β2受体激动剂对哮喘豚鼠糖皮质激素受体功能影响的研究

糖皮质激素 (ＧＣ)和支气管舒张药 β2 受体激动剂 (β2ＡＡ) ,临床上常被联合用于治疗支气管哮喘。近年来 ,有人认为长期规则使用 β2 ＡＡ可使哮喘病情恶化和增加病死率[1] 。我们的研究旨在从分子水平探索 β2 ＡＡ沙丁胺醇对哮喘豚鼠血淋巴细胞糖皮质激素受体 (ＧＲ)功能的影响 ,为临床合理应用β2 ＡＡ和ＧＣ提供重要的实验依据。材料与方法　哮喘动物模型的复制及分组 :5 0只豚鼠 ,雄性 ,体重 45 0～ 5 5 0ｇ ,参照国内、外常用的方法复制哮喘模型。哮喘豚鼠随机分为对照组 (Ａ组 ,10只 ) ;沙丁胺醇组 (Ｂ组 ,10只 ) :每次予沙丁胺醇 …     

哮喘患者氧化/抗氧化系统的变化及意义

为探讨支气管哮喘(哮喘)患者体内氧化/抗氧化系统的变化及其与哮喘的相关性,选择40例非急性发作期哮喘患者、20例健康人(对照组),用放射免疫法和分光光度法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)含量,同时测定1秒种用力肺活量实测值和预计值百分比(FEV1%).结果显示,哮喘患者SOD、CAT活性低于对照组(P＜0.01,P＜0.05);MDA含量高于对照组(P＜0.01);哮喘患者MDA含量与FEV1%呈显著负相关(P＜0.01);哮喘患者吸入沙丁胺醇治疗后MDA含量减低(P＜0.05),沙丁胺醇 必可酮吸入治疗者较单独吸入沙丁胺醇治疗者SOD活性升高(P＜0.05),MDA含量下降(P＜0.05).表明氧化/抗氧化系统失衡是哮喘发病的重要机制之一,应用β2-受体兴奋剂及吸入糖皮质激素均可减少氧化物的产生.     

地塞米松对哮喘豚鼠嗜酸细胞中白细胞介素3、5及粒-巨噬细胞集落刺激因子受体表达的影响

目的观察地塞米松(DM)对嗜酸细胞(EOS)上白细胞介素5受体α(IL-5Rα)、白细胞介素3受体α(IL-3Rα)、粒-巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM-CSFRα)及共同β链(βcR)mRNA表达的影响,探讨糖皮质激素促进哮喘EOS凋亡的机制.方法18只健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组,每组6只,以卵蛋白致敏激发制作哮喘豚鼠模型,密度梯度分离法分离支气管肺泡灌洗液(BALF)中的低密度EOS(HEOS)及正常密度EOS(NEOS),以末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)法检测细胞凋亡,原位杂交检测各受体mRNA表达,逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)法检测EOSIL-5Rα、IL-3Rα相对含量.结果HEOS及NEOS凋亡,哮喘组(4.0±2.0、3.0±2.0)与正常组(8.0±2.0、7.0±2.0)比较差异有显著性(P＜0.01),而细胞数哮喘组(75.2±12.6、50.7±11.2)与正常组(4.8±1.5、9.5±2.6)比较差异也有显著性(P＜0.01).用DM2h后不同密度EOS数量(14.8±8.3、20.0±7.0)与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.01),DM组以HEOS下降为明显(P＜0.05),BALF中EOS以NE0S为主,EOS凋亡DM组(24.0±5.0、22.0±4.0)与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.01);EOS表达IL-5、IL-3及GM-CSFα受体mRNA,哮喘组与正常组比较差异有显著性(P＜0.01,0.05),DM组与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.05或0.01);而βcR表达哮喘组(41±6、39±7)与正常组(28±5、26±5)比较差异有显著性(P＜0.01);DM组(32±8、30±5)与哮喘组比较差异有显著性(P＜0.05).HEOS表达各受体与NEOS比较差异无显著性(P＞0.05);RT-PCR检测显示,DM组IL-5Rα、IL-3RαmRNA与哮喘组比较差异均有显著性(P＜0.01,0.05).结论DM可促进哮喘豚鼠肺内EOS凋亡,减少肺内EOS浸润,DM可通过促进IL-5、IL-3、GM-CSF受体各自α链表达,抑制这三种受体的共同β链表达,减少其生物学功能,促进EOS凋亡.     

地塞米松对支气管哮喘豚鼠白介素4、白介素5及气道反应性的影响

目的 探讨地塞米松对支气管哮喘(简称哮喘)豚鼠模型白介素4(IL-4)、IL-5水平及气道高反应性(airway hyperreactivity,AHR)的影响,为激素治疗哮喘提供理论依据.方法 实验分为3组:正常对照组、哮喘模型组和地塞米松治疗组,每组各10只豚鼠.用卵白蛋白腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型,三通管做气管插管进行机械通气,测定气道内压力以反映气道反应性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测豚鼠血清中IL-4、IL-5含量.结果 哮喘模型组豚鼠血清IL-4、IL-5含量,分别为(38.2±3.4)ng/L和(344.4±21.8)ng/L,显著高于正常对照组,分别为(19.8±1.2)ng/L和(77.8±26.0)ng/L(P＜0.01);地塞米松组IL-4、IL-5含量,分别为(22.0±1.8) ng/L和(234.6±35.1)ng/L,均明显低于哮喘模型组(P＜0.01).哮喘豚鼠模型组气道反应性(0.013±0.014) g/L与正常对照组(0.168±0.186) g/L比较显著升高(P＜0.01);地塞米松组气道反应性(0.144±0.154) g/L与哮喘模型组比较显著降低(P＜0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 地塞米松能有效降低哮喘豚鼠AHR,其机制可能是抑制哮喘豚鼠体内IL-4、IL-5的生成.     

糖皮质激素联合长效β2-受体激动剂治疗糖皮质激素抵抗型哮喘

目的观察糖皮质激素(GC)联合长效β2-受体激动剂(LABA)对糖皮质激素抵抗型(SR)哮喘患者哮喘症状和肺功能的影响,探讨GC联合LABA对SR哮喘有无治疗作用.方法SR哮喘患者20例,随机分为A、B,每组各10例.A组吸入沙美特罗50 ug,2次/天和氟替卡松500 ug,2次/天.B组每天吸入氟替卡松500 ug,2次/天,急性发作时吸入沙丁胺醇,疗程4周,疗程开始及结束时评价哮喘临床积分和肺功能检查.结果治疗后A组患者哮喘临床积分显著降低(与A组治疗前比较P＜0.01;与B组治疗后比较P＜0.05),肺功能指标用力肺活量(FVC%).第1秒用力呼吸容积(FEV1%)最大呼气流量(PEF%),50%肺活量时最大呼气流量(V50%),25%肺活量时最大呼气流量(V25%),均显著增高.B组治疗后与治疗前比较,上述各项指标均无显著改变(P＞0.05).结论CS联合LABA是治疗SR哮喘的有效方法.     

慢性充血性心力衰竭患者外周血淋巴细胞β-受体密度的变化及不同β-受体阻滞剂对其影响

目的探讨慢性充血性心力衰竭患者外周血淋巴细胞β-肾上腺素受体密度的变化规律.方法采用密度梯度离心法分离112例心衰患者及41例正常人单个核细胞(含90%淋巴细胞),制备淋巴细胞膜,进行受体结合分析,求得平衡解离常数Kd和最大结合量Bmax.受体密度以Bmax表示.结果心衰组β-受体密度较对照组明显下降(P＜0.01).心功能Ⅱ级患者β-受体密度明显低于正常对照组(P＜0.01),重度心衰心功能Ⅲ、Ⅳ级患者β-受体密度下调更明显(P＜0.01).冠心病与扩张型心肌病两组之间Bmax无显著性差异(P=0.99).心衰患者中,美托洛尔治疗组β-受体密度明显高于非β-受体阻滞剂治疗组(P＜0.05),卡维地洛治疗组β-受体密度与非β-受体阻滞剂治疗组无显著性差异(P=0.40).结论心衰时出现了外周血淋巴细胞β-受体密度下调的现象.心衰时外周血淋巴细胞β-受体密度下调与病因无关,下调的幅度与心衰严重程度有关.应用美托洛尔能明显上调β-受体密度.     

双重打击急性肺损伤大鼠激素受体mRNA水平及激素干预效果研究

目的 探讨尾静脉注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的一次打击及LPS尾静脉注射后盐酸(HCI)气管内滴入双重打击致急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的炎症机制、激素干预效果的差异及潜在机制.方法 健康雄性SD大鼠48只,随机分为6组(每组8只):生理盐水(NS)组、LPS组、LPS-HCl组、NS+地塞米松(Dex)组、LPS+Dex组和LPS-HCl+Dex组.检测各组支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数、蛋白含量,肺湿/干重比(W/D),肺组织病理评分,血清和BALF中TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-10的含量及肺组织中糖皮质激素受体(GR)mRNA水平.结果 ①LPS-HCl组BALF中蛋白含量高于LPS组(P＜0.05),LPS+Dex组BALF中细胞总数、蛋白含量以及肺W/D均低于LPS组(P值均＜0.05),而LPS-HCl+Dex组只有肺W/D比LPS-HCl组降低(P＜0.05);②LPS+Dex组和LPS-HCl+Dex组的病理评分均较激素干预之前显著降低(P值均＜0.01),且LPS-HCl+Dex组评分明显高于LPS+Dex组(P＜0.01);③LPS-HCl组BALF中IL-1β、IL-4水平明显高于LPS组(P值均＜0.05),LPS+Dex组和LPS-HCl+Dex组血清和BALF中TNF-α的含量较激素干预之前降低(P值均＜0.01),IL-10的含量升高(P值均＜0.05),同时LPS+Dex组BALF中IL-1β的含量下降(P＜0.05);④LPS+Dex组和LPS-HCl+Dex组肺组织中GR mRNA水平均较激素干预之前升高(P值均＜0.05),而NS+Dex组肺组织中GR mRNA水平较NS组显著降低(P＜0.01).结论 一次打击及双重打击所致ALI/急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)在蛋白渗漏、细胞因子水平方面存在一定差异,说明ALI/ARDS的炎症反应与致病因素是紧密相连的;LPS组的激素干预效果优于LPS-HCl组,这可能与两种模型的GR表达水平、功能状态及病理损伤特点不同有关.     

大鼠支气管哮喘模型中前列腺素D2水平和嗜酸粒细胞上受体改变研究

目的 前列腺素D2(PGD2)通过嗜酸粒细胞(EOS)上前列腺素受体(DP1/CRTH2)调控其分化、成熟、迁移和募集功能,本研究试图了解在哮喘时外周血PGD2水平和EOS上DP1/CRTH2受体表达改变,探讨哮喘时EOS气道中浸润的机制.方法 20只雄性SD清洁级大鼠,随机分为正常对照组、哮喘组,每组10只.用卵白蛋白(OVA)雾化诱喘.用放射配体法分析其外周血EOS上的PGD2受体;用ELISA测定大鼠血中PG D2水平;肺组织病理切片,HE染色镜检.结果 与正常对照组相比,哮喘组大鼠支气管壁有显著的淋巴细胞和EOS浸润,具有典型的哮喘病变,哮喘组外周血PGD2水平显著高于正常对照组(P＜0.01),哮喘组外周血和支气管肺泡灌洗液中EOS计数较正常对照组显著增加(P＜0.01);哮喘组与正常对照组相比外周血EOS上DP总结合和CRTH2受体结合容量显著增加(P＜0.01),DP1差异无统计学意义(P＞0.05).结论 大鼠哮喘模型中外周血PGD2水平增高,同时EOS细胞上CRTH2受体表达增多,增高的PGD2可通过CRTH2信号转导途径,使EOS趋化作用增强,向气道内浸润,产生炎症效应,导致哮喘病理上EOS浸润特征.     

哮喘豚鼠气道壁厚度与转化生长因子β1的相关及地塞米松干预效果

我们为研究复制哮喘豚鼠模型 ,测定气道壁厚度和转化生长因子β1(ＴＧＦ β1) ,探讨二者之间的相关性及用地塞米松干预的效果。材料与方法　哮喘豚鼠制备及干预 :豚鼠 3 6只 ,雌雄不限 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ。随机分为哮喘组、地塞米松干预组(简称治疗组 )和对照组 ,每组各 12只。哮喘组和治疗组豚鼠腹腔注射 10 %卵蛋白溶液 1ｍｌ,10天后以 1%卵蛋白雾化吸入 ,隔天 1次共 15次 ,制备慢性哮喘豚鼠模型 ,对照组用生理盐水。于每次激发前 ,治疗组豚鼠腹腔注射 0 0 5 %地塞米松 1ｍｌ,哮喘组和对照组腹腔注射等量的生理盐水。标本采集 :将豚…     

糖皮质激素联合长效β_2-受体激动剂治疗糖皮质激素抵抗型哮喘

目的观察糖皮质激素(GC)联合长效β2-受体激动剂(LABA)对糖皮质激素抵抗型(SR)哮喘患者哮喘症状和肺功能的影响,探讨GC联合LABA对SR哮喘有无治疗作用。方法SR哮喘患者20例,随机分为A、B,每组各10例。A组吸入沙美特罗50ug,2次/天和氟替卡松500ug,2次/天。B组每天吸入氟替卡松500ug,2次/天,急性发作时吸入沙丁胺醇,疗程4周,疗程开始及结束时评价哮喘临床积分和肺功能检查。结果治疗后A组患者哮喘临床积分显著降低(与A组治疗前比较P<0.01;与B组治疗后比较P<0.05),肺功能指标用力肺活量(FVC%)。第1秒用力呼吸容积(FEV1%)最大呼气流量(PEF%),50%肺活量时最大呼气流量(V50%),25%肺活量时最大呼气流量(V25%),均显著增高。B组治疗后与治疗前比较,上述各项指标均无显著改变(P>0.05)。结论CS联合LABA是治疗SR哮喘的有效方法。     

Research and Evaluation of the Influence of the Construction of the Gate and the Influence of the Piston Velocity on the Distribution of Gases into the Volume of the Casting

Distribution of gasses to the cast volume and volume of pores can be maintained within the acceptable limits by means of correct setting of technological parameters of casting and by selection of suitable structure and gating system arrangement. The main idea of this paper solves the issue of suitability of die casting adjustment—i.e., change of technological parameters or change of structural solution of the gating system—with regards to inner soundness of casts produced in die casting process. Parameters which were compared included height of a gate and velocity of a piston. The melt velocity in the gate was used as a correlating factor between the gate height and piston velocity. The evaluated parameter was gas entrapment in the cast at the end of the filling phase of die casting cycle and at the same time percentage of porosity in the samples taken from the main runner. On the basis of the performed experiments it was proved that the change of technological parameters, particularly of pressing velocity of the piston, directly influences distribution of gasses to the cast volume.