错配修复基因hMLH1甲基化与胃癌的关系

目的:通过研究散发性胃癌中错配修复基因hMLH1 mRNA的表达及其启动子区5'CpG岛甲基化状态,探讨hMLH1基因异常甲基化在胃癌发生过程中的作用.方法:应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)检测60例胃癌组织及其癌旁黏膜组织中hMLH1基因启动子区的甲基化状态,逆转录PCR(RT-PCR)检测两种组织中hMLH1 mRNA表达情况.结果:胃癌组织hMLH1 mRNA表达水平明显低于癌旁组织(t=4.082,P<0.01),hMLH1基因启动子区高甲基化18例(30%),其癌旁黏膜组织中未发现有甲基化.hMLH1基因启动子区甲基化与胃癌的临床病理参数之间无明显的相关性.hMLH1 mRNA表达阴性的21例病例中,17例(81%)发生甲基化,而hMLH1 mRNA表达阳性的39例中仅有1例(2.5%)发生甲基化,hMLH1 mRNA表达降低与甲基化之间存在明显的相关性(χ2=8.0182,P=0.0046).结论:胃癌组织中hMLH1基因启动子区甲基化与其mRNA表达缺失密切相关,是导致hMLH1基因错配修复功能缺陷的重要原因之一.     

胃癌多基因甲基化状态分析

目的:检测胃癌组织中p16,hMLH1,E-cadherin和RUNX3基因甲基化状态,探讨多基因甲基化在胃癌发病中的作用.方法:采用饱和氯化钠法提取肿瘤组织、瘤旁组织及正常胃黏膜组织DNA.采用甲基化特异PCR对上述基因甲基化状态进行分析.结果:在正常胃黏膜组织中,38.9%存在E-cadherin甲基化,16.7%存在RUNX3甲基化,没有发现p16和hMLH1甲基化;在癌旁组织中,p16、hMLH1、E-cadherin和RUNX3甲基化频率分别为8.3%,4.2%,54.2%和29.2%;在胃癌组织中,上述基因甲基化频率分别为33.3%,20.8%,0.8%和54.2%.66.7%胃癌被检出存在2个或2个以上基因甲基化,明显高于癌旁组织(37.5%,χ2=4.09,P<0.05)和正常胃黏膜组织(5.6%,χ2=15.94,P<0.01),而癌旁组织则高于正常胃黏膜组织(χ2=4.16,P<0.05).有5例胃癌没有检出任何一种基因甲基化.结论:多基因甲基化是部分胃癌发展过程中一种早期事件,提示多基因甲基化在这部分胃癌的发病中起重要作用.     

多基因甲基化在胰腺癌发病机制中的作用

目的:检测基NRASSF1A,p16,SOCS-1和 hMLH1在胰腺癌中甲基化的作用．方法:采用饱和氯化钠法提取肿瘤组织(n= 21)和瘤旁组织(n=21)DNA．采用甲基化特异 PCR对上述基因甲基化状态进行分析．结果:在癌旁组织中,RASSF1A,p16,SOCS-1 和hMLH1甲基化频率分别为36．4％,13．6％, 13．6％和4．5％;在胰腺癌中分别为59．1％, 40．9％,31．8％和18．2％．P16甲基化频率在两种组织间具有显著性差异(x2=4．13,P<0．05)． 45．5％胰腺癌被检出存在2个或2个以上基因甲基化,明显高于癌旁组织(9．1％,x2=7．33, P<0．01)．31．8％胰腺癌没有检出任何一种基因甲基化．结论:多基因甲基化是部分胰腺癌发展过程中一种早期事件,在这部分胰腺癌的发病中起重要作用．     

胃黏膜细胞hMSH2,hMLH1和p53基因表达与幽门螺杆菌感染的关系

目的:探讨幽门螺杆菌(Hpylori)感染与胃癌、癌旁及胃炎黏膜中hMSH2,hMLH1和p53基因表达的关系. 方法:高中分化腺癌22例,低分化腺癌37例,黏液癌17例,浅表陛胃炎38例,正常对照10例,用快速尿素酶方法检测Hpylori感染,用免疫组化SP法检测hMSH2, hMLH1和p53基因的表达. 结果:(1)hMSH2在胃癌中的表达阳性率显著高于癌旁组织、胃炎黏膜和正常对照(67.1% vs 35.5%,42.1%,30.0%; P<0.01),其中,在低分化腺癌中阳性率显著高于高中分化腺癌和黏液癌(81.1% vs 54.5%,52.9%;P<0.05); hMLH1在胃癌中的表达阳性率低于非癌组织,但无显著性差异,其中,在黏液癌的阳性率显著低于其他两种腺癌(47.1% vs 81.8%,97.2%;P<0.001);p53在胃癌中的表达阳性率显著高于癌旁组织、胃炎黏膜和正常对照(47.4% vs 7.9%.0.0%,0.0%;P<0.001),其中,在黏液癌和低分化腺癌中的阳性率显著高于高中分化腺癌(64.7%,54.1% vs 22.7%;P<0.05). (2)在全部被检组织中,Hpylori感染组hMSH2和hMLH1 的表达阳性率均低于相应的非感染组,其中,胃癌Hpylori 感染组hMSH2的表达阳性率显著低于非感染组(56.8% vs 81.3%)(P<0.05).胃癌及癌旁组织Hpylori感染组p53的表达阳性率均高于非感染组,但无显著性差异. 结论:胃癌的发生发展可能与hMSH2和p53基因的高表达有关;Hpylori感染影响hMSH2,hMLH1和p53基因的正常表达,这可能是Hpylori致癌的机制之一.     

错配修复基因hMLH1和hMSH2在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨错配修复基因hMLH1和hMSH2在胃癌发生中的作用.方法:收集青岛大学医学院附属医院普外科手术切除的胃癌组织40例, 经病理诊断腺癌33例, 黏液腺癌7例, 患者术前均未接受放化疗和免疫治疗, 每例均取相应癌旁组织. 胃镜活检20例慢性胃炎黏膜组织(慢性浅表性胃炎10例, 慢性萎缩性胃炎10例). 采用Western blot法检测hMLH1和hMSH2蛋白在胃癌组织、癌旁组织及胃炎组织中的表达.结果:胃癌组织中hMSH2蛋白的表达显著高于癌旁组织和胃炎组织(0.28±0.10 vs 0.23±0.07, 0.11±0.10, 均P <0.01); hMLH1蛋白在胃炎组织和癌旁组织中的表达显著高于胃癌组织(0.28±0.07, 0.26±0.06 vs 0.22±0.06, 均P <0.01); hMLH1和hMSH2在胃癌中的表达与年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、浸润深度、组织学类型、分化程度、淋巴结转移、远处转移等无关, 差异均无显著性.结论:hMSH2高表达可能是胃癌发生的标志之一, 而hMLH1则可能是胃癌预警组织的一种标志物.     

胃癌和癌旁组织中hMSH2和p27蛋白的表达及其意义

背景:错配修复(MMR)基因是保证DNA复制高保真度的重要基因,与消化道肿瘤的发生密切相关。抑癌基因p27可阻止细胞周期G1/S期转换,p27表达下调在肿瘤的进展、转移过程中起有一定作用。目的:探讨MMR基因hMSH2和p27在胃癌和癌旁组织中的表达及其意义。方法:以免疫组化方法检测93例胃癌患者癌组织和癌旁组织中hMSH2和p27蛋白的表达。结果:胃癌组织中hMSH2蛋白的阳性表达率为65.6%,显著高于癌旁组织的38.7%(P<0.01);p27蛋白的阳性表达率为46.2%,显著低于癌旁组织的80.6%(P<0.01)。胃癌组织中hMSH2蛋白的表达与肿瘤临床病理特征无相关性;p27蛋白的表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关。hMSH2和p27蛋白在胃癌组织中的表达呈负相关。结论:MMR基因hMSH2表达异常和抑癌基因p27表达下调可能与胃癌的发生有关。     

EphA2、hMLH1、hMSH2 mRNA在新疆维吾尔及汉族食管鳞癌中的表达及意义

目的: 探讨食管鳞状细胞癌中基因EphA2与hMLH1、hMSH2 mRNA在新疆维吾尔族和汉族中的表达以及与临床病理特征之间的关系.方法: 利用RT-PCR技术检测30例维吾尔族和30例汉族食管鳞癌组织与食管远隔无癌组织中EphA2与hMLH1、hMSH2 mRNA的表达.结果: EphA2在癌组织和远隔无癌组织中的阳性表达率分别为71.7%和46.7%, 差异有统计学意义(χ2 = 7.761, P = 0.005), EphA2的差异表达率为56.7%(癌组织大于远隔无癌组织),EphA2表达与浸润深度、淋巴结转移和民族有关( P<0.05);hMLH1在癌组织中的阳性表达率(63.3%)低于远隔无癌组织(88.3%), 差异有统计学意义(χ2 = 9.130, P = 0.003), hMLH1的差异表达率为75.0%(远隔无癌组织大于癌组织), hMSH2在癌组织和远隔无癌组织中的阳性表达率分别为: 83.3%和86.7%, 差异无统计学意义(χ2 = 0.261, P = 0.609), hMSH2的差异表达率为81.7%(远隔无癌组织大于癌组织),hMLH1和hMSH2阳性表达率与临床分期有关( P<0.05);EphA2的表达与hMLH1、hMSH2两者之间成负相关.结论: 基因EphA2、hMLH1、hMSH2通过不同的途径和机制共同促进食管癌的发生、发展, 联合检测有望成为食管癌高发人群普查和筛查的标志物.     

错配修复基因 hMLH1 和hMSH2 在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨错配修复基因hMLH1 和hMSH2 在胃癌发生中的作用.方法采用免疫组化SP法,检测散发性胃癌、癌旁黏膜和胃炎黏膜组织中hMLH1 和 hMSH2基因的表达情况.结果 hMSH2在胃癌组织中的阳性表达率(67.1%)显著高于癌旁黏膜(41.4%)和胃炎黏膜组织(41.2%)(P<0.05),而后两者无显著差异(P>0.05).hMSH2在低分化腺癌中的阳性率(80.6% )显著高于高中分化腺癌(57.7%)和黏液癌(53.8%)(P<0.05),而后两者无显著差异(P>0.05).hMLH1在胃炎黏膜组织的阳性表达率(38.2%)显著低于胃癌(77.1%)和癌旁黏膜组织(74.3%)(P<0.05),后两者无显著差异(P>0.05). hMLH1在黏液癌中的阳性率(38.5%)显著低于高中分化腺癌(80.8%)和低分化腺癌(90.3%)(P<0.05),后两者无显著差异(P>0.05).结论 hMSH2高表达可能是胃癌发生的标志之一;hMSH2表达与肿瘤分化程度及患者预后有关;hMLH1有可能作为胃癌预警组织学标记物.     

血清雌激素水平与结肠黏膜组织错配修复基因表达水平的关系

目的 研究体内雌激素对结肠黏膜组织错配修复基因表达的影响.方法 共选取结肠镜检查正常的健康人42名.于结肠镜检查前0.5 h抽取静脉血测定血清雌二醇(E2)水平,结肠镜下于右半结肠取肉眼观正常的结肠黏膜组织,以半定量逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)和免疫组化染色法评定DNA错配修复基因hMLH1、hMSH2的表达量,分析血清E2水平与结肠黏膜hMLH1和hMSH2表达量的关系.结果 正常人血清E2水平与结肠黏膜组织hMLH1基因的表达量之间存在双峰曲线关系,当血清E2≥45 pg/ml时,hMLH1的表达量与血清E2水平正相关(mRNA相对表达量:P=0.003、r=0.701;免疫组化阳性指数:P=0.000,r=0.874).但血清E2水平与hMSH2表达量间无关联.结论 体内高雌激素水平能增强结肠黏膜组织错配修复基因hMLH1的表达.     

MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态对脑胶质瘤预后的影响

目的探讨脑胶质瘤DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶（MGMT）和错配修复基因（MMR）（hMLH1、hMSH2）启动子甲基化状态及其对患者预后和烷化剂化疗敏感性的影响。方法采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定其蛋白表达。绘制Kaplan-merier生存曲线。结果脑胶质瘤组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,而正常脑组织相应基因启动子区未发生甲基化;三种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似。MGMT基因甲基化的脑胶质瘤患者存活率显著高于未甲基化者（P〈0.05）;MMR基因甲基化患者中MGMT基因甲基化与未甲基化者的生存期无统计学差异（P〉0.05）。结论hMLH1、hMSH2及MGMT甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件;联合检测MGMT、hMLH1和hM-SH2基因启动子甲基化状态可判断脑胶质瘤患者的预后及其对烷化剂化疗的敏感性。