假病毒的 构建及其感染能力的初步研究

摘要]?目的?在二级生物安全实验室条件下,通过构建新型冠状病毒（新冠病毒）VSV假病毒,研究新冠病毒及其流行变异株的侵入特性。方法?通过购买的新冠病毒（Wuhan-Hu-1株）VSV-luc假病毒构建VSV-G/VSV-ΔG-luc假病毒;利用VSV-G/VSV-ΔG-luc假病毒构建新冠病毒VSV假病毒。通过分子克隆对新冠病毒S基因相应位点进行突变,构建新冠病毒不同变异株的刺突蛋白表达质粒,由此包装出新冠病毒各种变异株假病毒。比较新冠病毒Wuhan-Hu-1株与D614G株、Delta株在不同细胞系中的感染能力。 结果?新冠病毒VSV假病毒构建成功。评价新型冠状病毒Wuhan-Hu-1株、D614G株、Delta株在4种不同细胞系中侵入情况,与Wuhan-Hu-1株相比,D614G株和Delta株的感染水平均明显增加（P均＜ 0.05）,同时在Calu-3和Caco-2细胞系中,Delta株的感染水平明显强于D614G株（P均＜0.05）。利用模拟细胞-细胞间传播的感染试验发现,Delta株感染HEK-293T细胞与Vero细胞的能力明显高于D614G株（P均＜0.05）。 结论?新冠病毒Delta株的感染能力明显强于Wuhan-Hu-1株和D614G株。VSV假病毒系统能够模拟、替代新冠病毒活病毒在侵入细胞的过程中的生理功能,并且安全可靠、易于量化、应用广泛,在新冠病毒研究领域中能够发挥重要作用　　 摘要]?目的?在二级生物安全实验室条件下,通过构建新型冠状病毒（新冠病毒）VSV假病毒,研究新冠病毒及其流行变异株的侵入特性。方法?通过购买的新冠病毒（Wuhan-Hu-1株）VSV-luc假病毒构建VSV-G/VSV-ΔG-luc假病毒;利用VSV-G/VSV-ΔG-luc假病毒构建新冠病毒VSV假病毒。通过分子克隆对新冠病毒S基因相应位点进行突变,构建新冠病毒不同变异株的刺突蛋白表达质粒,由此包装出新冠病毒各种变异株假病毒。比较新冠病毒Wuhan-Hu-1株与D614G株、Delta株在不同细胞系中的感染能力。 结果?新冠病毒VSV假病毒构建成功。评价新型冠状病毒Wuhan-Hu-1株、D614G株、Delta株在4种不同细胞系中侵入情况,与Wuhan-Hu-1株相比,D614G株和Delta株的感染水平均明显增加（P均＜ 0.05）,同时在Calu-3和Caco-2细胞系中,Delta株的感染水平明显强于D614G株（P均＜0.05）。利用模拟细胞-细胞间传播的感染试验发现,Delta株感染HEK-293T细胞与Vero细胞的能力明显高于D614G株（P均＜0.05）。 结论?新冠病毒Delta株的感染能力明显强于Wuhan-Hu-1株和D614G株。VSV假病毒系统能够模拟、替代新冠病毒活病毒在侵入细胞的过程中的生理功能,并且安全可靠、易于量化、应用广泛,在新冠病毒研究领域中能够发挥重要作用     

狂犬病毒CTN—1株在Vero细胞上的适应传代

以我国狂犬病固定毒人二倍体细胞适应株（CTN－1）作Vero细胞适应传代研究。显示CTN－1株能较好适应Vero细胞，经5代培养病毒滴度可达7.5 logLD50/ml，且在5－20代以内均稳定在7.0logLD50/ml左右，符合WHO对生产用毒种滴度要求。     

氧化低密度脂蛋白损伤血管内皮细胞及促血管平滑肌细胞增殖的机制

目的 观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导人脐静脉血管内皮细胞株(ECV304)损伤及损伤条件培养基作用于血管平滑肌细胞(VSMC)的影响.方法 采用流式细胞术(FCM)测定ECV304细胞内Ca2+、线粒体膜电位(MMP)、凋亡率及VSMC细胞周期各时相DNA含量、增殖指数.结果 ox-LDL致ECV304细胞活力降低,细胞内Ca2+浓度升高,MMP下降,细胞凋亡率明显增高；损伤条件培养基有明显促进VSMC增殖,与正常对照组比较有显著差异(P＜0.01,P＜0.001).结论 ox-LDL导致血管内皮细胞损伤,引起ECV304细胞内Ca2超载,致线粒体功能障碍,促进细胞凋亡；促进VSMC增殖.     

T肽对树突细胞的协同作用及其对肾癌细胞抗肿瘤效应和免疫微环境的影响

目的探究T肽对树突细胞(DC)的协同作用及其对肾癌细胞的抗肿瘤效应和免疫微环境的影响。方法 (1)将人DC的培养皿分为3组:A组人DC的培养皿加入生理盐水100μl,B组人DC的培养皿加入T肽50μg/100μl,C组人DC的培养皿加入脂多糖(LPS)50μg/100μl;使用流式细胞仪检测DC成熟度,并观察DC表面共刺激分子表达。(2)将人DC的培养皿分为两组:D组人DC的培养皿加入生理盐水100μl,F组人DC的培养皿加入T肽50μg/100μl;观察人DC分泌IL-12b的情况。(3)将人肾癌细胞的培养皿分为2组:E组人肾癌细胞的培养皿加入生理盐水100μl,F组人肾癌细胞加入人DC悬液100μl;D组人肾癌细胞加入T肽50μg/100μl和人DC悬液100μl;观察T肽协同DC对肾癌细胞的凋亡率,并且检测趋化因子CCL2、CCL5、CCL20、CCL22和CCL27的表达。结果 T肽促进DC的成熟,促进其表面共刺激分子表达水平上调;T肽可促进DC分泌IL-12b;T肽联合DC组对肿瘤细胞的抑制作用最强,差异有统计学意意义(P0.05);DC组和T肽联合DC组对肾癌细胞免疫微环境的影响明显,而且T肽联合DC组对肾癌细胞免疫微环境的影响最明显(P0.05)。结论 T肽对DC具有协同作用,且可增强DC的抗肿瘤效应和对免疫微环境的影响。