IgG IgM及IL-8在显微镜结肠炎发病机制中作用研究

目的 探讨显微镜结肠炎(MC)发病机制中免疫因素和炎症因子所起的作用.方法 对2004年8月至2006年3月就诊于包头医学院第二附属医院内蒙古消化病研究所的32例MC患者、71例肠易激综合征(IBS)及38例溃疡性结肠炎(UC)患者,采用免疫组织化学法检测肠黏膜IgG、IgM,采用放射免疫法测定血清IL-8质量浓度.结果 MC组肠黏膜IgG、IgM表达显著增高,与IBS组比较差异有统计学意义(P＜0.05),与UC组比较差异无统计学意义.MC组血清IL-8显著低于UC组(P＜0.05),与IBS组比较差异无统计学意义.结论 在MC的发病机制中,免疫调节功能异常可能为MC发病的主要因素,炎症并非引起MC的主要原因.     

基因表达谱芯片技术筛选HBV DNA多聚酶RNase H反式调节基因

目的:应用基因表达谱芯片(基因芯片)技术,检测乙型肝炎病毒DNA聚合酶RNase H结构域蛋白(HBV DNA P-RNase H, RNase H)的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响,进一步阐明RNase H对肝细胞基因表达的调节机制及其生物学功能.方法:以常规的分子生物学技术构建真核表达载体pcDNA 3.1(-)-RNase H,以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA 3.1(-)的HepG2细胞进行cDNA芯片分析.结果:RNase H表达质粒转染的细胞有222条差异表达基因,其中113条基因表达水平上调,109条基因表达水平下调.结论:应用基因芯片成功筛选了RNase H转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明RNase H的反式激活作用及免疫调节机制提供了新的依据.     

43例溃疡性结肠炎患者中肠易激样综合征的精神心理因素分析

目的探讨精神心理因素在溃疡性结肠炎(UC)缓解期中的作用.方法采用自评及他评焦虑、抑郁量表对43例UC、43例正常对照及21例肠易激综合征(IBS)患者进行精神心理因素评分.结果 UC组与对照组比较差异无显著性(P>0.05),与IBS组比较差异有显著性(P<0.05);IBS( )UC组与对照组比较,差异有显著性(P<0.01),而与IBS组比较,差异无显著性(P>0.05).结论异常的精神心理因素在IBS( )UC发病中可能具有重要的作用.     

应用基因芯片技术研究甲状腺乳头状癌的基因表达

目的　应用基因芯片技术研究甲状腺乳头状癌 (PTC)和正常成人甲状腺组织基因的差异表达。方法　分别用Cy5和Cy3两种不同的荧光染料通过逆转录反应将PTC组和对照组甲状腺组织的mRNA分别标记成探针 ,并与载有一组靶基因的基因表达谱芯片进行杂交。通过扫描荧光强度 ,计算机软件分析 ,寻找两组差异表达基因 ,并用RT PCR、免疫组化对其中两条基因进行验证。结果　共有 65条差异表达基因 ,其中表达增加的有 48条 (2 .0倍以上 ) ,表达降低的有 17条 (0 .5倍以下 )。RT PCR、免疫组化结果与芯片扫描结果一致。结论　基因芯片是筛选PTC与正常成人甲状腺组织差异表达基因的有效方法。通过筛选所得差异基因提示 ,PTC的发病涉及细胞外基质、细胞因子、受体信号转导等多个方面。     

艰难梭菌在肠易激综合征和炎症性肠病患者中的感染情况及与白细胞介素-8基因-251A/T多态性的关系研究

目的探讨艰难梭菌(C.difficile)在肠易激综合征(IBS)和炎症性肠病(IBD)患者中的感染情况及与白细胞介素8(IL-8)基因-251 A/T多态性的关系。方法研究选取经澄城县人民医院消化内科及肛肠科诊断为IBS、溃疡性结肠炎(UC)、克罗恩病(CD)的患者(分别为76例、90例、83例),同时选取90位健康志愿者作为对照组,比较C.difficile在各组中的感染情况,探讨C.difficile感染与基因位点多态性的关系。结果 UC组、CD组的感染率显著高于IBS组和对照组(P0.05),而IBS组与对照组的C.difficile感染率差异无统计学意义(P0.05),UC组与CD组的感染率差异亦无统计学意义(P0.05)。UC组血液中IL-8的浓度高于CD组、IBS组及对照组,而CD组的浓度高于IBS组和对照组,IBS组及对照组血液中IL-8浓度的差异无统计学意义(P0.05)。结论 C.difficile感染可使患者血液中IL-8浓度升高,IL-8基因-251 A/T多态性AA基因型是C.difficile感染的危险因素。     

康莱特对Patu-8988细胞周期及其调节基因表达的影响

目的研究康莱特注射液对人胰腺癌细胞周期及其调节基因表达的影响,探讨康莱特的药理机制.方法通过流式细胞仪DNA含量分析法检测康莱特对人胰腺癌细胞系Patu-8988细胞周期的影响,应用基因芯片技术分析加药前后细胞周期调节基因的表达差异,并以Western blot对部分基因蛋白产物的表达进行验证.结果 20 μl/ml康莱特作用Patu-8988细胞24 h后,G2/M期细胞比率从(17.79 ± 0.16)%上升至(23.96 ± 2.33)%,而S期细胞比率则由(36.61 ± 2.97)%降至(24.76 ± 4.92)%.基因芯片结果显示,在96条有关细胞周期的目的基因中共有27条基因表达发生大于3倍的显著变化,其中表达上调的基因17条,下调的10条.Western blot表明cyclin A、cyclin B1、cyclin E、p21等蛋白表达改变与基因芯片结果一致.结论康莱特的药理作用之一是使细胞周期相关基因的表达发生改变,从而影响细胞增殖.     

应用基因芯片技术筛选肝硬化相关基因

目的:探讨基因表达谱芯片技术在筛查肝硬化相关基因群表达中的作用.方法:按TRIzol法抽提肝硬化及正常肝脏组织总RNA,分离纯化两种组织的mRNA.经逆转录合成掺入生物素标记的cDNA合成探针,与基因芯片(涵盖18 400个转录本,代表14 500个明晰的基因)杂交,扫描芯片荧光信号图像,计算机分析,比较二种组织基因表达谱差异.结果:2例肝硬化组织与正常肝脏组织相比,有1424条基因(9.82%)共同表达差异,其中共同上调基因980条和共同下调基因444条.对1424条共同差异表达基因作了初步功能分类,这些基因与肝硬化的发病机制存在相关性.结论:基因表达谱芯片技术可以筛选出肝硬化表达异常的相关基因群,对其进一步研究有助于认识肝硬化的发病机制.     

溃疡性结肠炎和肠易激综合征重叠症状患者肠黏膜肥大细胞的变化

目的研究溃疡性结肠炎(U lcerative colitis,UC)和肠易激综合征(Irritab le bowel syn-drom e,IBS)患者肠活检组织肥大细胞(M ast cells,MC)的变化。方法收集我院2004年3月~8月期间UC、IBS患者以及对照组的结肠和直肠活检组织,通过免疫组化染色方法观察EC、MC数量的变化,并应用病理彩色图像分析软件进行定量分析。结果21例IBS、13例活动期UC及12例IBS(+)UC组肠黏膜MC数量增多,分别为65.4±6.6、74.3±7.6和73.1±3.9,与12例对照组(45.5±4.5)及10例IBS(-)UC组(48.7±5.0)比较有显著性差异(P<0.01);IBS、活动期UC及IBS(+)UC组间比较差异无显著性(P>0.05);IBS(-)UC组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。IBS及IBS(+)UC组以及对照组与IBS(-)UC组的阳染面积(Area)、阳染面积率(Pro-are-a)及平均积分光密度(IOD)比较差异均无显著性(P>0.05);但IBS及IBS(+)UC组与对照组及IBS(-)UC组比较差异有显著性(P<0.05)。结论MC在UC及IBS发病中可能具有重要作用,在IBS(+)UC中尤其明显,在IBS(-)UC中MC变化不明显,UC不同时期的MC存在不同的影响因素。     

miR-196b在溃疡性结肠炎缓解期肠易激样综合征肠黏膜中表达的意义

[目的]:研究溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)缓解期肠易激样综合征(IBLS)患者肠黏膜组织中miR-196b的表达水平,探讨其在溃疡性结肠炎缓解期肠易激样综合征[IBS(+)UC]中的意义。[方法]选取IBS(+)UC患者16例,并同时配对UC缓解期无肠易激样综合征[IBS(-)UC]患者及肠易激样综合征-腹泻型(IBS-D)患者各16例,采用qRT-PCR方法检测直肠黏膜组织中miR-196b的表达水平。[结果]IBS(+)UC患者直肠黏膜组织中miR-196b正常表达,水平为0.58±0.09,IBS(-)UC组直肠黏膜组织中miR-196b低表达,水平为0.41±0.07。2组比较差异有统计学意义(P0.05);IBS-D组miR-196b高表达,水平为0.64±0.11,与IBS(+)UC组比较差异无统计学意义(P0.05);与IBS(-)UC组比较,差异有统计学意义(P0.05)。[结论]直肠黏膜组织中miR-196b水平在IBS(+)UC表达上调,可以作为区分IBS(-)UC的关键指标。     

重症肌无力患者胸腺自身免疫相关基因表达的研究

目的探讨MG患者和正常对照者的胸腺组织炎症反应与自身免疫性疾病相关基因的表达情况。方法取MG患者（MG组）和正常对照者（对照组）的胸腺组织标本，提取总RNA，反转录合成cDNA后，体外转录合成生物素标记的cRNA与基因芯片进行杂交，通过化学发光法检测基因表达，比较两组胸腺组织基因表达的差异。结果MG组与对照组比较，有61条基因存在显著性差异，其中表达上调33条，下调28条，这些基因包括炎症相关趋化因子基因、细胞因子及其受体基因、与细胞因子产生与代谢有关的基因、细胞因子及其受体相互作用相关的基因、炎症反应相关基因以及体液免疫相关基因等。结论芯片筛选MG患者胸腺自身免疫相关基因表达与正常对照组存在显著差异。